АСД, фракция 2: использование при онкологии. АСД-2: использование для человека, инструкция
Проблема рака в настоящее время является приоритетной. Смертность от этой болезни стоит на втором месте после сердечно-сосудистых заболеваний. Многие институты и ученые занимаются изысканием лекарственных препаратов для избавления от этого грозного недуга. Это приносит определенные плоды: количество умерших значительно снижается с каждым годом: выявляются факторы риска, проводятся профилактические осмотры населения. Однако панацеи от этой болезни не найдено. А ведь хорошо забытое старое в некоторых случаях все же помогает. Среди эффективных методов борьбы со злокачественным поражением тканей и органов организма многими врачами используется АСД (фракция 2). Применение при онкологии и других тяжелых заболеваниях показывает хороший терапевтический эффект.
Что такое АСД?
АСД – это антисептический стимулятор – препарат, который был изобретен А.В. Дороговым в 1947-48 годах в лаборатории ветеринарной химической защиты. Ученый изучал действие сорбентов в организме при отравлениях. Он выявил, что улавливаемые вещества, которые получаются при сжигании животных тканей, в частности, лягушек, обладают какими-то новыми интересными свойствами. После многочисленных опытов и апробаций препарат начал активно применяться для больных с незаживающими ранами, трофическими язвами, хроническими воспалительными заболеваниями, остеомиелитом, туберкулезом.
История изобретения
Фракция АСД-2 при лечении рака зарекомендовала себя как панацея от этого тяжелого заболевания: множество людей побороло онкологический процесс, в частности, мать Берии, у которой был рак матки с метастазами в легких и печени. Затем по неизвестным причинам последовали гонения на ученого и загадочная смерть. Этому послужило то, что изобретение принадлежит не медику, а обычному ветеринару, который обучал профессоров медицины. Разработки не остановились, они продолжаются в настоящее время. Запатентована фракция АСД-3 для наружного применения больными с различными кожными поражениями. АСД (фракция 2) против рака пока не используется массово, но он получил признание ветеринаров, разрешен и широко применяется в терапии животных.
Основное его свойство – оказывать положительное влияние на иммунитет и нормализовывать все процессы на клеточном уровне, воздействуя не только на отдельные микроорганизмы и ткани, но и на весь организм в целом. Основная причина возникновения различных заболеваний – это стрессовое состояние. Однако защитные и восстановительные силы человеческого организма не используются полностью при болезненных состояниях. Поэтому основное предназначение АСД – разбудить эти силы восстановления и самостоятельно победить болезнь.
Действие АСД (фракция 2)
Антисептический стимулятор Дорогова – так расшифровывается АСД-2. Применение для людей объясняется множественными положительными действиями биогенного стимулятора. Во-первых, это выраженный адаптоген, то есть препарат, который повышает устойчивость тканей организма к различным неблагоприятным воздействиям, особенно к стрессовым факторам. Имея сходную структуру с живыми клетками, препарат легко проникает в каждую клетку различных тканей и не вызывает реакции отторжения. Побочного действия средство не оказывает, не влияет на плод, хотя легко проникает через гематоэнцефалический барьер. При применении восстанавливается гормональный фон и активируются функции периферической нервной системы.
Помимо этого АСД влияет на обмен веществ, обладает иммуномодулирующими свойствами. Если длительно использовать этот препарат, то восстанавливаются взаимоотношения клеток органов, тканей и обеспечивается четкая и ритмичная работа различных органов и систем. И поэтому организм сам борется с различными патологическими процессами и восстанавливает свои функции. В справочниках народной медицины и в интернете можно найти немало статей на тему «Препарат АСД-2, применение для человека». Инструкция по использованию поможет в правильном подборе нужной дозировки и методики употребления.
Достоинства и недостатки препарата
Лекарственное средство АСД (фракция 2) абсолютно безвредно и нетоксично. Препарат хорошо переносится больными. Его необходимо принимать довольно продолжительное время, симптомов накопления и интоксикации не возникает. Народная медицина советует сочетать прием АСД (фракция 2) с употреблением сильнодействующих настоек: болиголова, чистотела, аконита.
Одним из больших недостатков средства является сильный неприятный запах. Были попытки устранить это свойство, но тогда теряются все полезные свойства АСД-2. Применение для людей, которые страдают онкологическими заболеваниями, тем не менее, помогает продлить жизнь человека. Поэтому запах в этих случаях не играет важной роли.
Лечение животных
Препарат продается в ветеринарных аптеках и пользуется широким спросом для лечения и профилактики заболеваний всех животных. Отмечены хорошие результаты терапии болезней органов дыхания, пищеварительной системы, мочеполовых органов и кожи, а также восстановления ослабленных животных лекарственным средством АСД (фракция 2). Применение при онкологии у животных (а этими заболеваниями также страдают наши домашние любимцы) показывает отличные результаты. Отзывы ветеринаров об этом препарате сообщают об улучшении общего состояния животных со злокачественными процессами.
Терапия онкологических заболеваний
Известно много случаев излечения болезней фракцией АСД. Лечение рака (онкологии) данным препаратом чрезвычайно эффективно. Широкое применение антисептик-стимулятор Дорогова получил при терапии:
• раковых процессов различных органов;
• фиброзно-кистозной мастопатии;
• лейкозов и лимфогранулематозов;
• фибромы или аденомы молочных желез, простаты;
• миомы матки;
• узлового зоба;
• полипоза желудка и кишечника;
• кистозных образований почек, печени.
При этих заболеваниях, а также при инфекционных болезнях больными используется АСД (фракция 2). Применение при онкологии — не единственное показание. Препарат хорошо помогал в послевоенное время для лечения туберкулеза, венерических заболеваний: трихомониаза, хламидиоза.
АСД-2: применение для человека
Инструкция включает и другие показания для использования препарата людьми:
• псориаз;
• экзема;
• варикозная болезнь;
• тяжелые пневмонии, плеврит;
• сердечно-сосудистые патологии;
• подагра;
• ревматизм;
• лимфадениты;
• импотенция;
• ожирение и многие другие.
Это не полный перечень всех патологий, с которыми борется препарат.
Как правильно использовать препарат
Чтобы применять это лекарственное средство, многие ученые разработали свои советы и секреты. АСД, фракция 2 (онкология, различные инфекционные заболевания, болезни иммунной системы отступают под действием препарата) будет эффективным, если правильно принимать лекарство, ведь оно действует в минимальных дозах. Только правильный прием и соблюдение сроков приведут к излечению.
Активность препарата снижается при соприкосновении с воздухом, поэтому после встряхивания флакона нужно быстро набрать лекарство с помощью шприца, не открывая пузырек. Это можно сделать, проколов резиновую пробку и набрав необходимое количество. Препарат нужно развести в кипяченой прохладной воде.
Как уже отмечалось, АСД (фракция 2) имеет неприятный запах, поэтому нужно уметь его пить. Для этого необходимо глубоко вдохнуть воздух, резко выдохнуть, и, задержав дыхание, быстро выпить раствор. Можно закрыть глаза. После того как лекарство выпили, нужно сделать несколько вдохов через нос и выдохов через рот. АСД (фракция 2) в проветриваемом помещении или даже на улице пьется легче.
Изучены нормы и дозы, при которых получен наилучший результат применения препарата АСД (фракция 2). Онкология лечится, если пить раствор утром за 30-40 минут до еды и вечером через 2-3 часа после ужина. Правильный прием и соблюдение сроков приведет к излечению.
Предполагают, что АСД-2 сгущает кровь. Поэтому необходимо ежедневно пить кислые соки, кушать лимон или принимать полтаблетки средств «Аспирин» или «Кардиомагнил». Сторонники препарата АСД (фракция 2) советуют пить много жидкости – до 2 литров в день – для выведения различных токсических и вредных веществ из организма.
Методики лечения рака
Разработаны методики и дозировки препарата АСД (фракция 2). Применение при онкологии предусматривает интенсивный курс с нарастанием объема препарата. Применять 4 раза в день каждые 4 часа: первые 5 дней – по 5 капель, вторые 5 дней – по 10, третьи 5 дней – по 15, и так, прибавляя по 5 капель, до достижения дозы 50 капель. Затем принимать по 50 капель до полного выздоровления.
При щадящем приеме в 30-40 мл воды или холодного чая добавляют в первый день 3 капли, во второй день – 5, в третий – 7, в четвертый – 9, в пятый – 11, в шестой – 13, в седьмой – перерыв.
Во вторую, третью и четвертую недели принимать так же, в той же дозировке. Затем – недельный перерыв. Следующий курс начинать с пяти капель, постепенно прибавляя по 2 капли ежедневно, как в первую неделю. Также необходим перерыв после месяца приема.
Прием препарата не должен ухудшать самочувствие. Если это происходит, значит, следует отказаться от его использования.
Асд фракция 2 при раке молочной железы. Алексей власович дорогов
Лечение рака АСД 2 во многих случаях является успешным. Препарат снимает боль и останавливает рост раковой опухоли. Лечение рака фракцией АСД – это не шарлатанство и рекламный ход. Отзывами о нем пестрят все сайты и газеты о здоровом образе жизни и многочисленные сайты и форумы. Отзывы о лечении рака АСД говорят о том, что пациенты переживают состояние стойкой ремиссии. Они не болеют никакими простудными заболеваниями, у них стабильный, крепкий иммунитет. Обычно при онкологии очень часто бывает так, что присоединяются другие болезни. От чего человек и умирает, в конечном счете.
Мощный адаптоген – вот как можно охарактеризовать АСД. При раке, чтобы смобилизировать организм для борьбы с недугом, можно использовать ударную дозу препарата. Она уже измеряется не в каплях, а в миллилитрах. Берем 5 мл АСД 2 на половину стакана кипяченой воды. Но такое лечение желательно проводить под врачебным контролем, так как данная доза – предельная для человеческого организма. Есть и другая схема — 1-2 капли препарата добавлять в воду или молоко через 1 час после приема пищи два раза в день. Ежедневно нужно увеличивать дозировку на 1-2 капли до 40 капель и продолжать лечение в течение 1-3 месяцев. В любом случае все решает онколог.
Структура АСД полностью совместима с клетками организма человека. Это делает препарат безопасным и не вызывающим побочных эффектов, что очень важно при лечении тяжелых больных.
АСД используют не только в онкологии, но также при лечении таких серьезных заболеваний, как туберкулез любой локализации, бесплодие и псориаз. Доступность и безвредность сделали его универсальным лекарственным средством. Единственное, что может оттолкнуть вас – это неприятный запах. Но, учитывая эффективность лекарственного средства, можно закрыть на это глаза.
Лечение фракцией АСД 2 рака во многих случаях полностью останавливает болезнь. Во время лечения больному нужно давать много жидкости. Никакой строгой диеты не потребуется, кроме как исключения алкоголя. Но это онкологическим и другим тяжелым больным не разрешается и так.
Забор препарата нужно делать с помощью шприца – иглу вставляют в пробку флакона. Затем нужно флакон встряхнуть и перевернуть. Набираем нужное количество препарата в шприц, аккуратно извлекаем его, придерживая иглу. После чего в подготовленную кипяченую воду выливаем содержимое шприца медленно. Перемешиваем. Препарат можно пить.
Лечение онкологии АСДМногим тяжелобольным людям не может помочь медицина. И тогда люди ищут альтернативные пути, хватаются за любую соломинку. Так было и в 1947 году, когда к создателю АСД Алексею Дорогову потянулись сотни людей, которых, по сути, врачи отправили домой умирать. И он помогал им, изготавливая чудо-препарат у себя дома из мясокостной муки.
Необходимо помнить, что иногда прием препарата сопровождается такими неприятными эффектами, как тошнота, отрыжка и боль в желудке. В остальном препарат переносится легко, а эти явления достаточно быстро проходят. Чтобы себе помочь, через 10-15 минут после приема препарата нужно выпить кефир. Будьте осторожны при заболеваниях почек – при длительном приеме могут возникнуть колики. Также возможны колебания артериального давления. Чтобы избежать проблем с почками, между курсами пейте почечный чай. Также нужно регулярно проводить общие анализы крови и мочи. Особенно нужен врачебный контроль при приеме ударных доз АСД для лечения онкологических заболеваний.
В остальном принимать препарат достаточно просто, он доступен по цене абсолютно всем.
Его можно комбинировать с любыми химическими препаратами для лечения опухолевых процессов в организме. Найти препарат можно только в ветеринарных аптеках.Предраковые состояния, фиброзно-кистозная мастопатия, аденома – все это успешно лечится АСД. Проблема этих состояний лишь в том, что их трудно выявить. На ранней стадии рак не проявляет себя никак. А такие заболевания – это лишь спусковой крючок для развития онкологии. В их основе чаще всего лежат гормональные нарушения, которые как раз и корректирует АСД2. Препарат оказывает мощное действие на весь организм. Стимуляция иммунного ответа – вот основная задача. Иммунная система человека выявляет аномальные клетки и уничтожает их. Наступает стойкая ремиссия. Также препарат борется с последствиями интоксикации организма, которая при лечении рака химиотерапией неизбежна. Можно сочетать препарат с приемом настойки болиголова и мухомора, которые используются для борьбы с опухолями в народной медицине. АСД можно использовать при лечении рака почек, печени, тела матки, груди, простаты, легких.
Здравствуйте, друзья! Сегодня рассмотрим тему: Как принимать АСД 2 человеку для лечения рака. Отзывы людей, излечившихся от разных болезней, в том числе от онкологических смотрите в конце этой статьи.
Как принимать АСД 2 человеку для лечения рака.
Обязательно надо вести дневник, в котором ежедневно писать дату, часы, дозу капель, дозу воды, самочувствие.
Капли надо пить в разбавлении с 50 мл холодной кипяченой воды натощак за 30 минут до еды.
Можно заменить воду молоком.
Обязательно время от времени проходить анализы, подшивать их по дате и хранить.
Таблица 1: «Ударная» методика А.В. Дорогова для лечения рака.
Время приема | 8 час | 12 час | 16 час | 20 час |
1-й цикл | 5 капель 5 дней | 5 капель 5 дней | 5 капель 5 дней | 5 капель 5 дней |
2-й цикл | 10 капель 5 дней | 10 капель 5 дней | 10 капель 5 дней | 10 капель 5 дней |
3-й цикл | 15 капель 5 дней | 15 капель 5 дней | 15 капель 5 дней | 15 капель 5 дней |
4-й цикл | 20 капель 5 дней | 20 капель 5 дней | 20 капель 5 дней | 20 капель 5 дней |
5-й цикл | 25 капель 5 дней | 25 капель 5 дней | 25 капель 5 дней | 25 капель 5 дней |
6-й цикл | 30 капель 5 дней | 30 капель 5 дней | 30 капель 5 дней | 30 капель 5 дней |
8-й цикл | 35 капель 5 дней | 35 капель 5 дней | 35 капель 5 дней | 35 капель 5 дней |
9-й цикл | 40 капель 5 дней | 40 капель 5 дней | 40 капель 5 дней | 40 капель 5 дней |
10-й цикл | 45 капель 5 дней | 45 капель 5 дней | 45 капель 5 дней | 45 капель 5 дней |
11-й цикл | 50 капель до выздор. | 50 капель до выздор. | 50 капель до выздор. | 50 капель до выздор. |
Щадящая схема терапии рака препаратом АСД 2 по Дорогову А.В. дана в таблице 2.
Капли размешивать в 40 мл. холодной кипяченой воды.
Таблица 2.
Неделя | Пн. | Вт. | Ср. | Чт. | Пт. | Сб. | Вс. |
1-я неделя. | 3 капли | 5 капель | 7 капель | 9 капель | 11 капель | 13 капель | отдых |
2-я — 4-я неделя | 3 капли | 5 капель | 7 капель | 9 капель | 11 капель | 13 капель | отдых |
5-я неделя | отдых | отдых | отдых | отдых | отдых | отдых | отдых |
6-я — 10-я неделя | 5 капель | 7 капель | 9 капель | 11 капель | 13 капель | 15 капель | отдых |
11-я неделя | отдых | отдых | отдых | отдых | отдых | отдых | отдых |
На 12-й неделе можно перейти к схеме Табл.
Искусство исцеления от рака не стоит на месте. Народные целители — специалисты по раку — применяют АСД вместе с ядами, например, болиголовом или аконитом и т.д.
Новое слово о принципе действия препарата АСД.
Гуров Александр Евгеньевич
Друзья, наука не стоит на месте, за последние десятилетия, прошедшие после Дорогова, ученые исследуют принцип действия препарата АСД.
Крупный вклад в науку об АСД внёс Российский ученый Александр Евгеньевич Гуров, ветеринар из Вологды.
Гуров А.Е. — действительный член профессиональной медицинской ассоциации специалистов традиционной народной медицины и целителей России. Звание Академика он получил за научный труд в теме «Антисептик Стимулятор Дорогова в онкологии.»
В этой научной работе Гуров А.Е. доказал, что АСД действительно побеждает рак и хорошо совместим с химией и лучевой терапией. Он представил доказательства: результаты анализов крови в разные периоды лечения, рентгеновские снимки, выписки из историй болезни, мнения врачей.
