H04.1 — Другие болезни слезной железы (синдром сухого глаза)

	Аевит		Капс. 100 мг+100 тыс.МЕ: 10 или 20 шт. рег. №: П N015142/01 от 29.05.09
	Аевит		Капс. 100 мг+35 мг: 30 шт. рег. №: Р N001776/01-2002 от 21.11.08
	Аевит		Капс. 100 мг+55 мг: 10, 20, 30, 40, 100 или 500 шт. рег. №: ЛП-002467 от 20.05.14 Дата перерегистрации: 21.05.19
	Аевит		Капс. 100 мг+58 мг: 20, 30, 40, 500, 840, 1000, 1080, 1260, 1620, 1680, 2000 или 2160 шт. рег. №: ЛП-005266 от 20.12.18
	Аевит		Капс. 100 мг+58 мг: 20, 30, 40, 500, 840, 1000, 1080, 1260, 1620, 1680, 2000 или 2160 шт. рег. №: ЛП-003242 от 08.10.15
	Аевит		Капс. 55 мг+100 мг: 10, 20, 30, 40 или 50 шт. рег. №: ЛСР-005750/08 от 22.07.08 Дата перерегистрации: 20.06.18
	Аевит		Капс.: 10, 20, 30, 50 или 100 шт. рег. №: ЛП-002589 от 19.08.14
	Айстил		Капли глазные 0. 15%: тюбики-капельницы 0.3 мл 20 шт., фл.-капельница 10 мл рег. №: ЛП-000353 от 22.02.11 Дата перерегистрации: 19.05.16
МИ	Артелак® Баланс		Раствор офтальмологический увлажняющий 0.15%: фл.-капельница 10 мл рег. №: РЗН 2013/1380 от 04.09.19
МИ	Артелак® Всплеск		Раствор офтальмологический увлажняющий 0. 24%: фл. 10 мл с дозатором рег. №: РЗН 2013/1204 от 16.03.15
МИ	Артелак® Всплеск Уно		Раствор офтальмологический увлажняющий 0.2%: тюбики-капельницы 0.5 мл 30 шт. рег. №: РЗН 2013/1204 от 16.03.15
	Баларпан		Капли глазные 0. 01%: 5 мл или 10 мл фл., 1,5 мл тюб.-капельницы рег. №: ЛСР-008172/10 от 17.08.10
МИ	ВИД-КОМОД®		Раствор увлажняющий офтальмологический 20 мг/1 мл: контейнер 10 мл 1 или 420 шт. рег. №: ФСЗ 2010/06709 от 30.04.10
	Видисик		Гель глазной 0. 2%: туба 10 г рег. №: П N015826/01 от 18.02.10 Дата перерегистрации: 26.11.14
	Визомитин®		Капли глазные 0.155 мкг/мл: фл. 5 мл или 10 мл с пробкой-капельницей рег. №: ЛП-001355 от 13.12.11 Дата перерегистрации: 28.10.19
МИ	ВитА-ПОС®		Средство смазывающее офтальмологическое 250 МЕ/1 г: туба 5 г рег. №: ФСЗ 2010/07471 от 02.08.10
	Витамин А (Ретинола ацетат)		Капс. 33 тыс.МЕ: 10, 20, 30, 40, 100, 500, 1000, 2000, 4000, 6000 шт. рег. №: ЛП-004940 от 19.07.18
МИ	Гилан Комфорт		Р-р увлажняющий офтальмологический 0. 18%: фл. 10 мл 1 шт. рег. №: РЗН 2015/3476 от 24.07.18 Р-р увлажняющий офтальмологический 0.18%: тюбики-капельн. 0.4 мл 10 или 90 шт. рег. №: РЗН 2015/3476 от 24.07.18
МИ	Гилан Ультра комфорт		Р-р увлажняющий офтальмологический 0. 3%: фл. 10 мл 1 шт. рег. №: РЗН 2015/3476 от 24.07.18 Р-р увлажняющий офтальмологический 0.3%: тюбики-капельн. 0.4 мл 10 или 90 шт. рег. №: РЗН 2015/3476 от 24.07.18
	Гипромелоза-П		Капли глазные 5 мг/1 мл: фл. 10 мл с пробкой-капельницей рег. №: П N015955/01 от 25.12.09
	Дефислёз®		Капли глазные 3 мг/1 мл: фл. -капельн. 5 мл или 10 мл.; фл. 5 мл или 10 мл. рег. №: ЛС-000198 от 18.02.10
	Искусственная слеза®		Капли глазные 0.5%: фл. 5 или 10 мл с дозатором-капельницей рег. №: ЛСР-001608/09 от 05.03.09 Дата перерегистрации: 11.06.19
МИ	Катионорм		Капли глазные, эмульсия 3 г/100 мл: фл. 10 мл (300 капель) рег. №: РЗН 2013/783 от 04.07.13
	Лакрисифи		Капли глазные 5 мг+100 мкг/1 мл: фл.-капельн. 10 мл 1 шт. рег. №: П N014750/01 от 10.10.08
МИ	Оксиал®		Раствор офтальмологический увлажняющий 0. 15%: фл. 10 мл рег. №: РЗН 2011/09695 от 17.03.15
МИ	Окутиарз®		Раствор офтальмологический увлажняющий 1.5 мг/1 мл: контейнер 10 мл 1 или 420 шт. рег. №: РЗН 2015/2737 от 19.06.15
МИ	Оптинол® Глубокое Увлажнение		Средство увлажняющее офтальмологическое: фл. 10 мл рег. №: РЗН 2015/3398 от 22.02.18
МИ	Оптинол® Экспресс Увлажнение		Средство увлажняющее офтальмологическое: фл. 10 мл рег. №: РЗН 2015/3398 от 22.02.18
	Офтагель®		Гель глазной 2. 5 мг/1 г: фл. 10 г с пипеткой рег. №: П N012493/01 от 28.09.11
	Офтолик®		Капли глазные 6 мг+14 мг/1 мл: фл.-капельн. 10 мл рег. №: ЛСР-001359/08 от 29.02.08 Дата перерегистрации: 23.09.20
	Офтолик® БК		Капли глазные 6 мг+14 мг/1 мл: тюбик-капельн. 0.4 мл 30 шт. рег. №: ЛСР-002804/10 от 02.04.10 Дата перерегистрации: 05.12.13
МИ	Парин-Пос®		Средство смазывающее офтальмологическое 1300 МЕ/1 г: тубы 5 г 1 или 1460 шт. рег. №: РЗН 2016/4922 от 31.10.16
	Рестасис®		Капли глазные 0. 05%: фл. 0.4 мл 30 шт. рег. №: ЛП-000583 от 16.09.11 Дата перерегистрации: 19.09.16
	Аевит в капсулах		Капс.: 10 и 25 шт. рег. №: 74/552/8 от 14.06.74
	Аевит в капсулах		Капс. : 10 и 25 шт. рег. №: 74/552/8 от 14.06.74
МИ	Артелак® Баланс Уно		Раствор офтальмологический увлажняющий 0.15%: тюбики-капельницы 0.5 мл 2 или 30 шт. рег. №: РЗН 2013/1380 от 16.03.15
	Ифирал®		Капли глазные 2%: фл. -капельн. 5 мл 1 шт. рег. №: П N011669/03 от 07.04.06
	Лакрисин		Р-р-капли глазные 6 мг/1 мл: фл.-капельн. 10 мл рег. №: П N012859/01-2001 от 30.03.01	GALENA (Чешская Республика)
	Лакропос		Гель глазной 0. 2%: тубы 10 г 1 или 3 шт. рег. №: ЛП-000470 от 01.03.11
	Оптив®		Капли глазные: фл.-капельн. 10 мл или 15 мл рег. №: ЛП-001549 от 29.02.12 Дата перерегистрации: 31.05.17

Синдром сухого глаза — симптомы, лечение, причины.

Капли от сухости в глазах

Человеческая слеза кажется нам водой, в которой растворены какие-либо соли, которые и придают слезной жидкости специфический, солоновато-горький вкус. Однако на самом деле компонентов слезы намного больше, к тому же слеза имеет сложную упорядоченную структуру – 3 слоя.

Средний, так называемый водный слой, это действительно вода, в которой растворены микроэлементы, а также содержится определенное количество белка, ферментов. Слезу для увлажнения глазной поверхности продуцируют добавочные железы — они непрерывно производят маленькие порции слезы, которая, когда человек совершает движения глазным яблоком или веками распределяется по глазу. В том случае если человек, испытывая интенсивные эмоции, плачет, в работу «включаются» основные слезные железы — они вырабатывают большие объемы слезной жидкости.

Наружный слой слезной пленки является слоем липидов, жироподобных веществ, которые вырабатываются мейбомиевыми железами. Основное его предназначение — замедлять испарение водного слоя слезы. Кроме того, тончайшая пленка липидов обеспечивает дополнительную защиту глаза от мелких пылевых частиц и участвует в процессе преломления света.

Внутренний слой слезы (муциновый) вырабатывается самой слизистой оболочкой глазного яблока и век. Муцин делает поверхность глаза ровной и способствует равномерному распределению по нему слезы, удерживает водный и липидный слои на глазной поверхности. Кроме того, в муцине содержатся активные вещества, обеспечивающие быструю регенерацию конъюнктивы и заживление микроскопических повреждений на ней.

В пожилом возрасте иссушаются кожа и слизистые оболочки, также снижается интенсивность выработки слезы.

Особенно часто с такой проблемой сталкиваются женщины, у которых, вследствие естественных эндокринных перемен, сопровождающих период климакса, снижается уровень эстрогенов в организме, результатом чего становится сухость слизистых оболочек организма, и, в том числе, и глазной поверхности (роговицы и конъюнктивы). В целом, сухость слизистых (роговицы и конъюнктивы в том числе) считается одним из проявлений климакса. Усугубляет ситуацию прием гормональных препаратов, так называемая гормонзаместительная терапия.

Лекарства, которые вынуждены принимать многие люди в пожилом возрасте, могут иссушать слизистые, в том числе, глазную поверхность.

К таким препаратам, например, относятся мочегонные средства, которые часто входят в состав препаратов для лечения гипертонии, а также бета-блокаторы и антидепрессанты. Также с годами могут развиваться те или иные эндокринные патологии, например, диабет, ревматоидный артрит или болезни щитовидной железы— их следствием также нередко становится сухость слизистых глаза.

Глазные капли с консервантами, которые применяются при многих хронических заболеваниях глаз, например, при глаукоме, также способствуют изменению состава слезной пленки, вызывая развитие ССГ и оказывая токсическое влияние на глазную поверхность.

Если у вас появились симптомы сухости глаз, дискомфорт, ощущение песка в глазах, усталость или покраснение, то для правильной постановки диагноза и выбора терапии Вам необходимо обратиться к офтальмологу. Для получения более полной информации о некоторых имеющихся увлажняющих каплях, Вы можете пройти тест «Узнай, что подходит именно тебе»

МКБ-10 код H04.1 | Другие болезни слезной железы

ICD-10

ICD-10 is the 10th revision of the International Statistical Classification of Diseases and Related Health Problems (ICD), a medical classification list by the World Health Organization (WHO).

It contains codes for diseases, signs and symptoms, abnormal findings, complaints, social circumstances, and external causes of injury or diseases.

ATC

The Anatomical Therapeutic Chemical (ATC) Classification System is used for the classification of active ingredients of drugs according to the organ or system on which they act and their therapeutic, pharmacological and chemical properties.

It is controlled by the World Health Organization Collaborating Centre for Drug Statistics Methodology (WHOCC).

DDD

The defined daily dose (DDD) is a statistical measure of drug consumption, defined by the World Health Organization (WHO).

It is used to standardize the comparison of drug usage between different drugs or between different health care environments.

Сухость и жжение в глазах: причины, лечение

Сухость в глазах: причины появления дискомфорта

Для поддержания комфорта и здоровья органа зрения поверхность глазного яблока должна получать постоянное увлажнение. Эта функция возлагается на слезную пленку, которая состоит из трех слоев и выполняет ряд важных для зрительного аппарата функций. Она защищает глаза от негативного воздействия окружающей среды, инфекций и бактерий, обеспечивает смазку, смывает загрязнения. Слезная пленка отвечает даже за четкость зрения, ведь именно она выравнивает поверхность роговицы и превращает ее в гладкую линзу.

В нормальном состоянии слезная пленка состоит из трех компонентов (липидный, водный, муциновый) и при каждом моргании она обновляется. Именно этот «механизм» предупреждает появление сухости и красноты глаз. Когда состав слезной жидкости меняется (например, становится меньше липидов или муцинов), стабильность пленки нарушается. Она начинает быстро испаряться, дольше восстанавливаться и это становится причиной возникновения сухости в глазах. Существует ряд факторов, которые способствуют развитию ксерофтальмии:

• Нагрузки на зрительный аппарат. Одной из частых причин нарушения стабильности слезной пленки является длительная работа за компьютером. Во-первых, орган зрения по-разному воспринимает печатную и «экранную» информацию, что заставляет его перенапрягаться. Во-вторых, высокая концентрация внимания приводит к сокращению частоты морганий, отсюда и появляется напряжение и сухость в глазах.
• Контактные линзы. Дискомфорт, возникающий на фоне ССГ, часто становится причиной отказа от использования оптики. Его появление связывают с увеличением расхода слезной жидкости на обтекание контура линзы и ее смачивание. Если она вырабатывается в недостаточном количестве из-за дисфункции слезных желез, при ношении линз возникает сухость и мутность в глазах.
• Микроклимат помещения. Постоянное кондиционирование комнаты, воздушное отопление, недостаточная влажность может ускорить испарение слез, что впоследствии приведет к появлению сухости, жжения и других неприятных симптомов.
• Общие заболевания. Дисфункция слезных желез может быть вызвана такими болезнями, как сахарный диабет, ревматоидный артрит и пр. Развитию сухости также может способствовать прием некоторых препаратов (оральные контрацептивы, антидепрессанты, мочегонные средства).
• «Вековые» проблемы. Одной из причин сухости и слезоточивости глаз является неполное смыкание век (лагофтальм). Иногда появление дискомфорта связывают с проведением лазерной коррекции зрения, блефаропластики и пр.

Независимо от причин, которые спровоцировали появление сухости в глазах, при первых признаках патологии нужно обратиться к врачу. Опытный специалист проведет необходимые анализы (проба Норна, проба Ширмера), подберет подходящие методы лечения.

Как проявляется сухость глаз?

Неприятное ощущение сухости в глазах, вызывающее желание их потереть или чем-то увлажнить, далеко не единственное проявление ССГ. В клинической картине также присутствует:

• покраснение склеры, вызванное воспалением мелких сосудов;
• состояние жжения;
• ощущение «песка», тяжесть в глазах;
• болезненность при моргании;
• быстрая утомляемость зрительного аппарата;
• светобоязнь.

Из-за недостаточного увлажнения роговицы происходит высыхание ее эпителия.

Как бы странно это не звучало, но сухой кератоконъюнктивит на начальной стадии проявляется обильным слезотечением. Это стандартная защитная реакция организма в ответ на недостаточное увлажнение глазного яблока. «Рефлекторное слезотечение» появляется вследствие того, что организм заставляет слезный аппарат вырабатывать больше водянистого компонента слез.

Почему возникает сухость глаз в пожилом возрасте?

В пожилом возрасте многие люди жалуются на сухость в глазах и связана она, прежде всего, со старением организма. С возрастом многие физиологические процессы меняются, и это касается слезопродукции в том числе.

«Возрастная» сухость в глазах связана со снижением функции слезных желез. Когда слезы перестают вырабатываться в нужном количестве или меняется их состав, нарушаются процессы гидратации глазных тканей. Это и приводит к развитию ССГ.

Нормализовать деятельность слезного аппарата помогут капсулы Дельфанто®. В них содержится не менее 35% полифенольных антоцианов, которые устраняют последствия оксидативного стресса и восстанавливают функции слезных желез.

У женщин синдром «сухого глаза» часто появляется в период менопаузы. Многие системы и органы женского организма гормонозависимы и глаза в том числе. Когда во время климакса меняется гормональный фон (уменьшается количество эстрогенов), слизистые оболочки начинают испытывать дефицит влаги. На фоне этих изменений болят глаза, сухость начинает беспокоить все чаще, вызывая покраснение глаз, воспаление сосудов, состояние жжения.

Чем опасна сухость глаз?

При отсутствии лечения сухой кератоконъюнктивит прогрессирует и может даже перейти в хроническую форму. В запущенных случаях патологическое состояние приводит к помутнению роговицы, снижению остроты зрения.

Еще одним последствием невылеченной сухости является воспаление роговицы, которое приводит к появлению небольших язвочек на ее поверхности. Дальше происходит сквозная перфорация роговицы, стремительная потеря зрения. Поэтому если вы не намерены погрузиться в полную темноту, лучше при первых проявлениях синдрома «сухого глаза» обратиться к офтальмологу.

Как убрать сухость и покраснение глаз?

В распоряжении пациентов есть большой выбор методов устранения неприятных симптомов ксерофтальмии. 

Одним из самых распространенных способов борьбы с сухостью глаз является симптоматическое лечение с применением слезозаменителей. Очевидным их недостатком является замещение лишь водного слоя слезной пленки и очень короткое время контакта с глазной поверхностью. Это приводит к тому, что симптомы сухости глаза возвращаются достаточно быстро. Повторное же применение таких растворов способствует вымыванию из конъюнктивальной полости муцинов, лизоцима и других водорастворимых компонентов естественной слезы, что ухудшает течение патологического процесса синдрома «сухого глаза».

Считается, что контролировать состояние пациента при запущенном и хроническом синдроме «сухого глаза» можно при помощи глазных мазей, гелей. Но все перечисленные препараты имеют общий недостаток – временный эффект.

Капсулы Дельфанто® устраняют причины сухости в глазах, а не только неприятные симптомы. Они способствуют восстановлению работы слезного аппарата, поэтому обеспечивают увлажнение глаз естественной слезой.

Бессильны в плане восстановления слезопродукции и домашние рецепты. Использование подручных средств (отвары трав, медовые капли, компрессы и пр.) в качестве «увлажнителей» для глаз может обернуться аллергией. Поэтому для коррекции патологического состояния лучше воспользоваться средствами, которые имеют доказанную эффективность и безопасность, и прошли апробацию в клинической практике. Например, капсулами Дельфанто®.

В запущенных случаях, чтобы предотвратить развитие негативных последствий сухости глаз, может применяться радикальный метод лечения – окклюзия слезных протоков. Суть микрохирургической операции заключается в закупоривании протоков при помощи специальных пробочек. 

Минимизировать необходимость проведения хирургического лечения можно, если своевременно пройти курс с применением капсул Дельфанто®. Они обладают высокой биологической активностью, благодаря входящим в состав полифенольным антоцианам (концентрация не менее 35%). Даже после окончания курса они продолжают действовать на благо здоровья ваших глаз. Капсулы Дельфанто® можно применять, как для устранения ксерофтальмии, так и для профилактики. Особенно полезны они будут для офисных работников.

И помните, что с сухостью глаз нужно бороться, воздействуя на ее причины. Для этого нужны эффективные средства, которые помогут не только избавиться от неприятных симптомов, но и помогут устранить первопричину развития синдрома «сухого глаза».

Публикации в СМИ

Поражения слёзного аппарата (синдром сухого глаза) связаны с заболеваниями слёзных желёз или нарушением продукции ими слёзной жидкости, вследствие чего нарушается смачивание глазного яблока. Частота. Преобладающий возраст — пожилой. Преобладающий пол — женский.
Факторы риска • Проживание в областях с сухим климатом • Приём диуретиков • Генетическая предрасположенность к системным заболеваниям соединительной ткани (ревматоидный артрит, синдром Шёгрена), параличу Белла • Поражения век • Заболевания щитовидной железы.

Клиническая картина • Ощущение сухости в глазах — наиболее частый симптом • Ощущение инородного тела в глазах • Нечёткость зрения • Покраснение глаз.
Специальные исследования • Окрашивание флюоресцеином позволяет выявить неровности и сухие участки на поверхности глазного яблока, нарушение слёзной плёнки • Окрашивание бенгальским розовым — наиболее чувствительный метод, т.к. при этом прокрашиваются только мёртвые и умирающие клетки.
Дифференциальная диагностика • Инфекционные и аллергические поражения глаз • Приём холинолитических препаратов (уменьшают продукцию слёзной жидкости).

ЛЕЧЕНИЕ • Режим амбулаторный • Тактика ведения •• Обучение лиц из группы риска развития синдрома сухих глаз (см. Факторы риска) использованию препаратов искусственной слезы •• Целесообразно поддержание в жилых помещениях повышенной влажности • Лекарственная терапия — препараты искусственной слезы в форме глазных капель •• Дозировка варьирует в широких пределах в зависимости от тяжести симптоматики •• Стандартная доза — по 1 капле несколько раз в день — предотвращает появление неприятных ощущений в глазах •• Для предохранения конъюнктивы от высыхания в ночное время существуют глазные гели (карбомер, видисик), закладываемые в конъюнктивальный мешок •• В качестве дополнения можно использовать ретинол • Хирургическое лечение — интубация силиконовых пробок в устье слёзных канальцев.
Осложнения. Недостаточная выработка слёзной жидкости в течение длительного времени может приводить к разрушению роговицы с вторичным бактериальным инфицированием.
Сопутствующая патология. Синдром Шёгрена, ревматоидный артрит.
Беременность. Синдром сухих глаз может возникать у здоровых беременных женщин. При этом показано применение ретинола в дозе 6 000 МЕ/сут.

Возрастные особенности • Дети. Возможен блок слёзных каналов • Пожилые — поражение слёзных каналов часто приводит к слезотечению.
Профилактика • Следует избегать контактов с раздражающими глаза веществами (поллютанты, табачный дым), а также чрезмерной инсоляции • В рационе должно присутствовать достаточное количество витамина А.

МКБ-10 • H04 Болезни слезного аппарата

СИНДРОМ СУХОГО ГЛАЗА: Симптомы, лечение, капли, профилактика

Синдром сухого глаза (ССГ, ксерофтальмия) — это воспалительное заболевание, которое вызывается патологиями в работе слезных желез. Чтобы вылечить синдром сухого глаза, необходимо применить комплекс терапевтических средств.

В клинике Элит Плюс предлагаются современные методы лечения, терапия с помощью последних достижений ортокератологии и зарубежных медикаментов. Клиника находится в Москве, принимает взрослых пациентов и детей.

