Воспаление, иммунитет и инфекции, Государственный университет Джорджии

Benyue Zhang

¹ Центр воспаления, иммунитета и инфекций, Государственный университет Джорджии

Эндрю Т.Гевиртц

¹ Центр воспаления, иммунитета и инфекций, Государственный университет Джорджии

² Выпускник программы иммунологии и молекулярного патогенеза, Университет Эмори, Атланта, Джорджия

¹ Центр воспаления, иммунитета и инфекций, Университет штата Джорджия

² Программа аспирантуры по иммунологии и молекулярному патогенезу, Университет Эмори, Атланта, Джорджия

Поступило 20 декабря 2013 г .; Принято 10 января 2014 г.

Дополнительные материалы

Дополнительные данные

GUID: BDF7C2FD-D08B-4064-846A-079C075E6C05

GUID: 7BE092EC-8821-452C-ABB5-130BFECED95C

Аннотация

Фон. Ротавирус вызывает 500 000 смертей и миллионы посещений врачей и госпитализаций в год с худшими исходами и снижением эффективности вакцины в развивающихся странах. Мы предположили, что микробиота кишечника может модулировать ротавирусную инфекцию и / или реакцию антител и, таким образом, потенциально играть роль в таких региональных различиях.

Методы. Микробиота была удалена без микробов или с использованием антибиотиков. Повышенное воздействие микробиоты было достигнуто за счет лечения низкими дозами декстрансульфата натрия (DSS).Ротавирусную инфекцию и репликацию оценивали с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) и количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией. Диарею оценивали визуально. Гуморальные ответы на ротавирус измеряли с помощью ELISA и иммуноферментного анализа пятен.

Результаты. Устранение микробиоты отсрочило инфекцию и снизило инфекционность на 42%. Антибиотики не влияли на соотношение цепей положительного и отрицательного смысла, что позволяет предположить, что влияние оказывалось скорее на вход, чем на репликацию.Антибиотики снижали частоту и продолжительность диареи, указывая на то, что снижение уровня антигена ротавируса было биологически значимым. Несмотря на пониженный уровень антигена, антибиотики приводили к более стойкому гуморальному ответу слизистой оболочки / системного гуморального ответа ротавируса. Повышенная стойкость антител к ротавирусу коррелировала с повышенной концентрацией специфичных для ротавируса тонкой кишки, продуцирующих иммуноглобулин А клеток, секретирующих антитела, у мышей, получавших антибиотики. И наоборот, лечение DSS нарушило выработку антител, специфичных для ротавируса.

Выводы. Удаление микробиоты привело к снижению ротавирусной инфекции / диареи и более устойчивому ответу антител против ротавируса, что позволяет предположить, что введение антибиотиков перед вакцинацией против ротавирусной инфекции может повысить низкие показатели сероконверсии, которые коррелируют с неэффективностью вакцины в развивающихся регионах.

Ключевые слова: вакцина , микробиота, антибиотики, стерильность, иммунитет слизистой оболочки

(См. Редакторский комментарий Бартельта и Герранта на страницах 167–70.)

Ротавирус (RV), двухцепочечный, безоболочечный РНК-вирус, который преимущественно поражает эпителиальные клетки кишечника, является ведущей причиной острого гастроэнтерита у детей младшего возраста в мире [1]. До недавнего внедрения вакцины против RV, RV повсеместно инфицировали детей младше 5 лет. Большинство случаев разрешаются в течение 8 дней, хотя некоторые из них приводят к более серьезным осложнениям, приводящим к 2–4 миллионам госпитализаций в год во всем мире [2, 3]. Тем не менее, бремя болезни правого желудочка наиболее велико в развивающихся странах, где от правого желудочка ежегодно умирает 500 000 человек [4, 5].Такое несоответствие в бремени болезни правого желудочка обычно отражает общее состояние здоровья и питания, доступ к поддерживающей терапии и / или потенциальные коинфекции [6].

Широкое внедрение вакцин против RV значительно снизило бремя болезни RV в развивающихся странах. Например, в Малави, одной из наименее развитых стран мира, администрация Rotarix снизила смертность, связанную с RV, на 43%. Тем не менее, эффективность вакцины в развивающихся странах заметно ниже, чем в Европе и Америке (49% в Малави против> 95% в Европе и Америке) [2].Большая часть этой разницы, по-видимому, связана с вакцинами, вызывающими меньший иммунный ответ, поскольку в Малави только 57% серопозитивности к иммуноглобулину A (IgA) к RV после вакцинации Rotarix, тогда как RotaTeq индуцировало 95% серопозитивность к IgA к RV в Северной и Южной Америке и Европе [ 7, 8].

Различные гипотезы могут объяснить, почему вакцины против RV менее иммуногенны в некоторых регионах. Отсутствие правильного питания, которое влияет на иммунные реакции, может быть причиной снижения эффективности вакцины.Кроме того, высокие титры трансплацентарных антител материнского происхождения и IgA грудного молока обладают потенциалом нейтрализации вакцинного штамма RV и могут снизить экспозицию антигена RV за счет предотвращения инфекционно-подобного состояния, связанного с вакциной RV. Чтобы преодолеть присутствие нейтрализующих антител, которые блокируют инфекционно-подобное состояние и последующие защитные иммунные ответы, были предложены более высокие дозы RV [9]. Другая возможность заключается в том, что хроническая инфекция, например, гельминтами, подавляет иммунный ответ на вакцину против RV [5, 10].Более общая форма последней гипотезы заключается в том, что инфекция или иммунный ответ на вакцины против РВ зависит от микробиоты кишечника, которая, как считается, значительно различается между людьми в развитых и развивающихся странах. Действительно, микробиота оказывает широкое и разнообразное влияние на развитие и функцию иммунной системы [11]. Например, в моделях инфекции гриппа и лимфоцитарного хориоменингита вирус-специфические адаптивные ответы, включая ответы как Т-клеток, так и В-клеток, были уменьшены при лечении антибиотиками из-за снижения функции дендритных клеток и макрофагов [12, 13] .В случае кишечных вирусов, а именно полиовируса и реовируса, устранение микробиоты привело к относительной устойчивости к инфекции, что могло бы уменьшить выработку защитных иммунных ответов [14]. Такая способность микробиоты влиять как на вирусную инфекцию, которая необходима для иммунного ответа, так и на иммунный ответ, предполагает, что микробиота может опосредовать различия в тяжести заболевания RV и / или эффективности вакцины.