Гуров А.Е. выдвинул теорию морфогенных полей, суть которой в том, что информация в живых тканях накапливается тысячелетиями. У заболевших людей информация ослабевает и даже рушится. Действие АСД основано на восстановление ослабленной информации и гармонизации состояния.
Отзывы о препарате АСД некоторых бывших больных людей:
Отзыв №1.
Добрый день всем! У меня большая семья и много проблем. Когда тяжело заболел мой пес, ветеринары прогнозировали мучительную смерть собаке. Лейшманиоз, аллергия, 70% потери шерсти, гниение суставов, слепота и тд. За 3 недели от 8 месячного щенка почти ничего не осталось.
И вот один доктор из районного центра порекомендовал АСД 2. Вопреки прогнозам врачей, пес выжил. Красавец! Ему 3 года! На примере пса, я стала давать АСД мужу и детям. У мужа удален желчный пузырь, был перитонит, строжайшая диета, изжога, желтушность и слабость.
Пил АСД 2 месяца: вода 50 мл. и АСД 1,5 мл. натощак за 30 мин до еды, перерыв на 2 месяца и курс повторил. Результат не заставил себя ждать! Цветущий мужчина в свои 47! В диете не нуждается, румянец на щеках ЗАГЛЯДЕТЬСЯ можно!
Сыну 21 год — инвалид детства с диагнозом сирингомиелия (поражение спинного мозга кистами, потеря чувствительности), гипертония 2 степени. 2 раза в год лежал в больнице, часто падал, ожоги, давление 190. По той же схеме пропил АСД. Врачи в шоке! В мае этого года констатировали резкое улучшение! Кисты уменьшаются! Давление стабилизировалось! Чувствительность потихоньку восстанавливается (прыщик на спине не выдавишь без стонов:)) Ходит без трости!
СПАСИБО ДОРОГОВУ за его препарат! ЦАРСТВО ЕМУ НЕБЕСНОЕ! СПАСИБО и МИХАИЛУ ветврачу за подсказку. Лекарства все выбросила. Нет нужды!
Отзыв №2:
Наташа (Москва):
Считаю своим долгом рассказать об опыте лечения АСД- 2 и 3 мною лично и моими знакомыми.
Начну с того, что несколько лет назад у мамы определили рак кожи, причем мокнущий и постоянно чешущийся. При этом было невозможно мыться и просто невыносимо спать. Врачи очень жестоко отнеслись, сказали, что в вашем возрасте (73) излечиться не очень реально и просто готовьтесь к худшему. Причем обследовалась у нескольких различных врачей, включая платных.
Мама решила сама искать в интернете! советы и статьи на данную тему и вышла на АСД. Купила обе фракции (2 и 3), через неделю почувствовала небольшое облегчение, но чесаться и мокнуть продолжало (хотя и немного меньше). Она, несмотря на свой возраст, решила не сдаваться и настолько поверила отзывам тех, кто вылечился, что вышла на клинику в Москве, где врач конкретно лечит АСД и назначает каждому индивидуально.
Мы привезли ее к этой докторше, она ей назначила индивидуальный курс. Мама сама даже до конца не могла поверить, когда через 2 недели все стало исчезать на глазах. А через месяц от самой большой мокнущей раны-язвы остался лишь след, и на этом месте стала расти новая розовая кожа.
Мама, конечно, рассказала знакомым и друзьям, и мне. Я лично с помощью АСД останавливаю ОРЗ (и ангину), которой раньше страдала подолгу и в тяжелой форме, проходила несколько курсов антибиотиков, врачи махнули рукой, сославшись на очень слабый иммунитет. А теперь достаточно 2-3 приемов по 1 кубику, и вся простуда исчезает на след. день. ТО же даю мужу, когда он начинает заболевать.
Близкая подруга АСД вылечила экзему, а ее подруга — рак груди. Их знакомый из другого города блокирует рак легких.
Я живу за рубежом, привезла АСД сюда (а это ЮАР!), дала знакомой, у нее дочь страдает псориазом, тоже очень помогло. Теперь она будет лечить АСД панкреатит.
Низкий вам поклон от всех нас!
Отзыв №3:
Мне 50 лет. АСД-2 ПРИНИМАЮ С 2004 года, побочных явлений не наблюдалось, препарат действительно уникален. Этим препаратом пользуюсь постоянно и лично проверила на себе при лечении таких болезней, как ПРОЛЕЖНИ, НЕКРОЗ — БЫЛИ ВЫЛЕЧЕНЫ ЗА 2,5 МЕСЯЦА, так-как этот препарат не только убивает микробы, но и восстанавливает умершие клетки.
Даже находясь в интересном положении, я каждый день принимала АСД по 2 капли и чувствовала себя прекрасно, и это при том, что мне шел 47 год. Родила сама, и сейчас моему счастью 4 года. и он тоже принимает АСД. Иммунитет у него отличный, а ещё если у ребёнка расстройства желудка, то 5 капель и 10 грамм кипячёной воды исправят всё в течение 10 минут.
Я так много могу писать об этом препарате потому, что всё лично опробовала на себе и своих родных. Можете мне поверить, я даже могу написать свой E-mail [email protected] если кому-то нужна моя помощь, пишите отвечу подробно.
Отзыв №4:
Химия-терапия убивает всё живое, и раз вам её назначили, значит надо пройти обязательно, а вот когда приедете домой, сразу начинайте пить АСД. Дозировка указана в разделе, как лечиться этим препаратом, лично я принимала начиная; 1 день по 1 капле 4 раза в день. 2 день 2 капли 4 раза в день, и. т. д.до 50 капель и точно так же обратно только на убавление до 1 капли. На 10 день, то-есть на 10 капле, может что-то в организме заболеть,
У меня три дня болели почки, но главное, не пугайтесь и не прекращайте принимать — всё восстановится на свои места.
Да и ещё как только начнёте принимать препарат, может начаться сонливость и повысится аппетит, тоже боятся не надо, это ваш организм начинает своё излечение. Со временем аппетит уменьшится, и сон ваш нормализуется, волноваться не стоит.
Отзыв №5:
Реально помогает от простатита, пью внутрь и делаю инъекцию без иглы в прямую кишку, предварительно сделав клизму (растительное масло и АСД: 30% АСД/70% масла — боль 5 минут ужасная! Но потом отходит). Не поверите, но из хронической стадии перешел в начальную. Супер и только.
Отзыв №6:
Ромашка Оля:
Моя бабушка перенесла рак крови и рак груди. Лечилась фракцией АСД-2 и АСД-3. Я тогда была мала, чтобы понимать происходящее и трезво оценивать положение моей бабушки. Но я никогда не забуду запах этого препарата.
Жизнь меня столкнула с ним второй раз уже в 1996 г. Бывший муж был выписан умирать с туберкулёзом легких, из-за хим.поражения печени. Снимки УЗИ говорили о циррозе. Врачи дали жизни моему мужу 4-6 месяцев, в лучшем случае.
Пришлось взяться основательно за народную медицину, уринотерапию, а перед этим пришлось порыться в мед.учебниках.
Учебники были 50-х годов, и вот в них я и наткнулась на препарат АСД! У меня появилась надежда! Этот препарат был у нас на свиноводческом комплексе.
И начали лечение. Чистка организма мочой, прием фракции дали такой замечательный результат, что в шоке был весь туб.диспансер! У лечащего врача очки буквально сами взлетели на лоб, когда через 5 месяцев он увидел своего пациента румяного, красивого и ЖИВОГО!
Меня пытали долго и упорно, и многие согласились с правильностью лечения.
УЗИ печени — состояние нормальное, в легких не было ни одной каверны, по результатам снимков, анализов было дано заключение-здоров!!!
Об этом препарате ходят легенды. Официальное разрешение АСД фракция 2 получила только в ветеринарии. Однако мир переполнен известиями об эффективности применения этого препарата для лечения от рака и людей. По одной из легенд, достоверность которой ничем не подкреплена, с помощью АСД фракция 2 была излечена мать Берии.
Поэтому, принимая решение на врачевание средствами, на которые не выдана лицензия Минздрава, ответственность за свою жизнь вы берете только на себя, если вы, конечно, не Берия.
Интерес к АСД фракции 2 против рака возрос в последнее время во многом благодаря муссированию этой темы в прессе.
Утверждают, что АСД сильно повышает иммунитет, это ценное свойство .
Методика АСД 2 лечение ракаСам препарат был разработан в 1947 г. в лаборатории Всесоюзного института экспериментальной ветеринарии (ВИЭВ), где в качестве сырья использовалась ткань лягушек, подверженная термической возгонке с конденсацией жидкости. При таком виде возгонке жиры, белки, углеводы, нуклеиновые кислоты – разлагаются до образования низкомолекулярных компонентов.
Полученный препарат имел антисептическое, стимулирующее, ранозаживляющее действия. Окрестили его АСД (антисептик-стимулятор Дорогова).
Изготовление АСД для лечения ракаВ современных условиях жидкости АСД изготавливаются по специальной технологии из тканей долгоживущих животных. ЛСД фракция 2, представляет собой жидкость чайного цвета с очень специфическим запахом. Применяется как наружно, так и внутренне.
Ученые считают, что АСД фракция 2 против рака обладает чётко выраженным антибактериальным действием, при этом он является мощным адаптогеном, то есть легко проходит тканевые барьеры, поскольку его структура аналогична структуре живой клетки и ею не отторгается. Поэтому нет и побочных эффектов, осутствует негативное влияние . АСД не только поддерживает координирующую роль периферической нервной системы, но и обеспечивает нужный гормональный фон. Он принимает участие во всех обменных процессах, проявляет себя в виде модулятора иммунной системы организма. Восстановление им нормального соотношения клеток, которые регулируют разнообразные процессы, необходимые организму обеспечивает и нормальную работу всех органов и систем. АСД действует не некий определенный микроб, а на весь организм человека, который, вследствие действия препарата сам уничтожает этот микроб, обогащенный полученными силами и материалом.
Лечение рака АСД 2. НедостаткиНедостаток его, для кого-то, может, и определяющий – сильный тошнотворный запах.
Привыкание к препарату не зарегистрировано.
При лечении АСД необходим прием большого количества жидкости (2-3 литра в сутки) — для выведения из организма токсинов и шлаков. Особых диет при лечении препаратом не требуется, передозировки тоже не страшны.
«За» лечение рака легких, желудка с помощью АСДПрекрасно поддаются лечению с помощью АСД фракции 2 предраковые формы заболевания. При этом применяется общая дозировка и схема, ставятся компрессы на наружные опухоли.
Возраст пациента, расположение и характер раковых поражений имеют основное значение при лечении онкологических заболеваний. АСД Ф-2 довольно быстро останавливает течение болезни и снимает боль. В запущенных стадиях рака применяют не общую дозировку, а до пяти миллилитров АСД на сто миллилитров воды дважды день. Все эти действия – только с одобрения и под наблюдением врача.
Интенсивная методика лечения рака с применением АСДИнтенсивная методика лечения рака с применением АСД производится по прогрессивной схеме (четырехразовый прием), при которой дозы принимаемого лекарства постепенно возрастают.
Принимать в 8 00 , 12 00 , 16 00 , 20 00 часов ежедневно. Дозы растут каждые пять дней. Первая пятидневка – по пять капель, вторая – по десять, третья – по двадцать и т.д., пока не достигнете дозы в пятьдесят капель. После этого принимаете по пятьдесят капель до выздоровления.
Щадящая методика лечения рака с применением АСДВ первый день (например, в понедельник) утром за 30 мин. До приема пищи в чашку сливают 30-40 миллилитров спитого чая и капают три капли АСД Ф-2.
Вторник — пять капель, в среду — семь, в четверг — девять, в пятницу -одиннадцать, в субботу- тринадцать, воскресенье день отдыха и анализа своих ощущений.
Вторая, третья и четвертая также посвящены приему препарата по той же схеме. Затем неделя перерыва. После перерыва вновь начинается прием АСД по той же схеме, но начинают не с трех, а с пяти капель АСД, прибавляя по две капли ежедневно. Лечиться месяц (четыре недели), затем снова недельный отдых и весь курс повторяется.
Обязательно контролируйте самочувствие, любое ухудшение здоровья – сигнал к прекращению применения препарата.
Доброе время суток! Перед тем как читать рецепты лечения заболеваний лекарственными растениями, настоями, различными препаратами (АСД, перекись, сода и тд) в домашних условиях, немного расскажу о себе. Звать меня Константин Федорович Макаров — я врач-фитотерапевт з 40-летним опытом работы. Когда Вы будете читать статью, советую Вам поберечь свой организм и здоровье и не сразу приступать к тем методам лечения, которые описаны ниже и сейчас расскажу ПОЧЕМУ! Есть очень много целебных растений, препаратов, сборов трав, которые доказали свою эффективность и о них много хороших отзывов. Но есть вторая сторона медали — это противопоказания применения и сопутствующие заболевания больного. К примеру, мало кто знает, что настойку болиголова нельзя применять при химиотерапии или при применении других препаратов возникает обострение заболевания и Вы можете растеряться. Потому, что бы Вы себе не навредили, лучше консультируйтесь у специалиста или своего лечащего врача, перед применением различных методов лечения. Здоровья Вам и лечитесь правильно. Моя страничка в одноклассниках, добавляйте в друзья — ok.ru/profile/586721553215. Больше обо мне читайте здесь: Фитотерапевт Константин Макаров.
Самые страшные заболевания — онкологические, они известны людям еще с незапамятных времен. И если предки наши не могли бороться с этими заболеваниями, то современная медицина, как традиционная, так и народная, совершила прорыв в этом вопросе. Фракция АСД 2 против онкологии Об этом чудесном препарате прямо легенды ходят, хотя разрешена АСД фракция 2 исключительно в ветеринарии. Мир переполняют известия об эффективном применении, особенно после применения АСД отзывы при онкологии указывают на позитивные результаты лечения людей. Эта тема довольно часто обсуждается в прессе и интернет — изданиях. За последние годы сильно вырос интерес к этому препарату. Официальная медицина не признает применение фракции АСД для лечения заболеваний, из этого следует, что принимая решение на лечение данным препаратом, ответственными за вашу жизнь являетесь вы сами.
Утверждается, что препарат способен значительно повысить иммунитет человека, а это значит, что в борьбе с онкологическими заболеваниями пациент имеет немало шансов победить, применяя для лечения фракцию. Средство обладает целым рядом положительных воздействий на человеческий организм: оказывает антибактериальное действие; является сильнейшим адаптогеном, благодаря своей структуре, аналогичной живым клеткам; не имеет побочных эффектов; не воздействует негативно на плод в утробе матери; обеспечивает нормальный гормональный фон; налаживает все обменные процессы в организме; является модулятором иммунной системы организма. В итоге, фракция АСД 2 при онкологии воздействует не на определенную клетку, микроб или вирус, а нас весь организм человека в целом, который самостоятельно уничтожает «вредителя» обогащенный материалом и силами, вследствие воздействия препарата. Противораковая терапия Предраковые формы, онкология АСД 2 фракция отзывы пациентов гласят о том, что терапия имеет положительные результаты лечения болезней. При этом используется для лечения общая схема и дозировка препарата, на наружные опухоли необходимо ставить компрессы. Основное значение при таких заболеваниях имеет возраст больного, расположение и характер раковых поражений.
Применение АСД 2 в начальных стадиях онкологических заболеваний обеспечивает быстрое обезболивание и остановку развития болезни. Если рак находится в запущенном состоянии, следует лечиться не по стандартной схеме, а принимать вплоть до пяти миллилитров препарата с водой два раза на день. Все принятые меры необходимо обсуждать с лечащим врачом и под его строгим контролем. Информация к прочтению: АСД фракция 2 как пить человеку при болезни
Ударная методика лечения при онкологии
с 1-го по 5-й день — принимать по 5 капель фракции АСД 2
с 6 -го по 10-й — по 10 капель
с 11-го по 15-й — по 15 капель
с 16-го по 20-й — по 20 капель
с 21-го по 25-й — по 25 капель
с 26-го по 30-й — по 30 капель
с 31-го по 35-й — по 35 капель
с 36-го по 40-й — по 40 капель
с 41-го по 45-й — по 45 капель
с 46 -го и до полного выздоровления — по 50 капель препарата за один прием.
Щадящая схема лечения при онкологии
Принимая вторую фракцию АСД при онкологии отзывы пациентов, свидетельствуют о том, что им легче было принимать препарат по более щадящей методике лечения. В понедельник принимают три капли АСД 2, растворив в 30-40 миллилитрах крепкого чая. Во вторник принимают пять капель препарата. В среду принимают 7 капель. В четверг принимают 9 капель. В пятницу принимают 11 капель. В субботу принимают 13 капель. Воскресенье — перерыв. На второй, третьей и четвертой неделе лечения принимают АСД 2 по такой же схеме. Затем семидневный перерыв, а уже с понедельника пьют фракцию по аналогичной схеме с 5 пяти капель, и прибавляют в последующие дни по 2 капли. Курс лечения составляет четыре недели, и перерыв на семь дней. При ухудшении самочувствия необходимо прервать прием препарата. Полезная ссылка: Лечение народными средствами рака матки Комплексное лечение онкологии Противораковая терапия для достижения эффективного результата должна быть комплексной, так вторая АСД фракция при онкологии применяется одновременно с фитопрепаратами из 15-20 целебных трав в виде настоев на воде и спиртовых (40%) настоек. Уместным будет прием противоопухолевых трав — аконита, болиголова и др. В каждом случае травы подбираются индивидуально, что бы оказать многостороннее лечебное воздействие на организм больного.