Синдром сухого глаза: что это такое

В синдром сухого глаза входит комплекс симптомов, их объединяет ксероза (ощущение сухости), вызванная неправильной работой слезных каналов и протоков. Отсутствие увлажнения не только вызывает физический дискомфорт, но также ведет к развитию ряда сопутствующих болезней.

Синдром сухого глаза в справочнике МКБ находится под номером Н-04.1. Слезы необходимы человеческому глазу для нормальной работы. Почти половина офтальмологических проблем в мире связана именно с синдромом сухого глаза. Болезнь становится частым спутником офисных работников, людей старше 40 лет. С развитием цифровых технологий и распространением смартфонов, компьютеров, ксерофтальмией начинают страдать люди все более молодого возраста.

Согласно общей статистике, болезнь диагностируется почти у 18% людей. Постепенно количество заболевших увеличивается.

Заболевание синдрома сухого глаза проявляется из-за негативного влияния:

• Планшетов, компьютеров, смартфонов, телевизоров;
• Контактных линз из мягких материалов;
• Кондиционеров и сухого воздуха;
• Медицинских препаратов с мочегонным, снотворным, противоаллергенным действием, а также противозачаточных и антидепрессантов.

Ксерофтальмия развивается постепенно. На начальных этапах заболевания ухудшается качество слез из-за изменения в химическом составе. В будущем возникают проблемы с работой желез и слезоотведения.

Как происходит развитие синдрома сухого глаза

В нормальном состоянии слезная пленка покрывает всю переднюю сторону глазного яблока. Пленка имеет неоднородную структуру, имеет толщину около 10 мкм. Пленка состоит из 2-х слоев:

• Наружный слой липидный. Он необходим для защиты глазного яблока от обезвоживания, потери тепла поверхности роговицы и конъюнктивы. Нарушение липидного состава ведет к высушиванию белка глаза, изменению температуры.
• Внутренний слой состоит из жидкости. Ее синтезируют слезные железы (главные, добавочные). Водянистый слой постоянно обновляется и является основой слезной пленки. Он обеспечивает основные защитные и метаболические функции защитного слоя белка глаза.

Если снижается синтез желез или меняется химический состав пленки, естественные процессы увлажнения и теплообмена нарушаются. Это и приводит к развитию заболевания. Водянистый слой перестает правильно выполнять свои функции. Также нарушения могут быть вызваны проблемами в синтезе слез, проблемами с липидами и муцинами, увеличением скорости испарения пленки и т.д.

У развития ксерофтальмии могут быть разные причины. Сбой в одной из систем вырабатывания слез, изменение химического состава пленки и т.д. Чтобы избавиться от синдрома сухого глаза, необходимо выявить и устранить первопричину. Также в лечение входит облегчение симптомов.

Классификация и стадии развития синдрома сухого глаза

Офтальмологи выделяют 3 класса заболевания, в зависимости от этиологии:

1. Синдромальный. Возникает при нарушении секреции слезных желез и работы бокаловидных клеток конъюнктивы. Синдромальный тип появляется при эндокринных заболеваниях и изменениях, коллагенозах, климактерическом и синдроме Стивенса-Джонсона.
2. Симптоматический. Проявляется из-за анатомических особенностей строения глаза и желез, после приема некоторых видов лекарств, воспалительных процессов на роговице и конъюнктиве.
3. Артифициальный. Нарушения этого типа вызваны внешними факторами и окружающей средой. К таким факторам относятся загрязненный воздух, ультрафиолет. Также артифициальный проявляется из-за неправильно подобранной косметики, контактных линз и т.д.

Ксерофтальмию диагностирует врач -офтальмолог. По первопричинам также определяется, как придется вылечивать заболевание.

Степени синдрома сухого глаза

Выделяют 3 степени прогрессирования синдрома сухости глаз:

1. Легкая степень. Непосредственно сухость еще не проявляется, возникает повышенная слезоточивость, имеющая компенсаторную природу.
2. Средняя степень.Проявляются яркие признаки недостатка жидкости в пленке. Глазные яблоки краснеют, появляется слизистое отделяемое в конъюнктивальной полости.
3. Тяжелая степень. Слезные железы функционируют заметно хуже нормы, пациент постоянно ощущает сухость в глазах.

Обычно синдром проявляется сильным покраснением, ощущением зуда и жжения, «песка» в глазах. Многие люди списывают эти симптомы на усталость. На самом деле, лучше обратиться к офтальмологу при появлении первого дискомфорта. Запущенный синдром сухого глаза сложнее и дольше лечить.

Последствия и осложнения

Худшее последствие синдрома — развитие перфорации роговицы. Это нарушение может привести к частичной или полной потере зрения. Также у пациентов с средней и тяжелой степенью болезни повышен риск развития бактериального кератита. Основные симптомы:

• Острые боли;
• Отечность;
• Образование язв;
• Светобоязнь;
• Спазмы;
• Слизистые, гнойные выделения;
• Образование мутных пятен на роговице.

Если пациент не обращается за медицинской помощью и затягивает заболевание до перфорации роговицы, лечение может быть радикальным. Понадобится пересадка тканей роговицы.

Один из распространенных симптомов на последних стадиях — временное ухудшение зрения. При моргании четкость зрения восстанавливается.

Причины возникновения

Заболевание всегда проявляется при неправильном распределении защитной пленки или патологическом составе слез. Причинами к развитию синдрома служат различные факторы:

• Возрастная группа риска. Люди после 40 чаще подвержены развитию болезни.
• Прием лекарственных препаратов. Гормональные, мочегонные антигистаминные, противозачаточные средства могут вызывать подобные побочные эффекты.
• Женский пол. Из-за гормональных перепадов в периоды менструаций, беременностей, климакса женщины чаще страдают от заболевания.
• Сопутствующие заболевания. Болезнь может развиваться при ревматоидных артритах, диабетах, гормональных болезнях, нарушениях в работе щитовидной железы.
• Мягкие контактные линзы.Частое ношение линз нарушает структуру слезной пленки. Особенно, если линзы неправильно подобраны, редко заменяются и очищаются.
• Сидение за мониторами. Телефоны, компьютеры провоцируют нарушения органов зрения. Проблема в увлеченности человека процессом просмотра информации на экране. Пользователь редко моргает, из-за чего глаза быстрее устают, работа слезных желез постепенно нарушается.
• Хирургические вмешательства. Часто появляется после лазерной коррекции зрения или операции.

Незначительное влияние также оказывают климатические условия, наследственность, неправильное питание и дефицит витаминов. Офтальмолог обязательно порекомендует тщательнее следить за питанием, режимом сна и снижением негативного влияния окружающей среды.

Диагностика

Как уже говорилось выше, почти в половине случаев поиск причин, почему ощущается дискомфорт в глазах или ухудшение зрения, пациентам ставят диагноз синдром сухого глаза. Диагностика ведется с применением традиционных методов. Реже применяются функциональные пробы.

Оценка осмолярной слезной жидкости

У пациента берется проба слезной жидкости, по которой определяется состав и качество глазной пленки. Для забора анализа используется специальный прибор. Процедура безболезненная, длится не больше 30 секунд.

Биомикроскопия роговицы, конъюнктивы и век

Исследование проводится при помощи визуального осмотра. Врач изучает мягкие ткани на предмет патологий, скопления гнойных и слизистых выделений.

Тиаскопия

Применяется для исследования липидного слоя пленки. Тиаскопию делают с помощью специального прибора. Он помогает выявить толщину и состав внешнего слоя пленки, определить, есть ли нарушения. Тиаскопия позволяет выявить болезнь даже на ранней стадии, когда классические симптомы не проявились.

Как лечить синдром сухого глаза

Лечение начинают со сбора анамнеза и выявления причины развития синдрома сухого глаза. Избавляться от ССГ необходимо комплексным подходом. Так, если синдром вызван внешними факторами, врач порекомендует исключить их. Помимо снижения рисков ухудшения состояния пациента, применяются медикаменты и хирургические вмешательства.

Лекарственные средства

В большинстве случаев используются капли, которые нужно наносить на поверхность глазного яблока. Дополнительно применяются мази, если пострадали ткани век.

Тип лекарства	Воздействие	Препараты
Капли общего действия	Снимают раздражение и воспаление. Сужают сосуды глазного яблока, благодаря чему белки перестают иметь красный оттенок. Нормализуют выработку глазной жидкости, восстанавливают химический состав и толщину защитной слезной пленки.	Seeway Comfort
Капли с гиалуроновой кислотой	Одновременно убирают дискомфортные ощущения и восстанавливают работу слезных желез. Плюс капель — сохранение остроты зрения и устранение симптомов.	Окуртиаз, Хилозар-Комод, Артелак Всплеск
Капли с гипромеллозой	Восстанавливают слезоотделение, снижают раздражение и воспаление. Применяются в качестве самостоятельного средства, при реабилитации после операций и т.д.	Гипромеллоза-П, Искусственные слезы
Средства с карбомером	Делают состав глазной жидкости более вязким, но ухудшают остроту зрения на период терапии. Могут вызывать чувство жжения, зуда.	Видисик, Офтагель
Средства с циклоспорином	Нормализуют состояние глаз, облегчают симптомы, сужают сосуды.	Restasis
Капли с повидоном	Подходят пациентам, которые много работают за монитором. Снимают раздражающие эффекты, если постоянно нужно напрягать глаза.	Вид-Комод
Мази с тетрациклином, эритромицином	Нужны для увлажнения и дезинфекции век, глаз. Помогают бороться с инфекциями и воспалениями.	Тетрациклиновая мазь 1%
Вне классификации	Капли и мази со смешанным составом. Оказывают комплексное действие, помогают снизить неприятные ощущения, покраснения. В зависимости от состава, восстанавливают деятельность слезных желез	Визин, Катионорм, Систейн

Препараты для глаз используются на ранних стадиях и облегчения симптомов. В запущенных случаях капли не помогут, необходимо хирургическое вмешательство.

Хирургическое вмешательство

При ксерофтальмии 3-й степени медикаменты мало помогают. Пациенту назначают пересадку слезных каналов или обтурацию выводящих путей. Рекомендуется заранее обращаться к врачу заранее, до перехода заболевания на последние стадии.

Лечение народными средствами

Народные средства — устаревший вариант помощи при заболеваниях с низкой эффективностью. Врачи офтальмологи клиники ЭлитПлюс категорически не советуют самолечение и использование сомнительных средств без рекомендаций специалиста.

Профилактика

Оплата качественного лечения и препаратов обходятся дорого для бюджета и здоровья. Профилактика поможет снизить риск развития заболевания:

• Чаще моргать при работе с компьютером и смартфоном;
• Умываться теплой водой без агрессивной химии;
• Повышать влажность окружающей среды;
• Защищать глаза очками от солнца и ветра;
• Пить не менее 2 л воды в день;
• Не курить.

При проявлении первых симптомов синдрома сухого глаза обратитесь к врачу. Лечение ранних стадий проходит проще и обойдется дешевле.

Видео о болезни

Часто задаваемые вопросы

❓ Почему возникает синдром сухого глаза

✅ Заболевание проявляется из-за комплекса факторов, включая наследственность и внешнюю среду.

❓ Код МКБ 10 болезни глазного аппарата

✅ Синдром зарегистрирован под номером Н-04.1.

❓ Что делать при синдроме сухого глаза

✅ Снизить нагрузку на глаза, записаться на прием к офтальмологу.

❓ Лечится ли синдром сухого глаза

✅ Да. В зависимости от стадии и этиологии болезни, применяются лекарственные препараты и хирургические операции.

❓ Может ли синдром «сухого глаза» пройти самостоятельно, без лечения?

✅ Нет. Болезнь будет постепенно прогрессировать.

❓ Кто находится в группе риска

✅ Офисные работники, люди пожилого возраста, с гормональными заболеваниями, женщины после нескольких беременностей, в климактерическом состоянии.

Источник: https://elitplus-clinic.ru/stati/sindrom-suxogo-glaza.html

МАМО — Международная Академия медицинского образования

При оплате картами возврат наличными денежными средствами не допускается. Порядок возврата регулируется правилами международных платежных систем.

— Для возврата денежных средств на банковскую карту необходимо заполнить «Заявление о возврате денежных средств», которое высылается по требованию Исполнителем на электронный адрес и оправить его вместе с приложением копии паспорта по адресу: 115419 г. Москва, Рощинский 2-й проезд, д. 8, почтовый ящик 130.

— Возврат денежных средств будет осуществлен на банковскую карту в течение 21 (двадцати одного) рабочего дня со дня получения «Заявление о возврате денежных средств» Исполнителем. — Для возврата денежных средств по операциям проведенными с ошибками необходимо обратиться с письменным заявлением и приложением копии паспорта и чеков/квитанций, подтверждающих ошибочное списание. Данное заявление необходимо направить по адресу: 115419 г. Москва, Рощинский 2-й проезд, д. 8, почтовый ящик 130.

— Срок рассмотрения «Заявление о возврате денежных средств» и возврата денежных средств начинает исчисляться с момента получения Исполнителем Заявления и рассчитывается в рабочих днях без учета праздников/выходных дней.

— В случае одностороннего расторжения настоящего договора по инициативе Исполнителя, Исполнитель обязуется возместить Заказчику убытки в полном объеме (возвратить оплаченные денежные средства в полном объеме), включая банковскую комиссию в случае приобретения курса с использованием кредитных средств (в рассрочку).

— В случае одностороннего расторжения настоящего договора по инициативе Заказчика, Заказчик обязан оплатить Исполнителю оказанные услуги, а также фактически понесенные расходы, к которым в том числе относится банковская комиссия, в случае приобретения курса с использованием кредитных средств (в рассрочку).

— Исполнитель вправе отказаться от исполнения обязательств по Договору при условии полного возмещения Заказчику убытков.

— Заказчик вправе отказаться от исполнения обязательств по Договору, предупредив об этом Исполнителя за 3 (три) рабочих дня, при условии оплаты Исполнителю фактически понесенных им расходов, в том числе расходы на оплату комиссии банка — эквайрера и иные банковские расходы, возникающие в связи с осуществлением возврата денежных средств.

Последствия старения при сухом глазу

Abstract

Сухой глаз поражает миллионы людей во всем мире и вызывает хорошо известные факторы риска сухого глаза. Анатомические и возрастные изменения, вызванные воспалением, влияют на все компоненты функциональной единицы слезной железы, включая слезную железу, конъюнктиву, мейбомиевую железу, и ухудшают здоровье глазной поверхности. Появляется все больше доказательств того, что воспаление играет роль в сухости глаз. В этом обзоре будут обобщены текущие знания о старении и сухости глаз, включая уроки, извлеченные из экспериментов на животных, и многообещающие методы лечения.

Введение

Дисфункция слезы — одна из наиболее частых проблем, с которыми сталкиваются окулисты. Сообщается, что дисфункция слезы имеет распространенность от 2 до 14,2%. ^1–3 Было обнаружено, что он увеличивается с возрастом с 4 ^-го -го до 8-го ^-го -го десятилетия жизни и в течение этого периода чаще встречается у женщин, чем у мужчин. ^{4, 5} Дисфункция слезы возникает в результате заболевания одного или нескольких компонентов слезной функциональной единицы, которая состоит из продуцирующих слезу желез и их нервных связей.Многие пациенты старше 40 лет с дисфункцией слезы имеют признаки заболевания мейбомиевых желез (MGD) в качестве основной причины, особенно у пациентов с нестабильной слезной пленкой, но нормальным слезоотделением и объемом слезы. В этом обзоре основное внимание будет уделено эпидемиологическим аспектам старения, возможным механизмам возрастного синдрома сухого глаза и обсуждению некоторых потенциальных методов лечения, а также урокам, извлеченным из моделей старения на животных.

1. Старение как фактор риска сухого глаза

Старение является значительным фактором риска сухого глаза

Крупные эпидемиологические исследования, проведенные в рамках исследования женского здоровья и здоровья врача, показали, что распространенность сухого глаза у женщин и мужчин увеличивается каждые пять лет после возраст 50, с большей распространенностью у женщин по сравнению с мужчинами. ^{1, 3–8} Было установлено, что возраст и женский пол являются наибольшими факторами риска развития синдрома сухого глаза. Это подтверждается клиническими данными о снижении слезоотдачи у женщин в течение 6-го десятилетия жизни. ^{9, 10} Неравномерность поверхности роговицы при синдроме сухого глаза ухудшает зрительную функцию из-за снижения контрастной чувствительности и функциональной остроты зрения. ^{11, 12} Было обнаружено, что наличие сухого глаза значительно влияет на способность выполнять повседневные действия, такие как чтение, использование компьютера и вождение. ¹³ Используя методы временного компромисса, Шифман и другие подсчитали, что сильный синдром сухого глаза оказывает такое же влияние на качество жизни, как и стенокардия средней или тяжелой степени. ^{14, 15} Ожидается, что с увеличением возраста населения и продолжительностью жизни сухой глаз будет оставаться одной из основных причин посещения офтальмологов. ¹⁶ Следовательно, очень необходимо более глубокое понимание возрастного синдрома сухого глаза и методов лечения, адаптированных к этой конкретной группе населения.

Слезная железа (LG) значительно страдает от старения. В главной слезной железе человека наблюдались различные гистопатологические изменения, такие как ацинарная атрофия; периацинарный фиброз; перидуктальный фиброз; расширение межлобулярных протоков; разрастание межлобулярных протоков; лимфоцитарная инфильтрация; и жировая инфильтрация. ^17–20 Существует несколько гистопатологических различий между глазными и глазничными долями. Диффузный фиброз и диффузная атрофия глазничных долей чаще наблюдались у женщин, чем у мужчин. ^{20, 21} Грызуны часто используются в исследованиях старения, поскольку их LG страдает изменениями, связанными со старением, как и люди (см. Обзор Роча и его коллег). ^22–25

Возрастные изменения век включают дряблость век, атрофию мейбомиевых желез и метаплазию устья, уменьшение объема слезы с увеличением времени разрыва слезы и сухость глаз. ^26–31 В молодом здоровом веке отверстия мейбомиевых желез расположены кпереди от кожно-слизистого соединения, что можно идентифицировать как линию Маркса, физиологическую линию окрашивания диагностическими красителями, такими как флуоресцеин, лиссамин зеленый и бенгальский розовый.Сообщалось, что линия Маркса с возрастом смещается вперед. ³² MG имеют рецепторы андрогенов и отвечают на стимуляцию андрогенов. ^{31, 33–37} и MGD чаще встречается у мужчин, чем у женщин. ^{28, 29, 38, 39} MGD может возникать сам по себе или в сочетании с дефицитом водянистой слезы (ATD). Среда воспалительных цитокинов как в слезах, так и в клетках конъюнктивы, собранных методом импрессивной цитологии, отличается от ATD. ^40–44 Пациенты с ATD имеют значительную потерю бокаловидных клеток, повышенную экспрессию IFN-γ и IL-17A по сравнению с нормальным контролем, но ни одно из вышеупомянутых изменений не присутствует у пациентов с MGD. ⁴⁴

Еще одним частым возрастным заболеванием является конъюнктивохалазис, состояние, при котором конъюнктива складывается и становится избыточной, что может закупоривать точку и вызывать дискомфорт в глазах. Он часто ассоциируется с возрастом ^45–48 лет и более подробно обсуждается в сопутствующей статье Гумуса и его коллег.

До сих пор ведутся споры о том, приводит ли старение к сухому глазу или является ли сухой глаз возрастным заболеванием, имеющим совершенно иной механизм, чем старение как таковое. ⁴⁹ Например, возраст как фактор риска потери бокаловидных клеток остается спорным. ^{23, 50–54} Становится более очевидным, что, как и аутоиммунный синдром сухого глаза, возрастной синдром сухого глаза имеет значительное воспаление и сложный иммунный ответ, который со временем приводит к глубоким изменениям LG и поверхности глаза (). ^{22–25, 28, 51, 55–58}

Старение вызывает глубокие системные изменения, но также меняет функциональную единицу слезной железы.

2-Возрастные сопутствующие заболевания и ятрогенный синдром сухого глаза

Старение часто сопровождается сопутствующими заболеваниями, такими как сердечно-сосудистые заболевания, диабет 2 типа, депрессия, глаукома и другие заболевания глаз.Некоторые из этих сопутствующих заболеваний сами по себе или лекарства, которые используются для их лечения, могут оказывать вредное вторичное воздействие на поверхность глаза. Примером является сахарный диабет, который поражает сетчатку, LG и роговичные нервы и часто связан с сухим глазом. ^59–61 Некоторые связанные с возрастом сопутствующие заболевания изменяют гомеостаз глазной поверхности вторично по сравнению с системной терапией или лечением глаз, которые необходимы для контроля исходной заболеваемости, и некоторые из этих лекарств могут иметь вторичный эффект высыхания глаз.Например, антигипертензивные, антигистаминные и антидепрессанты являются одними из общепризнанных классов препаратов, которые сушат поверхность глаза. ^{3, 5–8, 56, 62} Для получения полного списка лекарств, которые обладают подсушивающим эффектом или усугубляют синдром сухого глаза, обратитесь к обзору Фраунфельдера и его коллег ^{62, 63} и посетите National Eye Реестр лекарств (http://www.eyedrugregistry.com/about.html).

Пациенты с глаукомой, заболеванием, которое чаще встречается у пожилых пациентов, часто жалуются на раздражение глаз. ^{64, 65} Хотя нельзя исключить прямое действие соединений, используемых для лечения глаукомы, бензалкония хлорид, широко используемый консервант для глазных капель из-за его мощного антибактериального действия, был признан токсичным для поверхности глаза. Бензалкония хлорид увеличивает проникновение лекарственного средства, частично из-за разрушения вторичного эпителиального барьера и токсичности для эпителия роговицы. ^65–68 Недавние исследования показали, что переход на раствор, не содержащий консервантов, улучшил симптомы, связанные с поверхностью глаза, без потери эффективности антиглаукомных препаратов, обещая облегчение для большого числа пациентов с вторичным синдромом сухого глаза из-за глаукомы. ^69–71

3-Возможные механизмы, приводящие к возрастному сухому глазу

Все организмы начинают стареть сразу после рождения. Хотя некоторые возрастные изменения отмечаются как вехи (например, первые шаги и слова ребенка, первый окончательный зуб, первое бритье усов у мальчиков; первый ребенок и т. Д.), Ухудшение состояния здоровья и жизнеспособности, которое часто сопровождает старение, является неприятностью для многие. Существует также экономическое бремя для общества и лиц, осуществляющих уход, поскольку увеличивается ожидаемая продолжительность жизни, а также повышается восприимчивость к большому количеству заболеваний, таких как рак, сердечно-сосудистые заболевания, аутоиммунитет и немощь.