Наша цель состояла в том, чтобы изучить возможность того, что микробиота может влиять на инфекцию и / или иммунные реакции на RV.Новорожденные мыши служили моделью RV-болезни, а взрослая модель RV-инфекции считалась аналогичной вакцинации RV, где защита от инфекции лучше всего коррелирует с уровнями кишечного анти-RV IgA [1]. Наши результаты показывают, что комменсальная микробиота способствует инфицированию RV и влияет на иммунные реакции, индуцированные RV.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Животные

Во всех экспериментах, за исключением экспериментов с использованием неонатальных или стерильных мышей, использовали самцов мышей C57BL / 6 в возрасте 6-8 недель, приобретенных в Jackson Laboratories (Bar Harbor, ME).В экспериментах с участием новорожденных мышей использовали 6-дневное потомство (самцы и самки) мышей C57BL / 6J. В экспериментах с участием стерильных мышей использовали мышей C57BL / 6, полученных путем переноса эмбрионов, как описано ранее [15]. Мышей содержали в стерильных изоляторах в Университете штата Джорджия, который одобрил все процедуры.

Вирус и прививки

Штамм EC мыши RV был предоставлен Мэри Эстес (Медицинский колледж Бейлора). Взрослые мыши получили 10 ⁵ доз с выделением 50% (SD ₅₀ ) ПЖ, которым предшествовала 1.33% (мас. / Об.) Бикарбоната натрия (Sigma-Aldrich) через желудочный зонд. Новорожденные получали 2 дозы 50% диареи RV через желудочный зонд.

Антибиотики и режимы антибиотиков

Взрослым мышам вводили ампициллин (Sigma-Aldrich) в концентрации 1 г / л и неомицин (Sigma-Aldrich) в концентрации 0,5 г / л в питьевой воде ad libitum за 1 неделю до инокуляции и за 1, 7 или 11 недель после инокуляции. Новорожденные получали 200 мкг ампициллина и 100 мкг неомицина в 100 мкл воды через желудочный зонд за 1 день до и через 1 день после инокуляции.Кроме того, матери получали 1 г / л ампициллина и 0,5 г / л неомицина с питьевой водой, начиная с 1 недели до родов и до тех пор, пока потомство не отняли от груди.

Инфекция беспроблемных мышей RV

Самцов и самок свободных от микробов мышей в возрасте 6-8 недель инокулировали и содержали в изоляторах гнотобиотиков (Park Bioservices) в течение и до 9 недель после инокуляции. Состояние отсутствия зародышей контролировали с помощью количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) для 16S рибосомной ДНК (рДНК) и фекальных культур в инфузионном бульоне мозг-сердце (BD).

Количественное определение бактериальной нагрузки

Фекальную бактериальную ДНК выделяли с использованием набора QiAamp DNA Stool Kit (Qiagen), а 16S рДНК амплифицировали с помощью количественной ПЦР (Bio-Rad).

Обнаружение антигена ротавируса в фекалиях

Супернатанты гомогенатов кала (100 мг / мл) замораживали или немедленно анализировали с помощью иммуноферментного анализа (ELISA), как описано в другом месте [16].

Дуоденальный геном RV Количественная ПЦР с обратной транскрипцией (qRT-PCR)

Образцы двенадцатиперстной кишки собирали, промывали фосфатно-солевым буфером и гомогенизировали в TRIzol (Ambion).Дуоденальную РНК исследовали на геном RV, как описано в другом месте [17].

Одноцепочечная qRT-PCR для репликации RV

Репликационная способность RV в образцах РНК двенадцатиперстной кишки определялась соотношением положительно-смысловой и отрицательной цепей RV, как описано в другом месте [17].

ELISA антител

Фекальные и сывороточные относительные продуцирование и титр антител против RV анализировали, как описано ранее [18]. Уровни общего IgA измеряли, как описано в [19].

Тонкий кишечник, RV-специфические, продуцирующие IgA, секретирующие антитела клетки. Иммуноферментный анализ пятен

Целый тонкий кишечник, собственную пластинку слизистой оболочки и клетки пейера собирали, как описано ранее [20].Клетки наносили на фильтровальные планшеты (Millipore), покрытые очищенным резусом RV. RV-специфический IgA зондировали вторичным антителом против IgA (SouthernBiotech).

Введение декстран-сульфата натрия (DSS)

DSS (MP Biomedicals) разводили в питьевой воде до 1% (мас. / Об.) И вводили ad libitum за 4 дня до и через 3 дня после инокуляции RV.

Липокалин-2 ELISA

Надосадки фекалий готовили, как указано выше, и липокалин-2 оценивали, как описано в другом месте [21].

Статистический анализ

Если не указано иное, данные взяты из одного эксперимента (n = 5 мышей на условие), который проводился несколько раз и давал аналогичные результаты. Статистическая значимость оценивалась с помощью теста Стьюдента t .