Обзор лечения онкологии молочных желез препаратом АСД 2И так, я часто использую в лечении больных данный препарат, поскольку он помогает. Я фитотерапевт и работала с такими профессорами как Топорков и Суханов. В клинике фитотерапии Суханова я проработала больше 10 лет. Сейчас сама практикующий фитотерапевт и консультирую как на этом сайте, так и за контактами указанными ниже. Обо мне, как я пережила рак и стала фитотерапевтом вы можете узнать вот здесь . И так перейдем к самой статье о лечении рака груди АСД 2 .
Про АСД много пишут и плохого и хорошего. Я вообще заметила такую вещь, много негатива пишут те люди, которые даже не принимали ни одного препарата, а у них почему то сложилось мнение, что он как-то не правильный. Не мне судить и осуждать их, но сначала попробуйте, даже не так, я бы им посоветовала проработать в фитотерапии несколько лет, посмотреть как люди лечатся от тех или иных болезней той же настойкой болиголова, аконита джунгарского или препарата АСД, а только после этого делала выводы.
Среди нашего населения лечения онкологии груди АСД 2 доволи популярная вещь. Вы можете найти много форумов, где люди общаются по поводу применения данного препарата. Один из отзывом о нем я приведу в данной статье. АСД 2 это антисептик-стимулятор Дорогова и содержит: карбоновые кислоты, алифатические и циклические углеводороды, соединения с активной сульфгидрильной группой, производные амидов и воду. Препарат АСД, фракции 2 тормозит дальнейшее распространение раковых клеток и снимает боли при онкологии.
Методика приема при онкологии груди АСД 2.
8 12 16 20 часов
5 5 5 5 капель 5 дней
10 10 10 10 капель 5 дней
15 15 15 15 капель 5 дней
20 20 20 20 капель 5 дней
25 25 25 25 капель 5 дней
30 30 30 30 капель 5 дней
35 35 35 35 капель 5 дней
40 40 40 40 капель 5 дней
45 45 45 45 капель 5 дней
50 50 50 50 капель до выздоровления
Необходимо пить много воды.
Есть другая методика приема, о ней расскажет отзыв одного человека. Более подробнее про методику напишите мне по контактах указанных ниже.
Отзыв о применении АСД 2:
Много разных подходов к определению дозы. Кто-то по каплям мерит, кто-то говорит что по 1 кубику на 10 кг веса тела нужно принимать. Знакомый мой дозу определял методом подбора (весит он порядка 85-90 кг): начал с одного кубика пить. Потом через три-четыре дня увеличивал на один кубик… после перехода с пяти кубиков на шесть заметил, что голова побаливать стала… когда перешел на 7 кубиков, то еще сильнее заметил головные боли. Для него доза в 5 кубиков оказалась нормальной. У каждого организм индивидуальны и по своему борется с болезнями, для каждого дозировка подбирается индивидуально. Кому-то хватает малой дозы, а кому-то нужно выпить столько, чтобы до отрыжки. Главное не бояться, плохого он не сделает. И вообще — препарат замечательный, я сам жуткий скептик в этих вопросах, но если бы не случай с близкими родственниками и друзьями принимавшими АСД-2. Никогда бы не поверил про то, что о нем пишут.
Вот такое пишут на форумах и я за то, каждый организм индивидуальный и всегда за метод терапевтической дозы (если вы читали другие мои статьи то я почти всегда его описываю). Более эффективное лечение когда организм сам определяет дозу, чем мы идем по назначенным дозировкам.
На сегодня пока все. Если у вас возникли вопросы, то задавайте их мне по контактам указанным ниже. Будьте здоровы!
Другие полезные статьи на сайте:
Признаки рака груди:
Здравствуйте…
Прошу прощение за беспокойство-каково ваше отношение в пименениии АСД 2 фракции у людей? и результаты…..
12.04.13
пациентка советуется по поводу миомы (3 узла.) Один Интерстицильно-субмукозный…по передней стенке с центрипитальным ростом….
Повились жалобы в последние 2 месца-беспокот сиьнейшие обильниые длительные кровотечени
Возрат молодой- 37 лет….не беременнела. не рожала…
Оперировать даже щадяще не хочет (по причине) наркоза…
Пить гормоны тоже не желает
Как ей помочь? И есть ли результаты лечения данного заболевания травами? …
Пишите на почту, распишу вам способы лечения.
ин-58,железо-9,3
АЛТ-16 АСТ-22,4 общ.блок-65,4 эр.3.7 тромб.470 лейк 4,6 гемогл-101
АСД фракция 2, раствор 100 мл.(АРМАВИР) при онкологии, инфекциях и плохом иммунитете, цена 210 грн
Цену уточнять по тел.: 0973885818 Владислав
фракция 2, раствор фл. 100 мл (Армавир)
АСД фракция 2 — это препарат, нашедший свою прочную нишу в ветеринарии. Полное его название: «Антисетик-Стимулятор Дорогова», в честь своего изобретателя – советского учёного. А.В. Дорогов стремился создать препарат, который бы действовал как универсальное защитное средство для всех органов и тканей, повышал устойчивость к вредным факторам среды, к инфекциям и болезням.
Действие АСД, в первую очередь, иммуностимулирующее и антисептическое. Он успешно используется для стимуляции роста молодых животных, для заживления тканей, лечения онкологии различных областей.
Состав и форма выпуска
АСД фракция 2 выпускается во флаконах – по 20 и 100 мл. Внутри флакона жидкость желтоватого цвета с коричневым или красноватым оттенком. Имеет сильный специфический запах. Получается АСД сухой перегонкой мясокостной муки, когда органические вещества муки разрушаются до мельчайших, биологически активных веществ.
В составе раствора есть:
- карбоновые кислоты,
- алифатические амины,
- циклические и алифатические углеводороды,
- сульфогидрильные производные.
Фармакологическое действие
Действие АСД-2 – это эффекты биологически активных веществ, которые проникают во все клетки организма за счёт своего небольшого размера и универсальности. Поэтому действие АСД-2 распространяется абсолютно на весь организм животного, благотворно воздействуя на здоровье собаки.
АСД-2 активирует центральную и периферическую нервную систему, оказывает выраженное противовоспалительное действие, является сильным антисептиком. Отдельные компоненты АСД-2 стимулируют желудочно-кишечный тракт: моторику, выделение и активность ферментов. Улучшает иммунитет, как системный, так и местный, ускоряет заживление ран и повреждений.
В каких случаях эффективно использовать АСД-2
Учитывая обширность фармакологических эффектов АСД, спектр его применения очень широк:
АСД 2 часто применяют при онкологии, кожных проблемах, заболеваниях глаз и ушей.Наиболее актуально использовать АСД фракцию 2 для собак при онкологии: саркома, опухоли кишечника, желудка, мягких тканей. Тот факт, что АСД-2 действует как иммуностимулятор, способствует уменьшению размеров опухолей и болевых ощущений животного. Важно и улучшение аппетита – опухолевая интоксикация часто не даёт животному нормально питаться.
Довольно часто используется АСД-2 для собак при лечении дерматита. В данном случае можно накладывать на повреждённую кожу компрессы с лекарством.
Инструкция по применению и дозировка
Применяется АСД-2 курсами длиной от 5 до 14 дней. Затем делается небольшой перерыв в течение 2-3 дней и курс повторяется. Все патологии, кроме онкологических, требуют применения АСД однократно. При опухолях фракцию 2 назначают 4 раза в сутки.
Для получения благоприятного эффекта, важно знать, как применять препарат для собак разных пород и размеров. Дозировка АСД фракция 2 составляет 0,1 мл на 1 кг для собак любой массы. Например, для крупной собаки весом 25 кг понадобится 2,5 мл раствора внутрь.
Если собака маленькая – 3-4 кг — и возникает вопрос, как давать ей АСД, то можно воспользоваться инсулиновым шприцем, объем которого 1 мл (для 5 кг собаки – полшприца). АСД-2 даётся в виде водного раствора – на каждый 1 мл препарата используется 20 мл воды.
Важно! Иногда удобнее отмерять назначенную дозу каплями – тогда в 1 мл 40 капель раствора.
При выпадении шерсти, грибковых поражениях кожи, кожных инфекциях, гнойных ранах АСД-2 используется местно. В таком случае надо знать, как развести препарат для собаки. Обычно, наружно используется от 5% до 20% растворы.
Для получения 5% раствора 5 мл АСД растворяется в 95 мл воды. Из такого раствора делаются марлевые компрессы на поражённую зону. Компресс закрепляется на теле собаки с помощью попоны или повязки.
В тяжёлых случаях гнойных ран в полость раны закладывается тампон, пропитанный 20% раствором. 20% раствор препарата АСД-2 можно получить, растворив 20 мл АСД в 80 мл воды.
При инфекциях глаз – конъюнктивиты бактериальные, вирусные, травмы инфицированные – закапывается 5% раствор АСД-2 по 2-3 капли в каждый глаз в течение 5-7 дней.
Более точную дозировку всегда необходимо узнавать у ветеринарного врача. Только он может комплексно оценить состояние собаки, степень её иммунодефицита и назначить конкретное количество препарата.
Противопоказания и побочные эффекты
При применении любого лекарства для собаки нужно обязательно соотносить, какой степени вред и какую пользу можно получить. В случае с АСД-2 вероятность побочных эффектов крайне мала – за 60-летний опыт применения АСД в ветеринарии не выявлено противопоказаний или побочных реакций, которые служили бы причиной отказа от лечения.
Исключение составляет редкая индивидуальная непереносимость, которая может возникнуть у собаки.
Условия хранения и цена
АСД-2 препарат вполне бюджетный и доступный, приобрести его можно почти во всех ветеринарных аптеках. Стоимость колеблется от 120 руб за 20 мл флакон до 300 руб за 100 мл ёмкость.
Хранить АСД-2 следует при комнатной температуре, в тёмном месте. Срок годности нераспакованного флакона – 4 года. Открытый флакон необходимо использовать в течение 2-х недель.
асд лечит суставы
асд лечит суставыасд лечит суставы
>>>ПЕРЕЙТИ НА ОФИЦИАЛЬНЫЙ САЙТ >>>Что такое асд лечит суставы?
В своих отзывах хирурги и ортопеды особо выделяют правильную формулу, каждый компонент которой усиливает и дополняет общее воздействие на причину патологического процесса.Активные ингредиенты комплекса Биотрин: Змеиный яд много лет используется в народной медицине для быстрого устранения болевого синдрома. Акулий жир запускает выработку синовиальной жидкости, усиливает кровоток, насыщение тканей кислородом и полезными микроэлементами. Панты марала необходимы для подавления воспалительного процесса, предотвращения осложнений основного заболевания. Отдельно стоит выделить комплекс из 50-ти витаминов, усиливающих иммунитет и поддерживающих общее здоровье.
Эффект от применения асд лечит суставы
Состоит Биотрин из акульего жира, змеиного яда, пантов марала. Именно благодаря натуральности лекарство практически не имеет противопоказаний. Назначают средство при болях, отечности, хрусте и скованности.
Мнение специалиста
Работаю я токарем и, после длительной физической нагрузки на работе, жутко болит спина и колени. Ходил к докторам, делал уколы, мазал различными мазями, носил бандажи — легче особо не становилось. Боялся, что совсем развалюсь, потеряю работу, а у меня все-таки жена и дети. В поисках решения проблемы наткнулся на Биотрин, оставил заявку. Мне перезвонил специалист, которая уговорила меня купить курс. Долго сомневался выкупать с почты или нет, все-таки деньги не маленькие. Решил забрать посылку, подумал, вдруг поможет, а если нет — будет мне урок. В итоге прошел я половину курса и что могу сказать — да, я не излечился полностью (но надежда, что до конца курса такое может произойти, не покидает меня). Но боль практически прошла. Мажу Биотрин перед работой на колени и вечером на колени и спину. Работать стало однозначно легче. Конечно, я не забросил и другие способы, которыми пытался вылечиться, но Биотрин стал отличным дополнением. В общем, если у вас проблемы с суставами, то биотрин точно вам должен подойти. Устраивают ли вас цены или нет — это уже другой вопрос. Я много потратил денег на бесполезные лекарства, поэтому заплатить за средство, которое действительно помогает — не самое плохое решение.
Как заказать
Для того чтобы оформить заказ асд лечит суставы необходимо оставить свои контактные данные на сайте. В течение 15 минут оператор свяжется с вами. Уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 3-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.
Отзывы покупателей:
Даша
Биотин гель – препарат, который содержит в своем составе вещества, аналогичные тем, которые в норме вырабатываются в человеческом организме. Перед использованием средства желательно изучить, что это за гель. Это поможет понять, как именно работает лекарственное средство.
Kira
«Биотрин» – мощное эффективное средство, которое подойдет для людей всех возрастов. Применять его можно даже для маленьких деток, которые ушибают коленки или локти.
Противопоказаний у Биотрина немного. Не рекомендуется наносить препарат на поврежденную слизистую оболочку, на ранки, язвы. В таком случае гель наносят с обратной стороны, например, если болит колено, но там есть открытая рана, то гель мажут сбоку или под коленом. Где купить асд лечит суставы? Работаю я токарем и, после длительной физической нагрузки на работе, жутко болит спина и колени. Ходил к докторам, делал уколы, мазал различными мазями, носил бандажи — легче особо не становилось. Боялся, что совсем развалюсь, потеряю работу, а у меня все-таки жена и дети. В поисках решения проблемы наткнулся на Биотрин, оставил заявку. Мне перезвонил специалист, которая уговорила меня купить курс. Долго сомневался выкупать с почты или нет, все-таки деньги не маленькие. Решил забрать посылку, подумал, вдруг поможет, а если нет — будет мне урок. В итоге прошел я половину курса и что могу сказать — да, я не излечился полностью (но надежда, что до конца курса такое может произойти, не покидает меня). Но боль практически прошла. Мажу Биотрин перед работой на колени и вечером на колени и спину. Работать стало однозначно легче. Конечно, я не забросил и другие способы, которыми пытался вылечиться, но Биотрин стал отличным дополнением. В общем, если у вас проблемы с суставами, то биотрин точно вам должен подойти. Устраивают ли вас цены или нет — это уже другой вопрос. Я много потратил денег на бесполезные лекарства, поэтому заплатить за средство, которое действительно помогает — не самое плохое решение.
АСД-2Ф в лечении суставных болей и болезней суставов. Как применять препарат наружно и схемы и дозировки приема внутрь. Советы и рекомендации. Лечит ли АСД суставы и можно ли таким образом вылечить артрит – на этот вопрос точного ответа нет. У АСД есть множество приверженцев, которые убеждают в эффективности и безопасности этого средства, призывая лечить им. Использование препарата АСД фракция 2 для онкологических больных: воздействие на организм, что лечит, эффективность применения АСД-2 при раке. Лечит ли АСД грыжу? Наконец, следует немного вспомнить о способах питания хрящевой . Это хорошо заметно в случае крупных суставов, таких как плечевой, тазобедренный или коленный. АСД-2Ф в лечении суставных болей. 12 483 просмотра 12 тыс. просмотров. . АРКАДИЙ ОЗДОБА проводит 5-дневное ИНДИВИДУАЛЬНОЕ Скайп-обучение по самоисцелению, по паразитарной теории возникновения заболеваний, по. Сегодня предлагаем к обсуждению тему: «асд лечит суставы». Мы постарались полностью раскрыть тему и преподнести ее в удобном виде. Как правильно принимать фракцию АСД 2 при болях в суставах. Причины болей. Лечение болевых ощущений с помощью препарта Дорогова. Схемы приема. На сегодняшний день антисептик-стимулятор Дорогова является препаратом нетрадиционной медицины. Категорически разводить фракцию АСД-2 минеральной или газированной водой. . Фракцию АСД-2 принимать внутрь, разбавляя в 1/2 стакана холодной кипяченой воды, 2 раза в день — утром и вечером за 30 минут до еды. Во время. АСД 2 при артрите – помогает избежать артроскопических вмешательств, минимизирует воспаление, останавливает или замедляет разрушение сустава. Препарат может применяться как альтернативное лечение или. АСД для лечения суставов. Артроз — заболевание костных соединений человека с выраженным болевым синдромом, которое влияет на качество жизни человека. АСД для суставов — препарат нетрадиционной медицины, позволяющий. Содержание. Асд фракция 2 для суставов человека. Причины болей в суставах. Применении АСД фракции 2 для суставов. Лечит ли АСД суставы и можно ли таким образом вылечить артрит – на этот вопрос точного ответа нет. У АСД есть множество приверженцев, которые убеждают в эффективности и безопасности этого средства, призывая лечить им.
http://kitchensofdiablo.com/upload/opukhli_sustavy_golenostopa_chem_lechit2710.xml
http://panamlegalservices.com/admin/userfiles/kak_lechit_artroz_plechevogo_sustava_otzyvy2201.xml
gorecki.gda.pl/userfiles/kak_lechit_vospalenie_sukhozhiliia_loktevogo_sustava6752.xml
http://ethio3f.com/ehpea/userfiles/smeshchenie_sustava_kak_lechit9385.xml
http://www.oecbtb.org/userfiles/bolit_sustav_zapiastia_chem_lechit3903.xml
Состоит Биотрин из акульего жира, змеиного яда, пантов марала. Именно благодаря натуральности лекарство практически не имеет противопоказаний. Назначают средство при болях, отечности, хрусте и скованности.