Иммунная система также претерпевает старение, называемое иммуно-старением, снижение иммунной функции, характеризующееся уменьшением количества наивных Т-лимфоцитов, хроническим воспалением, гипериммуноглобулинемией, аутоиммунитетом, плохой реакцией на вакцины и повышенной восприимчивостью к инфекциям. ^72–75 Типичным признаком старения является хронический воспалительный статус слабой степени, называемый воспалением ⁷⁶ , характеризующийся общим увеличением продукции провоспалительных цитокинов. Было обнаружено, что увеличение количества воспалительных медиаторов в сыворотке крови связано с болезнью Альцгеймера, деменцией, болезнью Паркинсона и диабетом 2 типа. ^76–78 Изменения в иммунной системе имеют серьезные последствия для выживания и являются надежными предикторами заболеваемости и смертности среди пожилых людей. ⁷⁵

Другие связанные с возрастом клеточные / метаболические теории, касающиеся старения, включают повышенный окислительный стресс, повышенное повреждение ДНК, изменение репарации ДНК, повышенное гликирование белков, укорочение теломер и снижение функции протеасом, и это лишь некоторые из них. ^{79, 80} Хотя в этих областях накоплено множество доказательств, точный механизм (ы), которые контролируют старение, все еще плохо изучены.Каждая клетка стареет, но не с одинаковой скоростью; Возрастные изменения могут сопровождать или не сопровождать патологическое старение, и каждый человек уникален, а значит, и свое собственное старение. То же самое и с сухим глазом, связанным со старением.

Появляется все больше свидетельств того, что сухой глаз сопровождается воспалением. За последние 20 лет произошел сдвиг в парадигме «сухого глаза»: от болезни, связанной с уменьшением слез, к болезни, в которой воспаление и аутоиммунитет играют важную роль. Повышенные уровни воспалительных и связанных с Т-клетками медиаторов, таких как IL-1β, IL-6, TNF-α, IL-17, IFN-γ, были отмечены в конъюнктиве и слезной жидкости пациентов с синдромом сухого глаза по сравнению с контрольными субъектами. ^{12, 40, 44, 81–90} Активация местной иммунной среды является еще одним универсальным признаком синдрома сухого глаза, поскольку повышенная экспрессия клеток HLA-DR ⁺ — частая находка, которая использовалась в качестве индикатора терапевтический ответ в клинических испытаниях. ^{81, 91–100} Другие признаки синдрома сухого глаза включают повышенную продукцию матриксных металлопротеиназ (ММП), повышенные уровни хемокинов и белков, участвующих в окислительном стрессе, повышенную плоскоклеточную метаплазию эпителия глазной поверхности, потерю бокаловидных клеток и увеличение эндоплазматического ретикулума. стресс. ^{12, 81, 83, 85, 96, 97, 101–117}

Сухой глаз — хроническое заболевание, но при выполнении таких действий, как вождение автомобиля, длительный просмотр видеодисплея и покупки в магазинах, часто возникают обострения. с высоким расходом переменного тока. Пациенты с синдромом сухого глаза живут и работают в условиях контролируемой сквозняков и / или низкой влажности (иссушающий стресс), а раздражение и заболевание глазной поверхности ^118–122 , которое они испытывают в этой среде, могут снизить их продуктивность и качество жизни. ^{123, 124} Было показано, что воздействие высыхающих условий окружающей среды активирует чувствительные к стрессу клетки / пути на поверхности глаза, стимулирует эпителиальные клетки поверхности глаза к синтезу и секреции провоспалительных цитокинов и ММР, которые могут быть обнаружены в эпителиальном слое. сами клетки. ^{42, 85} Это воспаление, связанное с острым стрессом, может сенсибилизировать ноцицепторы роговицы и вызывать поверхностные эпителиальные изменения, такие как разрушение плотных контактов эпителия, приводящее к дисфункции роговичного барьера, что клинически проявляется как повышенное поглощение флуоресцеина.Изменения окружающей среды, связанные с сухим глазом, более подробно обсуждаются в сопутствующей статье Калонже и его коллег.

Модели на 4 животных возрастного синдрома сухого глаза

Было описано множество животных моделей, которые использовались для изучения патогенеза сухого глаза. Модель иссушающего стресса с сухим глазом, в которой используется сочетание низкой влажности, экологического стресса и фармакологической холинергической блокады, стала стандартной моделью в области исследований. С момента первого описания он был использован более чем в 65 публикациях. ¹²⁵ Эта модель воспроизводит некоторые особенности синдрома сухого глаза человека, включая дисфункцию роговичного барьера, потерю бокаловидных клеток и продукцию цитокинов эпителием глазной поверхности. ^126–144 При высыхании в основном используется инбредная линия мышей C57BL / 6, в то время как мыши Balb / c также использовались с немного другой кинетикой заболевания. ¹⁴² Недавние исследования показали, что старые мыши C57BL / 6 являются ценным инструментом для изучения возрастного синдрома сухого глаза, поскольку у этих мышей развиваются возрастные MGD, окрашивание роговицы, потеря бокаловидных клеток, инфильтрация лимфоцитов конъюнктивы и дакриоаденит. ^{23, 145, 146} Подобно обезвоженным мышам и пациентам с синдромом Шегрена (СС) у людей наблюдается увеличение продукции MMP-9 и цитокинов, связанных с Т-клетками, таких как IL-17, IFN-γ, на стареющей поверхности глаза. и приток CD4 ⁺ и CD8 ⁺ Т-клеток в пожилой LG ²³ , предполагая, что множественные побуждающие механизмы могут сходиться, чтобы вызвать клинически значимый синдром сухого глаза независимо от инициирующего фактора. Воспаление может быть общим знаменателем в этих ситуациях.Уроки, извлеченные из животных моделей сухого глаза, обсуждаются более подробно в сопутствующей статье Стерна и Пфлугфельдера. Патогенетические исследования с использованием старых мышей суммированы и кратко обсуждаются в следующих параграфах.

1. Женский пол — фактор риска сухого глаза . Подобно исследованиям на людях ^{4, 147} , самки мышей C57BL / 6 развивают большее нарушение роговичного барьера, чем самцы мышей того же возраста, хотя другие признаки синдрома сухого глаза, такие как низкая плотность бокаловидных клеток и инфильтрация LG, были аналогичны у обоих полов. ²³ Это сопровождалось более высокими уровнями IL-17A и IFN-γ по сравнению с молодыми мышами. IL-17 стимулирует MMPs-3 и -9, которые, как было показано, разрушают белки плотных контактов и нарушают барьерную функцию роговицы. ^{85, 148–151} Сухой глаз влияет на качество жизни ^{7, 14} и качество зрения, а также снижает контрастную чувствительность. ^{12, 13} Мы можем предположить, что более выраженное заболевание роговицы у пациенток может привлечь больше женщин в офтальмологическую клинику, чем мужчин, хотя нельзя исключать другие факторы, такие как половые гормоны и их влияние на заболевание роговицы.

2. Старые CD4 ⁺ Т-клетки спонтанно аутореактивны . Общей чертой, наблюдаемой у субъектов SS, моделей животных SS и обезвоживающих подвергшихся стрессу мышей, является повышенная инфильтрация CD4 ⁺ Т-клеток в конъюнктиву и биопсии LG. ^152–157 Это также наблюдалось у старых мышей C57BL / 6. ²³ Кроме того, адоптивный перенос старых CD4 ⁺ Т-клеток вызывал большую лимфоцитарную инфильтрацию конъюнктивы и LG и большую потерю бокаловидных клеток, чем адоптивный перенос молодых доноров, демонстрируя, что старые CD4 ⁺ Т-клеток участвуют в возрастных сухой глаз. ²³ Эти исследования показывают, что старение способствует образованию аутореактивных Т-клеток; однако точный механизм образования этих аутореактивных Т-клеток, как и антиген, остается неизвестным. Возможно, что здесь играет роль комбинация таких факторов, как старение иммунной системы, отсутствие периферической толерантности или накопленное воздействие антигена на протяжении всей жизни. Не исключено, что все три могут действовать синергетически.

3. Интерферон-γ участвует в возрастной потере бокаловидных клеток .Конъюнктива — одна из самых богатых бокаловидными клетками тканей во всем организме, она следует сразу за кишечным трактом. Бокаловидные клетки очень чувствительны к окулярной среде и помимо продуцирования муцинов участвуют в иммуномодуляции на поверхности глаза. ^158–161 Сигнатурный цитокин Th-2 IL-13 играет важную роль в выживании бокаловидных клеток и гомеостазе. ^{162, 163} IFN-γ, с другой стороны, отрицательно влияет на бокаловидные клетки конъюнктивы. ^{112, 130, 157, 164} Это верно как для индуцированной DS, так и для индуцированной старением повышающей регуляции IFN-γ, поскольку мыши IFN-γKO частично устойчивы к связанной с возрастом потере бокаловидных клеток. ^{23, 57, 157}

4. Старые регуляторные Т-клетки дисфункциональны . Используя вариант мышей с сахарным диабетом без ожирения, у которых не развивается диабет, Курси и его коллеги продемонстрировали, что дакриоаденит у старых мышей NOD.B10.h3b сопровождается значительным увеличением частоты регуляторных Т-клеток (Tregs) в LG, несмотря на увеличение LG. патология по сравнению с молодыми мышами той же линии. ²⁵ Это согласуется с сообщениями о биопсиях слюнных желез у пациентов с СС, где повышенная частота клеток Foxp3 ⁺ коррелировала с более тяжелым заболеванием. ^{165, 166} Несмотря на то, что эти старые мышиные Treg не функционируют и не способны подавлять эффекторные Т-клетки in vitro, они не теряют экспрессию Foxp3 ⁺ , но приобретают способность продуцировать IFN-γ и IL-17. Более того, адоптивный перенос старых Treg или старых эффекторов T привел к аналогичным более высоким показателям воспалительного слезного кератоконъюнктивита по сравнению с молодыми Treg и эффекторами T, что указывает на потерю способности подавления in vivo и приобретение эффекторного фенотипа. ²⁵

5. Окислительный стресс у пожилых LG нарушает секрецию слезы .Активным формам кислорода, образующимся в результате нормального метаболизма, должна противодействовать антиоксидантная защита, чтобы предотвратить повреждение липидов, ДНК и митохондрий. У мышей с повышенным митохондриальным окислительным стрессом или снижением антиоксидантных путей с возрастом изменился гомеостаз LG, что привело к уменьшению объема слезы LG и усиленному окрашиванию роговицы. ^167–170 В поддержку исследований на животных было отмечено снижение экспрессии антиоксидантных ферментов и повышение экспрессии маркеров окислительного стресса в конъюнктиве пациентов с СС. ^108–111 Повышенная концентрация в слезах гексаноил-лизина, маркера окислительного стресса липидов, достоверно коррелировала с оценками окрашивания и плотностью воспалительных клеток в исследовании конфокальной микроскопии, оценивающем SS и контроль. ¹⁰⁸ Хотя неясно, возникает ли окислительный стресс как причина или следствие сухого глаза, Дэн и его коллеги недавно показали, что гиперосмолярность может увеличивать окислительный стресс в культивируемых эпителиальных клетках. ¹⁷¹

6. Старые мейбомиевые железы становятся атрофическими .Гистологический анализ старых век человека показал множество морфологических изменений, включая кистозное расширение ацинусов и / или протоков, атрофию ацинусов, утолщение базальной мембраны ацинусов, грануляционной ткани и липогранулематозное воспаление. ²⁶ У старых мышей C57BL / 6 также развивается возрастной MGD, характеризующийся уменьшением объема ацинусов, повышенной экспрессией цитокинов и повышенной дифференцировкой мейбоцитов. ^{145, 146, 172, 173} Предполагается, что уменьшение объема ацинусов может быть вторичным по отношению к потере стволовых клеток в мейбомиевых железах и не является необходимым для кератинизации протоков, поскольку у пожилых людей не было отмечено увеличения кератина 10 или SPRR1-a. C57BL / 6 MG. ^{145, 173} В элегантных исследованиях с использованием иммунофлуоресцентной компьютерной томографии и трехмерной реконструкции не наблюдалось кератинизации протоков в старых мейбомиевых железах мышей C57BL / 6, что дополнительно подтверждает их выводы. ¹⁴⁵

5. Лечение возрастного синдрома сухого глаза

Существует только два одобренных FDA препарата для лечения сухого глаза. Циклоспорин, модулятор Т-клеток, широко используется более десяти лет для лечения всех форм сухого глаза. ^{92, 99, 106, 117, 174–177} Lifitegrast, новый ингибитор антигена-1, ассоциированного с функцией лимфоцитов (LFA-1), который участвует в миграции Т-клеток из сосудов, только что получил одобрение для лечения симптомов и симптомы сухого глаза в июле 2016 года.Результаты клинических испытаний фазы 2 и 3 показали многообещающие результаты. ^178–180 Отзывы о современных методах лечения сухого глаза см. В опубликованных обзорах. ^181–183 Другие новые методы лечения сухого глаза рассматриваются в сопутствующей статье Gumus и Pflugfelder.

Немедикаментозным подходом к уменьшению синдрома сухого глаза является использование добавок. Полиненасыщенные жирные кислоты, такие как омега-6 (линоленовая кислота) и омега-3 (α-линоленовая кислота), приобрели популярность в качестве пероральных добавок при болезни сухого глаза, поскольку они уменьшают количество медиаторов воспаления и снижают активацию дендритных клеток. ^{95, 184–188}

Был предложен более целостный подход к проблемам старения и сухости глаз, который включает использование ограничения калорий (CR) и добавок витаминов и антиоксидантов. ¹⁸⁹ Ограничение калорий (CR) без недоедания появилось в 21 ^-м веке как потенциальная стратегия предотвращения возрастных заболеваний. Хотя книга ¹⁹⁰ CR была впервые опубликована в 1935 году МакКеем и коллегами, она вызвала интерес после исследований, показывающих увеличение продолжительности жизни, снижение сердечно-сосудистых заболеваний и заболеваемость опухолями у грызунов. ^191–194 Эти результаты были воспроизведены на нечеловеческих приматах, ^{195, 196} , вызвав большой интерес научного сообщества к этому вмешательству в старение. С тех пор было накоплено огромное количество доказательств, демонстрирующих, что CR вызывает глубокие метаболические, гормональные и молекулярные изменения. Подробный обзор CR, включая CALERIE, спонсируемый NIH ( C всесторонний A оценка L на длительный срок E ffects R обучение I участие в клиническом исследовании E ) люди, см. обзор Моста и его коллег. ¹⁹⁷ В офтальмологии было показано, что CR существенно снижает инфильтрацию поднижнечелюстных желез у старых мышей с предрасположенностью к аутоиммунным заболеваниям. ¹⁹⁸ Это сопровождалось значительным снижением медиаторов воспаления, таких как TNF-α и IL-6, в то время как было отмечено увеличение TGF-β1. ¹⁹⁸ У старых крыс CR в течение 6 месяцев значительно улучшил секрецию слезы, морфологию ацинаров LG и снизил экспрессию маркеров окисления липидов 8-гидрокси-2 дезоксигуанозина (8-OHdG) и 4-гидроксиноненала (HNE), которые связаны с окислительным стрессом. ¹⁹⁹

Что мы знаем и будущие направления исследований

Резюме

Клинические и лабораторные исследования, проведенные за последние несколько десятилетий, показали, что сухой глаз является хроническим воспалительным заболеванием, которое может быть вызвано множеством внешних или внутренних факторов, способствующих развитию нестабильная и гиперосмолярная слезная пленка. Эти изменения в составе слезы, в некоторых случаях в сочетании с системными факторами, приводят к воспалительному циклу, который вызывает заболевание эпителия глазной поверхности и нервную стимуляцию.Острое высыхание активирует сигнальные пути стресса в эпителии глазной поверхности и резидентных иммунных клетках. Это запускает производство врожденных медиаторов воспаления, которые стимулируют выработку матриксной металлопротеиназы, рекрутирование воспалительных клеток и созревание дендритных клеток. Эти медиаторы в сочетании с воздействием аутоантигенов могут привести к адаптивному ответу, опосредованному Т-клетками. Нарушение барьера роговицы развивается в результате опосредованного протеазой лизиса плотных контактов эпителия, что приводит к ускоренной гибели клеток, десквамации, неравномерной, плохо смазанной поверхности роговицы и обнажению и сенсибилизации эпителиальных ноцицепторов.Дисфункции и гибели бокаловидных клеток конъюнктивы способствует Т-хелпер 1 цитокин интерферон гамма (IFN-γ). Эти эпителиальные изменения еще больше дестабилизируют слезную пленку, усиливают воспаление и создают порочный круг. Циклоспорин и лифитеграст, два препарата, одобренных FDA, подавляют активацию Т-клеток и выработку цитокинов. Хотя эти методы лечения представляют собой значительный прогресс в лечении синдрома сухого глаза, они не эффективны в уменьшении дискомфорта и заболевания эпителия роговицы у всех пациентов. Доклинические исследования выявили другие потенциальные терапевтические мишени, биомаркеры и стратегии для поддержки эндогенных иммунорегуляторных путей.Мы надеемся, что эти открытия приведут к дальнейшему прогрессу в диагностической классификации и лечении.

Сухой глаз — многофакторное и самовоспалительное заболевание

За последние два десятилетия знания о патофизиологии сухого глаза значительно расширились и продолжают развиваться. В то время как нарушения слезной функции традиционно классифицируются как дефицитный компонент (например, водный или липидный) или как водный дефицит или испаряющийся, в действительности большинство пациентов, испытывающих симптомы или признаки дисфункции слезы, имеют несколько факторов риска, а также заболевание или дисфункцию более чем одной слезоточивой клетки. / железы, образующие нестабильную слезную пленку. ¹ Нестабильность слезы сопровождается повышенной осмолярностью слезы (либо в области разрыва слезы, либо диффузно), что активирует сигнальные пути стресса в эпителии глазной поверхности и резидентных иммунных клетках и запускает выработку врожденных воспалительных молекул, которые инициируют порочный процесс саморазвития. постоянный цикл (), который может привести к дальнейшему снижению слезной функции и ухудшению симптомов. ^{2, 3} Многочисленные внешние (например, осушающая среда, воздействие) и внутренние (например.г. старение, аутоиммунитет, лекарства от сушки) факторы, которые могут способствовать этому воспалительному циклу, демонстрируют, почему часто бывает трудно приписать единственную причину для большинства случаев болезни сухого глаза, и важность устранения всех изменяемых факторов риска.

Воспалительный цикл сухого глаза, который может быть инициирован или усилен внешними и внутренними факторами, которые вызывают нестабильность слезы и изменения состава слезы, включая гиперосмолярность, которые активируют сигнальные пути стресса в клетках поверхности глаза, что запускает выработку врожденных медиаторов воспаления, которые могут приводить к рекрутированию и активация CD4 + Т-клеток, которые продуцируют цитокины, вызывающие заболевание эпителия роговицы, конъюнктивы и слезной железы.

Поверхность глаза — это очень уникальная обнаженная слизистая оболочка. Он покрыт специализированным многослойным эпителием, который служит барьером для воздействия окружающей среды, микробов и воспалительных процессов. После кишечника эпителий конъюнктивы занимает второе место по плотности слизистых бокаловидных клеток. Он также содержит множество резидентных иммунных клеток, таких как естественные киллеры, дендритные клетки, макрофаги, γδ и CD4 и CD8 ⁺ Т-клетки, которые функционируют в основном в антимикробной защите, но могут участвовать в патогенезе сухого глаза. ^4–6 Эпителий роговицы должен выдерживать ежедневные экологические проблемы, сохраняя при этом прозрачность и комфорт. Слезные железы и эпителий глазной поверхности продуцируют ряд антимикробных факторов, включая α- и β-дефенсины, IgA, лактоферрин и лизоцим, которые присутствуют в слезной пленке и функционируют для поддержания микроокружения пауцибактерий. ^7–20 Многие механизмы поддержания поверхности глаза и гомеостаза желез нарушаются при сухом глазу (). Исследования, проведенные на животных моделях и пациентах с синдромом сухого глаза, показали, что высыхание представляет собой мощный стресс (в той же степени, что и микробные продукты) для поверхности глаза, который запускает вторичный иммунный ответ, который может привести к порочному кругу (). ^21–27 Гиперосмолярный стресс оказывает прямое провоспалительное действие на эпителий глазной поверхности. Было показано, что он активирует митоген-активируемые протеинкиназы (MAPK), стимулирует секрецию провоспалительных цитокинов (например, IL-1β, TNF-α и IL-6), хемокинов и матриксных металлопротеиназ, таких как MMP-3 и MMP- 9 и вызывают апоптоз. ^{22, 23, 26, 28–38} Взаимодействие этих медиаторов воспаления является сложным, и было показано, что они усиливают друг друга; тем самым усиливая воспалительный каскад.Например, IL-1β стимулирует выработку TNF-α и MMP-3 среди других факторов. ^{31, 32, 39, 40} В свою очередь, TNF-α стимулирует MMP-9 и MMP-3, которые являются физиологическим активатором MMP-9. ^{41, 42} MMP-9 способствует разрушению барьера роговицы, лизируя плотные контакты в поверхностном эпителии. ^{23, 26, 43} Мыши с нокаутом MMP-9 устойчивы к разрушению роговичного барьера при воздействии высыхающего стресса, а ингибиторы MMP, такие как кортикостероиды и доксициклин, показали потенциал в предотвращении вызванного высыханием разрушения эпителиального барьера роговицы на животных моделях. ^{26, 43–45} Система обнаружения MMP-9 на месте (InflammaDry®, RPS, Сарасота, Флорида) одобрена для обнаружения повышенных уровней MMP-9 в слезах у пациентов с синдромом сухого глаза. ^46–50 Повышенная слезоточивость MMP-9 также была обнаружена при других заболеваниях глазной поверхности, таких как атопический и весенний кератоконъюнктивит, язвы роговицы, рецидивирующие эрозии роговицы и ожоги глаз, которые также имеют нарушение роговичного барьера. ^51–63 Обнаружение повышенной слезоточивости MMP-9 дает основание для использования противовоспалительной / протеазной терапии в этих условиях.