РЕЗУЛЬТАТЫ

Устранение микробиоты задерживает инфицирование RV и облегчает развитие RV-индуцированного заболевания

Инфекция взрослых мышей RV не приводит к серьезным проявлениям заболевания, но служит четко определенной моделью инфекции [1].Соответственно, пероральная инокуляция мышей C57BL / 6 в возрасте 6-8 недель 10 ⁵ SD ₅₀ мышиного штамма ЕС привела к тому, что антиген RV стал обнаруживаться в кале через 1-2 дня после инокуляции. Такое выделение RV, которое достигает пика через 3-4 дня после инокуляции и продолжается 6-8 дней после инокуляции, пропорционально инфекционности (т. Е. Уровню вирусного генома в лизатах кишечника) [22]. Чтобы исследовать роль микробиоты, мы вводили RV мышам, получавшим комбинацию ампициллина и неомицина за 1 неделю до инокуляции, которую они продолжали получать на протяжении всей инфекции.Количественный анализ на основе ПЦР показал, что такие антибиотики снижают бактериальную нагрузку кишечника на 99% (дополнительный рисунок 1 A ). Такое снижение уровней микробиоты постоянно приводило к задержке появления фекального антигена правого желудочка на 1 день и примерно 40% снижению общего выделения правого желудочка (что определяется площадью под кривой; рисунок A ). Учитывая, что у мышей, получавших лечение антибиотиками, все еще была значительная бактериальная нагрузка в кишечнике и что антибиотики могут изменять относительные пропорции бактерий, потенциально приводя к увеличению численности некоторых видов, также использовали мышей без микробов.Свободным от зародышей мышам C57BL / 6, содержавшимся в стерильных изоляторах на протяжении всего эксперимента, и контрольным мышам, содержащимся в обычных условиях, перорально вводили стерилизованный фильтром RV. Посев кала и количественная ПЦР подтвердили отсутствие бактерий у этих мышей. Подобно мышам, получавшим антибиотики, у стерильных мышей начальное проявление инфекции задерживалось на 1 день. У свободных от зародышей мышей также обнаруживается задержка клиренса ПЖ, что, вероятно, отражает их незрелую кишечную адаптивную иммунную систему [11], которая важна для очищения ПЖ (Рисунок B ) [18].Таким образом, задержка инфицирования правого желудочка может быть постоянным следствием удаления микробиоты. Чтобы убедиться, что пониженные уровни фекального антигена RV отражают снижение инфекционности, мы количественно оценили уровень геномов RV в лизатах двенадцатиперстной кишки с помощью qRT-PCR. Лечение антибиотиками привело к 10-кратному снижению геномов RV через 2 и 3 дня после инокуляции (Рисунок C ), таким образом подтверждая, что антибиотики снижают инфекционность RV. Затем мы измерили соотношение положительных и отрицательных цепей RV, которое отражает степень активной репликации RV [17].Этот параметр существенно не отличался между контрольными мышами и мышами, получавшими антибиотики (фигура D ), что позволяет предположить, что удаление микробиоты снижает проникновение вируса, а не репликацию RV.

Удаление микробиоты снижает инфекционность ротавируса (RV). Мышей-самцов C57BL6 в возрасте 6-8 недель лечили ампициллином и неомицином за 1 неделю до пероральной инокуляции 10 ⁵ 50% -ными дозами (SD ₅₀ ) мыши штамма EC RV. A , Образцы фекалий собирали ежедневно и анализировали на антигены RV с помощью иммуноферментного анализа (ELISA). B , Самцов и самок мышей, свободных от микробов, в возрасте 6–8 недель инфицировали стерилизованным фильтром RV. Образцы фекалий собирали ежедневно и анализировали на антиген RV с помощью ELISA. C , Была приготовлена ​​тотальная РНК из двенадцатиперстной кишки, и лизат клеток мышей, обработанных антибиотиками, зондировали на РНК-мессенджер NSP3, репрезентативную для генома RV, с помощью количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (qRT-PCR). D , Был приготовлен лизат клеток двенадцатиперстной кишки, и каждый образец анализировали на соотношение положительных и отрицательных цепей с помощью одноцепочечной qRT-PCR.Значение отношения положительно коррелирует с репликацией правого желудочка. * P <.05.

Как и в случае с людьми, инфекция правого желудочка у новорожденных мышей вызывает секреторную диарею, возникающую через 2–3 дня после инокуляции и продолжающуюся 3–8 дней. Чтобы определить, влияет ли снижение инфекционности ПЖ в результате лечения антибиотиками на заболевание ПЖ, новорожденным мышам вводили антибиотики через пероральный желудочный зонд за 1 день до и через 1 день после инокуляции, а затем инокулировали ПЖ на день 0. Затем мышей ежедневно контролировали на предмет диареи, как указано. по наличию жидких, обильных фекалий желтого цвета при легком надавливании на живот (Рисунок A ).Лечение антибиотиками привело к снижению суточной частоты диареи на 4–8 дни после инокуляции (Рисунок B ) и к снижению общей заболеваемости диареей на 34% (Рисунок C ). Среди мышей, у которых развилась диарея, те, которые получали антибиотики, имели диарею примерно на 1 день меньше, чем необработанные мыши (фигура D ). Таким образом, уменьшение инфицирования RV посредством удаления микробиоты привело к сокращению продолжительности диарейного заболевания.

Лечение антибиотиками снижает диарею, вызванную ротавирусом (RV), у новорожденных мышей.Беременных самок C57BL6 лечили ампициллином и неомицином в питьевой воде ad libitum за 1 неделю до родов, и лечение продолжали до отъема потомства. Потомство обрабатывали 100 мкг неомицина и 200 мкг ампициллина в 100 мкл воды через желудочный зонд за 1 день до и через 1 день после инокуляции. Шестидневным мышам прививали 2 50% -ные дозы RV мышей от диареи, и их ежедневно наблюдали визуально на предмет диареи. A , Типичная диарея правого желудочка у новорожденных. B , Ежедневные показатели наблюдаемой диареи в дни 0–9 после инокуляции. C , Заболеваемость диареей, представленная как фракция, так и процент от общего числа инокулированных мышей. D . Из мышей, у которых наблюдались признаки диареи, усредняли количество дней, в течение которых у каждой мыши была диарея. * P <.05.