асд лечит суставы
В своих отзывах хирурги и ортопеды особо выделяют правильную формулу, каждый компонент которой усиливает и дополняет общее воздействие на причину патологического процесса.Активные ингредиенты комплекса Биотрин: Змеиный яд много лет используется в народной медицине для быстрого устранения болевого синдрома. Акулий жир запускает выработку синовиальной жидкости, усиливает кровоток, насыщение тканей кислородом и полезными микроэлементами. Панты марала необходимы для подавления воспалительного процесса, предотвращения осложнений основного заболевания. Отдельно стоит выделить комплекс из 50-ти витаминов, усиливающих иммунитет и поддерживающих общее здоровье.
✔️ Болит тазобедренный сустав и отдает в ногу? Лечение и профилактика заболеваний тазобедренного сустава без операций и риска для здоровья . Вы здесь: Главная. Когда болит тазобедренный сустав и отдаёт в ногу: что делать? Наши услуги. Лечение суставов Лечение позвоночника Лечение. Как лечить артроз тазобедренного сустава? Для лечения артроза тазобедренного сустава используется консервативная терапия. Если желаемый результат после лечения отсутствует, назначают хирургическое вмешательство. Коксартрозом тазобедренного сустава называют дегенеративно-дистрофический процесс, протекающий в суставном сочленении головки бедренной кости и тазовой вертлужной впадины. Заболевание характерно в большей степени для людей среднего и пожилого возраста, хотя может возникать и у молодых, в. Артроз тазобедренного сустава — опасное заболевание. Оно причиняет немалые мучения, а в тяжелых случаях может полностью . Артроз тазобедренного сустава считается возрастной болезнью, хотя и молодые люди от него не застрахованы. Это заболевание причиняет немалые мучения, а в тяжелых случаях. Артроз тазобедренного сустава – распространенная болезнь, которая приводит к утрате трудоспособности и постоянным болям в ноге. Узнайте, каковы первые симптомы коксартроза, какие у него есть стадии и как эффективно вылечить эту. Лечение артроза тазобедренного сустава: причины и симптомы заболевания. Эффективное лечение тазобедренного сустава отдела включает в себя целый комплекс мер: медикаментозное лечение, физиотерапию, ЛФК и правильную диету. Анатомия тазобедренного сустава. Тазобедренный сустав является самым крупным и мощным суставом в человеческом организме, что обусловлено его функцией — именно на этот сустав приходится максимальная нагрузка во время прямохождения. Как следует из названия, сам сустав образован. Полная замена тазобедренного сустава. Во время этой процедуры хирург заменяет весь тазобедренный сустав . Медленно наклонитесь вперед, чтобы встать. Согните колени и бедра, сядьте. Продолжайте чередовать сидение и стояние. Выпады. Положите на пол гимнастический коврик. Встаньте в. Остеоартроз тазобедренного сустава: степени заболевания. . Остеоартроз тазобедренного сустава: причины болезни, симптомы, лечение. . Эндопротезирование колен в Чехии: гарантии, цены, реабилитация, отзывы и статистика. Узнать подробнее. Малоинвазивное эндопротезирование.
Как надо лечить рак легких фракцией АСД и АСД 2
Препарат АСД создан ученым Дороговым в 1947 году. Вещество предназначалось для усиления иммунной системы человека. Проведенные опыты позволили сделать новый фармацевтический продукт с уникальными антисептическими свойствами. Первоначально АСД производился из тканей лягушек. Изучение свойств мясокостной муки позволило заменить исходный продукт без потери целебных свойств. Фракция АСД-2, созданная ученым в результате нестандартного подхода к обработке исходного материала, применяется до нынешнего дня для лечения многих заболеваний, в том числе и онкологических.Подробная информация о раке легких находится здесь.
Свойства фракции АСД
Препарат представляет собой темно-коричневую жидкость с сильным неприятным запахом. Официально разрешено применять его только в ветеринарии. Успешное лечение рака легких у животных, дало возможность использовать этот уникальный препарат и для лечения рака у человека.
Фракция АСД обладает антисептическим, антибактериальным и адаптогенным свойством.
Структура вещества схожа с живой клеткой человека. Это дает возможность встраиваться и способствовать оздоровлению организма на клеточном уровне. Именно это наиважнейшее свойство фракции используется для лечения рака. Уникальной считается и способность АСД влиять на обменные процессы организма. Препарат, в отличие от большинства подобных продуктов, не действует на бактерии и микробов, а настраивает весь организм на правильную работу.
Исследования показали, что АСД-2 не вызывает привыкания и не дает каких-либо аллергических реакций. Трудности лечения могут быть только при приеме фракции, которая имеет слишком сильный неприятный аромат.
АСД при раке легких
По статистике, фракция при предраковых состояниях способна излечивать полностью. Ее применяют и внутрь и наружно. Несмотря на врачебный казус, при котором статус средства не позволяет лечить человека, большинство врачей советуют принимать АСД при раке.
Если в легких или бронхах обнаружены доброкачественные опухоли, или начальные новообразования раковых клеток, то фракция может приниматься по общей схеме. Рак легких второй стали требует увеличения приема лекарственного средства. При запущенных формах рака легких лечение фракцией АСД облегчает состояние больного.
Общая схема приема фракции
Препарат принимается натощак в разведенном водой виде.
Схема приема состоит из активной фазы и отдыха.
- В течение 5 дней принимать по 5 капель фракции в 100 г воды
- Перерыв 3 дня
- 3 дня по 10 капель
- Перерыв 3 дня
- 3 дня по 15 капель
- Перерыв 3 дня
- 3 дня по 20 капель
- Перерыв 3 дня
- 3 дня по 25 капель
- Перерыв 3 дня.
Дальнейший прием препарата рекомендован в дозировке 25 капель фракции на полстакана воды. Активная фаза 3 дня и такой же длительности перерыв. Срок приема неограничен. Требуется подтверждение анализами положительного результата лечения.
На ранней стадии рака легких рекомендуется принимать по чайной ложке АСД-2, разведенных в половине стакана воды, по 2 раза в сутки
Интенсивная схема
Применение АСД в качестве лечебного средства при раке легких снимает боль и останавливает рост раковой опухоли. Мощнейший адаптоген мобилизует внутренние силы организма на борьбу с раковыми клетками. Не стоит отказываться от других средств лечения рака легких. Фракция помогает легче перенести химиотерапию и восстановиться после хирургического вмешательства. Схожесть с собственными клетками человеческого организма сказывается на отсутствии побочных эффектов при приеме лекарства.
Как принимать АСД при раке легких, должен решить врач, в зависимости от степени развития болезни. Интенсивный прием препарата рекомендуется, начиная со второй стадии. Отзывы пациентов онкологических клиник, которые принимали фракцию по совету врачей, говорят о стабильно положительном результате.
Интенсивная схема лечения предусматривает четырехразовых прием АСД-2 в течение суток каждые 4 часа. Дозировка начинается с 5 капель, увеличиваясь каждую пятидневку на 5. Наивысшая доза приема составляет 50 капель за один раз. Длительность зависит от результата лечения. Не стоит отказываться от препарата, если анализы фиксируют качественные изменения состояния. Лечение может длиться годами. При снижении риска рецидива переходят на щадящий режим приема фракции. Возможно, что придется принимать АСД довольно длительный срок.
Щадящий режим приема
Фракция разводится спитым чаем. Заварку залить кипятком на второй раз и остудить. Разводить лечебное средство в половине стакана жидкости. Схема приема рассчитана на неделю. В первый день достаточно 3-х капель, и дальше с увеличением на 2 капли в течение 6 дней. Затем следует перерыв и еще одна неделя приема по такому же принципу. Далее недельный перерыв и повторение курса, но с первоначальной дозировкой от 5 капель. Если не возникает никаких ухудшений состояния, то следует отдохнуть месяц и после проведения анализов можно повторить полный курс лечения по щадящей схеме.
Меры предосторожности
Лечение рака легких фракцией АСД 2 может вызывать некоторые неприятные реакции организма. Они не опасны и не требуют прекращения приема препарата.
- Может наблюдаться отрыжка или вздутие живота. Рекомендуется выпивать по стакану кефира примерно через полчаса после приема.
- Количество выпиваемой жидкости в день должно быть увеличено до 2-3 литров. Это требуется для выведения из организма токсичных веществ. Полезно пить соки и компоты из брусники, клюквы и сухофруктов.
- Особых изменений в питании прием АСД не требует. Но будет полезно исключить из рациона жирные, острые и жареные блюда. Заменить на фрукты (гранат, яблоки), овощи (лук, свекла, чеснок) и каши.
- При длительном лечении фракцией может снижаться артериальное давление. Можно принимать стимулирующие препараты. Золотой корень, женьшень и другие природные средства помогут нормализовать давление.
- Иногда возможны почечные колики. Избежать этого помогут почечные травяные сборы.
Не нужно забывать о постоянном контроле состояния. Все изменения необходимо обсудить с врачом. Хотя сильных побочных эффектов у фракции не наблюдается, но общее состояния организма и течение заболевания могут потребовать изменения схемы приема или временного отказа от лечения АСД.
Лечение рака с применением АСД-2
Лечение рака с применением АСД-2
АСД – антисептик-стимулятор Дорогова – препарат, разработанный советским ученым А. В. Дороговым в 40-х годах прошлого века. АСД был разработан по заданию правительства с целью спасения и защиты человека от радиации. Оказалось, что препарат помогает и при тяжелейших формах кожных заболеваний, туберкулезе, истощении нервной системы, полиартрите, стенокардии. Я слышал такую легенду (возможно, это и правда, но информацию я нашел в единственном источнике, за точность которого не ручаюсь): «Препарат АСД долго не допускали в официальную фармакопею, но этому поспособствовал не кто иной, как Л. П. Берия, у которого раком болела мать. А. В. Дорогов с помощью своего средства вылечил женщину, Берия рассказал об этом Сталину, а уже тот дал указание министру здравоохранения А. Ф. Третьякову допустить лекарство к широкому применению. После смерти Сталина АСД был снова запрещен к применению в медицине, и с тех пор его разрешено использовать только в ветеринарии».
До сих пор препарат АСД (другое его название – «фракция-2», где цифра «2» показывает, что он модифицирован в ходе последующих исследований, то есть несколько изменен по сравнению с изобретением А. В. Дорогова) можно купить только в ветеринарных аптеках. Медики считают его обычным иммунным препаратом, повышающим защитные силы организма против болезней, в том числе, возможно, и против рака.
Получают АСД методом термического распада тканей животных, выпускается он в виде препаратов для наружного и внутреннего употребления. В ветеринарной медицине можно найти очень много описаний успешного применения АСД в лечении опухолей у животных, в лечении же человека препарат используется только неофициально, на страх и риск пациентов. Врачи-онкологи не признают этот метод.
Валерий Викторович Тищенко рекомендует применять препарат АСД-2 при лечении лимфогранулематоза по схеме, отраженной в табл. 1.
Таблица 1
Схема лечения лимфогранулематоза препаратом АСД-2
Принимают препарат с водой: примерно 70-150 мл воды на одну дозу (подбирать следует индивидуально). Общая допустимая доза – не более 120 капель в день, 30 капель за прием. Если одноразовую дозу сильно увеличивать, возможно обострение. В этом случае нужно немедленно остановить прием АСД-2 и начать его снова только через неделю в меньшей, безопасной дозировке.
После вскрытия флакона с препаратом хранить его нужно в холодильнике, в плотно закрытой емкости. Закрывать лучше притертой пробкой. Со временем препарат портится, приобретая темный цвет и сильный неприятный запах. Пользоваться таким препаратом нельзя. Вообще, АСД-2 на вкус не очень приятен, но это не должно пугать – ведь лекарства вовсе не должны быть сладкими и вкусными.
При раке легких В. В. Тищенко рекомендует комплексный прием АСД-2 в сочетании с настойкой болиголова. Принимать препараты нужно 4 раза в день, за час до еды, добавляя их в воду. Схема лечения представлена в табл. 2.
Дозировки препаратов нужно соблюдать очень строго. В первые две недели количество капель болиголова нужно увеличивать на одну каждый день, доведя к концу второй недели дозировку до 10 капель.
В. В. Тищенко указывает, что нужно смотреть на свое самочувствие и общее состояние, и если возникают какие-то нежелательные последствия, то дозы препаратов следует корректировать в сторону уменьшения. Одновременно три раза в день (12.00, 16.00 и 20.00) начинать принимать АСД-2 по схеме.
Таблица 2
Схема комплексного лечения при раке легких
Поскольку болиголов намного сильнее АСД-2, то, дойдя до 25 или 30 капель на прием (АСД-2), норму превышать не следует. Итого в день получится от 75 до 100 капель. Однако следует помнить, что существует индивидуальная переносимость препаратов, и потому необходимо руководствоваться одним правилом: передозировки недопустимы! Лекарство должно работать на выздоровление, а не на угнетение больного организма.
В дополнение к этим препаратам автор рекомендует принимать по 1 дес. ложке сосновой пыльцы, смешанной с медом в пропорции 1:1, за 15 минут до еды или через час после еды. Молоко и кефир во время приема АСД-2 рекомендуется ограничить, но можно пить на ночь. Желательно исключить чай и кофе, поскольку они нарушают кровообращение.
Большое внимание в своем лечении Валерий Викторович уделяет психологическому состоянию пациента. Лечение не должно угнетать, иначе никакие, даже самые сильные, препараты не помогут. Положительный настрой, надежда на излечение должны присутствовать обязательно.
Данный текст является ознакомительным фрагментом.
Продолжение на ЛитРесAmazon.com: Фракция АСД-2 (АСД) для ВНУТРЕННЕГО ПРИМЕНЕНИЯ 100 мл (А.
Дорогов) (для лечения ЖИВОТНЫХ и ЖИВОТНЫХ: иммуномодулятор, онкология): Все остальное- Убедитесь, что он подходит, введя номер своей модели.