Функция роговицы, конъюнктивы и слезной железы в поддержании гомеостаза глазной поверхности (левая сторона каждой ткани) и медиаторов заболевания и патологических изменений в каждой ткани (правая сторона каждой ткани). IL-17 = интерлейкин 17, IL-13 = интерлейкин 13, IFN-γ = интерферон-гамма

Эпителиальные клетки поверхности глаза также секретируют хемокины, которые привлекают воспалительные клетки. Повышенные уровни хемокинов CCL20 (MIP3α), CXCL9 (MIG), CXCL10 (IP-10) и CXCL11 (I-TAC) и их рецепторов были отмечены в клетках поверхности глаза и / или слезах пациентов с синдромом сухого глаза и мышей с экспериментально индуцированным сухой глаз. ^64–68 Генетическая делеция или фармакологическая блокада определенных хемокинов или хемокиновых рецепторов (CCL20, CCR6 или CXCR3) предотвращала развитие индуцированного высыханием заболевания глазной поверхности и снижала патогенность аутореактивных Т-клеток в мышиных моделях сухого глаза. ^{69, 70}

Другим эффектом высыхания является активация врожденных воспалительных путей в эпителии, включая нуклеотид-связывающий домен, семейство, содержащее лейцин, пириновый домен-3 (NLRP3), толл-подобный рецептор и пути окислительного стресса. ^{29, 30, 71–80} Антиоксиданты продемонстрировали терапевтический потенциал для лечения синдрома сухого глаза в доклинических исследованиях на культуре или мышах, а также в пилотных клинических испытаниях. ^{30, 34, 81–85}

Метаплазия и потеря бокаловидных клеток в эпителии конъюнктивы — хорошо известная черта дефицита водянистой слезы. ^86–92 Наиболее тяжелые заболевания глазной поверхности, такие как синдром Стивенса-Джонсона, пемфигоид слизистой оболочки (ММП), болезнь трансплантат против хозяина и тяжелые щелочные ожоги конъюнктивы, часто приводят к полной потере бокаловидных клеток конъюнктивы. ^93–96 Т-хелперные цитокины, как было обнаружено, модулируют дифференцировку бокаловидных клеток конъюнктивы. Цитокин IL-13 Th3 стимулирует пролиферацию и выработку слизи, тогда как цитокин IFN-γ Th2 индуцирует захват бокаловидных клеток, экспрессию ороговевших предшественников оболочки, снижение выработки слизи, невосприимчивость к холинергической стимуляции, стресс ER и развернутый белковый ответ и апоптоз. ^{27, 97–104} Помимо производства муцинов, стабилизирующих слезу, бокаловидные клетки также продуцируют ^{105, 106} иммунорегуляторных факторов, таких как TGF-β и ретиноевую кислоту. ^{104, 107, 108} Перекрестные помехи между бокаловидными и дендритными клетками имеют решающее значение для поддержания иммунной толерантности в тканях слизистой оболочки. ¹⁰⁹ Пассажи, связанные с бокаловидными клетками, которые доставляют поверхностные антигены к лежащим ниже дендритным клеткам и способствуют толерантности, были идентифицированы как в кишечнике, так и в конъюнктиве. ^{109, 110} Мыши с делецией заостренного домена SAM, содержащего ген фактора транскрипции ETS (нокаут Spdef ), лишены бокаловидных клеток, развивают воспаление конъюнктивы и теряют иммунную толерантность ¹¹¹ к местно применяемым антигенам, как было обнаружено в исследовании другие модели сухого глаза у мышей, которые сопровождаются потерей бокаловидных клеток ^{109, 112–114} Эти исследования указывают на критическую роль продуктов бокаловидных клеток в кондиционировании толерогенных свойств дендритных клеток конъюнктивы и поддержании иммунной толерантности поверхности глаза. ^{107, 108}

Доказательства указывают на то, что за первоначальным врожденным иммунным ответом на сухость следует адаптивный CD4 ⁺ Т-клеточный аутоиммунный ответ у мышей, подвергшихся высыхающему стрессу, и пациентов с синдромом Шегрена (СС) и не связанными с СС водными дефицит слезы. ^115–117 Хотя целевой аутоантиген (ы) в этой аутоиммунной реакции не был идентифицирован, члены семейства калликреинов были вовлечены в качестве предполагаемых антигенов в некоторых исследованиях. ^{118, 119} Нарушение иммунной толерантности при синдроме сухого глаза ^112–114 вызывает созревание дендритных клеток ¹²⁰ и образование аутореактивных эффекторных Т-клеток ^{70, 101, 121–124} в моделях сухого глаза у мышей. Пациенты с синдромом сухого глаза имеют повышенное количество дендритных клеток конъюнктивы ^{125, 126} и более высокий процент клеток, экспрессирующих маркер созревания дендритных клеток HLA-DR. ^127–130 Истощение дендритных клеток предотвратило развитие синдрома сухого глаза у мышей, подвергшихся иссушающему стрессу. ¹²⁰ Зрелые дендритные клетки инициируют антиген-специфические эффекторные Т-клетки Th2 и Th27 в дренирующих лимфатических узлах конъюнктивы. Несколько лабораторий идентифицировали гамма-интерферон (IFN-γ) и IL-17, продуцируемые Th2 и Th-17 клетками соответственно, в качестве критических эффекторных цитокинов при синдроме сухого глаза. ^{27, 66, 69, 70, 99, 101, 121, 123, 124, 131–136} IFN-γ способствует потере бокаловидных клеток конъюнктивы и потере ацинаров слезной железы, в то время как IL-17 вызывает нарушение роговичного барьера и лимфангиогенез у мышей. модели глаз.Нарушение иммунной толерантности и образование эффекторных Т-клеток предполагает неадекватное подавление регуляторными Т-клетками (Treg). В самом деле, дисфункциональные Treg, которые не могут подавлять эффекторную активность Т, но продуцируют IFN-γ и IL-17, наблюдались на мышиных моделях сухого глаза, вызванного высыхающим стрессом или связанного со старением. ^{123, 137} Кроме того, адоптивный перенос Т-эффекторов или Tregs от старых мышей мышам-реципиентам с наивным иммунодефицитом вызывал потерю бокаловидных клеток и инфильтрацию слезной железы, в то время как адоптивный перенос Т-эффекторов или Tregs от молодых мышей этого не делал, что позволяет предположить, что возраст Связанная с этим дисфункция Treg может способствовать возникновению синдрома сухого глаза. ¹³⁷

Воспаление и дисфункция слезной железы (LG) развиваются с возрастом и при аутоиммунном заболевании — синдроме Шегрена (SS). ¹³⁸ Признаками СС являются лимфоцитарная инфильтрация слезных и слюнных желез, сывороточные аутоантитела, сухой кератоконъюнктивит и сухость во рту. ¹³⁹ Мышиные модели СС и старения определили патогенную роль CD4 ⁺ T ^{98, 137, 140–142} и В-клеток. ^143–146 Мышиные модели SS, у которых развивается дакриоаденит, имеют тенденцию к искажению Th2 ^147–151 , тогда как модели, у которых развивается сиаладенит, имеют перекос по Th27. ^152–155 IFN-γ, продуцируемый инфильтрирующими клетками, увеличивает экспрессию каспазы и вызывает ацинарный апоптоз. ^{150, 151, 156–158} Измененный ядерный фактор, усиливающий передачу сигналов каппа-легкой цепи активированных В-клеток (NFκB), участвует в SS ^159–161 , и было обнаружено, что усиление передачи сигналов NFκB в эпителиальных клетках способствует развитию слезной железы. ацинарный апоптоз, предшествующий лимфоцитарной инфильтрации на мышиной модели SS. ¹⁶¹ Инфильтрация аутореактивными Т-клетками и окислительный стресс также наблюдались в стареющей слезной железе, что указывает на то, что старение связано с воспалением, а не просто дегенеративным процессом. ^{98, 137, 162–166} Эти исследования показывают, что, как и на поверхности глаза, порочный цикл воспаления и апоптоза с участием инфильтрирующих клеток и железистых ацинарных клеток увековечивает воспаление LG, ведущее к дисфункции желез при СС и возрастному сухому глазу.

Появляется все больше свидетельств того, что микробиом, микробное сообщество, населяющее человеческий организм, выполняет иммунорегуляторные функции. Долгое время подозревали наличие глазного микробиома; однако традиционные мазки из конъюнктивы часто дают отрицательный результат. ^{17, 167} Это резко контрастирует с культурами края век и кожи вокруг глаз, на которых часто растут бактерии. ^{168, 169} Исследования с использованием геномного секвенирования 16S продемонстрировали микробиом глазной поверхности, который может иметь самую низкую биомассу из любой ткани в организме ^{16, 170, 171} Никаких различий в количестве и разнообразии микробиома глаза между SS и контрольные субъекты; ¹⁶ , однако, значительные изменения кишечного микробиома были отмечены в той же когорте со значительным сокращением комменсальных родов и увеличением патогенных родов, таких как , Escherichia / Shigella и Proteobacteria. У мышей, у которых было вызвано антибиотиками истощение микробиома с помощью коктейля из пяти пероральных антибиотиков до экспериментального обезвоживающего стресса, развился значительно более сильный синдром сухого глаза, чем у контрольных мышей, которые не получали антибиотики, что позволяет предположить, что микробиом кишечника может модулировать воспаление и тяжесть глазной поверхности. болезни сухого глаза. ¹⁶

Дальнейшие направления исследований

Два одобренных препарата для лечения сухого глаза, циклоспорин и лифитеграст, нацеленные на Т-клетки, которые вносят ключевой вклад в патофизиологию хронического синдрома сухого глаза.Циклоспорин, связанный с циклофилином, подавляет активность кальциневрина серин / треонинфосфатазы, которая обычно дефосфорилирует ядерный фактор активированных Т-клеток (NFAT) после связывания антигена с рецептором Т-клеток. ¹⁷² Дефосфорилированный NFAT транспортируется в ядро, где он инициирует транскрипцию цитокинов Т-клеток, особенно IL-2 и IFN-γ. ¹⁷² Lifitegrast — это небольшая молекула, которая ингибирует связывание лейкоцит-ассоциированного антигена 1 (LFA-1) на Т-клетках с его лигандной молекулой межклеточной адгезии 1 (ICAM1) на антигенпредставляющих, эпителиальных и эндотелиальных клетках сосудов и предотвращает образование иммунологический синапс, необходимый для полной активации Т-клеток. ¹²⁵ Эти молекулы улучшили признаки и симптомы сухого глаза в клинических испытаниях, но они не эффективны у всех пациентов с синдромом сухого глаза и не устраняют острые эффекты высыхания на поверхности глаза, включая повышенное производство врожденных медиаторов и активацию сигнальные пути стресса MAPK. ^172–174 Терапия, направленная на острые эффекты обезвоживания, вероятно, обеспечит более быстрое снятие раздражения глаз и предотвратит воздействие сухой и сквозняковой среды, такой как кабина самолета.Кортикостероиды показали эффективность в лечении хронического синдрома сухого глаза и в предотвращении раздражения и нарушения барьера роговицы в ответ на иссушающую экологическую проблему ^175–178 ; однако длительное использование кортикостероидов сопряжено с риском образования катаракты и глаукомы, и лечение со стероидоподобным ингибирующим действием на врожденные воспалительные пути могло бы стать большим шагом вперед.

Бокаловидные клетки конъюнктивы продуцируют растворимые муцины, которые стабилизируют прекорнеальный слой слезы.Они также производят факторы, поддерживающие гомеостаз и иммунную толерантность на поверхности глаза. ^{109, 179} Наихудшее заболевание роговицы развивается в условиях сухого глаза с потерей бокаловидных клеток, таких как синдром Шегрена, синдром Стивенса-Джонсона и болезнь «трансплантат против хозяина». ^{134, 180, 181} Цитокин Th2 IFN-γ ингибирует секрецию бокаловидных клеток и способствует апоптозу этих клеток. ^{133, 182} Сообщалось, что циклоспорин А и капли сыворотки увеличивают плотность бокаловидных клеток конъюнктивы. ^{183, 184} Необходимы исследования для определения методов лечения для поддержания количества и функции бокаловидных клеток при старении и в условиях синдрома сухого глаза, особенно тех, которые связаны с наиболее тяжелой потерей бокаловидных клеток.

Терапия для поддержки эндогенных естественных противовоспалительных и иммуномодулирующих механизмов также кажется многообещающей. В западной диете часто не хватает противовоспалительных полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК). ^{185, 186} Было обнаружено, что пероральные добавки с гамма-линоленовой кислотой (GLA, n-6) и омега-3 (n-3) PUFA улучшают симптомы раздражения глаз и стабильность слезы, ингибируют созревание дендритных клеток конъюнктивы и снижают медиаторы воспаления у пациентов с сухим глазом. ^187–189 Другие пищевые добавки, такие как куркумин, обладают мощным противовоспалительным действием и, как было обнаружено, подавляют выработку IL-1β эпителиальными клетками роговицы, подвергающимися осмотическому стрессу, и созреванием дендритных клеток. ^{190, 191} Было обнаружено, что дисбактериоз кишечника является фактором риска синдрома сухого глаза, и у мышей с вызванным антибиотиками истощением их микробиома развилось значительно более тяжелое заболевание глазной поверхности в ответ на иссушающий стресс. ¹⁶ Добавки с комменсальной микробиотой показали противовоспалительное действие при аутоиммунных состояниях, таких как воспалительное заболевание кишечника и сахарный диабет. ^192–196 Вполне возможно, что пробиотики или метаболиты комменсальных бактерий в будущем могут иметь терапевтический потенциал для лечения синдрома сухого глаза.

Сухой глаз | AOA

Сухой глаз — распространенная и часто хроническая проблема, особенно у пожилых людей. С каждым морганием век слезы растекаются по передней поверхности глаза, известной как роговица. Слезы обеспечивают смазку, снижают риск заражения глаз, смывают инородные тела в глазу и сохраняют поверхность глаз гладкой и чистой.Избыточные слезы на глазах стекают в небольшие дренажные каналы во внутренних уголках век, которые стекают в спинку носа. Сухие глаза могут возникнуть, когда слезоотделение и отток слезы не сбалансированы.

Причины и факторы риска

Сухость глаз может возникнуть, когда слезоотделение и отток слезы не сбалансированы. Люди с сухими глазами либо не производят достаточно слез, либо их слезы плохого качества:

• Недостаточное количество слез. Слезы производятся несколькими железами на веках и вокруг них.Слезы имеют тенденцию уменьшаться с возрастом, с различными заболеваниями или как побочный эффект некоторых лекарств. Условия окружающей среды, такие как ветер и сухой климат, также могут уменьшить объем слезной жидкости из-за повышенного ее испарения. Когда нормальное количество слезотечения уменьшается или слезы слишком быстро испаряются из глаз, могут развиться симптомы сухого глаза.
• Слезы низкого качества. Слезы состоят из трех слоев: масла, воды и слизи. Каждый компонент защищает и питает переднюю поверхность глаза.Гладкий масляный слой помогает предотвратить испарение водного слоя, а муциновый слой равномерно распределяет слезы по поверхности глаза. Если слезы испаряются слишком быстро или неравномерно распределяются по роговице из-за недостатка любого из трех слоев слезы, могут развиться симптомы сухого глаза.

Сухость глаз может развиться по разным причинам, в том числе:

• Возраст. Сухие глаза — часть естественного процесса старения. Большинство людей старше 65 лет испытывают некоторые симптомы сухости глаз.
• Пол. Женщины более склонны к развитию сухости глаз из-за гормональных изменений, вызванных беременностью, использованием оральных контрацептивов и менопаузой.
• Лекарства. Некоторые лекарства, в том числе антигистаминные, противоотечные, лекарства от артериального давления и антидепрессанты, могут снижать выработку слезы.
• Состояние здоровья. Люди с ревматоидным артритом, диабетом и проблемами щитовидной железы чаще имеют симптомы сухого глаза.Кроме того, проблемы с воспалением век (блефарит), воспалением поверхности глаза или поворотом век внутрь или наружу могут вызвать развитие сухости глаз.
• Условия окружающей среды. Воздействие дыма, ветра и сухого климата может усилить испарение слезы, что приведет к появлению симптомов сухого глаза. Неспособность регулярно моргать, например, когда вы в течение длительного времени смотрите на экран компьютера, также может способствовать высыханию глаз.
• Прочие факторы. Длительное использование контактных линз может быть фактором развития сухости глаз. Рефракционные операции на глазах, такие как LASIK, могут уменьшить слезоотделение и способствовать появлению сухости глаз.

Сильно выраженная сухость глаз может повредить переднюю поверхность глаза и ухудшить зрение.

Симптомы

Люди с сухими глазами могут испытывать раздражение, песок, царапины или жжение в глазах; ощущение чего-то в глазах; избыточный полив; и помутнение зрения. Симптомы включают:

• Покраснение.
• ощущение покалывания, царапания или жжения.
• Светочувствительность.
• Слезотечение.
• Тягучая слизь возле глаза.
• Blurry Vision.

Диагностика

Сухие глаза можно диагностировать при всестороннем обследовании глаз. Тестирование с акцентом на оценку количества и качества слез, производимых глазами, может включать:

• Анамнез пациента, чтобы определить симптомы пациента и отметить любые общие проблемы со здоровьем, лекарства или факторы окружающей среды, которые могут способствовать проблеме сухого глаза.
• Внешний осмотр глаза, включая структуру век и динамику моргания.
• Оценка век и роговицы с использованием яркого света и увеличения.
• Измерение количества и качества слез при любых отклонениях от нормы. В глаза можно нанести специальные красители, чтобы лучше наблюдать за слезоточивостью и подчеркнуть любые изменения внешней поверхности глаза, вызванные недостаточным количеством слез.

С помощью информации, полученной в результате тестирования, врач оптометрии может определить, есть ли у вас сухость глаз, и посоветовать варианты лечения.

Лечение

Лечение сухости глаз направлено на восстановление или поддержание нормального количества слез в глазах, чтобы минимизировать сухость и связанный с этим дискомфорт, а также поддерживать здоровье глаз. Сухость глаз может быть хроническим заболеванием, но врач оптометрии может назначить лечение, чтобы сохранить ваши глаза здоровыми и комфортными, а также предотвратить ухудшение зрения. Основные подходы, используемые для лечения и лечения сухости глаз, включают добавление слез с использованием безрецептурных растворов искусственной слезы, сохранение слез, увеличение выработки слез и лечение воспаления век или поверхности глаз, которое способствует сухости глаз.

• Добавляем слезы. В легких случаях сухости глаз часто можно справиться с помощью безрецептурных растворов искусственной слезы. Их можно использовать сколько угодно часто, чтобы дополнить естественное производство слезы. Рекомендуются растворы искусственной слезы без консервантов, поскольку они содержат меньше добавок, которые могут еще больше раздражать глаза. Людям с сухими глазами, которые не реагируют только на искусственные слезы, необходимо предпринять дополнительные меры для лечения сухих глаз.
• Слезы консервирующие. Если дольше держать естественные слезы на глазах, это может уменьшить симптомы сухости глаз. Это можно сделать, заблокировав слезные каналы, через которые слезы обычно стекают. Слезные каналы можно заблокировать крошечными силиконовыми или гелеподобными пробками, которые при необходимости можно удалить. Или хирургическая процедура может навсегда закрыть слезные протоки. В любом случае цель состоит в том, чтобы дольше оставались слезы на глазах, чтобы уменьшить проблемы, связанные с сухостью глаз.
• Увеличение слезоотдачи. Врач оптометрии может назначить глазные капли, увеличивающие слезоотдачу.Также может помочь прием пищевых добавок с омега-3 жирными кислотами.
• Лечение вызванного воспаления века или поверхности глаза. Врач оптометрии может порекомендовать рецептурные глазные капли или мази, теплые компрессы и массаж век или очистители век, чтобы уменьшить воспаление вокруг поверхности глаз.

Профилактика

Чтобы уменьшить симптомы сухости глаз, вы можете предпринять следующие шаги:

• Не забывайте регулярно моргать, когда читаете или смотрите на экран компьютера в течение длительного времени.
• Повышает влажность воздуха на работе и дома.
• Носите солнцезащитные очки на открытом воздухе, особенно с закручивающейся оправой, чтобы уменьшить воздействие сухого ветра и солнца.
• Пищевые добавки, содержащие незаменимые жирные кислоты, могут помочь некоторым людям уменьшить симптомы сухого глаза. Спросите своего врача, может ли прием пищевых добавок помочь при проблеме сухого глаза.
• Как избежать обезвоживания, пить много воды (от 8 до 10 стаканов) каждый день.
• Избегайте попадания воздуха в глаза, направляя обогреватели в сторону от лица.
• Избегайте более сухих, чем обычно, сред, таких как пустыни, самолеты и места на большой высоте.

Найдите врача оптометрии

Повышенная активность катепсина S, связанная со снижением ингибирующей способности протеазы, способствует изменению белков слезы у пациентов с синдромом Шегрена

1.

Брито-Зерон, П., Рамос-Казальс, М. и группа, Э.-С. т. f. Достижения в понимании и лечении системных осложнений синдрома Шегрена. Текущее мнение в ревматологии 26 , 520–527, https://doi.org/10.1097/BOR.0000000000000096 (2014).

2.

Бекман, К. А., Луч, Дж. И Милнер, М. С. Диагностика синдрома Шегрена у пациентов с синдромом сухого глаза. Clin Ophthalmol 10 , 43–53, https://doi.org/10.2147 / OPTH.S80043 (2016).

PubMed CAS Статья Google Scholar

3.

Брито-Зерон, П. и др. . Ранняя диагностика первичного синдрома Шегрена: клинические рекомендации рабочей группы EULAR-SS. Обзор клинической иммунологии 12 , 137–156, https://doi.org/10.1586/1744666X.2016.1109449 (2016).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

4.

Li, X. и др. . Повышенная экспрессия катепсинов и провоспалительных цитокинов, вызванных ожирением, в слезных железах самцов мышей NOD. Invest Ophthalmol Vis Sci 51 , 5019–5029, https://doi.org/10.1167/iovs.09-4523 (2010).

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

5.

Hamm-Alvarez, S. F. et al. . Катепсин S является кандидатом в биомаркеры синдрома Шегрена. Arthritis Rheumatol 66 , 1872–1881, https://doi.org/10.1002/art.38633 (2014).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

6.