Отсутствие микробиоты приводит к более устойчивому ответу антител слизистой оболочки, специфичному для RV

Инфекция RV инициирует устойчивый адаптивный иммунитет, который устраняет первичную инфекцию и обеспечивает защиту от инфекции в будущем [1].Такой индуцированный инфекцией иммунитет является основой используемых в настоящее время вакцин против РВ, которые представляют собой живые аттенуированные вирусы. Такой защитный иммунитет лучше всего коррелирует с RV-специфическим фекальным IgA, уровни которого часто параллельны уровням сывороточного иммуноглобулина G (IgG) и IgA, которые обычно измеряются в клинических исследованиях [1, 18]. Модель RV-инфекции у взрослых мышей можно рассматривать как модель RV-вакцинации, поскольку обе являются бессимптомными инфекциями, которые не приводят к диарее, но обеспечивают защитный иммунитет [1].Принимая во внимание, что антибиотики могут снижать антительный ответ на системно вводимые антигены и что снижение инфекционности, вероятно, снижает воздействие антигена, мы предположили, что лечение антибиотиками может снизить уровень антител, специфичных к RV [12, 13]. Чтобы исследовать эту возможность, мы лечили мышей антибиотиками за 1 неделю до и до 11 недель после инокуляции, еженедельно собирали фекалии и сыворотку и анализировали образцы на RV-специфические IgG и IgA. Лечение антибиотиками не влияло на продукцию антител в ранние сроки после инокуляции RV, но увеличивало уровни RV-специфических антител, особенно сывороточного и фекального IgA, через 9 недель после инокуляции и позже (рисунок).Такое усиление наблюдали при измерении иммунной реактивности RV при однократном разведении сыворотки или фекального супернатанта или при количественном определении титра после ряда разведений. Это повышение было специфичным для правого желудочка, поскольку, в соответствии с другими исследованиями, лечение антибиотиками приводило к умеренному снижению общего уровня IgA (дополнительные рисунки 2 A и 2 B ) [11].

Лечение антибиотиками увеличивает устойчивость антител к ротавирусу (RV). Мышей C57BL6 лечили антибиотиками, как описано, и они продолжали принимать антибиотики до 11 недель после инокуляции. A , C и E , выработка сывороточного иммуноглобулина G (IgG; A ), сывороточного иммуноглобулина A (IgA; C ) и фекального RV IgA ( E ), как измерено по иммунной реактивности RV при однократном разведении супернатанта сыворотки или фекалий через 0, 9, 10 и 11 недель после инокуляции. Результаты отражают поздние системные ответы и ответы на антитела слизистых оболочек правого желудочка. B , D и F , титры сывороточного RV IgG ( B ), сывороточного RV IgA ( D ) и фекального RV IgA ( F ), измеренные с помощью разбавления образца, при котором OD ₄₅₀ равнялся 0.2 поверх бланка, через 11 недель после инокуляции. * P <.05.

Альтернативный подход к использованию антибиотиков для изучения микробиоты — это использование мышей, свободных от микробов, хотя есть предостережение, что у этих мышей отсутствует ассоциированная с кишечником лимфоидная ткань, которая обеспечивает адаптивный иммунитет [11]. В соответствии с этим знанием и отсроченным клиренсом RV, наблюдаемым у этих мышей, у стерильных мышей наблюдалась заметная задержка продукции фекальных IgA к RV. Несмотря на отсутствие GALT, это нарушение у стерильных мышей продукции фекальных IgA против RV было преодолено со временем.Более того, аналогично мышам, получавшим антибиотики, стерильные мыши демонстрировали сывороточный ответ антител против RV, который первоначально был подобен таковому у обычных мышей, но усилился через несколько недель после инокуляции (рисунок). Затем мы исследовали влияние антибиотиков на приобретение RV-специфических антител после патогенной (то есть вызывающей диарею) инфекции RV у новорожденных мышей. Патогенная вирусная инфекция обычно является сильным индуктором адаптивного иммунитета. Тем не менее, несмотря на сокращение продолжительности диареи, вызванной RV, лечение антибиотиками увеличивало выработку анти-RV IgA в сыворотке, причем самые высокие титры наблюдались преимущественно в более поздние сроки после заражения (рисунок).Таким образом, в отличие от нашего первоначального прогноза, удаление микробиоты привело к усилению специфичных для RV системных и слизистых антител.

Мыши, лишенные зародышей, демонстрируют усиленный сывороточный ответ антител на ротавирус (RV). Свободных от зародышей самцов и самок мышей C57BL6 инокулировали стерилизованным фильтром RV, фекалии и сыворотку собирали еженедельно вплоть до 9 недели после инокуляции, и образцы анализировали на наличие антител RV с помощью иммуноферментного анализа. За мышами еженедельно до конечной точки эксперимента наблюдали с помощью фекальной культуры на предмет отсутствия микробов. A , C и E , выработка сывороточного иммуноглобулина G (IgG; A ), сывороточного иммуноглобулина A (IgA; C ) и фекального RV IgA ( E ), как измерено по иммунной реактивности ПЖ при однократном разведении супернатанта сыворотки или фекалий через 0–9 недель после инокуляции, что отражает поздние системные и слизистые реакции антител к ПЖ. B , D и F , титры сывороточного RV IgG ( B ), сывороточного RV IgA ( D ) и фекального RV IgA ( F ), измеренные с помощью разбавления образца, при котором OD ₄₅₀ равнялся 0.2 поверх бланка через 9 недель после инокуляции. * P <.05. Сокращение: условно Конв.

Неонатальные мыши, получавшие лечение антибиотиками, демонстрируют повышенную продукцию сывороточного иммуноглобулина A (IgA) после инокуляции ротавируса (RV). Новорожденных лечили антибиотиками, как описано в разделе «Материалы и методы», и им прививали RV. Образцы фекалий и сыворотки собирали через несколько недель после инокуляции, и образцы анализировали на антитела к RV. A и C , продукция сывороточного иммуноглобулина G (IgG; A ) и иммуноглобулина A (IgA; C ) в сыворотке крови, измеренная по иммунной реактивности RV при однократном разведении сыворотки, 4, 6, и 9 недель после инокуляции. B , Титр сывороточного IgG к RV, измеренный с помощью разведения образца, при котором OD ₄₅₀ равнялась 0,2 по сравнению с контрольным образцом, через 9 недель после инокуляции. D , Титр сывороточного IgA к RV, измеренный разведением сыворотки, при котором OD ₄₅₀ равняется 0,2 по сравнению с контрольным образцом, через 9 недель после инокуляции. * P <.05.