- Фракция АСД-2 (АСД) для ВНУТРЕННЕГО ПРИМЕНЕНИЯ 100 мл (А. Дорогов) (для лечения ЖИВОТНЫХ и ЖИВОТНЫХ: иммуномодулятор, онкология)
Магазин — Габалда Скидки
КатегорииАвтомобиль, Запасные части, Двигатели и детали двигателя, Нагреватели двигателя и аксессуарыДетские товары, Безопасность, Ворота и дверные проемыОдежда, Обувь и ювелирные изделия, Мужчины, ЧасыОдежда, Обувь и ювелирные изделия, Мужчины, Часы, Карманные часыОдежда, Обувь и ювелирные изделия, Мужчины, Часы, Наручные ЧасыОдежда, обувь и ювелирные изделия, аксессуары для обуви, ювелирных изделий и часов, аксессуары для часов, шкафы и футлярыОдежда, обувь и ювелирные изделия, женщины, современное искусство и дизайнер, часыОдежда, обувь и ювелирные изделия, женщины, часы, наручные часыЗдоровье и дом, витамины и пищевые добавки, Добавки, Хондроитин и глюкозамин, Комбинации Промышленные и научные, Гидравлика, Пневматика и Сантехника, Насосы, Насосы с гибким рабочим колесом Почтовые ящики, Ящики для рассылокPatio, Газон и сад, Ферма и ранчо, Уход за птицей, Принадлежности для птицеводства tio, Газон и сад, Уличный сад, Птицы на заднем дворе и дикая природа, Птицы, Аксессуары для птичников И дикая природа, Птицы, Кормушки, Газон и сад, Открытый сад, Птицы на заднем дворе и дикая природа, Птицы, FoodPatio, Газон и сад, Уличный декор, Птицы на заднем дворе и дикая природа, Птицы, Еда, Семена птиц, Газон и сад, Уличный сад, Птицы на заднем дворе и дикая природа, Птицы, Еда, Мучные черви, Газон и сад, Уличный сад, Водные сады и пруды, Насосы и циркуляция, Насосы, Газон и сад, Уличный сад, Водные сады и пруды, Водоочистка Патио, Газон и сад, Веселый питомец, Кормушки для семян, Специальные кормушки, Принадлежности для животных без / не для домашних животных, Принадлежности для птиц, Принадлежности для домашних животных, Птицы, Клетки и аксессуары Ванны для птицТовары для домашних животных, Птицы, Клетки и аксессуары, Крышки для птичьих клеток ies, Птицы, Клетки и аксессуары, Клетки для животных, Птицы, Клетки и аксессуары, Лестницы, Товары для домашних животных, Птицы, Клетки и аксессуары, Гнезда Птицы, клетки и аксессуары, качелиЗаводы для домашних животных, Птицы, переноски Товары для здоровьяЗаводы для домашних животных, птицы, игрушкиПринадлежности для домашних животных, птицы, лакомстваПринадлежности для домашних животных, купите 25 долларов Сэкономьте 5 долларов на Kaytee, Еда, рыба и экзотические товары Кролики, товары для домашних животных, купите 25 долларов, сэкономьте 5 долларов на Kaytee, еду, мелких птиц Кровати и мебель, когтеточки s, Кровати и мебель, Подоконники, товары для домашних животных, кошки, переноски и коляски, переноски, переноски с мягкими стенками Кошки, товары для здоровьяЗаводы для домашних животных, кошки, товары для здоровья, уход за бедрами и суставами Игрушки для мышей и животныхПринадлежности для домашних животных, собаки, переноски и товары для путешествий, автомобильные дорожные аксессуары, чехлы на сиденья , Собаки, Двери, Ворота и ПандусыЗаводы для домашних животных, Собаки, Уход за когтями, Товары для животных, Собаки, Товары для здоровья Тренировочные коврики и подносыЗоотовары, собаки, игрушки, ба llsТовары для домашних животных, собаки, игрушки, жевательные игрушкиПринадлежности для домашних животных, собаки, игрушки, плюшевые игрушки , Закуски, Товары для домашних животных, Собаки, Лакомства, Сырая кожа, Товары для животных, Рыба и водные животные Рыбы и водные животные, Товары для аквариумных домашних животных, Рыбы и водные животные, Аквариумный декор, Фон для домашних животных, Рыбы и водные животные, Аквариумный декор, Коралловые украшения Принадлежности, Рыба и водные животные, Аквариумный декор, Живые растения, товары для домашних животных, Рыбы и водные животные, Аквариум, Орнаменты, Товары для домашних животных, Рыбы и водные животные, Аквариумный декор, Пластиковые растения, Товары для домашних животных, Рыбы и водные животные, Аквариум © cor, Разделители для аквариумовЗоотовары, Рыба и водные питомцы, Aquari um Обогреватели Товары для домашних животных, Рыбы и водные животные, Вытяжки для аквариумов Водные животные, Аквариумные насосы и фильтры, Воздушные насосыЗаводы для домашних животных, Рыба и водные животные, Аквариумные насосы и фильтры, Аксессуары для фильтров Принадлежности для насосов Принадлежности для домашних животных, Рыба и водные животные, Насосы и фильтры для аквариумов, Водяные насосыЗаводы для домашних животных, Рыбы и водные животные, Подставки для аквариумов Домашние животные, Субстрат для аквариума, Товары для песка, Рыбы и водные питомцы, Наборы для тестирования аквариумов Домашние животные, Аквариумы и миски для рыб И водные домашние животные, Автоматические кормушкиЗаводы для домашних животных, Рыба и водные питомцы, Резервуары для разведенияЗоотовары, Рыба и водные домашние животные, Корм Контент — Основа для собак, Корм для собак, Товары для животных, Рептилии и амфибии И земноводные, Тепловые лампы и маты для террариумов, Тепловые коврики товары, мелкие животные, дома и места обитания, загоны и хижины для улицы, товары для животных, лучшие товары для животных, товары для животных, лучший выбор на Amazon. Спортивные часы И товары для дома, Электроэнергетические и ручные инструменты, Ручные инструменты, Наборы розеток и розеток, Розетки для индивидуальных приводов, Инструменты для привода с тройным квадратом и предметы домашнего обихода, Электроэнергетические и ручные инструменты, Ручные инструменты, Наборы инструментов И аксессуары, Аккумуляторы и зарядные устройства, Зарядные устройства и преобразователи, Зарядные устройства
ПоискОценка реакции рака простаты in vivo с использованием количественной ультразвуковой характеристики ультразвуковых рассеивающих свойств | BMC Cancer
Клеточная культура
Клетки рака простаты человека (PC3), полученные из Американской коллекции типовых культур (ATCC, Manassas VA, USA), культивировали в RPMI-1640 (Wisent Inc., St Bruno, Canada) среды с добавлением 5% антибиотика пенициллина / стрептомицина (Sigma-Aldrich) и 10% фетальной бычьей сыворотки (Sigma-Aldrich, St Louis, MO, USA). Клетки подвергали воздействию 5% CO2-HEPA-фильтрованного воздуха и инкубировали при 37 ° C. Затем конфлюэнтные клетки собирали при комнатной температуре с 0,02% EDTA и 0,25% растворами трипсина. Осадки клеток выделяли и центрифугировали при 4 ° C в течение 10 минут перед ресуспендированием в Mg + / Ca + фосфатно-солевом буфере Дульбекко (DBPS).
Модель животного
Самцы мышей CB-17 с тяжелым комбинированным иммунодефицитом (SCID) в возрасте от пяти до шести недель, полученные от Charles River Inc.(Уилмингтон, Массачусетс, США). Общий объем суспензии клеток PC3 5 × 10 6 вводили подкожно в нижнюю правую заднюю ногу каждого животного. Перед экспериментами опухоли выращивали в течение примерно 2–3 недель до достижения максимального диаметра 7–10 мм.
Мышей анестезировали путем внутрибрюшинной инъекции смесью кетамина (100 мг / кг веса тела), ксилазина (5 мг / кг веса тела) и ацепромазина (1 мг / кг веса тела) (Sigma, Burlington, ON, Canada ) и 2% вентилируемый кислородом изофлуран. Чтобы обеспечить оптимальную температуру тела мышей, во время экспериментов использовались как нагревательные лампы, так и грелки, чтобы держать мышей в тепле. За всеми животными внимательно следили на предмет нарушения дыхания и вводили кислород животным, которые находились в тяжелом состоянии.
Заявление об этике
Все экспериментальные процедуры на животных проводились в соответствии с руководящими принципами Канадского совета по уходу за животными. Протоколы экспериментов были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных Центра науки здравоохранения Саннибрук.За животными наблюдали визуально, и с ними обращались с большой осторожностью, чтобы свести к минимуму страдания или боль на протяжении всех экспериментальных процедур. Все животные, использованные в исследовании, были умерщвлены в конце исследования либо путем шейного вывиха (что считается стандартными операционными процедурами в сравнительных исследованиях) с последующей передозировкой анестетика.
Дизайн эксперимента
Реакция опухоли на лечение ГТ и УЗМБ оценивалась через 24 часа. Процедуры включали только HT (10, 40 и 50 мин), только микропузырьки и комбинацию процедур USMB и HT.Для каждого условия лечения использовали 3-5 мышей.
Ультразвук и обработка микропузырьками
Микропузырьки Definity (1% (об. / Об.)) (Газ перфторпропан / липосомальная оболочка, Lantheus Medical Imaging, Inc., Северная Биллерика, Массачусетс, США) стимулировали давлением 246 кПа и 570 кПа в США. использованный для этого исследования. Микропузырьки создавали и активировали с помощью устройства для смешивания флаконов (Lantheus Medical Imaging, North Billerica, MA, USA) при 3000 об / мин в течение 45 с перед инъекцией животным. Концентрации микропузырьков рассчитывали по общему объему крови животного, рассчитанному по массе животного.Мышей, которых лечили с помощью микропузырьков и комбинированного лечения микропузырьками / HT, снабжали катетером для хвостовой вены, чтобы можно было вводить физиологический раствор и микропузырьки. После инъекции микропузырьков мышам делали вторую инъекцию 0,1 мл физиологического раствора для промывания катетера в хвостовой вене.
Американская терапевтическая система состояла из цифровой системы сбора данных (Acquiris CC103, Agiulent Technologies NY), усилителя (RPR4000, Ritec Inc.), генератора сигналов (AWG530, Tektronix) и преобразователя с частотой 500 кГц и 28.Диаметр апертуры 6 мм. Во время лечения USMB каждую мышь устанавливали на специальный столик, который частично погружали в водяную баню с температурой 37 ° C таким образом, чтобы опухоль находилась в естественном пиковом фокусе датчика US. Заднюю ногу, несущую опухоль, каждого животного подвергали ультразвуковому облучению сразу после инъекции МБ в пределах половины максимального пика акустического сигнала. Животных подвергали 16-периодному тональному импульсу с частотой 500 кГц с частотой повторения импульсов 3 кГц, в результате чего средний рабочий цикл составлял 0.25% на итого 5 мин. Каждые 2 с повторялись акустические всплески, позволяющие кровеносным сосудам наполняться МБ между озвучиванием, вызывая разрыв пузырей in vivo.
Лечение гипертермии
Животным вводили HT-лечение через 5 часов после лечения USMB. Животных помещали в изготовленные на заказ пробирки для сокола объемом 50 мл, состоящие из отверстия в дне, служащего вентиляционным отверстием, отверстия в открывающейся крышке, через которое проходили ноги и хвост, и полоски липучки. Хвост и лечебную ногу каждой мыши фиксировали с помощью ленты и прикрепляли к индивидуальной пластине с соответствующими креплениями на липучках.Планшет погружали в водяную баню с температурой 43 ° C и удерживали на месте с помощью удлинительного зажима с тремя зубцами, прикрепленного к опорной стойке. Затем ногу с опухолью каждого животного погружали в воду на соответствующее время обработки 10, 40 или 50 минут.
Сбор и анализ данных
Данные US-RF и B-режима были собраны за 24 часа до и после всех процедур с использованием системы визуализации VEVO 770 (VisualSonics Inc., Торонто, Канада). Система оснащалась одноэлементным преобразователем РМВ-710Б.Заявленные характеристики высокочастотного преобразователя: центральная частота 25 МГц, фокусная глубина 15 мм и f / 2,1 [21, 22]. Измеренная центральная частота составила 20 МГц, что обеспечило полосу пропускания от 10 МГц до 25 МГц -6 дБ. Измеренные осевое и поперечное разрешение составили 54 мкм и 149 мкм соответственно. Для получения объемных радиочастотных данных мы использовали следующие настройки сбора данных: размер шага 0,2 мм и усиление 20 дБ. Размер шага — это расстояние по высоте (вне плоскости) между последовательными объемными кадрами RF, а коэффициент усиления — это коэффициент усиления усилителя приемника для сигнала RF.
Оценка параметра обратного рассеяния
Мы выбрали десять различных областей интереса (ROI) опухоли для спектрального анализа. Эти области интереса соответствуют 10 плоскостям визуализации в объеме опухоли. Области интереса были выбраны в центре опухоли, составляя примерно 2/3 площади поперечного сечения опухоли (примерно 5–10 × 5–10 мм в плоскости и 5–10 мм в плоскости). Спектральные параметры QUS оценивались для каждого кадра (10 кадров на животное / опухоль) и затем усреднялись по сканированию в УЗИ.
Мы использовали метод скользящего окна для получения спектрально-параметрических изображений QUS, которые отражают пространственное распределение акустических свойств внутри опухоли. Было показано, что эти свойства являются потенциальными визуализирующими биомаркерами гибели клеток, поскольку опухоль реагирует на различные режимы лечения рака. Мы использовали скользящее окно размером 10 × 10 λ с перекрытием 80% между соседними окнами как в осевом, так и в боковом направлениях. Здесь λ — длина волны акустических волн. Размер окна был выбран таким образом, чтобы в нем было достаточно рассеивателей для надежной спектральной оценки при сохранении текстуры изображения.Функция стробирования Хеннинга была применена к отдельным строкам РЧ сканирования в окне. Впоследствии спектр мощности стробированных РЧ-сигналов в пределах окна оценивался с использованием метода быстрого преобразования Фурье (БПФ). Для эффективной оценки спектральных параметров оценивался усредненный спектр мощности в пределах окна. Чтобы исключить системные эффекты УЗИ, нормированный спектр мощности (NPS) был оценен с использованием эталонного фантомного метода [23]. Эталонный фантом состоял из стеклянных шариков по 3 штуки.Диаметром 3 ± 2,2 мкм, погруженные в агар. Измеренные коэффициент затухания и скорость звука эталонного фантома составили 0,477 дБ / МГц / см и 1540 м / с соответственно. Эталонный фантом был сканирован с использованием той же системы США и настроек датчика.
Поскольку акустические волны ослабляются при распространении через промежуточные слои ткани, это может повлиять на оценку параметра обратного рассеяния. Коррекция затухания была выполнена с использованием предполагаемых коэффициентов затухания 2,0 дБ / см / МГц и 0.6 дБ / см / МГц для кожи и опухоли соответственно [24]. Ручная сегментация была выполнена на изображениях УЗИ в B-режиме для определения области интереса опухоли и границы раздела вода-кожа. Мы приняли однородную толщину обшивки 0,5 мм. Полоса частот анализа составляет примерно от 10 МГц до 25 МГц.
Свойства акустического рассеивателя, которые включают средний диаметр рассеивателя (ASD) и среднюю акустическую концентрацию (AAC), были получены путем сопоставления измеренного коэффициента обратного рассеяния (BSC) с теоретически полученным BSC.{\ left \ {4 \ left ({\ alpha} _s (f) — {\ alpha} _r (f) \ right) \ left (R + \ frac {\ Delta z} {2} \ right) \ right \} }, $$
(1)
, где S s ( f ) и S r ( f ) — это спектры от образца и эталонного фантома соответственно. α S и α R — коэффициенты ослабления образца и эталонного фантома соответственно.2 \) представляет собой среднеквадратичное изменение акустического импеданса между рассеивателем и фоновой средой [25]. F (f, a eff ) — форм-фактор, который описывает изменения в BSC в зависимости от частоты [25]. Были оценены две модели форм-фактора, которые включают сферическую гауссову модель (SGM) и модель сферы, заполненной жидкостью (FFSM). Расчетный диаметр рассеивателя соответствует диаметру наиболее подходящего BSC.
Гистопатология
Мышей умерщвляли в конечных точках эксперимента, и все образцы опухолей немедленно вырезали.Образцы опухолей разделяли на половины, причем одна половина была зафиксирована в оптическом геле, затем была быстро заморожена жидким азотом, а другая половина была зафиксирована в 10% формалине с нейтральным буфером (Fisher Scientific Canada, Оттава, Онтарио, Канада). Образцы, фиксированные формалином, хранили до 48 ч при комнатной температуре, затем переносили в 70% раствор этанола и хранили при 4 ° C в течение 24 ч. При подготовке к окрашиванию образцы опухоли заключали в парафиновые блоки. Образцы окрашивали с помощью терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы dUTP для мечения на конце (TUNEL) для обнаружения апоптотических клеток и гематоксилином и эозином (H&E) для идентификации ткани и клеточной структуры.Все окрашивание проводилось Программой патологических исследований, Университетская сеть здравоохранения, Торонто, Онтарио, Канада.
Образцы тканей были оцифрованы и сняты с помощью микроскопа Leica CD100 (видеокамера Leica DC100 с разрешением 1 мегапиксель, ПК с частотой 2 ГГц с программным обеспечением Leica IM1000) с объективом с 20-кратным увеличением.
Статистический анализ
Статистический анализ проводился с использованием GraphPad Prism (GraphPad Software, Ла-Хойя, Калифорния, США) с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим выбранным сравнительным тестом Бонферрони. P-значения ( p <0,05) считались статистически значимыми и отмечены звездочкой (*).