Costantino, C. M., Ploegh, H. L. & Hafler, D. A. Катепсин S регулирует процессинг MHC класса II в CD4 + HLA-DR + T-клетках человека. J Immunol 183 , 945–952, https://doi.org/10.4049/jimmunol.0

1 (2009).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

7.

Ризе, Р. Дж. и др. . Важная роль катепсина S в процессинге инвариантной цепи, ассоциированном с MHC класса II, и загрузке пептидов. Иммунитет 4 , 357–366 (1996).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

8.

Фонович М. и Тюрк Б. Цистеиновые катепсины и деградация внеклеточного матрикса. Biochim Biophys Acta 1840 , 2560–2570, https://doi.org/10.1016 / j.bbagen.2014.03.017 (2014).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

9.

Эльмариа, С. Б., Редди, В. Б. и Лернер, Е. А. Катепсин S передает сигналы через PAR2 и генерирует новый агонист рецептора связанного лиганда. PloS one 9 , e99702, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0099702 (2014).

ADS Статья PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

10.

Николич-Патерсон, Д. Дж. Катепсин S-зависимая активация рецептора-2, активируемого протеазой: новый механизм эндотелиальной дисфункции. Журнал Американского общества нефрологов: JASN 27 , 1577–1579, https://doi.org/10.1681/ASN.2015101162 (2016).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

11.

Чжао, П. и др. . Катепсин S вызывает воспалительную боль из-за предвзятого агонизма PAR2 и TRPV4. Журнал биологической химии 289 , 27215–27234, https://doi.org/10.1074/jbc.M114.599712 (2014).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

12.

Ким, Н. и др. . Избыточная экспрессия катепсина S вызывает у мышей хронический атопический дерматит. J Invest Dermatol 132 , 1169–1176, https://doi.org/10.1038/jid.2011.404 (2012).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

13.

Киршке, Х. В Справочнике по протеолитическим ферментам (изд. Гай Салвесен) 1824–1830 (Academic Press, 2013).

14.

Regmi, S. C. et al. . Разложение протеогликана 4 / лубрицина катепсином S: потенциальный механизм уменьшения смазки поверхности глаза при синдроме Шегрена. Exp Eye Res 161 , 1–9, https://doi.org/10.1016/j.exer.2017.05.006 (2017).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

15.

Терк В. и Боде В. Цистатины: белковые ингибиторы цистеиновых протеиназ. писем FEBS 285 , 213–219 (1991).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

16.

Ши Г. П. и др. . Дефицит цистатина С при атеросклерозе и аневризмах аорты человека. Журнал клинических исследований 104 , 1191–1197, https://doi.org/10.1172/JCI7709 (1999).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

17.

Ха, К. Г. и др. . Уменьшение метастатического распространения у мышей, гомозиготных по нулевому аллелю гена ингибитора протеазы цистатина С. Мол Патол 52 , 332–340 (1999).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

18.

Kolwijck, E. и др. . Баланс между внеклеточными катепсинами и цистатином С важен при раке яичников. евро J Clin Invest 40 , 591–599, https://doi.org/10.1111/j.1365-2362.2010.02305.x (2010).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

19.

Фланаган, Дж. Л. и Уиллкокс, М. Д. Роль лактоферрина в слезной пленке. Biochimie 91 , 35–43, https: // doi.org / 10.1016 / j.biochi.2008.07.007 (2009).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

20.

Kijlstra, A. Роль лактоферрина в неспецифическом иммунном ответе на поверхности глаза. Reg Immunol 3 , 193–197 (1990).

PubMed Google Scholar

21.

Кноп, Э., Кноп, Н. и Клаус, П. Локальная продукция секреторного IgA в ассоциированной с глазом лимфоидной ткани (EALT) нормальной глазной поверхности человека. Invest Ophthalmol Vis Sci 49 , 2322–2329, https://doi.org/10.1167/iovs.07-0691 (2008).

Артикул PubMed Google Scholar

22.

Дойл М. Э. и др. . Аутоиммунный дакриоаденит мышей NOD / LtJ и его последующее влияние на состав слезных белков. Am J Pathol 171 , 1224–1236, https://doi.org/10.2353/ajpath.2007.070388 (2007).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

23.

Роган, М. П. и др. . Потеря микробицидной активности и повышенное образование биопленки из-за снижения активности лактоферрина у пациентов с муковисцидозом. J Infect Dis 190 , 1245–1253, https://doi.org/10.1086/423821 (2004).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

24.

Денисин, А.К., Карнс, К. и Херр, А.Е. Обработка слезной жидкости человека, собранной с помощью полоски Ширмера, после сбора влияет на содержание белка. Аналитик 137 , 5088–5096, https://doi.org/10.1039/c2an35821b (2012).

ADS Статья PubMed CAS Google Scholar

25.

Боуг, М. и др. . Терапевтическое дозирование перорально активного селективного ингибитора катепсина S подавляет болезнь в моделях аутоиммунитета. Журнал аутоиммунитета 36 , 201–209, https://doi.org/10.1016/j.jaut.2011.01.003 (2011).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

26.

Рупанагуди К. В. и др. . Ингибирование катепсина S подавляет системную красную волчанку и волчаночный нефрит, поскольку катепсин S необходим для прайминга Т-лимфоцитов CD4 и В-клеток, опосредованного МНС класса II. Анналы ревматических болезней 74 , 452–463, https://doi.org/10.1136/annrheumdis-2013-203717 (2015).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

27.

Саегуса, К. и др. . Ингибитор катепсина S предотвращает презентацию аутоантигенов и аутоиммунитет. Журнал клинических исследований 110 , 361–369, https://doi.org/10.1172/JCI14682 (2002).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

28.

Пейн, К. Д. и др. . Фармакокинетика и фармакодинамика ингибитора катепсина S, LY3000328, у здоровых людей. Британский журнал клинической фармакологии 78 , 1334–1342, https://doi.org/10.1111/bcp.12470 (2014).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

29.

Терон М. и др. . Фармакодинамический мониторинг RO5459072, ингибитора малых молекул катепсина S. Frontiers в иммунологии 8 , 806, https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00806 (2017).

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

30.

Кокс, Дж. М. и др. . Определение содержания и активности катепсина S в плазме человека и значение для клинических исследований. Anal Biochem 430 , 130–137, https://doi.org/10.1016/j.ab.2012.08.011 (2012).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

31.

Haves-Zburof, D. et al. . Катепсины и их эндогенные ингибиторы цистатины: экспрессия и модуляция при рассеянном склерозе. Журнал клеточной и молекулярной медицины 15 , 2421–2429, https://doi.org/10.1111/j.1582-4934.2010.01229.x (2011).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

32.

Цимерман Н., Бргулян П. М., Красовец М., Сускович С. и Кос, Дж.Уровень цистатина С в сыворотке, мощного ингибитора цистеиновых протеиназ, повышен у пациентов с астмой. Clinica chimica acta; международный журнал клинической химии 300 , 83–95 (2000).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

33.

Шах, М. и др. . Наночастица полимера, связывающего рапамицин, проявляет мощную терапевтическую активность в подавлении аутоиммунного дакриоаденита на мышиной модели синдрома Шегрена. Журнал контролируемого выпуска: официальный журнал Общества контролируемого выпуска 171 , 269–279, https://doi.org/10.1016/j.jconrel.2013.07.016 (2013).

Артикул CAS Google Scholar

34.

Шах, М. и др. . Глазные капли рапамицина подавляют воспаление слезных желез на мышиной модели синдрома Шегрена. Invest Ophthalmol Vis Sci 58 , 372–385, https: // doi.org / 10.1167 / iovs.16-19159 (2017).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

35.

Дин Р. А. и др. . Идентификация кандидатных ангиогенных ингибиторов, процессируемых матриксной металлопротеиназой 2 (ММР-2) в клеточных протеомных скринингах: нарушение действия фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) / пептида, регулирующего аффинный гепарин (плейотрофин) и ангиогенных комплексов ингибиторов роста VEGF и фактора роста соединительной ткани посредством Протеолиз ММП-2. Молекулярная и клеточная биология 27 , 8454–8465, https://doi.org/10.1128/MCB.00821-07 (2007).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

36.

Lenarcic, B., Krasovec, M., Ritonja, A., Olafsson, I. & Turk, V. Инактивация человеческого цистатина C и кининогена человеческим катепсином D. Письма FEBS 280 , 211–215 (1991).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

37.

Xu, Y., Ding, Y., Li, X. & Wu, X. Цистатин C представляет собой связанный с заболеванием белок, подлежащий множественной регуляции. Иммунология и клеточная биология 93 , 442–451, https://doi.org/10.1038/icb.2014.121 (2015).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

38.

Warfel, A.H., Zucker-Franklin, D., Frangione, B. & Ghiso, J. Конститутивная секреция цистатина C (гамма-след) моноцитами и макрофагами и ее подавление после стимуляции. J Exp Med 166 , 1912–1917 (1987).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

39.

Merz, G. S. et al. . Цистатин С человека образует неактивный димер во время внутриклеточного переноса трансфицированных клеток СНО. Журнал клеточной физиологии 173 , 423–432, DOI: 10.1002 / (SICI) 1097-4652 (199712) 173: 3 <423 :: AID-JCP15> 3.0.CO; 2-C (1997).

40.

Bahamondes, V. et al . Изменения в экспрессии и распределении Rab3D в ацинусах пациентов с синдромом Шегрена связаны с потерей полярности клеток и секреторной дисфункцией. Arthritis Rheum 63 , 3126–3135, https://doi.org/10.1002/art.30500 (2011).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

41.

Kamoi, M. et al. . Накопление секреторных пузырьков в эпителии слезной железы связано с синдромом сухого глаза, не относящимся к типу Шегрена, у пользователей терминалов с визуальным дисплеем. PloS one 7 ​​, e43688, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0043688 (2012).

ADS Статья PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

42.

Gillette, T. E. & Allansmith, M. R. Лактоферрин в тканях глаза человека. Am J Ophthalmol 90 , 30–37 (1980).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

43.

Mackie, I. A. & Seal, D. V. Диагностические значения профилей слезных белков. Br J Ophthalmol 68 , 321–324 (1984).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

44.

Versura, P., Bavelloni, A., Grillini, M., Fresina, M. & Campos, E.C. Диагностические характеристики панели слезоточивого белка при раннем появлении синдрома сухого глаза. Молекулярное зрение 19 , 1247–1257 (2013).

PubMed PubMed Central Google Scholar

45.

Versura, P. et al. . Протеомика слезы при болезни сухого глаза, вызванной испарением. Eye (Lond) 24 , 1396–1402, https://doi.org/10.1038/eye.2010.7 (2010).

Артикул CAS Google Scholar

46.

Янссен П. Т. и ван Бийстервельд О. П. Белки слезной жидкости при синдроме Шегрена. Scand J Rheumatol Suppl 61 , 224–227 (1986).

PubMed CAS Google Scholar

47.

Да Дальт, С., Монкада, А., Приори, Р., Валезини, Г. и Пиветти-Пецци, П. Тест на разрыв лактоферрина в диагностике синдрома Шегрена. Eur J Ophthalmol 6 , 284–286 (1996).

Артикул PubMed Google Scholar

48.

D’Souza, S. & Tong, L. Практические вопросы, касающиеся анализов слезного белка при синдроме сухого глаза. Eye Vis (Lond) 1 , 6, https://doi.org/10.1186/s40662-014-0006-y (2014).

Артикул Google Scholar

49.

Хамфрис-Бехер, М. Г., Брайер, Дж., Ямачика, С., Пек, А. Б. и Йонссон, Р. Альтернативная перспектива иммунного ответа при аутоиммунной экзокринопатии: индукция функционального покоя, а не деструктивная аутоагрессия. Scand J Immunol 49 , 7–10 (1999).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

50.

Пастори, В., Тавацци, С. и Лекки, М. Контактные линзы, содержащие лактоферрин: защита глаз от окислительного стресса. Роговица 34 , 693–697, https://doi.org/10.1097/ICO.0000000000000435 (2015).

Артикул PubMed Google Scholar

51.

ван Нимвеген, Дж. Ф. и др. . Проверка критериев ACR-EULAR для первичного синдрома Шегрена в голландской проспективной диагностической когорте. Ревматология (Оксфорд, Англия) 57 , 818–825, https://doi.org/10.1093/rheumatology/kex495 (2018).

Артикул Google Scholar

52.

Schenke-Layland, K. et al. . Лимфоцитарная инфильтрация приводит к деградации структур внеклеточного матрикса слезной железы у мышей NOD, проявляющих экзокринопатию, подобную синдрому Шегрена. Exp Eye Res 90 , 223–237, https://doi.org/10.1016/j.exer.2009.10.008 (2010).

Артикул PubMed CAS Google Scholar

53.

Vilalta, P. M., Zhang, L. & Hamm-Alvarez, S. F. Новое таксол-индуцированное фосфорилирование и стабилизация виментина, выявленное в исследованиях стабильных микротрубочек и промежуточных филаментов виментина. Журнал клеточной науки 111 (Pt 13), 1841–1852 (1998).

PubMed CAS Google Scholar

54.

Meng, Z. et al. . Несбалансированный Rab3D по сравнению с Rab27 увеличивает секрецию катепсина S из слезных ацинусов на мышиной модели синдрома Шегрена. Am J Physiol Cell Physiol 310 , C942–954, https://doi.org/10.1152/ajpcell.00275.2015 (2016).

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

55.

Ву, К. и др. . Измененная экспрессия генов, функционирующих в липидном гомеостазе, связана с отложением липидов в слезной железе мышей NOD. Exp Eye Res 89 , 319–332, https://doi.org/10.1016/j.exer.2009.03.020 (2009).

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

Введение

Введение

Влажная глазная поверхность состоит из многослойного плоского эпителия слизистой оболочки роговицы / конъюнктивы и покрывающей его слезной пленки [1].Эти клетки постоянно обновляются в процессе, посредством которого дочерние клетки, образованные в результате деления базальных клеток на базальной мембране, перемещаются вверх в клеточных слоях, одновременно подвергаясь терминальной дифференцировке. Клетки апикального клеточного слоя морфологически и биохимически сильно отличаются от клеток базального слоя. По мере приближения к поверхности клетки все более уплощаются и начинают поляризованно экспрессировать маркеры слизистой оболочки, включая связанные с мембраной муцины, такие как MUC16, которые исходят из специализированных мембранных складок на апикальном слое клеток, называемых микропликами.MUC16 связывает несколько олигомеров галектина LGALS3 с образованием высокоорганизованного гликокаликса [2]. Гликокаликс, наряду с самими плазматическими мембранами, создает трансклеточный барьер для предотвращения внутриклеточного проникновения [2, 3]. Плотные соединения закрывают пространство между соседними клетками, создавая параклеточный барьер, предотвращая проникновение в более глубокие слои клеток [4]. По мере дальнейшего созревания апикальных клеток площадь их поверхности увеличивается, их микроплиты уплощаются, и MUC16 теряется с их поверхности [5].Кроме того, клетки становятся менее активными в метаболическом отношении, в конечном итоге распадаясь в форме гибели клеток, называемой десквамацией [6]. У человека полный оборот эпителия глазной поверхности происходит через 5–7 дней [7, 8].

Непосредственно подвергаясь воздействию внешней среды, эпителий глазной поверхности подвержен действию повреждающих агентов и физических воздействий, таких как ультрафиолет, микроорганизмы и аллергены, которые вызывают повреждение глазной поверхности, нарушение барьера и усиление шелушения [1]. Повреждение глазной поверхности характерно для болезни сухого глаза (сухой кератоконъюнктивит), иссушающего состояния глазной поверхности, поражающего 20% или более населения в Северной Америке, Европе и Азии [9].Наиболее часто используемый метод отслеживания повреждений глазной поверхности из-за таких проблем — окрашивание водорастворимыми «витальными» красителями [10]. Впервые флуоресцеин был использован клинически в 1882 году для оценки дефектов эпителия роговицы [11]. Использование бенгальской розы было популяризировано в 1930-х годах для диагностики синдрома сухого глаза из-за характерного «точечного» окрашивания, наблюдаемого на поверхности глаза пациентов [12]. Флуоресцеин сейчас также используется для этой цели [13]. Воздействие многоцелевых растворов для очистки контактных линз (MPS) также вызывает окрашивание витальными красителями — недавно признанное явление, называемое окрашиванием роговицы, индуцированным раствором (SICS) [14].

Учитывая широкое использование витальных красителей, удивительно, что механизм окрашивания до сих пор не совсем понятен [13]. В исследованиях, опубликованных в начале 1990-х годов, сообщалось, что здоровые клетки в однослойной культуре поглощают бенгальскую розу [15] и что компоненты слезы, такие как муцины, блокируют поглощение. Позже было показано, что эпителиальные клетки роговицы в культуре автономно исключают бенгальский шиповник, если индуцируются дифференцироваться и вырабатывать гликокаликс слизистой оболочки [1]. Это свидетельствует о том, что окрашивание точечных пятен бенгальской розой при синдроме сухого глаза может представлять собой повреждение гликокаликсного барьера отдельных клеток, позволяя красителю проникнуть внутрь.Это также было первым признаком того, что относительно недифференцированные однослойные культуры клеток не могут обеспечить полную модель глазной поверхности.

Гидроксиксантин, флуоресцеин, является исходным соединением, из которого был получен бенгальский розовый, таким образом, эти два красителя структурно родственны [16]. Тем не менее, они различаются свойствами захвата клеток. Живые эпителиальные клетки роговицы в монослойной культуре поглощают флуоресцеин так же, как бенгальский розовый, но на более низком уровне, требующем визуализации при эпифлуоресцентном освещении [17].Поглощение флуоресцеина отдельными эпителиальными клетками роговицы также наблюдалось на поверхности глаза кролика in situ при эпифлуоресцентном освещении [18]. В более поздних исследованиях наблюдали, что отдельные клетки в поверхностных эпителиальных слоях поверхности глаза человека, поврежденные сухим глазом, поглощают флуоресцеин, что описывается как «гиперокрашивание» [19]. В отличие от розового бенгальского, захват флуоресцеина клетками не блокируется муцинами [17], за исключением повреждения гликокаликса как причины гиперокрашивания. Это означает, что плазматическая мембрана должна быть основным барьером для проникновения красителя.

Два недавних исследования использовали клетки в монослойной культуре для изучения основных механизмов поглощения флуоресцеина [20, 21]. Хотя все клетки поглощали флуоресцеин на низком уровне, как сообщалось ранее [17], наблюдалось, что небольшой процент концентрирует краситель, таким образом выделяясь как гиперфлуоресцентный. Наблюдалось, что концентрация флуоресцеина является активным процессом, который ингибируется снижением температуры или уничтожением клеток [21]. Применение повреждающего стресса [20] или лечение MPS [21] значительно увеличивало количество гиперфлуоресцентных клеток.Стрессовые клетки, демонстрирующие высокую интенсивность флуоресценции, также проявляли характеристики раннего апоптоза, будь то в монослойной культуре или в апикальном эпителиальном слое глаз кроликов ex vivo [20]. Эти данные свидетельствуют о том, что гиперокрашивание флуоресцеина — это активный процесс концентрации красителя в клетках, которые могут быть повреждены, но все еще живы.

Когда поверхность клетки нарушена, она может реагировать активацией процессов ремоделирования для восстановления повреждений плазматической мембраны и поддержания протеостаза [22-25].Мы предположили, что флуоресцеиновый краситель может поглощаться эндоцитарными пузырьками отдельных клеток, подвергающихся такой репарации. Здесь мы сообщаем о нашем исследовании этой идеи с использованием недифференцированных эпителиальных клеток роговицы человека в однослойной культуре, стратифицированных и дифференцированных культурах и роговице мыши ex vivo, чтобы наблюдать полный спектр факторов, которые могут влиять на поглощение флуоресцеина, и мы включаем сравнение с краситель бенгальской розы, позволяющий оценить дифференцировку клеток.

Материалы и методы По всему тексту для генов и их продуктов используется номенклатура

HUGO.

Экспериментальная модель, план исследования и статистический анализ

Целью этого исследования было изучить механизмы поглощения красителя, относящиеся к заболеванию глазной поверхности. Мы предположили, что стимуляция ремоделирования плазматической мембраны повреждением сублетальных клеток может привести к поглощению жизненно важного красителя в везикулах восстановления эндоцитов. Окислительный стресс был вовлечен в повреждение глазной поверхности из-за сухого глаза [26] и многих других заболеваний глазной поверхности [27, 28], поэтому мы выбрали его в качестве повреждающего стресса для нашего исследования.Исходный водный раствор трет-бутилгидропероксида (tBHP) разводили в среде культур клеток человека или культур глазных органов мыши, как мы ранее описали [29]. Конечное разведение tBHP, использованное для экспериментов с культурами клеток, составляло 3 мМ или 10 мМ (как указано в деталях отдельных экспериментов). Конечное разведение 10 мМ tBHP использовали для экспериментов на культуре глазных органов мышей. Эти оптимальные концентрации были определены эмпирически при оценке зависимости реакции от дозы как вызывающие высокий уровень жизнеспособного окрашивания красителя без уничтожения клеток.Как только был добавлен tBHP, все культуры возвращали в инкубатор для клеточных культур в атмосфере 5% CO ₂ . Стрессовые культуры сравнивали с не подвергавшимися стрессу контролями, инкубированными аналогичным образом в течение того же периода времени. Клетки инкубировали от 2 до 3 часов, а глаза мышей инкубировали в течение 2,5 часов перед определением конечной точки.

Чтобы узнать, участвует ли эндоцитоз в поглощении красителя, этот процесс блокировали обработкой клеток или глаз ингибиторами эндоцитоза. Хлорпромазина гидрохлорид (MP Biologicals, Solon, OH), ингибитор клатрин-опосредованного эндоцитоза [30], использовали в конечном разведении 8 мкг / мл.Генистеин (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури), ингибитор кавеолин-опосредованного эндоцитоза [30], использовали в конечном разведении 200 мкМ. Гидрат Dynasore (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури), ингибитор ГТФазы, который быстро и обратимо ингибирует активность членов семейства динаминов, участвующих в эндоцитозе, опосредованном как клатрином, так и кавеолином [31], разбавляли до конечной концентрации 40 мкМ или 80 мкМ (как указано в отдельных деталях эксперимента). Производное Dynasore Dyngo-4a (Abcam, Кембридж, Великобритания), более мощный ингибитор динамина [32], использовали в конечном разведении 15 мкМ.Все ингибиторы растворяли в ДМСО, который служил средством для лечения. Такой же объем ДМСО добавляли к подходящим необработанным культурам в качестве контроля носителя.