Увеличение продолжительности реакции антител на RV с помощью антибиотиков предполагает возможность включения лечения антибиотиками в кампании вакцинации.Однако, учитывая отрицательные потенциальные последствия длительного приема антибиотиков, мы затем попытались определить, может ли более короткое воздействие также усиливать образование антител к RV. Таким образом, мы сравнили эффекты двухнедельного курса антибиотиков (от 1 недели до инокуляции до 1 недели после инокуляции) с контрольными условиями (т.е. без антибиотиков) и с терапией антибиотиками, продолжавшейся на протяжении всего эксперимента (от 1 недели до до 7 недель). после инокуляции). У мышей, получавших антибиотики только в течение 2 недель, бактериальная нагрузка в кале вернулась в течение 2 недель после прекращения приема антибиотиков, тогда как мыши, получавшие антибиотики на протяжении всего эксперимента, продолжали демонстрировать подавление бактерий (дополнительный рисунок 1 B ). и 1 C ).В то время как максимальное усиление ответа специфичных к RV антител наблюдалось при поддерживаемом лечении антибиотиками, 2-недельного курса было достаточно для значительного повышения сывороточных уровней и титров анти-RV IgG и IgA (фигура A — D ). Дальнейший сокращенный курс антибиотиков, продолжавшийся от 2 дней до инокуляции до 3 дней после инокуляции RV, привел к тенденции к увеличению титров анти-RV IgA в кале и сыворотке, что не было статистически значимым (дополнительный рисунок 3). Мы предположили, что опосредованное антибиотиками усиление устойчивости антител слизистой оболочки связано с более устойчивыми уровнями RV-специфических секретирующих антитела клеток (ASC).Таким образом, затем мы выполнили анализ ELISPOT для количественного определения уровней RV-специфических IgA-продуцирующих ASC из собственной пластинки тонкой кишки и пейеровских бляшек. У контрольных мышей инокуляция RV приводила к тому, что RV-специфические ASC переходили с неопределяемого уровня до уровня 4000 клеток на миллион lamina propria и клеток пейеровых пятен, которые затем уменьшались примерно в 40 раз к 7 неделям после инокуляции. Лечение антибиотиками не оказало значительного влияния на образование RV-специфических IgA-продуцирующих ASC через 2 недели после инокуляции.Однако через 7 недель после инокуляции лечение антибиотиками заметно повысило уровни этих клеток. Степень улучшения (примерно в 20 раз) была наибольшей у мышей, получавших антибиотики на протяжении всего эксперимента, но, тем не менее, была устойчивой (увеличение в 10 раз) у мышей, получавших 2-недельный курс антибиотиков (рис. E ).

Лечение антибиотиками приводит к большему сохранению в кишечнике клеток, продуцирующих специфические антитела к ротавирусу (RV). Мышей C57BL6 лечили антибиотиками, как описано в разделе «Материалы и методы».Однако одна группа мышей продолжала терапию антибиотиками только в течение 1 недели после инокуляции (всего 2 недели), тогда как другая группа мышей продолжала терапию антибиотиками на протяжении всего эксперимента (всего 8 недель). A и C , сывороточный иммуноглобулин G (IgG; A ) и сывороточный иммуноглобулин A (IgA; C ) еженедельно в течение 7 недель после инокуляции, что отражает поздние системные и слизистые реакции антител на RV. B и D , титр сывороточного RV IgG ( B ) и титр сывороточного IgA RV ( D ), измеренные разбавлением образца, при котором OD ₄₅₀ равнялась 0.2 поверх бланка через 7 недель после инокуляции. E , Клетки собственной пластинки тонкой кишки (LP) и клетки Пейера (PP) выделяли и наносили на планшеты с покрытием через 2 недели и 7 недель после инокуляции. Концентрация RV-специфических, продуцирующих IgA клеток, секретирующих антитела (ASC), была рассчитана в каждой группе. * P <.05. Сокращение: UnTx, необработанный.

Влияние на микробиоту на базальное состояние активации врожденного иммунитета может регулировать специфический для RV адаптивный иммунитет

Мы предположили, что снижение бактериальной нагрузки с помощью лечения антибиотиками снижает степень базального состояния активации врожденного иммунитета, что позволяет использовать RV-специфический иммунитет. сигналы опасности для более быстрой активации GALT во время инфекции; это должно привести к более сильной активации вирусспецифических клеток и сохранению ASC в кишечнике.Обратной стороной этой гипотезы является то, что индукция большей степени активации врожденного иммунитета перед введением вируса может ослабить ответ антител. Чтобы проверить эту возможность, мышей подвергали воздействию DSS через питьевую воду, что нарушает целостность кишечного эпителиального барьера и приводит к увеличению воздействия на иммунные клетки микробиоты и ее продуктов. Хотя лечение DSS может привести к стойкому опасному для жизни колиту, воздействие низких уровней DSS, таких как 1,0%, приводит лишь к умеренным гистопатологическим изменениям в кишечнике, но все же вызывает легко обнаруживаемую активацию экспрессии провоспалительных генов, которую можно контролировать путем измерения уровни фекального липокалина-2 [21].Соответственно, воздействие 1,0% DSS в течение 1 недели не приводило к явным симптомам колита, но, тем не менее, индуцировало устойчивую экспрессию фекального липокалина-2 (рисунок A ). Лечение DSS не повлияло на течение инфекционности RV (Рисунок B ). Более того, DSS-индуцированное воспаление низкой степени не влияло на начальное образование сывороточного RV-специфического IgG (фиг. C и D ). Однако лечение DSS привело к значительно более низким уровням RV-специфического фекального и сывороточного IgA через 3–9 недель после инокуляции (Рисунок E — H ).Эти результаты предполагают, что состояние базальной активации врожденного иммунитета во время инокуляции RV может модулировать уровни RV-специфических антител. Соответственно, манипулирование этим параметром может быть способом модуляции генерации этих защитных ответов.