5-FU | 5-фторурацил (противораковое средство) |
6-MP | 6-меркаптопурин (противораковое средство) |
6- TG | 6- TG Тиогуанин (противораковый препарат) |
AA | Анапластическая анемия |
ABC | Продвинутый рак груди |
ABMT | Аутологичная трансплантация костного мозга |
ADR | Неблагоприятная реакция на лекарства |
AE | Неблагоприятное событие |
AFP | Альфафетопротеин — напр.экспрессируется опухолями половых клеток и другими видами рака |
СПИД | Синдром приобретенного иммунодефицита |
ALAT | Аланинаминотрансфераза / алининтрансаминаза |
ALCL | Анапластическая крупноклеточная лимфома |
ALL | Острый лимфобластный лейкоз |
ALT | Аланинаминотрансфераза |
AMKL | острый мегакариоцитарный лейкоз |
AML | Острый миелоидный лейкоз |
ANC | Абсолютное количество нейтрофилов |
ANED | Жив без признаков болезни |
ANLL | Острый нелимфатический лейкоз |
ARMS | Альвеолярная рабдомиосаркома |
ASR | Стандартизированный по возрасту коэффициент (заболеваемость) |
AUC | Площадь под кривой |
B-ALL | B-клеточный острый лимфобластный лейкоз |
BAER | слуховая вызванная реакция ствола мозга |
BCC | Базально-клеточная карцинома |
BID / BD | Дважды в день (bis in die) |
BM | Костный мозг |
BM | Мониторинг крови (например, для глюкозы) |
BMJ | Британский медицинский журнал |
BMR | Базальная скорость метаболизма |
BMT | Пересадка костного мозга |
BNF | Британский национальный формуляр |
BP | Артериальное давление |
BRM | Модификатор биологического ответа |
BSA | Площадь поверхности тела |
BSE | Самостоятельное обследование груди |
Bx | Биопсия |
C / O | Жалоба на |
C / W | Продолжить с |
C1 — C7 | Шейные позвонки (например, позвоночник)C7 = седьмой шейный позвонок) |
Ca | Рак; карцинома |
Ca | Кальций |
ЗВОНИТЕ | Общий ВСЕ |
CAT | Компьютерная аксиальная томография (сканирование) |
куб.см | Кубический сантиметр |
CCF | Застойная сердечная недостаточность |
CCR | Непрерывный полный возврат |
CEA | Карциноэмбриональный антиген (онкомаркер) |
CGH | Сравнительная геномная гибридизация — цитогенетический метод |
CGL | Хронический гранулоцитарный лейкоз |
cGy | Centi Grey (единица излучения) |
CHF | Застойная сердечная недостаточность |
CLL | Хронический лимфолейкоз |
см | сантиметр — 0.01 метр |
CML | Хронический миелоидный лейкоз |
CMML | хронический миеломоноцитарный лейкоз |
CMV | Cytomegalo virus |
ЦНС | Центральная нервная система — мозг и позвоночник |
CPM | Циклофосфамид (противораковое средство) |
СЛР | Сердечно-легочная реанимация |
CR | Полное возвращение / полный ответ |
CRA | Сотрудник по клиническим исследованиям |
CRC | Колоректальная карцинома |
CRF | Формы отчетов о болезни |
CRF | Хроническая почечная недостаточность |
CRO | Контрактная исследовательская организация |
CSF | Спинномозговая жидкость |
CSF | Колониестимулирующий фактор |
CT | Компьютерная аксиальная опухоль (сканирование) |
CT | Химиотерапия |
CTC | Общие критерии токсичности |
CTCL | Кожная Т-клеточная лимфома |
CTO | Управление клинических испытаний |
CTX | Исключение для проведения клинических испытаний |
CUP | Рак неизвестного первичного / первичного рака неизвестного происхождения |
CVA | Сердечно-сосудистое нарушение (инсульт) |
CVC | Центральные венозные катетеры |
CVP | Центральное венозное давление |
CXR | Рентген грудной клетки |
D / C | Напряжение |
D / H | История лекарств |
Д / Ш | Обсуждается с |
DCIS | Ductal Carcinoma In situ — тип рака груди |
DDAVP | Десмопрессиновый тест для определения осмоляльности мочи |
DDx | Дифференциальная диагностика |
DFI | Интервал отсутствия заболеваний |
DFS | Выживаемость без болезней — время без болезни до рецидива или последнего наблюдения |
DI | Начальный диабет |
дл | децилетр — 0.01 литр |
DLBCL | Диффузная большая B-клеточная лимфома |
DLCL | Диффузная крупноклеточная лимфома |
DLS | Дата последнего посещения |
DLT | Токсичность с ограничением дозы — определяется исследованиями фазы 1 |
DMC | Комитет по мониторингу данных |
ДНК | Дезоксирибонуклеиновая кислота |
ДНК | Не посещал (клиника) |
DNR | Не возобновлять |
DOA | Dead on Arival |
Dx | Диагностика |
EBM | Доказательная медицина |
EBV | Вирус Эпштейна-Барра |
ЭКГ | Электрокардиограмма — сканирование сердца |
EDTA | этилендиаминтетрауксусная кислота — используется для измерения функции почек |
ЭЭГ | Электроэнцефалограмма — сканирование мозга |
EFS | Выживание без событий — время от постановки диагноза до определенных событий (например, рецидива или смерти). |
EJC | European Journal of Cancer |
EMC | Внескелетная миксоидная хондросаркома |
EMUO | Осмоляльность мочи ранним утром (оценка концентрации мочи) |
ЛОР | Ухо нос горло |
СОЭ | Скорость оседания эритроцитов |
ETS | Экологический табачный дым |
F / H | Семейная история |
FAB | Французско-американская и британская классификационная схема лейкемии |
FBC | Полный анализ крови |
FEV | Принудительный объем отхаркивающего средства (легочная проба) |
FFA | Для дальнейшего назначения |
FIGO | Federation Internat.Gyn. Обст. (Гинекологическая система стадирования FIGO) |
FISH | Флуоресценция in situ Гибридизация |
FMTC | Семейная медуллярная карцинома щитовидной железы |
FNA | Тонкая игольчатая аспирация — вид двупунктуры с использованием тонкой иглы (или FNAB) |
FU | Последующая деятельность |
FVC | Принудительная жизненная емкость |
г | грамм — единица веса |
G-CSF | Фактор, стимулирующий колонии гранулоцитов, способствует выработке лейкоцитов |
GA | Общий наркоз |
GCP | Надлежащая клиническая практика (руководящие принципы) |
GCT | Опухоль зародышевых клеток |
GCT | Гигантоклеточная опухоль Контекст: опухоли костей |
GFR | Громерулярная скорость фильтрации |
GI | Желудочно-кишечный тракт |
GIST | Желудочно-кишечные стромальные опухоли |
GM-CSF | Фактор, стимулирующий колонии гранулоцитов и макрофагов |
GPR | Хорошая частичная ремиссия |
GU | Мочеполовая и мочеполовая |
GvHD | Болезнь трансплантата против хозяина |
Гр | Грей (единицы излучения) |
H&E | Гематоксилин и эозин (краситель) |
H / O | История |
Hb | Гемоглобин |
HCC | Гепатоцеллюлярная карцинома |
ХГЧ | Хорионический гонадотропин человека (гормон) |
HCL | Волосатоклеточный лейкоз |
HCO3 | Бикарбонат |
HD | Болезнь Ходжкина (лимфома) |
HD | Высокая доза |
HDC | Высокодозная химиотерапия |
ВИЧ | Вирус иммунодефицита человека |
HL-A | Антигены, ассоциированные с лейкоцитами человека (соответствие HL-A для BMT) |
HNSCC | Плоскоклеточный рак головы и шеи |
HNPCC | Наследственный неполипозный колоректальный рак |
ВПЧ | Вирус папилломы человека — причастен к некоторым гинакологическим раковым заболеваниям |
HR | Высокий риск |
ЗГТ | Заместительная гормональная терапия |
HTLV | Вирус Т-клеточной лейкемии-лимфомы человека |
I-131 | Радиоактивный йод |
МКБ | Международная классификация болезней (система кодирования) |
ICDO | Международная классификация болезней по онкологии (система кодирования) |
ICF | Межклеточная жидкость |
ICU | Отделение интенсивной терапии |
ИЛ2 | Интерлейкин2 |
IM | Внутримышечно — в мышцу |
IMRT | Лучевая терапия с модуляцией интенсивности |
INSS | Международная система стадирования нейробластомы |
ITU | Отделение интенсивной терапии |
МЕ | Международные единицы |
IV | Внутривенно — в вену |
IVP | Внутривенная пиелограмма — вид рентгена после инъекции йодного красителя |
JCO | Журнал клинической онкологии |
K + | Калий |
кг | Килограмм — тысяча граммов |
л | литр — единица объема |
L1 — L5 | Поясничные позвонки 1-5 (например, позвоночник.L1 = 1-й поясничный позвонок) |
LCH | Гистиоцитоз из клеток Лангерганса |
LCIS | Лобулярная карцинома In situ — тип рака молочной железы |
ЛДГ | Лактодегидрогеназа — высокие уровни коррелируют с объемом опухоли при некоторых формах рака |
LMM | Лентиго Maligna Меланома |
LMP | Низкий злокачественный потенциал (контекст: опухоли яичников) |
LN | Лимфатический узел |
LP | Люмбальная пункция |
LVEF | фракция левожелудочковой фекции — функциональный тест сердца |
LVSF | Фракция укорачивания левого желудочка — функциональный тест сердца |
Lx | Лампэктомия |
м | метр (единица длины) |
M / H | История болезни |
MAB — mAb | Моноклональные антитела |
MDR | Множественная лекарственная устойчивость |
MDS | Миелодиспластический синдром |
МУЖЧИНЫ | Множественная эндокринная неоплазия — (семейная) a.к.а. FMEN |
мэкв / л | миллиэквивалент на литр |
метастазы | Метастазы (где опухоль распространилась на вторичные участки) |
мг | магний |
мг | миллиграмм — 0,001 грамм |
MI | Инфаркт миокарда |
mIBG | Радиоактивный йод Метаидобензогуанидин (сканирование mIBG или терапия mIBG). |
мл | миллилитр 0,001 литр |
MM | Злокачественная меланома |
мМ | миллимоль |
мм | миллиметр — 0,001 метра |
MM | Злокачественная миеланома |
MM | Множественная миелома |
мОсм | миллиосмоль |
MPNST | Злокачественная опухоль оболочки периферического нерва |
МПО | Медицинская и детская онкология (журнал) |
МРТ | Магнитно-резонансная томография (сканирование) |
MRT | Злокачественная рабдоидная опухоль |
MSSU | Средний образец мочи |
MTD | Максимально переносимая доза — исследования фазы 1 |
MTX | Метотрексат (противораковое средство) |
MUD | Соответствующий неродственный донор — для трансплантации костного мозга |
Mx | Мастэктомия |
Н / Д | Тошнота и рвота |
Na + | Натрий |
NAD | Отклонение от нормы не обнаружено |
NBCCS | Синдром невоидной базальноклеточной карциномы |
NBM | Нет через рот |
NED | Нет признаков болезни |
нг | нанограмм — 0.000000001 грамм |
НХЛ | Неходжкинская лимфома |
NK | Естественные киллерные клетки (большие лимфоциты, часть иммунной системы) |
NK | Неизвестно |
NM | Узловая меланома |
ЯМР | Ядерный магнитный резонанс (сканирование) |
NMSC | Немеланомный рак кожи |
NOS | Не указано иное (см. ICDO) |
NPC | Рак носоглотки |
NRSTS | Нерабдомиосаркома Саркома мягких тканей |
NSCLC | Немелкоклеточный рак легкого |
NSE | Нейрон-специфическая энолаза — нейральный маркер |
NSR | Несущественный результат |
NSR | Нормальный синусовый ритм |
O / E | При осмотре |
ONB | Обонятельная нейробластома |
OS | Общая выживаемость |
OS | Остеогенная саркома (контекстные опухоли костей) |
PBSC | Стволовые клетки периферической крови (см. PBSCT) |
PBSCH | Сбор стволовых клеток периферической крови |
PBSCR | Спасение стволовых клеток периферической крови (трансплантат) |
PBSCT | Трансплантация стволовых клеток периферической крови |
PD | Прогрессирующая болезнь |
PDQ | Запрос данных врача (CancerNet) |
PET | Позитронно-эмиссионная томография — сканирование после небольшой радиоактивной инъекции. |
ПЭТ | Эндокринная опухоль поджелудочной железы |
PFS | Выживаемость без прогрессирования |
пг | пикограмм — 0,000000000001 грамм |
pH | концентрация водород-ионов — кислота / щелочь |
PH | Прошлая история |
PLB | Первичная лимфома кости |
PNET | Примитивная нейроэктодермальная опухоль Контекст: Опухоли ЦНС |
PNET | Периферическая нейроэктодермальная опухоль Контекст: Опухоли костей — см. Ewing’s tu |
PNS | Периферическая нервная система — нервная система за пределами головного мозга и позвоночника. |
PR | Частичный ответ / частичная ремиссия |
PR | в прямую кишку |
prn | по мере необходимости |
prn | при необходимости (pro re nata) |
PSA | простатоспецифический антиген — тест PSA, используемый в скрининге на рак простаты |
PUD | Периуретральная диатермия (связанная с поверхностным раком мочевого пузыря) |
QALY | Год жизни с поправкой на качество |
qid | Четыре раза в день (четверть в день) |
QoL | Качество жизни |
RBC | Количество эритроцитов / количество эритроцитов |
ПКР | Почечно-клеточная карцинома |
РКИ | Рандомизированное контролируемое исследование |
RFS | Выживаемость без рецидива — время от постановки диагноза до рецидива или смерти. |
RIGS | Радиоиммунологическая хирургия |
RMS | Рабдомиосаркома |
РНК | рибонуклеиновая кислота |
RT | Лучевая терапия |
RTPCR | Полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой |
Rx | Лечение |
SA | Площадь поверхности (см. BSA) |
SAE | Серьезное нежелательное явление |
SC | Подкожно |
SCC | Плоскоклеточный рак |
SCLC | Мелкоклеточный рак легкого |
SD | Стабильная болезнь |
SDV | Проверка исходных данных |
SGOT | Глутаминовая щавелевоуксусная трансаминаза сыворотки — тест функции печени |
SGPT | Глутаминовая пировиноградная трансаминаза сыворотки — тест функции печени |
SH | Социальная история |
SHO | Старший дежурный |
SIADH | Синдром несоответствующего антидиуретического гормона |
SNP | Полиморфизм одиночных нуклеотидов |
SOB | Одышка |
SSM | Меланома поверхностного распространения |
T1 — T12 | Грудные позвонки 1-12 (например, позвоночник.T10 = десятый грудной позвонок) |
ТАМ | опухолевые макрофаги |
TBI | Облучение всего тела |
TCC | Переходно-клеточная карцинома (обычно рак мочевого пузыря) |
TCP | Тромбоцитопения |
tds / tid | Трижды в день (тер в день) |
TNF | Фактор некроза опухоли |
TNM | Система стадирования — первичная опухоль |
TPN | полное парентеральное питание |
TRK | Транскетолаза |
U & Es | Мочевина и электролиты |
UA | Анализ мочи |
мкг | мкг — 0.000001 грамм |
ULN | Верхние пределы нормы |
ИВД | Инфекция верхних дыхательных путей |
US | Ultasound (сканирование) |
UTI | Инфекция мочевыводящих путей |
UVR | Ультрафиолетовое излучение |
VEF | Фракция выброса желудочков (проверка функции легких) |
VM-26 | Тенипозид (противораковое средство) |
VMA | Ваниллилминдальная кислота |
VP-16 | Этопозид (противораковое средство) |
WBC | Количество лейкоцитов |
WCC | Количество белых клеток |
WM | Макроглобулинемия Вальденстрема |
XRT | Лучевая терапия (внешняя) |
YST | Опухоль желточного мешка — (также известная как.опухоль зародышевых клеток) |
Интегративная геномика идентифицирует конвергентный молекулярный подтип, который связывает эпигеномные с транскриптомными различиями при аутизме
Интеграция многомерных данных из ASD и контрольного мозга
Мы интегрировали ранее опубликованные наборы данных по экспрессии мРНК 9 , экспрессии miRNA 12 , метилирование ДНК 11 и ацетилирование гистонов 10 из когорты из 48 ASD и 45 контрольных мозгов (дополнительные данные 1 и рис.1а). Мы проанализировали только образцы, происходящие из лобной и височной коры, потому что предыдущие исследования показали, что нерегулируемые функции ДМПП преимущественно локализуются в коре головного мозга и существенно ослабляются в мозжечке. Для экспрессии мРНК и миРНК мы использовали нормализованные количественные показатели генов и сводную статистику дифференциальной экспрессии из предыдущих исследований 9,12 («Методы»).
Для метилирования ДНК мы использовали нормализованные количественные оценки зонда из предыдущего исследования 11 и свернули измерения уровня зонда на промоторы гена 21880 и тела гена 24458, чтобы облегчить сравнение между метилированием и экспрессией («Методы»).Первоначальный анализ дифференциального метилирования идентифицировал 2578 и 1262 дифференциально метилированных промоторов и генных тел, соответственно, с FDR <10% («Методы», дополнительный рисунок 1a, b и дополнительные данные 4). Гены с дифференциальным метилированием промотора в значительной степени отличаются от генов с дифференциальным метилированием тела гена (Supplementary Fig. 1e, f). Тем не менее, нагрузки для каждого образца по первому основному компоненту дифференциального промотора и метилирования генных тел были почти идентичны (дополнительный рис.1d) и не коррелирует с какими-либо потенциальными искажающими факторами (дополнительный рис. 1c), указывая на согласованный регуляторный механизм.
Для ацетилирования гистонов мы количественно определили согласованные пики h4K27ac, идентифицированные в предыдущем исследовании 10 во всех ASD и контрольных образцах, включая образцы, отмеченные как атипичные в предыдущем исследовании 10 («Методы»). Первоначальный анализ дифференциального ацетилирования выявил 2156 дифференциально ацетилированных областей с FDR <20% («Методы», дополнительный рис.2а и дополнительные данные 5). Хотя это было меньше дифференциально ацетилированных областей, чем было идентифицировано ранее (дополнительный рис. 2b), мы показываем, что это истощение является артефактом гетерогенности подтипа в образцах ASD (см. Ниже раздел «Подтип-специфические различия ацетилирования гистонов при ASD»).