В конце эксперимента немедленно проводили анализ жизненно важных красителей и / или другие анализы на клетках, кондиционированной культуральной среде или глазах.

Все данные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение (SD). Все анализы были выполнены в трех экземплярах (n = 3). Статистическая значимость двух наборов данных оценивалась по критерию Стьюдента.Для расчета значений P использовали все технические повторы из всех биологических повторов. Статистическая значимость была определена при P <0,05. Индивидуальные эксперименты повторяли не менее двух раз.

Культура эпителиальных клеток роговицы человека

Иммортализованная теломеразой линия клеток лимбального эпителия роговицы человека (HCLE) использовалась во всех экспериментах с использованием культуры клеток [33, 34]. Клеточная линия была разработана в лаборатории Gipson [33] в соответствии с методами, описанными [35], и подтверждена анализом экспрессии маркеров [2], хромосомным анализом и использованием локусов полиморфных коротких тандемных повторов (STR) [36].Клеточная линия была получена из нормальной ткани и при стимуляции дифференцировки экспрессирует тот же ген муцина и кератиновый репертуар, что и нативный эпителий [33]. Для эксперимента клетки помещали в 96-луночные планшеты и использовали при 90% -ном слиянии в качестве монослоев или переносили в среду для дифференцировки, содержащую высокое содержание ионов кальция и бычью сыворотку, и оставляли на 7 дней для расслоения и дифференцировки, как описано [33]. Стратификацию обычно оценивали с помощью фазово-контрастной микроскопии; дифференцировку, ведущую к барьерной функции гликокаликса, оценивали с помощью анализа проникновения бенгальской розы.Результаты обоих этих анализов были показаны ранее [34].

Культура глазных органов мыши

Комитет по институциональному уходу и использованию животных Университета Южной Калифорнии одобрил протокол исследования № 11412 для использования мышей в этом исследовании. Исследование проводилось в соответствии с Положением Ассоциации исследований в области зрения и офтальмологии (ARVO) по использованию животных в офтальмологических и визуальных исследованиях. Мышей C57Bl / 6J дикого типа в возрасте 6-8 недель приобретали в Jackson Labs (Бар-Харбор, штат Мэн).Перед использованием в эксперименте мышей содержали в барьерном помещении, свободном от патогенов, и содержали при температуре 25 ± 1 ^° ° C, относительной влажности 60% ± 10% с чередованием 12-часовых циклов свет / темнота. Чтобы получить глаза для органной культуры, эвтаназию проводили с использованием сжатого газа CO ₂ в соответствии с Руководством Американской ветеринарной медицинской ассоциации по эвтаназии животных: издание 2013 года. Глаза были немедленно энуклеированы, промыты в PBS, а затем помещены в среду Keratinocyte-SFM (K-SFM) (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA) [33].

Анализ окрашивания жизненно важным красителем

Окрашивание жизненно важным красителем клеток в культуре проводили с использованием флуоресцеина натрия (Sigma-Aldrich). Окрашивание глаз мыши выполняли с использованием клинического раствора флуоресцеинового красителя (Fluoresoft-0,35%, Holles Laboratories, Cohasset, MA). Оба красителя дают сходные результаты окрашивания [37, 38]. Бенгальскую розу (0,05%; Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури) использовали как для клеток в культуре, так и для глаз мыши. Жизненно важные красители добавляли к культурам на 10 минут, а затем удаляли избыток красителя, промывая 3 раза PBS.Поглощение красителя качественно оценивали с помощью изображений. Изображения (возбуждение / испускание = 488/510 нм) получали сразу после промывки, чтобы можно было оценить окрашивание до диффузии красителя. Поглощение флуоресцеина культивируемыми клетками определяли количественно с использованием планшет-ридера и отображали на графиках в виде относительных единиц флуоресценции (RFU). Поглощение бенгальской розы культивированными клетками или глазами определяли количественно с использованием модификации ранее описанного метода [37]. После визуализации окрашенные клетки или глаза инкубировали в 100 мкл ДМСО при комнатной температуре в течение 1 часа, и раствор собирали в лунки 96-луночного планшета для считывания в планшет-ридере при 562 нм.

Анализы апоптоза

Ранний апоптоз оценивали путем зондирования как стратифицированных, так и однослойных культур HCLE с помощью Alexa Fluor 594-конъюгированного аннексина-5 (Invitrogen, Molecular Probes, Юджин, Орегон). Протокол производителя был соблюден с некоторыми изменениями. Таким образом, вместо сбора клеток после индукции конъюгат ANXA5 вносили непосредственно в лунки в количестве 25 мкл на 100 мкл среды. Затем клетки инкубировали в темноте при комнатной температуре в течение 15 минут и визуализировали с помощью флуоресцентного микроскопа Keyence BZ-X700 (возбуждение / испускание = 532/588 нм).

Поздний апоптоз оценивали с помощью набора для обнаружения гибели клеток in situ, Fluorescein (Roche, Базель, Швейцария). Клетки промывали PBS и инкубировали в реакционной смеси для мечения концевых концов дезоксинуклеотидтрансферазы dUTP (TUNEL) в течение 1 часа при 37 ° C в темноте, следуя протоколу поставщика, а затем трижды промывали PBS. Изображения получали с помощью флуоресцентного микроскопа Keyance BZ-X700 (возбуждение / испускание = 488/510 нм).

Анализ эндоцитоза

. Эндоцитоз количественно оценивали путем мониторинга клеточного поглощения ТФ человека, конъюгированного с Alexa Fluor 568 (сывороточный трансферрин; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA).Монослойные или стратифицированные культуры клеток HCLE один раз промывали PBS, а затем снова базальной средой K-SFM. Клетки визуализировали с помощью фазового контраста, чтобы гарантировать, что все лунки имеют одинаковую плотность клеток. Затем клетки зондировали TF, конъюгированным с Alexa Fluor 568, с использованием протокола производителя с некоторыми изменениями. Вместо помещения клеток на лед и промывания холодным раствором для визуализации живых клеток (LCIS) клетки промывали базальной средой K-SFM. Клетки зондировали с помощью 10x ТФ, конъюгированного с Alexa Fluor 568 (250 мкг / мл), разведенного в LCIS в течение 20 минут перед промывкой в ​​холодной LCIS.Затем клетки визуализировали с помощью флуоресцентного микроскопа Keyence BZ-X700 (возбуждение / испускание = 532/588 нм). Поглощение ТФ, конъюгированного с Alexa Fluor 568, количественно оценивали с помощью анализа изображения J.

Метаболические тесты на цитотоксичность

Для оценки цитотоксичности использовали два коммерческих метаболических теста: МТТ (3- [4,5-диметилтиазол-2-ил] -2,5-дифенилтетразолий бромид; Thermo Fisher Scientific) или WST-1 (4- [3- (4-иодфенил) -2- (4-нитрофенил) -2H-5-тетразолио] -1,3-бензолдисульфонат; Thermo Fisher Scientific).Супероксидные анионы, генерируемые NAD (P) H-зависимой клеточной оксидоредуктазной активностью, снижают MTT или WST до водорастворимых формазанов, которые поглощают видимый свет [39]. Краситель МТТ проницаем для клеток, и восстановление происходит внутриклеточно; Краситель WST-1 непроницаем для клеток, поэтому восстановление происходит вне клетки за счет транспорта электронов через плазматическую мембрану [40]. Уменьшение красителя измеряли по оптической плотности при длинах волн 590 нм (МТТ) или 440 нм (WST-1).

Анализ исключения трипанового синего

Анализ исключения трипанового синего основан на том принципе, что живые клетки обладают неповрежденными клеточными мембранами, которые исключают определенные красители, тогда как мертвые клетки не исключают краситель [41].Клетки окрашивали фильтрованным 0,4% красителем трипановым синим (Thermo Fisher Scientific) в течение 4 минут после 3 промывок PBS. Степень окрашивания измеряли качественно, визуализируя в белом свете, и количественно, используя планшет-ридер при 590 нм.

Связывание лектина

Чтобы определить присутствие гликоконъюгатов муцинового типа на поверхности клеток, был проведен анализ связывания с якалином, лектином, который специфически распознает Т-антиген, присутствующий на О-гликанах [42, 43]. Методы были такими, как описано ранее [34].Вкратце, клетки, фиксированные в 100% метаноле, инкубировали в блокирующем буфере (1% BSA в PBS) в течение 30 минут. Затем культуры инкубировали с джакалином, конъюгированным с флуоресцеином (Vector Lab, Burlingame, CA) в разведении 1: 100 в течение 1 часа при комнатной температуре, промывали PBS, затем накрывали покровным стеклом и получали изображения с использованием флуоресценции Keyance BZ-X700. микроскоп (возбуждение / испускание = 488/510 нм).

Вестерн-блоттинг

Белки из равных объемов образцов среды для культивирования клеток разделяли с помощью SDS-PAGE и переносили на мембраны из поливинилидендифторида (PVDF) (Thermo Fisher Scientific).Мембраны зондировали первичным антителом против LGALS3 (sc-23983; Santa Cruz Biotech, Santa Cruz, CA) в течение ночи (при разведении 1: 200) при 4 ^° ° C при осторожном встряхивании. Затем мембраны инкубировали в течение 1 часа с конъюгатами вторичное антитело-пероксидаза хрена (Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния) в разведении 1: 10 000. Специфические сигналы проявляли в течение 1 мин с использованием компонентов 1 и 2 набора повышенной хемилюминесценции (ECL) (GE Healthcare UK Limited, Бакингемшир, Великобритания).Хемилюминесценцию визуализировали путем экспонирования фотопленки (LAS-4000; Fujifilm, Токио, Япония).

Полимеразная цепная реакция

Для измерения лизиса клеток собирали среду для культивирования клеток и равную часть среды подвергали полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием наборов праймеров для обнаружения фрагментов гена ACTB (прямой праймер: 5′-cattgccgacaggatgcaga- 3 ‘; обратный праймер: 5′-ctgatccacatctgctggaa-3’), как описано ранее [44].

Результаты Окислительный стресс стимулирует поглощение жизненно важного красителя, связанное с повреждением сублетальных клеток

Целью нашей первой серии экспериментов было охарактеризовать и подтвердить нашу модель окислительного стресса в однослойных культурах эпителиальных клеток роговицы человека со ссылкой на два недавних исследования, обсуждаемых во Введении [20, 21].Репрезентативные результаты показаны на рис. 1.

10.1371 / journal.pone.0204288.g001 Рис. Окислительный стресс стимулирует поглощение жизненно важного красителя, связанного с повреждением сублетальных клеток.

A) Монослойные культуры клеток HCLE, высеянные в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу 3 мМ tBHP. Через 2 часа культуры окрашивали флуоресцеином или бенгальской розой и отображали при эпифлуоресцентном освещении (флуоресцеин) или белом свете (бенгальская роза). Представительные изображения показаны для каждого набора. B) Монослойные культуры HCLE, нанесенные на чашки в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 3 мМ tBHP.Через 2 часа проводили анализ связывания ANXA5 или анализ TUNEL для оценки апоптоза. Представительные изображения показаны для каждого набора. C) Послойные культуры клеток HCLE, нанесенные на чашки в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 3 мМ tBHP. Через 2 часа культуры окрашивали флуоресцеином или бенгальской розой и отображали при эпифлуоресцентном освещении (флуоресцеин) или белом свете (бенгальская роза). Репрезентативные изображения из каждого набора показаны из каждого набора.

Как видно при эпифлуоресцентном освещении (рис. 1А), флуоресцеин окрашивал все клетки в монослойной культуре, причем краситель концентрировался в основном в ядре, как описано в исходных отчетах [15, 17].Наблюдалась мозаика рассеянных отдельных гиперокрашенных клеток, как и в обоих контрольных исследованиях [20, 21]. Визуальный осмотр показал, что окислительный стресс увеличивает количество клеток, гиперокрашенных флуоресцеином, что опять же согласуется с обоими эталонными исследованиями [20, 21]. Поглощение красителя розово-бенгальского цвета было по существу таким же, как и у флуоресцеина, с аналогичным количеством клеток, показывающих концентрацию красителя как в стрессовых, так и в стрессовых условиях, по оценке визуального осмотра (рис. 1А). В соответствии с отчетом Баккара и его коллег [20] поглощение флуоресцеинового красителя (количественно определенное планшет-ридером), стимулированное окислительным стрессом, ингибировалось до 35% при понижении температуры культуры до комнатной и до 10% при понижении до 4 °. C (данные не показаны).Это согласуется с идеей о том, что поглощение и концентрация жизненно важного красителя — это активный процесс живых клеток.

Чтобы охарактеризовать повреждение клеток, вызванное окислительным стрессом, мы исследовали как раннюю (анализ связывания ANXA5), так и позднюю (анализ TUNEL) стадии апоптоза. Фосфатидилсерин, экспонированный на наружной створке поверхности мембраны, приводит к связыванию ANXA5. Процент клеток, которые связывали ANXA5, был существенно увеличен окислительным стрессом, судя по визуальному осмотру (рис. 1B). Это согласуется с результатами одного из справочных исследований [20].Напротив, только небольшое количество клеток, по-видимому, находилось на поздней стадии апоптоза, было обнаружено с помощью анализа TUNEL, выполненного в один и тот же момент времени, и разница между нестрессированными и подвергнутыми стрессу клетками была незначительной (рис. 1В). Это подтверждает идею о том, что повреждение клеток из-за окислительного стресса в нашей модели в первую очередь сублетально, по крайней мере, в исследуемый момент времени.

Затем мы попытались определить, будет ли окислительный стресс также стимулировать гиперокрашивание в стратифицированных и дифференцированных культурах клеток (рис. 1C).Для оценки дифференциации культуры окрашивали бенгальской розой для измерения барьерной функции гликокаликса. Дифференцированные клетки скапливаются в холмики, которые отличаются своим бледно-розовым или белым цветом в море темных клеток. Окислительный стресс значительно уменьшил площадь, занимаемую белыми островками в культурах, окрашенных бенгальской розой, а также увеличил степень окрашивания флуоресцеиновым красителем (судя по визуальному осмотру). Однако появление отдельных клеток с красителем, накопленным в цитоплазме, как видно в монослойных культурах, не было очевидным в этих стратифицированных и дифференцированных культурах.

Ингибиторы эндоцитоза блокируют стимулированное окислительным стрессом поглощение витального красителя монослойными клетками.

Затем мы исследовали возможную роль эндоцитоза в стимулированном окислительным стрессом поглощении витального красителя однослойными клеточными культурами. Репрезентативные результаты показаны на рис. 2.

10.1371 / journal.pone.0204288.g002 Рис. Ингибиторы эндоцитоза блокируют стимулируемое окислительным стрессом поглощение витального красителя монослойными клетками.

A) Монослойные культуры HCLE, высеянные в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу 3 мМ tBHP.Параллельный набор культур обрабатывали Dynasore (40 мкМ). (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя Dynasore, ДМСО.) ТФ, конъюгированный с Alexa Fluor 568, интернализация которого является маркером эндоцитозного процесса, добавляли ко всем культурам в начале эксперимента. Плотность флуоресцеина на отдельных изображениях измеряли с помощью программного обеспечения Image J: *, p <0,01; **, p <0,05 (t-критерий Стьюдента, n = 3). B) Монослойные культуры клеток HCLE, высеянные в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 3 мМ tBHP.В то же время параллельный набор культур обрабатывали одним из трех различных ингибиторов эндоцитоза: генистеином (200 мкМ), хлорпромазином (8 мкг / мл) или Dynasore (40 мкМ). (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя-ингибитора, ДМСО.) Через 2 часа культуры окрашивали флуоресцеином, и окрашивание количественно определяли с использованием планшет-ридера и отображали как RFU (единица относительной флуоресценции). Влияние ингибиторов на поглощение красителя оценивали по статистической значимости: *, p <0.01 (t-критерий Стьюдента, n = 3).

Во-первых, мы определили, стимулируется ли эндоцитоз окислительным стрессом. Клетки подвергали стрессу в присутствии ТФ, конъюгированного с Alexa Fluor 568, интернализация которого является маркером эндоцитарного процесса. Как и предполагалось, поглощение ТФ клетками в монослойной культуре стимулировалось окислительным стрессом (рис. 2А). Совместное лечение с Dynasore, которое ингибирует динаминовые ГТФазы, необходимые для эндоцитоза ТФ, блокирует стимулируемое стрессом поглощение ТФ.

Затем мы определили, блокируют ли ингибиторы эндоцитоза стресс-стимулированное поглощение витального красителя.Стресс-стимулированное поглощение флуоресцеинового красителя блокировалось генистеином, ингибитором кавеолин-опосредованного эндоцитоза, и хлорпромазином, ингибитором опосредованного клатрином эндоцитоза. Он также был заблокирован Dynasore, который необходим для обеих форм эндоцитоза (рис. 2B).

Эти результаты связывают между стимулированным стрессом эндоцитозом и жизненным поглощением красителя в однослойных культурах клеток.

Только Dynasore и его аналог Dyngo-4a блокируют стимулируемое окислительным стрессом поглощение витального красителя стратифицированными и дифференцированными клетками

В нашей следующей серии экспериментов мы изучили возможную связь между эндоцитозом и поглощением витального красителя стратифицированными и дифференцированными культурами клеток.Эти эксперименты были разработаны аналогично описанным выше с использованием однослойных клеточных культур. Репрезентативные результаты показаны на рис. 3.

10.1371 / journal.pone.0204288.g003 Рис. Только Dynasore и его аналог Dyngo-4a блокируют стимулируемое окислительным стрессом поглощение витального красителя стратифицированными клетками.

A) Стратифицированные культуры HCLE, высеянные в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 10 мМ tBHP. ТФ, конъюгированный с Alexa Fluor 568, интернализация которого является маркером эндоцитозного процесса, добавляли ко всем культурам в начале эксперимента.Изображения показаны для каждого набора из трех экземпляров. B) Стратифицированные культуры HCLE, помещенные на чашки в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 10 мМ tBHP. В то же время набор культур без стресса и стресса обрабатывали генистеином (200 мкМ). (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя Dynasore, ДМСО.) Через 2 часа культуры окрашивали бенгальской розой. Аналогичный эксперимент был проведен с использованием хлорпромазина (8 мкг / мл). Репрезентативные изображения показаны из каждого набора из трех экземпляров.C) Стратифицированные культуры HCLE, высеянные в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 10 мМ tBHP. В то же время параллельный набор нестрессированных и стрессированных культур обрабатывали Dynasore (40 мкМ). (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя Dynasore, ДМСО.) Через 3 часа культуры окрашивали флуоресцеином или бенгальской розой и отображали при эпифлуоресцентном освещении (флуоресцеин) или белом свете (бенгальская роза). Репрезентативные изображения показаны из каждого набора из трех экземпляров.Была проведена количественная оценка окрашивания бенгальской розы: *, p <0,01 (t-критерий Стьюдента, n = 3). OD = оптическая плотность при 562 нм. D. Стратифицированные культуры HCLE, высеянные в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 10 мМ tBHP. В то же время набор культур без стресса и стресса обрабатывали Dyngo-4a (15 мкМ). (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя Dynasore, ДМСО.) Через 3 часа параллельные наборы культур окрашивали флуоресцеином или бенгальской розой и отображали при эпифлуоресцентном освещении (флуоресцеин) или белом свете (бенгальская роза).Репрезентативные изображения показаны из каждого набора из трех экземпляров. Была проведена количественная оценка окрашивания бенгальской розы: *, p <0,01 (t-критерий Стьюдента, n = 3).

Во-первых, мы исследовали, стимулируется ли эндоцитоз окислительным стрессом, как это было сделано в экспериментах на монослойных культурах клеток, описанных выше. Результаты были совершенно разными в стратифицированных культурах клеток. Окислительный стресс не стимулировал поглощение ТФ, на самом деле, по-видимому, имелось некоторое ингибирование (рис. 3А).

Затем мы исследовали возможную роль эндоцитоза в стимулированном окислительным стрессом жизненно важном поглощении красителя, как это было сделано в экспериментах на однослойных культурах клеток.Опять же, результат был совершенно другим для стратифицированных и дифференцированных культур клеток. Генистеин и хлорпромазин не влияли на поглощение витального красителя (рис. 3В) в этих культурах. Интересно, что Dynasore продолжал оставаться очень эффективным ингибитором (рис. 3C). По этой причине мы также попробовали аналог Dynasore, Dyngo-4a, более мощный ингибитор динаминовых ГТФаз. Dyngo-4a также был очень эффективным ингибитором поглощения витального красителя в стратифицированных и дифференцированных культурах клеток при использовании в более низкой концентрации (рис. 3D).

Эти результаты показывают, что связь между поглощением витального красителя и эндоцитозом, наблюдаемая в однослойных клетках, не сохраняется для стратифицированных и дифференцированных клеток, которые лучше моделируют поверхность глаза. Таким образом, тот факт, что Dynasore и его аналог Dyngo-4a подавляют поглощение жизненно важного красителя, должен происходить с помощью альтернативного механизма.

Dynasore не предотвращает стимулированное окислительным стрессом поглощение витального красителя после воздействия стресса и возникновения повреждения

Как уже отмечалось, стратифицированные культуры клеток эпителиальных клеток роговицы являются лучшей моделью глазной поверхности, чем однослойные культуры.Однако многослойные скопления клеток, которые развиваются в среде для дифференцировки, не образуют гладкий и непрерывный слой, как эпителий роговицы. Цель следующей серии экспериментов состояла в том, чтобы подтвердить выводы клеточных культур, сделанные до сих пор на реальной глазной поверхности, а также расширить эти результаты. В этих экспериментах использовалась модель культуры глазных органов мыши. Репрезентативные результаты показаны на рис. 4.

10.1371 / journal.pone.0204288.g004 Рис. Dynasore не предотвращает стимулируемое окислительным стрессом поглощение витального красителя при использовании после воздействия стресса.