Повышение базальной иммунной активации снижает индуцированное ротавирусом (RV) образование антител. Мышей C57BL6 лечили декстрансульфатом натрия (DSS), как описано в разделе «Материалы и методы», и инокулировали RV. A , Экспрессию липокалина-2 в фекалиях анализировали с помощью иммуноферментного анализа. B , Ежедневно собирали образцы фекалий и анализировали антиген RV. C , E и G , был получен супернатант сыворотки и фекалий, и сывороточный иммуноглобулин G (IgG; C ) RV, сывороточный иммуноглобулин A RV (IgA; E ) и фекальный RV IgA ( G ) продукцию, измеренную по иммунной реактивности RV при однократном разведении сыворотки или фекального супернатанта, исследовали в течение 9 недель после инокуляции. D , F и H , титры сывороточного RV IgG ( D ), сывороточного RV IgA ( F ) и фекального RV IgA ( H ), измеренные с помощью разбавления образца, при котором OD ₄₅₀ равнялся 0.2 поверх бланка через 9 недель после инокуляции. * P <.05.

ОБСУЖДЕНИЕ

Микробиота кишечника все больше оценивается как модулятор многочисленных инфекционных и иммунологических процессов. Во многих случаях микробиота кишечника служит для защиты хозяина от инфекционных заболеваний, так что использование антибиотиков приводит к повышенной восприимчивости к ряду бактериальных инфекций. Кроме того, у мышей, подвергнутых удалению микробиоты, нарушена генерация иммунных ответов на некоторые вирусы [12, 13].Таким образом, мы изначально предположили, что устранение микробиоты может повысить восприимчивость к инфекции RV. В соответствии с наблюдением, что микробиота важна для развития GALT [11], который генерирует фекальный IgA, который способствует клиренсу RV [18], у стерильных мышей обнаружено замедленное образование фекальных анти-RV IgA и, соответственно, задержка клиренса RV. Тем не менее, общие последствия удаления микробиоты, особенно когда они были достигнуты с помощью более клинически значимого подхода к лечению антибиотиками, по-видимому, приносили пользу хозяину.В частности, лечение антибиотиками привело к задержке инфицирования RV и снижению общей инфекционности. Такое снижение инфекции было связано и, вероятно, привело к значительному снижению частоты и продолжительности диареи, вызванной RV.

Механизм, с помощью которого устранение микробиоты замедляет инфекционность RV, не ясен, но может быть аналогичен случаю с полиовирусом, реовирусом и вирусом опухоли молочной железы мыши, которые, как недавно сообщалось, инфицировали менее эффективно в отсутствие микробиоты [14 , 23].В таких случаях наблюдали, что бактериальный ЛПС связывает вирус и способствует его проникновению [14]. Хотя наши эксперименты на сегодняшний день не продемонстрировали прямой роли бактериальных лигандов в стимулировании проникновения правого желудочка, антибиотики оказали явное влияние на вирусную нагрузку с незначительным эффектом на репликацию правого желудочка, что предполагает, что аналогичная парадигма может работать. Другая возможность заключается в том, что отсутствие бактерий может снижать экспрессию рецепторов RV, необходимых для проникновения вируса. В самом деле, известно, что микробиота способствует экспрессии некоторых Toll-подобных рецепторов [24, 25], которые, как постулируется, облегчают проникновение кишечных вирусов [14, 23].

Снижение инфекционности RV после лечения антибиотиками, вероятно, привело к уменьшению воздействия на иммунную систему антигенов RV, что, как мы прогнозировали, снизит реакцию антител на вирус. Напротив, антибиотики усиливали ответ антител, в частности, приводя к более стойкому ответу. Такие более высокие титры в более поздние моменты времени, вероятно, обеспечат более длительную и более широкую защиту от последующей инфекции гетерологичными штаммами RV. Механизм, опосредующий этот эффект, не совсем ясен, но может отражать, что так называемые сигналы опасности RV обеспечивают больший стимулирующий эффект на антигенпредставляющие межклеточные взаимодействия, когда такие сигналы возникают в контексте пониженной базальной / фоновой передачи сигналов.В подтверждение этой возможности, удаление микробиоты приводит к снижению уровней в кале иммунных воспалительных маркеров, таких как липокалин-2 (данные не показаны) и relm-β [26], где использование DSS для увеличения состояния иммунной активации до инфицирования RV. привел к менее стойкому ответу антител. В этом контексте мы предполагаем, что неспособность вакцин против RV последовательно вызывать сильные ответы антител в развивающихся странах может отражать измененный состав микробиоты, возможно, обогащенный патобионтами, что приводит к хронической иммунной активации при введении вакцины RV.Другая возможность заключается в том, что удаление микробиоты снижает функционирование регуляторных Т-клеток, что способствует усилению воспалительных Т-клеточных реакций [27]. Расшифровка таких сложных механизмов остается важной исследовательской задачей.