Идентификация двух молекулярных подтипов РАС
В предыдущих молекулярных исследованиях 9,10,11,12 мы заметили, что примерно две трети образцов мозга РАС сгруппированы вместе на основе дифференциального сигнала для каждого набора данных.Чтобы формально оценить молекулярную гетерогенность ASD в четырех различных наборах данных, мы использовали SNF 17 для интеграции дифференциальной экспрессии мРНК, экспрессии miRNA, метилирования ДНК и ацетилирования гистонов для 30 ASD и 17 контрольных образцов, которые присутствовали во всех 4 наборах молекулярных данных (« Методы »). SNF создает интегративную сеть подобия выборка-выборка, количественно оценивая отношения выборка-выборка в каждом отдельном наборе данных и затем интегрируя эти отношения выборка-выборка во всех наборах данных 17 .Кластеризация отношений выборки является основным преимуществом SNF по сравнению с альтернативными методами интеграции данных, которые объединяют взаимосвязи генов, которые могут быть чувствительны к различным методам нормализации между типами данных 18 .
Нагрузки образцов по первому главному компоненту каждого дифференциального молекулярного уровня повторяли известные регуляторные взаимосвязи с дифференциальным ацетилированием ( R = 0,73) и дифференциальной экспрессией miRNA ( R = 0.51) сильно коррелирует с дифференциальной экспрессией мРНК, тогда как дифференциальное метилирование меньше коррелирует с экспрессией ( R = 0,13) 19,20 (рис. 1b). Используя эту сеть сходства, образцы разделились на два отдельных кластера (рис. 1c), один из которых полностью состоял из образцов ASD, сильно нагруженных на дифференциальные транскриптомные и эпигеномные сигнатуры (SNF Group 2). Поэтому мы сгруппировали эти образцы вместе как конвергентный подтип ASD. Другой кластер состоял из образцов ASD, которые не загружались в исходные дифференциальные сигнатуры и были неотличимы от контроля (группа SNF 1).Поэтому мы сгруппировали эти образцы вместе как несопоставимый подтип ASD. Мы построили классификатор логистической регрессии, чтобы отнести 61 ASD и 61 контрольную выборку, которые не использовались хотя бы в одном из четырех наборов классификационных данных, к конвергентным или разрозненным подтипам («Методы», рис. 1d и дополнительный рис. 4). Интересно, что 11 из 43 индивидуумов с РАС с образцами как из лобной, так и из височной коры были классифицированы по различным молекулярным подтипам в двух корковых областях (дополнительный рис.4d), значительная разница по сравнению только с 1 из 33 контрольных лиц ( p = 0,0096, точный критерий Фишера). Этот вывод согласуется с потенциальной молекулярной гетерогенностью в разных областях коры при РАС.
Назначения подтипов SNF были устойчивы к методологии кластеризации и всеобъемлющей перекрестной проверке без исключения (дополнительный рис. 3c, d). Мы дополнительно протестировали надежность кластеризации, исключив каждый набор данных и выполнив кластеризацию SNF и логистическую регрессию с использованием оставшихся трех наборов данных.Мы обнаружили, что присвоения подтипов в результирующей выборке были в высокой степени согласованы с присвоениями подтипов, идентифицированными с использованием всей коллекции из четырех наборов данных (диапазон = 0,86–0,93; рис. 1e и дополнительный рис. 5). Кроме того, присвоение подтипов РАС не коррелировало и не определялось биологическими или техническими переменными, включая возраст, пол, качество РНК, фракцию клеток и посмертный интервал (дополнительный рисунок 6). Наконец, для сравнения с приведенными выше классификациями образцов, которые были сгенерированы с использованием только дифференциальных признаков в каждом наборе данных, мы попытались сгруппировать образцы с помощью SNF, используя все функции в наборах транскриптомных и эпигеномных данных.Мы не находим четкого разделения между ASD и контрольными образцами (дополнительный рис. 3a, b), демонстрируя, что молекулярные различия между ASD и контрольным мозгом ограничиваются конкретными отличительными особенностями и не являются общим феноменом всего генома.
Подтип-специфичные различия экспрессии мРНК в ASD
Чтобы использовать возросшие возможности анализа более однородного набора случаев, мы выполнили анализ дифференциальной экспрессии мРНК отдельно для конвергентных и несопоставимых подтипов ASD по сравнению с контрольными образцами для каждого гена («Методы» и Дополнительный рис.7а, б). Для подтипа конвергентных РАС мы наблюдали 5439 дифференциально экспрессируемых генов при FDR <5%, 2283 из которых имели повышенную регуляцию, а 3156 понижающую регуляцию при РАС (дополнительные данные 2). Мы воспроизводим 94,5% дифференциально экспрессируемых генов из предыдущего исследования 9 и идентифицируем дополнительные 4356 генов с тем же статистическим порогом (рис. 2a, b и дополнительный рис. 7f), демонстрируя полезность этого специфичного для подтипа подхода. Наибольшее обогащение онтологии генов очень похоже на ранее идентифицированное, демонстрируя повышенную регуляцию генов, участвующих в иммунном ответе, и понижающую регуляцию генов, участвующих в синаптической передаче и транспорте нейрональных ионов (дополнительный рис.7в, г). Напротив, для подтипа ASD Disparate мы не обнаружили дифференциально экспрессируемых генов.
Рис. 2: различия в экспрессии мРНК при РАС.a Перекрытие в генах с подавлением РАС, выявленное в этом исследовании с Parikshak et al. 9 . b Перекрытие генов с повышенной регуляцией РАС, выявленное в этом исследовании с Parikshak et al. 9 . c Знаковая ассоциация собственных генов модуля коэкспрессии мРНК с диагнозом (скорректированное по Бонферрони значение p из линейной модели смешанных эффектов, см. Дополнительный рис.7д). Положительные значения указывают на модули с повышенной экспрессией в выборках ASD. Серые и черные полосы с метками обозначают модули, связанные с РАС, идентифицированные Parikshak et al., И те, которые дополнительно идентифицированы в этом исследовании, соответственно. Обогащение типов клеток для каждого модуля показано в скобках: нейрон (N), астроцит (A), микроглия (M) и отсутствие обогащения (-) (см. Дополнительный рис. 7g). d Первые 30 хаб-генов и 300 соединений для коэкспрессионного модуля мРНК.M17. e Лучшие улучшения онтологии генов для мРНК модуля коэкспрессии.M17. Обогащение онтологии рассчитывали с помощью g: Profiler с скорректированными FDR значениями p . f Обогащение модулей нейрональной коэкспрессии, подавляющих ASD, маркерами нейронального клеточного типа, идентифицированными при секвенировании одноядерной РНК 22 . Обогащения были рассчитаны с использованием модели логистической регрессии, и значения p были скорректированы для множественного тестирования с использованием поправки FDR. Только те обогащения с отношением шансов> 1 и FDR скорректировали значение p <0.05 показаны. г Первые 30 узловых генов и 300 соединений для коэкспрессионного модуля мРНК.M15. h Наибольшее обогащение онтологии генов для мРНК модуля коэкспрессии.M15. Обогащение онтологии рассчитывали с помощью g: Profiler с скорректированными FDR значениями p . i Обогащение модулей коэкспрессии глии с повышенной регуляцией ASD генами, активированными микроглией 26 и маркерами типа микроглиальных клеток 25 . Обогащения были рассчитаны с использованием модели логистической регрессии, и значения p , которые показаны в скобках, были скорректированы для множественного тестирования с использованием поправки FDR.Показаны только обогащения с отношением шансов> 1 и скорректированным FDR со значением p <0,05.
Затем мы идентифицировали модули коэкспрессии мРНК, которые были дифференциально связаны между ASD и контрольными индивидуумами в корковой сети коэкспрессии, определенной ранее 9 . Для каждого генного модуля мы проверили, имеют ли два подтипа РАС и контрольные образцы различия в их ассоциации с собственным геном модуля, суммарным показателем уровня экспрессии модуля (дополнительный рис.7д). Для подтипа конвергентных РАС мы обнаружили 13 дифференциально связанных модулей коэкспрессии при FDR <5%, включая 6 модулей, ассоциированных с РАС, идентифицированных ранее 9 и 7 модулей, ассоциированных с РАС, дополнительно идентифицированных в этом исследовании (рис. 2c). . Напротив, для подтипа ASD Disparate мы не обнаружили каких-либо дифференциально связанных модулей коэкспрессии.
Из семи дополнительно идентифицированных ASD-ассоциированных модулей коэкспрессии в этом исследовании, четыре были подавлены в ASD: мРНК.M1, модуль, представляющий нейрогенез, мРНК. M3, модуль, представляющий митохондриальную функцию в нейронах, которая ранее была задействована в ASD 21 , мРНК.M7, модуль без функционального обогащения, и мРНК.M17, модуль, представляющий синаптические передача сигналов и транспорт везикул в нейронах (рис. 2d, e). Чтобы получить представление о подавлении нейронов при РАС с более точным разрешением, мы сравнили модули с пониженной регуляцией РАС с типоспецифичными маркерами нейрональных клеток, идентифицированными с помощью одноядерного секвенирования РНК посмертной коры головного мозга человека 22 .Модули с пониженной регуляцией ASD значительно обогащены маркерами как тормозных, так и возбуждающих нейронов (рис. 2f). Самым сильным обогащением являются подтипы тормозных нейронов, экспрессирующие SST или PVALB , происходящие из возвышения медиального ганглия, а также возбуждающие нейроны глубокого слоя, экспрессирующие RORB или FEZF2 (рис. 2f), что позволяет предположить, что число и / или активность этих клеток снижается при РАС, что согласуется с недавним одноклеточным анализом посмертного мозга при РАС 23 .
Три из дополнительно идентифицированных ASD-ассоциированных модуля были активированы в ASD: mRNA.M15, модуль, представляющий метаболические процессы и регуляцию транскрипции в глии, mRNA.M21, модуль, представляющий рибосомную трансляцию, и mRNA.M23, модуль, обогащенный маркеры астроцитов. Модуль mRNA.M15 (Fig. 2g, h) был особенно интересен, потому что один из его главных генов-концентраторов — это REST , репрессор транскрипции, играющий критическую роль в репрессии нейронных генов в ненейральных клетках 24 .Хотя модуль мРНК.M15 обогащен микроглиальными маркерами (дополнительный рис. 7g), он демонстрирует заметно отличающийся профиль транскрипции 25 , чем ранее идентифицированная мРНК микроглиального модуля с повышенной регуляцией ASD мРНК.M19 (рис. 2i). Модуль mRNA.M19 специфически обогащен генами, маркирующими активацию микроглии 26 , что позволяет предположить, что он напрямую связан с нейроиммунным ответом. Напротив, модуль мРНК.M15 обогащен маркерами ювенильной или стареющей глии, что позволяет предположить, что это может быть связано с ростом и созреванием глии.В целом, клеточные процессы, лежащие в основе широких категорий типов иммуноглиальных клеток, активируются при РАС.
Подтип-специфичные различия экспрессии miRNA в ASD
Мы провели дифференциальный анализ экспрессии miRNA для конвергентных и Disparate подтипов ASD в сравнении с контрольными образцами для каждого зрелого транскрипта miRNA (методы и дополнительный рис. 8a, b). Для подтипа конвергентных РАС мы идентифицировали 43 дифференциально экспрессируемых miRNA с FDR <5%, 28 с повышенной и 15 с пониженной регуляцией при РАС, которые сильно перекрываются с предыдущими исследованиями (дополнительный рис.8c, d и дополнительные данные 3) 12 . Мы проанализировали дифференциально связанные модули коэкспрессии miRNA в сети коэкспрессии miRNA, определенной ранее 12 . Для подтипа конвергентных ASD мы обнаружили те же три модуля коэкспрессии miRNA, дифференциально связанных с FDR <5%, что и в предыдущем исследовании: miRNA.brown, которая подавляется в ASD, а также miRNA.magenta и miRNA.yellow, которые активируются (дополнительный рис. 8e). Мы использовали TargetScan 27 для прогнозирования мишеней мРНК для верхних концентраторов каждого дифференциально связанного модуля коэкспрессии miRNA (дополнительные данные 3).Мы обнаружили обогащение генов модулем mRNA.M19 с повышенной регуляцией в пределах предполагаемых мишеней модуля miRNA.brown (дополнительный рис. 8f), предполагая, что подавление этих miRNAs может способствовать усилению иммунных процессов при РАС. Мы также обнаружили обогащение генов в модулях mRNA.M16 и mRNA.M3 в пределах предполагаемых мишеней miRNA.magenta и miRNA.yellow (дополнительный рис. 8f), предполагая, что повышенная регуляция этих miRNA может способствовать подавлению нейрональной регуляции. процессы в ASD.Напротив, для подтипа ASD Disparate мы не обнаружили каких-либо дифференциально экспрессируемых miRNA или дифференциально связанных модулей коэкспрессии miRNA. В целом, специфичный для подтипов анализ экспрессии miRNA в значительной степени повторяет результаты предыдущей работы 12 .
Подтип-специфичные различия в метилировании ДНК в ASD
Мы провели дифференциальные анализы метилирования ДНК для конвергентных и несопоставимых подтипов ASD в сравнении с контрольными образцами для промоторов генов и тел генов («Методы»).Для подтипа конвергентных ASD мы идентифицировали 3013 дифференциально метилированных промоторов генов при FDR <5%, 2298 гиперметилированных и 715 гипометилированных в ASD (дополнительный рисунок 9b и дополнительные данные 4). Промоторы гиперметилированных генов ASD обогащены генами процессинга РНК, в то время как промоторы гипометилированных генов ASD обогащены генами химических сенсорных рецепторов (дополнительный рис. 9d, e). Мы идентифицировали 1460 дифференциально метилированных генных тел при FDR <5%, 678 гиперметилированных и 782 гипометилированных при РАС (дополнительный рис.10b и дополнительные данные 4). Тела гиперметилированных генов ASD обогащены генами процессинга РНК, тогда как тела гипометилированных генов ASD обогащены генами кератинизации и транспорта желчных кислот (дополнительный рис. 10d, e). Мы отнесли ранее идентифицированные дифференциально метилированные зонды 11 к их соответствующему промотору или аннотации тела гена и теперь идентифицировали в пятьдесят и одиннадцать раз больше дифференциально метилированных промоторов (дополнительный рис. 9h, i) и тела гена (дополнительный рис.10h, i) соответственно. Напротив, для подтипа ASD Disparate мы не обнаружили каких-либо дифференциально метилированных промоторов генов или тел генов (дополнительные рисунки 9c и 10c). Гены с дифференциально метилированными промоторами генов в значительной степени отличались от генов с дифференциально метилированными генными телами, хотя было большее перекрытие в гиперметилированных генах из-за их общего биологического обогащения (рис. 3a, b). Было 596 и 305 генов, которые как дифференциально экспрессировались, так и дифференциально метилировались в промоторах генов и телах генов, соответственно.Как и ожидалось, существует отрицательная корреляция между дифференциальной экспрессией и дифференциальным метилированием промоторов генов (Fig. 3c). Неожиданно обнаружилась также отрицательная корреляция с метилированием тела гена (Fig. 3d), предполагая, что в контексте ASD метилирование тела гена связано с негативной регуляцией экспрессии гена или отражает вторичный ответ.
Рис. 3: Различия в метилировании ДНК при РАС.a Перекрытие гиперметилированных промоторов генов ASD и тел генов. b Перекрытие промоторов гипометилированных генов и тел генов ASD. c Корреляция между изменениями экспрессии и метилирования для генов, которые имеют дифференциальное метилирование промотора и дифференциально экспрессируются. Для корреляции дифференциальной экспрессии с дифференциальным метилированием использовали линейную модель. P -значение взято из подгонки линейной модели. d Корреляция между экспрессией и изменениями метилирования для генов, которые имеют дифференциальное метилирование тела гена и дифференциально экспрессируются.Для корреляции дифференциальной экспрессии с дифференциальным метилированием использовали линейную модель. P -значение взято из подгонки линейной модели. e Топ-30 хаб-генов и 300 соединений для модуля со-метилирования промотора Prom.lightgreen. f Улучшенная онтология генов для модуля со-метилирования промотора Prom.lightgreen. Обогащение онтологии рассчитывали с помощью g: Profiler с скорректированными FDR значениями p . г Модуль со-метилирования промотора Значения собственных генов пром. Светло-зеленого цвета для ASD и контрольных образцов. P Значение получено из модели линейных смешанных эффектов (см. Дополнительный рис. 9f). h Топ-30 узловых генов и 300 соединений для модуля совместного метилирования тела гена GB.darkgreen. i Лучшие улучшения онтологии генов для модуля со-метилирования тела гена GB.darkgreen. Обогащение онтологии рассчитывали с помощью g: Profiler с скорректированными FDR значениями p . J Модуль со-метилирования гена GB. Темно-зеленые значения собственных генов для ASD и контрольных образцов. P Значение получено из модели линейных смешанных эффектов (см. Дополнительный рис.10f). Для коробчатых диаграмм в g , j центр прямоугольника — это медианное значение, границы прямоугольника — это значения 75-го и 25-го процентилей, усы выходят из прямоугольника в 1,5 раза больше межквартильного размаха прямоугольника. , а значения выбросов представлены в виде отдельных точек.