A) Совместное лечение. Глаза мыши, помещенные в органную культуру в трех экземплярах, либо не подвергали стрессу, либо подвергали стрессу с помощью 10 мМ tBHP. В то же время группа глаз без стресса и с напряжением обрабатывалась Dynasore (40 мкМ). (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя Dynasore, ДМСО.) Через 2 часа параллельные наборы культур окрашивали бенгальской розой или флуоресцеином и отображали в белом свете (бенгальская роза) или эпифлуоресцентном освещении (флуоресцеин). Репрезентативные изображения показаны из каждого набора из трех экземпляров.Окрашивание бенгальской розы определяли количественно с использованием планшет-ридера. *, р <0,01; **, p <0,05 (t-критерий Стьюдента, n = 3). B) После лечения. Глаза мышей, помещенные в культуру органов, сначала подвергали стрессу с помощью 10 мМ tBHP в течение 2 часов, затем тройные серии оставляли без обработки или обрабатывали 40 или 80 мкМ Dynasore в течение 30 минут. (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя Dynasore, ДМСО.) Затем глаза окрашивали бенгальской розой или флуоресцеином и отображали в белом свете (бенгальская роза) или эпифлуоресцентном освещении (флуоресцеин).Репрезентативные изображения показаны из каждого набора из трех экземпляров. Окрашивание бенгальской розы определяли количественно с использованием планшет-ридера. (t-критерий Стьюдента, n = 3).

Для валидационных экспериментов глаза мышей ex vivo помещали в культуру органов и оставляли без стресса или воздействия окислительного стресса в течение трех часов. В конце этого периода времени глаза удаляли из культуральной среды и сразу же проводили анализ окрашивания витальным красителем. Приложение стресса стимулировало значительное увеличение поглощения красителя на поверхности глаза (рис. 4А).Окрашивание было довольно равномерным, в отличие от сухого глаза, который проявляется в точечном окрашивании отдельных клеток. Однако такое равномерное окрашивание характерно для фотокератита [45]. Когда глаза обрабатывались Dynasore одновременно с воздействием стресса, поглощение красителя предотвращалось. Эти результаты согласуются с выводами, сделанными с использованием клеток в культуре.

Чтобы расширить наше исследование, мы изучили эффекты добавления ингибитора эндоцитоза после того, как глаза подверглись окислительному стрессу.Dynasore быстродействующий, проникающий в клетки за секунды [46]. Тем не менее, мы использовали как 15-минутный, так и 30-минутный период после лечения, чтобы гарантировать, что Dynasore успевает поработать (Рис. 4B показывает 30-минутную временную точку). Примечательно, что поглощение красителя не снижалось, в отличие от результатов, когда глаза обрабатывались Dynasore одновременно с воздействием стресса, даже когда стандартная концентрация Dynasore (40 мкМ) была удвоена (80 мкМ).

Эти результаты предоставляют дополнительные доказательства, чтобы отвергнуть гипотезу о том, что стресс стимулирует поглощение жизненно важного красителя через эндоцитарные везикулы.

Dynasore защищает поверхность глаза от разрушающего окислительного стресса

Целью следующей серии экспериментов было исследование альтернативной гипотезы о том, что Dynasore защищает поверхность глаза от разрушающего окислительного стресса, тем самым предотвращая поглощение жизненно важного красителя. Репрезентативные результаты показаны на рис. 5.

10.1371 / journal.pone.0204288.g005 Рис. Dynasore защищает клетки от повреждений из-за окислительного стресса.

A) Монослойные культуры HCLE, высеянные в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 10 мМ tBHP.В то же время набор культур без стресса и стресса обрабатывали Dynasore (40 мкМ). (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя Dynasore, ДМСО.) Через 2 часа проводили анализы WST-1 и МТТ: *, p <0,05; **, P <0,01 (t-критерий Стьюдента, n = 3). B) Монослойные культуры HCLE, высеянные в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 10 мМ tBHP. В то же время набор культур без стресса и стресса обрабатывали Dynasore (40 мкМ). (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя Dynasore, ДМСО.) Через 3 часа клетки окрашивали красителем трипановым синим и отображали в белом свете. Репрезентативные изображения показаны для каждого набора из трех экземпляров: *, p <0,01 (t-критерий Стьюдента, n = 3).

Сначала мы исследовали защиту самих клеток, используя однослойные культуры. Применяя метаболический анализ MTT / WST-1, мы обнаружили, что поглощение значительно увеличивалось при применении окислительного стресса, что свидетельствует о повреждении клеток. Обработка Dynasore одновременно с воздействием стресса была защитной, в частности, для анализа WST-1 (рис. 5A).Применяя анализ исключения трипанового синего для повреждения плазматической мембраны, мы обнаружили, что окрашивание значительно усиливается при применении окислительного стресса, что снова указывает на повреждение клеток. Обработка Dynasore одновременно с воздействием стресса была в высшей степени защитной, по существу устраняя окрашивание трипановым синим (рис. 5B).

Затем мы исследовали защиту гликокаликса, используя стратифицированные культуры клеток с дифференцировкой слизистой оболочки. Репрезентативные результаты показаны на рис. 6.

10.1371 / journal.pone.0204288.g006 Рис. Доказательства того, что Dynasore защищает гликокаликс клеточной поверхности от повреждений из-за окислительного стресса. Стратифицированные культуры

HCLE, высеянные в трех экземплярах, либо оставляли без стресса, либо подвергали стрессу с помощью 3 мМ tBHP. В то же время набор культур без стресса и стресса обрабатывали Dynasore (40 мкМ). (К необработанным культурам добавляли равный объем разбавителя Dynasore, ДМСО.) Через 2 часа (А) клетки окрашивали лектином, конъюгированным с флуоресцеином якалином и отображали при эпифлуоресцентном освещении.Репрезентативные изображения показаны из каждого набора из трех экземпляров. (B) Белки в среде разделяли с помощью SDS-PAGE, вестерн-блоттинга и зондирования антителом, специфичным к LGALS3 (вверху). ДНК в среде также подвергали геномной ПЦР для обнаружения гена ACTB (внизу).

Анализ связывания лектина с флуоресцентной меткой использовали для оценки повреждения муцинов на поверхности дифференцированных клеток. Jacalin — это лектин, который связывается с O-связанными гликанами, обнаруженными на мембранно-ассоциированных муцинах поверхности глаза [42, 43].Jacalin прочно связывается с глазной поверхностью нестрессированных клеток, что свидетельствует о дифференцировке слизистой оболочки. Однако не наблюдали различий в окрашивании между нестрессированными и подвергнутыми стрессу клетками, и лечение Dynasore также не имело эффекта (рис. 6А). Таким образом, если окислительный стресс повреждает гликоконъюгаты муцинового типа гликокаликса, повреждение должно быть незначительным и ниже уровня обнаружения с помощью этого метода.

Хотя мы не смогли обнаружить каких-либо изменений с помощью лектинового анализа, повреждение гликокаликса было очевидным, когда LGALS3 был исследован с помощью вестерн-блоттинга.Окислительный стресс вызвал увеличение LGALS3 в среде для культивирования клеток, что согласуется с увеличением выделения с апикальной поверхности клетки; обработка Dynasore ингибировала это увеличение (фиг. 6B, сравните 2 полосы с полосой 4 в наборе 1 и наборе 2). Уровни геномной ДНК в культуральной среде остались неизменными, что согласуется с увеличением выделения LGALS3 из самого гликокаликса, а не с увеличением выделения клеток, содержащих LGALS3, на их клеточную поверхность.

Эти результаты документируют повреждение клеток и гликокаликса из-за окислительного стресса, показывают, что лечение Dynasore предотвращает повреждение клеток, и предоставляют доказательства того, что Dynasore также предотвращает повреждение гликокаликса клеточной поверхности.

Обсуждение

Витальные красители обычно используются в клинической практике для оценки состояния глазной поверхности; однако механизмы окрашивания остаются плохо изученными. Недавние данные свидетельствуют о том, что сублетальное повреждение стимулирует поглощение жизненно важного красителя отдельными живыми клетками. Поскольку повреждение клеток также может стимулировать репаративное ремоделирование плазматической мембраны, мы предположили, что поглощение красителя происходит через эндоцитарные везикулы. В поддержку этой идеи мы показываем здесь, что применение окислительного стресса к относительно недифференцированным однослойным культурам эпителиальных клеток роговицы человека стимулирует как поглощение красителя, так и эндоцитоз, и что поглощение красителя блокируется совместным лечением тремя различными ингибиторами эндоцитоза.Стресс многослойных и дифференцированных культур эпителиальных клеток роговицы, которые являются лучшей моделью глазной поверхности, также стимулировал поглощение красителя; однако эндоцитоз не стимулировался, и два ингибитора эндоцитоза не блокировали поглощение красителя. Исключением был Dynasore и его более мощный аналог Dyngo-4a. Примечательно, что в то время как Dynasore блокировал стимулированное окислительным стрессом поглощение красителя на глазной поверхности глаз мышей ex vivo, когда лечение проводилось одновременно с воздействием стресса на глаза, оно не оказывало никакого эффекта при использовании после воздействия стресса, а глазная поверхность уже была повреждена. .Таким образом, Dynasore не мог работать, подавляя эндоцитоз. Используя методы цитотоксичности и вестерн-блоттинга, мы продемонстрировали альтернативный механизм. Мы обнаружили, что Dynasore замечательно защищает клетки и их поверхностный гликокаликс, предотвращая повреждение из-за стресса и, таким образом, предотвращая нарушение барьера и проникновение красителя.

Наши результаты подчеркивают важность использования стратифицированных и дифференцированных культур клеток при моделировании событий на поверхности глаза. Эпителиальные клетки роговицы человека в монослойной культуре относительно недифференцированы, напоминая базальные клетки эпителия роговицы.Однако, когда эти клетки переносятся в среду для дифференцировки с высоким содержанием кальция и оставляются на 7 дней, в них образуются многослойные клеточные холмы, которые экспрессируют маркеры гликокаликса слизистой оболочки, причем верхний клеточный слой демонстрирует уплощенную морфологию, аналогичную апикальному слою эпителия роговицы. [33]. В текущем исследовании мы наблюдали различия в появлении стимулированного окислительным стрессом поглощения витального красителя в однослойных и стратифицированных клетках, при отсутствии цитоплазматической концентрации в последних.Наше открытие о том, что окислительный стресс не стимулирует эндоцитоз в стратифицированных и дифференцированных культурах клеток, согласуется с концепцией о том, что стратифицированный эпителий слизистой оболочки, например эпителий поверхности глаза, ограничивает эндоцитоз как часть барьерной функции для предотвращения прохождения микробов и чужеродных антигенов [47]. .

Если эндоцитоз не является механизмом стимулированного окислительным стрессом поглощения витального красителя клетками на поверхности глаза, то что же тогда? Ключ к разгадке дают наши результаты с использованием анализа исключения трипанового синего, который основан на принципе, что живые клетки обладают неповрежденными клеточными мембранами, которые исключают определенные красители, такие как трипановый синий, эозин или пропидий, тогда как мертвые клетки этого не делают [41] .Недавно было показано, что окрашивание трипановым синим не обязательно указывает на лизис клеток, а скорее может указывать на образование пор в клеточных мембранах и, в более общем смысле, на повышенную проницаемость мембран [48]. Недавно было показано, что трипановый синий является жизненно важным красителем, подобным флуоресцеину и бенгальской розе, с потенциальным клиническим применением [49]. Окислительный стресс вызывает перекисное окисление липидов плазматической мембраны. В конце концов, может произойти порообразование [50], создавая проходы, которые недостаточно велики для уничтожения клеток, но позволяют флуоресцеину проникать внутрь.Гликокаликс должен исключать бенгальский розовый, но мы приводим здесь доказательства того, что барьерная функция гликокаликса также нарушается окислительным стрессом. Это изменение также кажется незначительным, поскольку оно не может быть обнаружено с помощью анализа связывания лектина, однако мы наблюдали увеличение LGALS3, высвобождаемого в среду для культивирования клеток. Известно, что динамины участвуют в общепринятом секреторном пути [51], однако LGALS3, как и другие члены семейства галектинов, лишен как домена, прикрепляющегося к мембране, так и сигнальной последовательности.Вместо того, чтобы переноситься в эндоплазматический ретикулум и компартменты Гольджи для классической секреции, LGALS3 синтезируется на кластерах свободных рибосом в цитоплазме клетки как негликозилированный белок перед секрецией [52, 53]. Таким образом, маловероятно, что Dynasore действует, чтобы ингибировать секрецию LGALS3. Взятые вместе, результаты показывают, что не требуется никакого специального механизма для жизненно важного поглощения красителя; краситель может просто легче проникать в поврежденную окислительным стрессом клетку из-за небольших перегородок в плазматической мембране и барьеров гликокаликса.Мы предполагаем, что требование к клетке, чтобы она была живой для гиперфлуоресценции, может заключаться в том, что необходимы активные механизмы для концентрирования красителя и предотвращения его выхода из клетки после того, как она вошла.

Следует иметь в виду, что мы не тестировали несколько форм стресса в этом исследовании, поэтому мы не можем быть полностью уверены в том, что результаты, полученные с использованием модели окислительного стресса, применимы к другим формам стресса. Тем не менее, мы отмечаем, что результаты наших первоначальных экспериментов по характеристике модели окислительного стресса полностью соответствовали результатам эталонного исследования Бандамвара, в котором были проверены несколько форм стресса [20].Вопрос о том, связано ли SICS с повреждением клеток, все еще обсуждается. MPS обычно содержат очиститель поверхностно-активного вещества, такой как Tetronic 1107 [54], биоцид, такой как полигексаметиленбигуанид (который также может обладать свойствами поверхностно-активного вещества [55]), и буферный агент. Поверхностно-активные вещества растворяют липиды плазматической мембраны, хотя это может не вызывать значительной токсичности. Мы предполагаем, что барьерная функция плазматической мембраны может быть нарушена в достаточной степени, чтобы флуоресцеин мог проникать в клетки более свободно. Кроме того, наша группа показала, что обработка стратифицированных и дифференцированных культур клеток HCLE различными MPS вызывает усиление окрашивания бенгальской розы, подобное тому, что мы показываем здесь для окислительного стресса, и мы предоставили доказательства связанного с этим выделения эктодоменов MUC16 [44] .

Как Dynasore и его аналог Dyngo-4a настолько эффективны в защите эпителиальных клеток глазной поверхности от окислительного стресса, остается открытым и очень интригующим вопросом. Эти соединения были разработаны специально для нацеливания на ГТФазы семейства динаминов в качестве помощи при изучении эндоцитоза [32]; однако были продемонстрированы другие эффекты, зависящие от динамина. Напр., Нацеливание Dynasore на членов семейства динаминов DNM2 или DRP1 защищает кардиомиоциты от входа в апоптоз после окислительного стресса, облегчая фрагментацию митохондрий [56-58] и блокируя активацию инфламмасом и экспрессию воспалительных цитокинов [59].Dynasore также оказывает динамин-независимые «нецелевые» эффекты на холестерин плазматической мембраны, липидные рафты и динамику актина [60]. Оба эти механизма могут объяснить защитные эффекты Dynasore на проницаемость плазматической мембраны и выделение гликопротеинов клеточной поверхности из-за разрушающего окислительного стресса и будут важны для изучения в будущих исследованиях. Чтобы определить, задействованы ли динамин-зависимые или независимые механизмы, потребуется нокдаун индивидуальных динаминов, как это было сделано в исследованиях кардиомиоцитов [56-59].

После того, как мы отправили эту рукопись на рецензию, нам стало известно о новой публикации той же команды, которая проводила одно из исследований, которые послужили здесь ссылкой [21]. Опять же, модель монослойных клеток в культуре была использована для исследования механизмов поглощения флуоресцеинового красителя в SICS [61]. Было обнаружено, что поглощение флуоресцеина, стимулированное MPS, не было связано с апоптозом, в отличие от результатов нашего второго эталонного исследования, в котором изучалось стимулируемое повреждающим стрессом поглощение флуоресцеина [20], подтвержденное здесь для окислительного стресса.Более того, поглощение флуоресцеина клетками, обработанными MPS, не было связано с метаболическим нарушением, как мы показываем здесь для окислительного стресса. Одно лишь поверхностно-активное вещество Tectronic 1107 вызывало те же эффекты, что и эффективный MPS. Тем не менее, Dynasore ингибировал поглощение флуоресцеина в клетках, обработанных MPS, аналогично нашим результатам в текущем исследовании с использованием окислительного стресса. Авт. Предположили, что динамин непосредственно участвует в проникновении флуоресцеина в обработанные MPS однослойные клетки посредством механизма, который может включать инкапсуляцию полимерными мицеллами и эндоцитоз.Будет интересно узнать, верен ли этот вывод для стратифицированных и дифференцированных культур клеток, которые более точно моделируют поверхность глаза.

Dynasore был предложен в качестве терапевтического кандидата для лечения заболеваний, связанных с аномальной митохондриальной динамикой [62, 63], и наши результаты, представленные здесь, предполагают, что он также может быть ценным для предотвращения заболеваний глазной поверхности. Более того, хотя мы наблюдали, что Dynasore и Dyngo-4a не влияли на жизненно важное поглощение красителя после того, как был нанесен ущерб, они все равно будут иметь ценность для лечения продолжающегося заболевания.Как обсуждалось во введении к этой статье, эпителий глазной поверхности постоянно и быстро переворачивается, при этом в слоях поднимаются новые клетки по мере слущивания апикальных клеток. Если Dynasore или Dyngo-4a применять местно в течение определенного периода времени, новые клетки, которые поднимаются на поверхность, будут защищены. Таким образом, мы прогнозируем, что хроническое заболевание глазной поверхности может постепенно исчезнуть с помощью такого лечения.

Синдром сухого глаза | Kellogg Eye Center

Ответы на ваши вопросы о синдроме сухого глаза: Чтобы просмотреть все 7 видеороликов из этой серии, щелкните значок в верхнем левом углу экрана.

Что такое синдром сухого глаза?

Синдром сухого глаза возникает, когда снижение слезоотдачи или аномалии слезной пленки не позволяют обеспечить адекватную смазку поверхности глаза. Хотя синдром сухого глаза может возникать как у мужчин, так и у женщин в любом возрасте, чаще всего страдают женщины.

Симптомы

Симптомы, связанные с синдромом сухого глаза, включают:

• Жжение или жжение
• Сниженное или нестабильное зрение
• Раздражение или царапание глаз
• Чрезмерное слезотечение, особенно при чтении, вождении автомобиля или просмотре телевизора
• Тягучая слизь в глазах или вокруг глаз
• Проблемы с ношением контактных линз

Описанные выше симптомы не обязательно означают, что у вас сухой глаз.Однако, если вы испытываете один или несколько из этих симптомов, обратитесь к офтальмологу для полного обследования.

Причины

Необходимо поддерживать правильный баланс масла, воды и слизи, чтобы слезы могли смазывать и защищать глаза. Дефицит любого из этих компонентов может привести к сухости и раздражению глаз. Если качественные слезы не будут производиться с постоянной скоростью, поверхность ваших глаз станет раздраженной, и ваши глаза будут чрезмерно слезиться, пытаясь их смазать.Вот почему из-за сухих глаз может возникнуть чрезмерное слезотечение.

Факторы риска

Производство слез обычно уменьшается с возрастом. Кроме того, по мере взросления люди часто теряют надлежащий баланс масла, воды и слизи в слезах, что приводит к нездоровой слезной пленке и симптомам сухого глаза. Синдром сухого глаза также может быть связан с системными заболеваниями, такими как артрит, а иногда и с сухостью во рту. Лекарства иногда вызывают синдром сухого глаза, уменьшая секрецию слезы. Среди распространенных лекарств, которые могут вызвать сухость глаз, — диуретики, бета-адреноблокаторы, антигистаминные препараты, снотворное, лекарства от беспокойства, болеутоляющие или алкоголь.Обязательно сообщите офтальмологу названия всех лекарств, которые вы принимаете. Кроме того, ношение контактных линз иногда может усугубить синдром сухого глаза, потому что адекватная слезная пленка необходима, чтобы контактные линзы комфортно находились на поверхности глаза.

Тесты и диагностика

Диагностика начинается с полного обследования глаз офтальмологом для выявления признаков сухости или неровной слезной пленки, а также распространенных причин этих симптомов, таких как воспаление век или закупорка естественных сальных желез глаза.Ваш врач также может измерить исходную скорость образования слезы в вашем глазу, поместив полоски фильтровальной бумаги под нижние веки. Иногда можно проанализировать состав производимой слезы. Также важен анализ вашего общего состояния здоровья и приема лекарств.

Лечение и лекарственные препараты

• Гигиена век
  Забитые или воспаленные сальные железы вдоль века могут привести к слезам низкого качества и синдрому сухого глаза. Это часто можно лечить, уделяя внимание гигиене век, которая включает в себя наложение теплых компрессов на веки, чтобы открыть заблокированные железы и позволить им выделять натуральные масла в слезную пленку.Веки также можно очистить с помощью безрецептурных скрабов для век или путем смешивания детского шампуня с водой и протирания век этой смесью с помощью ватного аппликатора (ватной палочки).
• Мигание
  Некоторым пациентам с легкой сухостью может помочь более частое моргание, особенно при чтении, вождении или просмотре телевизора.
• Искусственные слезы
  Для лечения сухого глаза часто используются глазные капли, называемые «искусственными слезами». Искусственные слезы отпускаются без рецепта врача.Вы можете попробовать несколько брендов, чтобы найти тот, который вам больше всего нравится. Глазные капли без консервантов доступны, если вы чувствительны к консервантам в искусственных слезах. Если вам нужно использовать искусственные слезы чаще, чем каждые два часа, вам могут подойти бренды без консервантов. Более густые гели и мази с искусственной слезой также могут использоваться для более длительного облегчения, но могут временно помутить зрение. Некоторым людям могут быть полезны твердые вставки в крышке, которые постепенно выделяют смазку в течение дня.
• Сохранение слез
  Сохранение слез на глазах — еще один способ сохранить глаза влажными. Слезы вытекают из глаза через небольшой канал в нос (вот почему из носа течет, когда вы плачете). Ваш офтальмолог может закрыть эти каналы на время или навсегда, чтобы сохранить ваши собственные слезы и продлить срок службы искусственных слез.
• Рестазис и местные стероиды
  Лекарственные глазные капли под названием Рестазис, уменьшающие воспаление на поверхности глаза, иногда используются для увеличения образования слез.Стероидные глазные капли также можно использовать в течение коротких периодов времени, чтобы уменьшить симптомы синдрома сухого глаза за счет уменьшения воспаления.
• Слезы сыворотки
  В более тяжелых случаях синдрома сухого глаза используются специально разработанные слезные капли, приготовленные из чистой части собственной крови пациента, называемые слезами сыворотки. Слезы сыворотки содержат факторы роста и другие питательные вещества, которые могут уменьшить симптомы синдрома сухого глаза.
• Устройство PROSE
  Для пациентов с тяжелым синдромом сухого глаза можно использовать специальный контакт, называемый протезной реабилитацией экосистемы поверхности глаза (PROSE).Это устройство специально адаптировано для каждого пациента и омывает переднюю часть глаза искусственной слезой.
• Процедура интенсивного импульсного света (IPL)
  При сухости глаз, вызванной дисфункцией мейбомиевых желез, лечение IPL нагревает веко, что уменьшает воспаление в кровеносных сосудах века, которые раздражаются, и препятствуют правильному функционированию мейбомиевых желез.
• Другие методы предотвращения испарения слез
• Зимой добавьте влаги в воздух, поставив на радиатор увлажнитель или таз с водой
• Носите защитные очки (в некоторых штатах запрещено носить во время вождения), которые могут уменьшить сушащий эффект ветра
• Избегайте всего, что увеличивает сухость, например слишком теплого помещения, фенов или ветра.
• Бросьте курить или находиться рядом с курением
• Используйте мазь перед сном, если у вас «чешутся глаза», когда вы просыпаетесь.Используйте наименьшее количество мази, необходимое для комфорта, так как это может временно привести к потере зрения.