Предполагая, что модель мыши RV может быть переведена на человека, наше исследование имеет несколько значений для использования антибиотиков в контексте инфекции RV и вакцинации. Во-первых, учитывая, что многие клинические диагнозы инфекций основаны на симптомах, а не на лабораторном обнаружении определенного патогена, наши результаты показывают, что решения о назначении антибиотиков не должны опасаться, что это повысит восприимчивость к RV.Более того, наши результаты показывают, что введение вакцины против RV не нужно откладывать в том случае, если человек в настоящее время принимает антибиотики. Скорее, наше исследование предполагает, что это может быть идеальным временем для введения RV и, возможно, других пероральных вакцин. Кроме того, низкая стоимость антибиотиков может оправдывать их избирательное использование при лечении заболеваний, вызываемых RV. Возможно, с активной вспышкой RV-инфекции можно справиться путем быстрого введения антибиотиков с последующей вакцинацией RV. Это действие может снизить тяжесть возникающих инфекций и повысить эффективность вакцины.В качестве альтернативы включение антибиотиков в более широкую кампанию вакцинации против РВ может повысить уровень сероконверсии. Действительно, на основе предложенного нами механизма, с помощью которого антибиотики стимулируют антитела к RV, мы могли бы предположить, что эффект может быть наибольшим в регионах с низким уровнем сероконверсии, таких как Малави, которые могут иметь более высокие уровни базовой иммунной активации. Даже небольшое повышение эффективности вакцины может привести к резкому снижению бремени болезней в обществе из-за коллективного иммунитета. В случае, если наши наблюдения на мышах окажутся актуальными для людей, перед крупномасштабными исследованиями необходимо тщательно изучить пагубные последствия использования антибиотиков, включая повышенную восприимчивость к бактериальным инфекциям [28] и распространение устойчивых к антибиотикам бактерий [29]. использование противомикробных препаратов для борьбы с бременем болезни правого желудочка.В свете этих опасений разработка подходов к избирательному манипулированию микробиотой может предоставить лучшие средства для безопасного усиления иммунного ответа на вакцины против RV. Такие избирательные манипуляции могут принимать форму более специфически действующих антибиотиков и / или введения пробиотиков. Действительно, введение пробиотика увеличивало частоту сероконверсии в когорте финских младенцев, вакцинированных против РВ [30]. Таким образом, хотя понимание механизмов и оптимизация требуют дополнительных экспериментов, подход манипулирования микробиотой может быть полезной стратегией для борьбы с RV.

Дополнительные данные

Дополнительные материалы доступны на сайте The Journal of Infectious Diseases онлайн (http://jid.oxfordjournals.org/). Дополнительные материалы состоят из предоставленных автором данных, которые публикуются в интересах читателя. Размещенные материалы не копируются. Авторы несут полную ответственность за содержание всех дополнительных данных. Вопросы или сообщения об ошибках следует адресовать автору.

Примечания

Благодарности. Мы благодарим Кейтлин Боханнон, Сару Блатт, Даниэля Риоса и Джейсона О за технические советы; и Раму Амару, Тимоти Деннинга и Ифора Уильямса за полезное обсуждение.

Финансовая поддержка. Работа поддержана Национальным институтом здравоохранения (грант DK083890).

Возможный конфликт интересов. Все авторы: о конфликтах не сообщалось.

Все авторы подали форму ICMJE для раскрытия информации о потенциальном конфликте интересов.Выявлены конфликты, которые редакция считает относящимися к содержанию рукописи.

Ссылки

ротавирусных инфекций у детей | Сидарс-Синай

Что такое ротавирус у детей?

Ротавирус — это заразный вирус, вызывающий тошноту и диарею.Это является основной причиной тяжелой инфекционной диареи у детей. Некоторые младенцы и дети у них может быть настолько сильная диарея, что они могут терять слишком много воды (обезвоживание). Они могут нужна неотложная помощь и пребывание в больнице. Ребенок может заразиться ротавирусом подробнее чем однажды. В большинстве случаев более поздние болезни протекают легче. Также существует вакцина от ротавирус.

Что вызывает ротавирус у ребенка?

Ротавирус чаще всего передается фекально-оральным путем.Часто это происходит из-за того, что ребенок не моет руки должным образом или достаточно часто. Это также может быть вызвано употреблением в пищу или питье зараженной пищи или воды.

Вирус может долгое время жить на поверхностях, таких как дверные ручки, игрушки и другие твердые предметы. По этой причине вспышки могут возникать в домашних хозяйствах и детских учреждениях. Чтобы предотвратить распространение вируса, нельзя контактировать с больным ребенком, если он не болен.

Какие дети подвержены риску ротавируса?

Большинство детей заражаются вирусом в возрасте от 3 до 35 месяцев.Инфекции чаще встречаются в более прохладные месяцы года, начиная с осени и заканчивая весной. В это время дети подвергаются большему риску. Любой ребенок, который находится рядом с ребенком, заболевшим ротавирусом, подвергается риску.

Какие симптомы ротавируса у ребенка?

Симптомы могут проявиться в течение 2 дней после контакта ребенка с вирусом. Симптомы могут проявляться у каждого ребенка по-разному. Они могут варьироваться от легких до тяжелых.К наиболее частым симптомам ротавируса относятся:

• Тошнота и рвота
• Водянистая диарея, которая возникает часто и может длиться от 3 до 8 дней
• Боль в животе
• Лихорадка, которая проходит через 1-2 дня

Слишком большая потеря воды из организма (обезвоживание) может произойти быстро, особенно у младенцев. Симптомы обезвоживания могут включать:

• Летаргия
• Сонливость
• Раздражительность
• Сухость во рту
• Жажда
• Бледный или пятнистый цвет кожи
• Глаза запавшие
• Мягкое место ребенка (родничок), которое кажется запавшим
• Меньше или совсем нет слез при плаче
• Меньше мочи или меньше влажных подгузников

Симптомы ротавируса могут быть такими же, как и при других заболеваниях.Убедитесь, что ваш ребенок посещает своего врача для постановки диагноза.

Как диагностируют ротавирус у ребенка?

Медицинский работник спросит о симптомах и истории здоровья вашего ребенка. Он или она проведет медицинский осмотр вашего ребенка. Стул вашего ребенка также может быть проверен на вирус.

Как лечится ротавирус у ребенка?

Лечение будет зависеть от вашего симптомы ребенка, возраст и общее состояние здоровья.Это также будет зависеть от того, насколько серьезным состояние есть. Антибиотики не используются для лечения этого заболевания. Лекарства от поноса бывают тоже не рекомендуется. Некоторые медицинские работники могут порекомендовать пробиотики. Но их эффективность неясна.