Мы сгенерировали сети котетилирования как для промоторов, так и для тел генов (дополнительные рисунки 9a и 10a), которые обобщили многие аспекты сети совместного метилирования на уровне зондов, которая была построена ранее 11 (дополнительные рисунки).11а, б). Мы идентифицировали восемь модулей совместного метилирования ASD-ассоциированных промоторов, четыре гиперметилированных и четыре гипометилированных в ASD (FDR <0,05; дополнительный рис. 9f). Гиперметилированные промоторные модули представляли собой: Prom.midnightblue, представляющий биосинтез кофермента А, Prom.pink, модуль без функционального обогащения, Prom.tan, обогащенный маркерами клеток олигодендроцитов, и Prom.turquoise, обогащенный маркерами клеток астроцитов и представляющий процессинг РНК. . Гипометилированные модули: Пром.коричневый и Prom.greenyellow, два модуля, представляющие сенсорное восприятие, а также Prom.lightcyan и Prom.lightgreen, два модуля, представляющие иммунные процессы.
На уровне тела гена мы идентифицировали 10 ассоциированных с ASD модулей со-метилирования, 4 гиперметилированных и 6 гипометилированных в ASD (FDR <0,05; дополнительный рис. 10f). Гиперметилированными модулями были: GB.blue, представляющий процессинг РНК, GB.cyan, обогащенный маркерами нейронных клеток и представляющий ответ развернутого белка, GB.darkred, обогащенный маркерами нейронных клеток и представляющий митохондриальную активность, и GB.royalblue, модуль без функционального обогащения. Гипометилированными модулями были: GB.black, GB.darkgreen, GB.lightcyan и GB.salmon, 4 модуля, представляющие иммунные процессы, а также GB.green, модуль, представляющий глюкуронирование, и GB.yellow, представляющий транспорт ионов желчной кислоты. . Напротив, для подтипа ASD Disparate мы не обнаружили каких-либо ассоциированных с ASD промоторов или модулей котетилирования генных тел.
В целом, модули совместного метилирования, связанные с ASD, не показали значительного глобального перекрытия с модулями коэкспрессии, связанными с ASD, на уровне гена (дополнительный рис. 11c, d), что позволяет предположить, что дифференциальное метилирование не является важным фактором дифференциальная экспрессия генов. Наибольшее перекрытие наблюдается между гипометилированными модулями со-метилирования и модулями с усиленной коэкспрессией, участвующими в иммунных процессах. В частности, Prom.lightgreen значительно перекрывается с мРНК.M19 и GB.darkgreen существенно перекрываются с mRNA.M15, указывая тем самым, что ассоциированная с ASD активация иммунной системы частично регулируется снижением метилирования ДНК на промоторах и телах генов (Fig. 3e-j).
Подтип-специфичные различия ацетилирования гистонов в ASD
Затем мы провели дифференциальные анализы ацетилирования гистонов для конвергентных и несопоставимых подтипов ASD по сравнению с контрольными образцами для пиков h4K27ac в геноме («Методы»). Для подтипа конвергентных ASD мы идентифицировали 15967 дифференциально ацетилированных пиков при FDR <10%, 8707 гиперацетилированных и 7260 гипоацетилированных при ASD (дополнительный рис.12а и дополнительные данные 5). Было сильное перекрытие с дифференциально ацетилированными пиками, идентифицированными в предыдущем исследовании (дополнительный рис. 12c, d) 10 . Напротив, для подтипа ASD Disparate мы не обнаружили каких-либо дифференциально ацетилированных пиков (дополнительный рис. 12b). Используя GREAT для оценки обогащения онтологии для генов, ближайших к каждому дифференциально ацетилированному пику 28 , мы обнаруживаем, что гены, проксимальные к гиперацетилированным пикам ASD, обогащены синаптическим потенциалом, в то время как гены, проксимальные к гипоацетилированным пикам ASD, обогащены в нейрогенезе и развитии органов (рис.4а, б). Известно, что h4K27ac маркирует активные промоторы 29 , и, как и ожидалось, дифференциально ацетилированные пики в промоторах генов сильно положительно коррелировали ( R = 0,25) с дифференциальной экспрессией (рис. 4d). Неожиданно мы обнаружили, что взаимосвязь между дифференциальным ацетилированием промотора и дифференциальной экспрессией была типоспецифичной для клеток, при этом гиперацетилированные промоторы были связаны с усиленной регуляцией генов микроглии и пониженной регуляцией нейрональных генов, тогда как гипоацетилированные промоторы были связаны с усиленной регуляцией генов астроцитов и пониженной регуляцией генов олигодендроцитов (рис.4д).
Рис. 4: Различия в ацетилировании гистонов при РАС.a Улучшение онтологии лучших генов при связывании гиперацетилированных областей ASD с проксимальными генами с использованием GREAT 28 . P Значения были скорректированы для многократного тестирования путем коррекции FDR. b Улучшение онтологии лучших генов при связывании гипоацетилированных областей ASD с проксимальными генами с использованием GREAT 28 . P Значения были скорректированы для многократного тестирования путем коррекции FDR. c Схема для связывания областей h4K27ac с их родственными генами.Пики h4K27ac внутри промоторов были непосредственно отнесены к проксимальному гену. Дистальные пики h4K27ac были отнесены к генам с использованием наборов данных eQTL и Hi-C. d Корреляция между изменениями экспрессии и ацетилирования для генов, которые имеют дифференциально ацетилированный участок внутри своего промотора и дифференциально экспрессируются. P -значение получено из линейной модели, используемой для корреляции дифференциальной экспрессии с дифференциальным ацетилированием. Отмечены четыре отдельных квадранта. e Обогащение типов клеток для четырех квадрантов в d .Обогащения были рассчитаны с использованием модели логистической регрессии, и значения p , которые показаны в скобках, были скорректированы для множественного тестирования с использованием поправки FDR. Показаны только обогащения с отношением шансов> 1 и скорректированным FDR со значением p <0,05. f Обогащение родственных генов, связанных с дифференциально ацетилированными участками в модулях коэкспрессии мРНК. Модули, имеющие существенное отношение к диагнозу, отмечены по осям и (красный: повышенная экспрессия в РАС; синий: пониженная экспрессия в РАС).Обогащения были рассчитаны с использованием модели логистической регрессии, и значения p , которые показаны в скобках, были скорректированы для множественного тестирования с использованием поправки FDR. Показаны только обогащения с отношением шансов> 1 и скорректированным FDR со значением p <0,05. g Связь между изменениями экспрессии и ацетилирования для дифференциально ацетилированных пиков, связанных с модулями коэкспрессии генов. Функциональная аннотация для каждого модуля представлена в верхнем левом углу.Связь каждого модуля с диагнозом РАС представлена в верхнем правом углу, а также то, являются ли изменения ацетилирования способствующими или компенсирующими изменениями в экспрессии.
В дополнение к маркировке промоторов, h4K27ac также маркирует дистальные энхансеры на расстоянии до 1 МБ от сайтов начала транскрипции генов (TSS) 30 . Мы использовали наборы данных локусов экспрессии количественных признаков (eQTL) и захвата конформации хроматина (Hi-C) из основной массы ткани мозга взрослого человека 31 , а также данные Hi-C с использованием отсортированных нейронных и глиальных клеток из ткани мозга взрослого человека («Методы») для связывания дистальных дифференциальных пиков h4K27ac с их родственными генами (рис.4c; «Методы»). В качестве исходного уровня мы проанализировали все пики дифференциально ацетилированного гена в пределах 1 МБ дифференциально экспрессируемого гена TSS и обнаружили, что общая корреляция между дифференциальным ацетилированием и дифференциальной экспрессией была незначительной ( R = 0,018, p = 2e-8) (дополнительная информация Рис. 12д). Корреляции улучшились при связывании дифференциально ацетилированных областей с дифференциально экспрессируемыми генами с использованием eQTL ( R = 0,084, p = 2,3e-9) (дополнительный рис.12f), объемный Hi-C ( R = 0,075, p = 1,4e-5) (дополнительный рисунок 12g), нейронный Hi-C ( R = 0,061, p = 7,6e-5) (Дополнительный рис. 12h) и глиальный Hi-C ( R = 0,11, p = 1,4e-11) (дополнительный рис. 12i). Корреляции были дополнительно улучшены, когда пики h4K27ac были связаны с генами с использованием комбинации eQTL и объемного Hi-C ( R = 0,18, p = 9,2e-4) (дополнительный рис. 12j) или глиального Hi-C ( R = 0.23, p = 2.9e-5) (дополнительный рис. 12l). Однако комбинация наборов данных eQTL и нейронов Hi-C не коррелировала ( R = 0, p = 0,36) (дополнительный рис. 12k), что, возможно, отражает смещение объемных связей eQTL к глиальным клеткам из-за большего количества глии по сравнению с нейронами коры головного мозга 32 .
Мы предоставляем список потенциальных родственных генов, связанных с дифференциально ацетилированными пиками, используя eQTL, нейрональные Hi-C, глиальные Hi-C и массовые Hi-C связи (дополнительные данные 5).Используя этот список родственных генов, мы идентифицировали модули коэкспрессии генов, потенциально регулируемые ASD-ассоциированными изменениями ацетилирования (рис. 4f). Мы обнаруживаем обогащение гипоацетилированных элементов ASD в мРНК.M2, олигодендроцитарном модуле, несущем многие гены с подавлением ASD, что позволяет предположить, что гипоацетилирование способствует подавлению регуляции олигодендроцитов при ASD. Неожиданно мы обнаружили обогащение гипоацетилированными элементами ASD в мРНК.M9, модулем астроцитов, который активируется в ASD, и гиперацетилированными элементами в мРНК.M4, нейронный модуль, который подавляется при РАС. В обоих случаях изменения ацетилирования отрицательно коррелируют с изменениями экспрессии. Это указывает на то, что для генов в этих модулях, связанные с ASD изменения ацетилирования не являются причинными, а компенсируют изменения экспрессии генов (Fig. 4g).
Расширение наследуемости РАС за счет нерегулируемых геномных признаков
Дифференциальная экспрессия генов или эпигенетические изменения могут быть либо вкладом, либо следствием заболевания. Чтобы обеспечить причинную привязку, мы использовали стратифицированную регрессию по шкале LD 33 , чтобы разделить наследуемость вариантов риска РАС из полногеномных ассоциативных исследований 4,34 на области генома, которые дифференциально экспрессируются, метилированы или ацетилированы.Мы включили воспалительное заболевание кишечника (ВЗК) в качестве компаратора набора данных GWAS 35 , поскольку ВЗК является нарушением иммунной дисрегуляции, но не влияет напрямую на мозг. Мы также включили болезнь Альцгеймера (БА) 36 , потому что БА является неврологическим заболеванием, но, как и ВЗК, имеет особый генетический профиль по отношению к РАС. Мы обнаружили значительное обогащение наследуемости РАС и ВЗК в областях генома, которые гиперацетилированы в головном мозге РАС (рис. 5a). В частности, эти обогащения обнаруживаются в дистальных энхансерных областях, а не в промоторах генов (рис.5b), подчеркивая важность некодирующих регуляторных элементов. Обогащение IBD, вероятно, маркирует гиперацетилированные элементы, связанные с генами микроглии (рис. 4d, e). Когнатные гены, связанные с гиперацетилированными энхансерами, обогащены модулем мРНК.M4 (рис. 4f), нейрональным модулем с подавлением ASD, представляющим гены, участвующие в транспорте синаптических пузырьков (рис. 5c, d). Это открытие подтверждает предыдущие наблюдения, что общие варианты генетического риска для РАС обогащены регуляторными областями нейрональных генов 4,13 .Среди генов в модуле мРНК.M4 шесть из его главных генов-концентраторов связаны с элементами, гиперацетилированными в ASD, включая DMTN и STX1B (рис. 5e, f). Обогащение вариантов причинного риска и последующее подавление этих узловых генов в модуле предполагает, что повышение ацетилирования, вероятно, является попыткой компенсировать подавление ключевых генов-драйверов этого модуля.
Рис. 5: Обогащение вариантов генетического риска РАС.a Обогащения по разделенной наследуемости для ASD, болезни Альцгеймера и IBD GWAS в дифференциально экспрессируемых, метилированных или ацетилированных областях генома.Показаны нескорректированные значения p- <0,05. Значения P были также скорректированы для многократного тестирования с помощью коррекции FDR, и эти обогащения с скорректированным значением p <0,1 отмечены звездочками. b обогащения по разделенной наследуемости для ASD, болезни Альцгеймера и IBD GWAS в дифференциально ацетилированных областях генома внутри промоторов генов или дистальнее них. Показаны нескорректированные значения p- <0,05. P -значения также были скорректированы для многократного тестирования с помощью коррекции FDR и этих обогащений с скорректированным значением p <0.1 отмечены звездочками. c 30 лучших хаб-генов и 300 соединений для коэкспрессионного модуля мРНК.M4. d Наибольшее обогащение онтологии генов для мРНК модуля коэкспрессии.M4. Обогащение онтологии рассчитывали с помощью g: Profiler с скорректированными FDR значениями p . e , f Геномная область вокруг DMTN e и STX1B f . Связанные с ASD гиперацетилированные области показаны вместе со связями eQTL и Hi-C с геном TSS.
Затем мы проанализировали, было ли обогащение наследуемости ASD в модулях сети коэкспрессии и совместного метилирования (Supplementary Fig. 13a-c). Мы обнаружили значительное обогащение наследуемости в модуле со-метилирования промотора Prom.green, который представляет гены, участвующие в нейрогенезе (дополнительный рис. 13d, e), еще больше усиливая наблюдение, что варианты риска РАС находятся в регуляторных областях генов, вовлеченных в нейрональную систему. функция и нейрогенез.
В совокупности (рис.6), наши результаты подтверждают модель, согласно которой варианты риска РАС нарушают регуляторные элементы, контролирующие экспрессию нейрональных генов, что приводит к общему подавлению синаптической передачи сигналов и транспорта нейрональных ионов. Это, в свою очередь, приводит к усилению транскрипции опосредованных астроцитами и микроглиями нейронных иммунных процессов за счет сопутствующего снижения метилирования ДНК, снижения экспрессии ассоциированных miRNA и увеличения ацетилирования гистонов в регуляторных элементах генов микроглии.Наконец, в ответ на компенсацию этих транскрипционных изменений происходит уменьшение ацетилирования гистонов на промоторах активированных генов астроцитов и увеличение ацетилирования гистонов, связанного с подавлением нейрональных генов в тех же регуляторных элементах, на которые первоначально влияют случайные генетические варианты.
Рис. 6: Схематическая модель молекулярной дисрегуляции при РАС.Интеграция на генетическом, транскриптомном и эпигеномном уровнях при РАС. Варианты риска РАС в первую очередь действуют в отношении нейрональных генов, которые в целом подавляются, вероятно, косвенно, в том числе через микро-РНК (например,грамм. желтый модуль). Другие особенности, включая другой модуль микроРНК (коричневый) и гипометилирование ДНК, предположительно являются компенсаторными или вторичными и связаны с повышающей регуляцией генов глиального иммунитета. Паттерны ацетилирования гистонов показывают сложную взаимосвязь, причем некоторые из них, как предполагается, отражают попытку компенсировать изменения в экспрессии генов (например, M4), в то время как другие, как предполагается, скорее всего, являются движущими силами изменений (микроглия). Синяя полоса и красные стрелки соответствуют регуляторным механизмам, которые, согласно прогнозам, уменьшают и увеличивают экспрессию генов, соответственно.
Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Среднее поверхностное расстояние (ASD) и результаты по Хаусдорфу (HD) для …
Цель: Мы оценили эффективность распространения контура органа от плановой компьютерной томографии до конусно-лучевой компьютерной томографии с деформируемой регистрацией изображения, сравнивая контуры с ручным контуром. Материалы и методы: Шестнадцать пациентов были идентифицированы ретроспективно на основании значительных физических изменений в течение курса лечения. Были оценены множественные органы в 3 регионах (голова и шея, простата и поджелудочная железа).Конусно-лучевая компьютерная томография после окончания лечения была зарегистрирована в плановой компьютерной томографии с использованием жесткой регистрации с последующей регистрацией деформируемого изображения. Контуры были скопированы на наборы изображений компьютерной томографии с коническим лучом с использованием жесткой регистрации и модифицированы двумя радиологами-онкологами. Контуры сравнивали с использованием коэффициента подобия Дайса, среднего поверхностного расстояния и расстояния Хаусдорфа. Полученные результаты: Средний коэффициент сходства врача Дайса для всех органов был равен 0.90. По сравнению с контурами каждого врача, общее среднее значение для ригидного изображения было 0,76 (P <0,001), и оно было улучшено до 0,79 (P <0,001) для регистрации деформируемого изображения. Сравнение регистрации деформируемых изображений с врачами привело к среднему коэффициенту сходства Дайса 0,77, 0,74 и 0,84 для групп головы и шеи, простаты и поджелудочной железы соответственно; тогда как среднее согласие между врачами для этих сайтов составило 0,87, 0,90 и 0,93 (P <0,001 для всех сайтов).