Найдите врача или место

Отзыв Кристофера Т. Худ, доктора медицины

Horizon уход за глазами mooresville

4 соединения. Она получила степень в области оптометрии в Школе оптометрии Межамериканского университета Пуэрто-Рико. Мы предлагаем вам много объективной информации от t Services: Оптические осмотры глаз на сухость глаз.Врачи общей практики; Радиолог; Офтальмологи; Хирурги; Дерматологи; Эндокринолог; Терапевты; Пластические хирурги; Посмотреть все »« Рыба с жареным картофелем »найдено в 1 блюде. Мурсвилл, Северная Каролина Д-р Штайн — офтальмолог из Мурсвилля, Северная Каролина, и может принимать пациентов с розовым глазом, заболеванием роговицы, плавающими глазами и другими. Доктор Сиракузы начал свою практику в Horizon Eye Care с исключительным образованием. Офтальмология. Horizon Eye Care, 1 отзыв. Понятно! Подтвердите свое объявление. Horizon Eye Care — это медицинская групповая практика, расположенная в Хантерсвилле, Северная Каролина, которая специализируется на офтальмологии и детской офтальмологии.Офтальмология. Вы можете использовать фильтр, чтобы сузить список участников, показывая только тех участников, которые вам нужны. О. Поскольку это высокотехнологичная и успешная частная практика, на горизонте открываются долгосрочные возможности для подходящего младшего оптометриста. 8:00 — 17:00. 1844 сотрудника в базе. Найдите 8 объявлений, связанных с Horizon Eye Care в Мурсвилле на YP.com. HydroEye. Меню и бронирование Сделайте предварительный заказ. Horizon Eye Care обслуживает большую часть района Шарлотт с офисами в различных удобных местах, включая Котсуолд, Хантерсвилл, Маллард-Крик, Мурсвилл, Пайнвилль и Уэверли.Обратите внимание, что 26 мая 2020 года наш университет был закрыт, а 1 июня 2020 года открылся новый офис в Mallard Creek. Уведомления о вакансиях по электронной почте. Оптометристы, офтальмологи, лазерная хирургия глаза / Lasik 7046582321. Глазные капли Bausch + Lomb. БОЛЬШЕ ИНФОРМАЦИИ. Да (0) Нет (0) Предлагает ли Horizon Eye Care парковка на территории? Правило маркетинга HIPAA обычно интерпретируется как позволяющее маркетологам в сфере здравоохранения рекламировать свой бренд посетителям веб-сайтов, как правило, с помощью файлов cookie. 185 Джо Нокс Авеню, Мурсвилл, Северная КаролинаШтольдорфу и его сотрудникам в Horizon Eye Care это было похоже на глоток свежего воздуха. Найдите других врачей и хирургов, офтальмологов в Мурсвилле на The Real Yellow Pages®. Мой визит; Портал пациента; Поиск. Horizon Eye Care, Horizon Optical и Horizon Laser & Eye Surgery Center — все они являются частью единой всеобъемлющей офтальмологической практики с шестью удобными местами, включая оптические магазины и центр амбулаторной хирургии в Южном Нью-Джерси. 2012 — Настоящее время 7 лет. На выходных, посвященных дню поминовения, у меня произошла авария, в глаз попал ржавый металл.2007 — 2012 5 лет. Horizon Eye предлагает полный спектр офтальмологических услуг, включая хирургическую и медицинскую офтальмологию, в шести офисах в районе Шарлотты и его окрестностях. Компания Horizon Eye Care расположена по адресу: 185 Knox Haven Ln в Мурсвилле, Северная Каролина, округ Иределл. В ее штате работают оптометристы, врачи, хирурги и OD, специализирующиеся на лечении катаракты, диабета, глаукомы, косметической хирургии и реконструктивной хирургии. Наши решения в отношении корпоративной политики основаны на имеющихся у нас научных данных и, следовательно, могут измениться, и тогда мы снова будем оценивать наши протоколы и обучать их.Brushy Mountain Outdoors 107 Plantation Ridge Dr. Офтальмология озера Норман. Вызов. 360 Expressions 591 River Hwy. Команда Horizon Eye Care безупречно выполнила и скоординировала предоперационные операции. Horizon Eye Care. Адрес: W Catawba Ave, Mooresville, NC 28115; Телефон: (704) 367-8133. Часы работы могут измениться в текущих обстоятельствах. Услуги. Да (0) Нет (0) Местоположение. Операция проводится на одном глазу с интервалом в 4-6 недель. Найти поблизости: банкоматы, отели, ночные клубы, парковки, кинотеатры; Обзоры.В Мурсвилле, штат Северная Каролина, в Horizon Eye Care Pa есть только один участник, работающий на проспекте Джо Нокса, 185. Офис Horizon Eye Care в Мурсвилле находится по адресу: 185 Joe Knox Avenue, Mooresville, NC 28117. Поиск. Врачи общей практики. Смотрите обзоры, фотографии, направления, номера телефонов и другую информацию о местах расположения Horizon Eye Center в Мурсвилле, Северная Каролина. Доктор Льюис Гаскин, доктор медицины. 492 Williamson Rd Mooresville, NC 28117. телефон: +1 704-664-9121…. Мурсвилл, Северная Каролина, 20 марта 2017 г. Обзор для доктора Крамера. Оповещения по электронной почте о вакансиях. Не сейчас. Horizon Eye Care. Провайдеры. или. Мурсвилл. Оптометристы, офтальмологи, Laser Eye… Контакт… Horizon Eye Care стр. Мурсвилл, Северная Каролина. ГОД НА ПРАКТИКЕ. ХАНТЕР СТОЛЛДОРФ из HORIZON EYE CARE в Мурсвилле, Северная Каролина, в качестве моего специалиста по уходу за глазами. Horizon Eye Care Mooresville 185 Joe Knox Ave Mooresville, NC 28117 (704) 658-2321 ПРИЕМ НОВЫХ ПАЦИЕНТОВ Horizon Eye Care Cotswold 135 S Sharon Amity Rd Ste 100 Charlotte, NC 28211 (704) 365-0555 ПРИЕМ НОВЫХ ПАЦИЕНТОВ Специальности Dr.Royce R Syracuse имеет следующие 1 СПЕЦИАЛЬНОСТИ Офтальмологии. Офтальмолог обучен гораздо большему, чем… 9 отзывов. Номер NPI для Horizon Eye Care Pa — 1679776884, он был назначен в июне 2007 года. «Я на пенсии, военно-морской флот, получаю услуги Medicare и Social Security. См. Обзоры, фотографии, направления, номера телефонов и другую информацию для центров Horizon Eye Care в Мурсвилле, Северная Каролина . Получите обзоры, часы работы, направления, купоны и многое другое для Horizon Eye Care по адресу 185 Joe Knox Ave, Mooresville, NC 28117. Наши врачи являются одними из самых талантливых офтальмологов и оптометристов в стране и стремятся улучшить жизнь пациентов с проблемами зрения. .В Horizon Eye Care мы стремимся улучшить качество жизни наших пациентов с помощью самых передовых технологических процедур и современного оборудования. Добавить в корзину. Он объяснил состояние, которое я испытывал, к моему удовлетворению и дал мне план, как двигаться дальше. Доктор Чак Монсон Комплексное семейное обследование зрения, контактные линзы, Rx… Центр по уходу за глазами. Horizon Eye Care. Мурсвилл, Северная Каролина. Рядом магазины одежды. Каков твой ответ? Услуги . Билл К. 07.02.20. Horizon Eye Care Pa (HORIZON EYE CARE PA) является поставщиком очков (оборудования, а не услуги) в Мурсвилле, Северная Каролина.Номер NPI для Horizon Eye Care Pa — 1679776884. Доктор Гиллис — лучший доктор, которого я когда-либо встречал. Бесплатный, быстрый и легкий способ найти работу из 525 000+ объявлений в Мурсвилле, Северная Каролина, и других крупных городах США. Посмотреть детали. Получить направление. 2. Horizon Eye Care была образована в 1997 году в результате слияния компаний Gaskin Eye Associates и Charlotte Eye. Horizon Eye Care PA 15419 Hodges Circle, Suite 100, Huntersville, NC 28078 11.35 mi Я провел более года, посещая трех (3) разных хирургов по лечению катаракты, прежде чем выбрать доктора.Штольдорф в компании Horizon Eye Care. Это не было… 23. Учитывая пандемию COVID-19, звоните заранее, чтобы уточнить часы, и не забудьте практиковать социальное дистанцирование. Ищете другие результаты? 16610 Birkdale Commons Pkwy, Ste E, Huntersville, NC 28078 Horizon Eye Care, 5 отзывов. Доктор Стивен К. Джонсон, OD, специалист по оптометрии из Мурсвилля, Северная Каролина. Образование. Доктор Фредерик Вайдман, доктор медицины. 185 Джо Нокс авеню. Мурсвилл, Северная Каролина. Узнайте больше о докторе Штайне Магазин расположен по адресу: 185 Joe Knox Ave Mooresville, NC 28117-9169, с ним можно связаться по телефону (704) 658-2321.10520 Park Rd, Charlotte, NC 28210. Horizon Eye Care 185 Joe Knox Ave, Mooresville, NC 28117 (704) 658-2321 Подробнее о компании. Horizon Eye Care — это медицинская групповая практика, расположенная в Шарлотте, Северная Каролина, которая специализируется на офтальмологии и открыта 5 дней в неделю. Получите обзоры, часы работы, направления, купоны и многое другое для Horizon Eye Care по адресу 185 Joe Knox Ave, Mooresville, NC 28117. Horizon Eye Care объявила о завершении внутренних и внешних ремонтных работ, а также о дополнительных врачах и услугах в своем офисе в Мурсвилле.Услуги: Эстетика Прозрачные линзы от катаракты | Осмотр глаза с заменой преломляющих линз LASIK Optical. 3 отзыва. Сайт: Horizoneye.com; Адрес: 185 Joe Knox Ave, Mooresville, NC 28117; Cross Streets: около пересечения улиц Joe Knox Ave и Plantation Ridge Dr; Телефон: (704) 365-0555 5 отзывов $$ Оптометристы, очки и оптики среднего уровня. См. Обзоры, фотографии, направления, номера телефонов и многое другое для центров ухода за глазами Horizon в Мурсвилле, Северная Каролина. В Horizon Eye Care мы стремимся улучшить качество жизни наших пациентов с помощью самых передовых технологических процедур и современного оборудования.Наш обученный персонал сопровождает вас на каждом этапе лечения, от обычного ухода за глазами до хирургических и косметических процедур, чтобы вы всегда получали наилучший уход. Horizon Eye Care PA — это офтальмологический центр, расположенный в Мурсвилле, штат Северная Каролина. 185 Джо Нокс авеню. Мурсвилл, Северная Каролина 28117. Военно-морская академия в Аннаполисе, штат Мэриленд, и получил медицинскую степень в Университете Вирджинии в Шарлоттсвилле. Сайт: Horizoneye.com; Адрес: 185 Joe Knox Ave, Mooresville, NC 28117; Cross Streets: около пересечения улиц Joe Knox Ave и Plantation Ridge Dr; Телефон: (704) 658-2321 Семейный врач — это врач, специализирующийся на уходе за людьми всех возрастов на всех этапах жизни.Я хочу посоветовать всем, кто ищет отличного офтальмолога, сделать себе одолжение и пойти к доктору Хантеру Штольдорфу. Наш обученный персонал сопровождает вас на каждом этапе лечения, от обычного ухода за глазами до хирургических и косметических процедур, чтобы вы всегда получали наилучший уход. 185 Joe Knox Ave, Mooresville, NC 28117 Charlotte Ophthalmology, 2 отзыва. Ценовой диапазон $$$ Прозрачность страницы Подробнее. Если вам поставили диагноз глазное заболевание, такое как катаракта, глаукома, дегенерация желтого пятна, диабетическая ретинопатия или сухой глаз, вы можете быть ошеломлены диагнозом и запутаться в том, что … Расположенный по адресу: проспект Джо Нокс, 185, центр Horizon Eye Care находится по адресу: +1 704-658-2321.Розовый бутик, пр. Столичный, 119. Вызов. Мурсвилл, Северная Каролина. YellowBot. Вт 8:00 — 17:00. Я потратил больше года на посещение трех (3) разных хирургов по лечению катаракты, прежде чем выбрать доктора Штоллдорфа в Horizon Eye Care. Всего в этом офтальмологическом центре работают 3 врача, в том числе:. Обратите внимание, что 26 мая 2020 года наш университет закрылся, а 1 июня 2020 года открылся новый офис в Маллард-Крик. Horizon Eye Care Mooresville, 185 Joe Knox Ave Mooresville, NC 28117 (704) 658-2321. 135 S Sharon Amity Rd Charlotte, NC 28211 (704) 365-0555 Специальности Dr.У Хантера С. Штольдорфа есть следующие 3 СПЕЦИАЛЬНОСТИ Семейной медицины. Horizon Eye Care, Пенсильвания в Шарлотте, штат Северная Каролина 28211; Horizon Eye Care, Пенсильвания, Мурсвилл, Северная Каролина 28117; Филиал медицинской клиники Кэмп Гейгер Макб в Кэмп-Лежене, Северная Каролина 28547; Доктор Хантер С. Столлдорф имеет более чем 15-летний опыт работы в офтальмологии. В 2 обзорах. Найдите и подайте заявку на самые свежие вакансии менеджера по медицинской практике в Мурсвилле, штат Северная Каролина. Обзор поставщиков услуг Расположение Отзывы XX Horizon Eye Care 135 S Sharon Amity Rd Ste 100 Charlotte, NC 28211.185 Joe Knox Ave. Mooresville, NC, 28117. Обновлено: 30 марта 2021 г., Mooresville, NC. Мурсвилл. Уход за глазами Horizon в Мурсвилле, Северная Каролина. 132 Gateway Blvd, Мурсвилл, Северная Каролина. Horizon Eye Care Mooresville 185 Joe Knox Ave Mooresville, NC 28117 (704) 658-2321 ПРИЕМ НОВЫХ ПАЦИЕНТОВ Brett James Pariseau Md 2226 Nelson Hwy Ste 200 Chapel Hill, NC 27517 (919) 445-2020 Horizon Eye Care Huntersville 15419 Hodges Cir Ste 100 Хантерсвилль, Северная Каролина 28078 (704) 892-1000 ПРИЕМ НОВЫХ ПАЦИЕНТОВ Университет Горизонта офтальмологии 11010 ДЭВИД ТЭЙЛОР… Систейн.Контактные линзы, очки и оправы, полная оценка здоровья глаз, общая оптометрия, лазерная хирургия, терапия зрения, осмотр глаз, спортивное зрение … Доктор Штольдорф имеет сертификат офтальмологического совета. 1 Horizon Eye Care 185 Joe Knox Ave, Mooresville, NC 28117 Существующие пациенты: (704) 658-2321; 2 Horizon Eye Care 135 S Sharon Amity Rd, Charlotte, NC 28211 Существующие пациенты: (704) 365-0555 Что вы ответите? где Беверли-Хиллз, Калифорния или. 2 офтальмолога. Доктор Хантер С. Столлдорф, доктор медицины, является офтальмологом из Мурсвилля, Северная Каролина.ОДНАКО … они не могли правильно составить счета и вести учет, даже когда их покрывали Medicare и BCBS. Офтальмологи, Лазерная хирургия глаза / Lasik 7048958200. 2012 — Настоящее время 7 лет. Он принимает несколько планов страхования. Horizon Eye Care. Horizon Eye Care pa Специальности: офтальмология. Не видите в точности то, что вам нужно? Все прошло хорошо, и без очков видеть стало намного лучше. Horizon Eye Care — качественный поставщик услуг по лечению зрения и оптометрии в Мурсвилле, Северная Каролина. Образование: Д-р Штольдорф окончил Университет им.С. Это ваше дело? Уполномоченным лицом Horizon Eye Care Pa является Вики Хармон, координатор управляемого медицинского обслуживания в магазине, ее контактный номер — 704-405-4183. 2. В Мурсвилле, Северная Каролина, нет членов. Офтальмология. Ресурсы для пациентов — ваш единственный источник всей информации, связанной с вашим визитом в Horizon Eye Care. ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ КОНТАКТНАЯ ИНФОРМАЦИЯ. Компресс для глаз Bruder Cold Therapy Eye Compress. Найдите лучшие услуги по лазерной коррекции зрения / лазерной коррекции зрения на Yelp: ищите обзоры 40 предприятий в Мурсвилле по цене, типу или местоположению.Исключительный уход за глазами от ведущей офтальмологической клиники в районе Шарлотт, Северная Каролина. Узнайте больше о Horizon Eye Care в Мурсвилле, Северная Каролина, на Facebook. Horizon Eye Care PA 185 Joe Knox Ave Mooresville NC 28117. Войти; Зарегистрироваться; Пригласить друга! Назначить встречу (704) 658-2321 Horizon Eye Care — это медицинская групповая практика, расположенная в Мурсвилле, Северная Каролина, которая специализируется на офтальмологии и открыта 5 дней в неделю. ОБНОВЛЕНИЕ: понедельник, 10 декабря — наше заведение в Мурсвилле теперь будет закрыто весь день из-за ухудшения условий.5 оценок. Найдите 8 объявлений, связанных с Horizon Eye Center в Мурсвилле на YP.com. Обеспечение четкого и ясного зрения — лишь одна часть первоклассной офтальмологической помощи в этой процветающей клинике: пациенты могут рассчитывать на комплексную помощь для более длительного сохранения здоровья глаз и зрения. Информация о встрече Оплатить Интернет-магазин Пригласите друга Позвоните 704.365.0555. ЧАСЫ. Horizon Eye Care 185 Джо Нокс Ave Mooresville NC 28117. Доктор Стивен К. Джонсон также сотрудничает с другими врачами и терапевтами в медицинских группах, включая Horizon Eye Care Pa.Доктор Стивен К. Джонсон принимает … Доктор Хантер Столлдорф, доктор медицины, является офтальмологом из Мурсвилля, Северная Каролина. Конкурентоспособная заработная плата. Focus Select® AREDS 2 не содержит цинка (180 шт.) Добавить в корзину. Протоколы COVID-19 — Mooresville Eye Care. Доктор Хантер С. Штоллдорф также сотрудничает с другими врачами и терапевтами в медицинских группах, включая Horizon Eye Care Pa. Доктор Хантер С. Штоллдорф принимает одобренные Medicare… например, пиццу, сантехников, гостиницу. Обзор; Страхование; Информация об офисе; Обзор. Увидела на моей кредитной карте уход за глазами «Мисви Муресвилл».Найдите других врачей и хирургов, офтальмологов в Мурсвилле на настоящих желтых страницах… В настоящее время он практикует в Horizon Eye Care и является аффилированным лицом с Медицинским центром Каролины Atrium Health. Авторизоваться. В 2 обзорах. Рефералы провайдера; Facebook YouTube Twitter LinkedIn. Horizon Eye Care. Доктор Белл является аффилированным лицом с ортопедической больницей Novant Health Charlotte, медицинским центром Novant Health Huntersville и ортопедической больницей Novant Health Charlotte. Хантер С. Столлдорф, доктор медицины, получил степень доктора медицины.Найдите 8 объявлений, связанных с Horizon Eye Care в Мурсвилле на YP.com. Прием новых пациентов Принятие программы Medicare Принятие программы Medicaid Пн. С 8:00 до 17:00. Центр зрения озера Норман. Врачи. Оптометристы, офтальмологи, лазерная хирургия глаза / Lasik. Доктор Белл работает в Мурсвилле, Северная Каролина, и специализируется на оптометрии. Ответов пока нет. Предложить правки. Сайт: Horizoneye.com; Адрес: 185 Joe Knox Ave, Mooresville, NC 28117; Cross Streets: около пересечения улиц Joe Knox Ave и Plantation Ridge Dr; Телефон: (704) 658-2321 Лучшие контакты и очки Америки.1 окулист «Я на пенсии, военно-морской флот, получаю медицинское обслуживание и социальное обеспечение. Horizon Eye предлагает полный спектр офтальмологических услуг, включая хирургические и медицинские офтальмологические услуги, в шести офисах в районе Шарлотты и его окрестностях. ОБЩАЯ РЕЙТИНГ. Он учился в Южном университете и окончил его. Колледж оптометрии в 1979 году, имея более 42 лет разнообразного опыта, особенно в оптометрии. Адрес. Отзывы (704) 658-2321. Мы — офтальмологи, которые всегда думают о зрении .. Horizoneye.com: посетите самый интересный Horizon Eye страницы, полюбившиеся пользователям из США, или проверить остальные на горизонте.com данные ниже. Дарси и компания озера Норман 20124 Вест Катавба авеню Люкс B, Корнелиус. Ответов пока нет. Локации; Аффилированные врачи; 15419 Hodges Circle, Suite 100 Huntersville, NC 28078 (704) 892-1000. Мое зрение значительно ухудшилось из-за катаракты, поэтому пришло время для операции. Оптометрия; РЕЙТИНГИ И ОТЗЫВЫ. 3. Horizon Eye Care в Мурсвилле, штат Северная Каролина. Horizon Eye предлагает полный спектр офтальмологических услуг, включая хирургические и медицинские офтальмологические услуги, в шести офисах в районе Шарлотты и его окрестностях.