Цель лечения — уменьшить симптомы. Лечение может включать:

• Давайте ребенку много воды, смеси, грудного молока или жидкостей с электролитами (сахарами и солями).Не давайте маленьким детям газированные напитки, соки или спортивные напитки.
• Кормить ребенка твердой пищей, если он может есть. Не ограничивайте пищу, если ваш ребенок может есть. Отсутствие еды может привести к тому, что диарея продлится дольше.

Если ваш ребенок теряет слишком много воды, ему, возможно, придется лечь в больницу. Лечение там может включать:

• Внутривенные (IV) жидкости. Тонкий, гибкая трубка вводится ребенку в вену.Жидкости подаются через эту трубку.
• Анализы крови. Готово для измерения уровня сахара, соли и других химических веществ (электролитов) в вашем детская кровь.

Какие возможные осложнения ротавируса у ребенка?

Слишком большая потеря воды из организма (обезвоживание) может произойти быстро, особенно у младенцев. Обезвоживание нужно лечить немедленно (см. Выше).

Как я могу предотвратить ротавирус у моего ребенка?

Если у вашего ребенка ротавирус, он или она может не иметь возможности посещать детский сад или школу во время болезни. Если ваш ребенок находится в больнице, его будут держать подальше от других детей, чтобы предотвратить распространение вируса.

Дома важно мыть руки, чтобы предотвратить распространение болезни. Чтобы предотвратить распространение болезни:

• Осторожно обращайтесь с грязными подгузниками и утилизируйте их.
• Мойте руки до и после ухода за ребенком. Используйте теплую воду с мылом и потрите не менее 20 секунд. Хорошо промойте и высушите на воздухе или используйте чистое полотенце.
• Очистите твердые поверхности, игрушки и дверные ручки дезинфицирующим средством.
• Убедитесь, что ваш ребенок часто моет руки, особенно после туалета.
• Убедитесь, что ваш детский сад поощряет мытье рук.

Узнайте у лечащего врача вашего ребенка о ротавирусной вакцине.Доступны две пероральные ротавирусные вакцины. Это RotaTeq и Rotarix. CDC рекомендует делать детям одну из этих вакцин. Оральная вакцина RotaTeq вводится в возрасте 2, 4 и 6 месяцев. Оральная вакцина Rotarix вводится в возрасте 2 и 4 месяцев.

Когда мне следует позвонить поставщику медицинских услуг для моего ребенка?

Позвоните поставщику медицинских услуг, если у вашего ребенка:

• Симптомы, которые не проходят или ухудшаются
• Новые симптомы

Основные сведения о ротавирусе у детей

• Ротавирус — это заразный вирус, вызывающий тошноту и диарею.
• У некоторых младенцев и детей диарея может быть настолько сильной, что они теряют слишком много воды (обезвоживание). Им может потребоваться неотложная помощь и пребывание в больнице.
• Большинство детей заражаются вирусом в возрасте от 3 до 35 месяцев.
• Вирус вызывает водянистую диарею, которая может длиться от 3 до 8 дней. Это также может вызвать тошноту, рвоту и жар.
• Лечение включает обильное питье, молочную смесь, грудное молоко или жидкости с электролитами (сахарами и солями).
• Если у вашего ребенка ротавирус, он или она не сможет посещать детский сад или школу во время болезни.
• Дома хорошее мытье рук может предотвратить распространение болезни.
• Узнайте у лечащего врача вашего ребенка о ротавирусной вакцине.

Следующие шаги

Советы, которые помогут вам получить максимальную пользу от посещения лечащего врача вашего ребенка:

• Знайте причину визита и то, что вы хотите.
• Перед визитом запишите вопросы, на которые хотите получить ответы.
• Во время посещения запишите название нового диагноза и любые новые лекарства, методы лечения или тесты. Также запишите все новые инструкции, которые ваш врач дает вашему ребенку.
• Узнайте, почему прописано новое лекарство или лечение и как они помогут вашему ребенку. Также знайте, какие бывают побочные эффекты.
• Спросите, можно ли вылечить состояние вашего ребенка другими способами.
• Знайте, почему рекомендуется тест или процедура и что могут означать результаты.
• Знайте, чего ожидать, если ваш ребенок не принимает лекарство, не проходит обследование или процедуру.
• Если вашему ребенку назначен повторный прием, запишите дату, время и цель этого визита.
• Узнайте, как можно связаться с лечащим врачом вашего ребенка в нерабочее время. Это важно, если ваш ребенок заболел и у вас есть вопросы или вам нужен совет.

Ротавирус (для родителей) — Cook Children’s

Что такое ротавирус?

Ротавирус — распространенный вирус, поражающий слизистую оболочку кишечника. Он вызывает рвоту и диарею, особенно у младенцев и маленьких детей. Центры по уходу за детьми являются частым местом вспышек инфекций.

Прививки от ротавируса рекомендуются для большинства детей и могут предотвратить многие ротавирусные инфекции.

Каковы признаки и симптомы ротавируса?

У детей с ротавирусной инфекцией есть:

У них также могут быть кашель и насморк. Однако, как и все вирусы, некоторые ротавирусные инфекции вызывают незначительные симптомы или не вызывают их вообще, особенно у взрослых.

Иногда диарея настолько сильна, что может быстро привести к обезвоживанию. Обезвоженный ребенок может:

• испытывать жажду
• быть капризным
• быть беспокойным
• очень усталым
• иметь запавшие глаза
• иметь сухость во рту и языке
• иметь сухую кожу
• иметь запавшее мягкое место ( родничок) у ребенка
• реже ходите в туалет, чтобы пописать
• у младенцев, носите сухой подгузник в течение нескольких часов

Заразен ли ротавирус?

Да, ротавирус легко передается от человека к человеку.Инфекции распространены в зимние и весенние месяцы, особенно в группах, таких как детские сады.

Вирус передается с калом инфицированных людей до и после появления у них симптомов. Дети могут заразиться, если засовывают пальцы в рот после прикосновения к загрязненной поверхности, например к игрушке. Обычно это происходит, когда дети недостаточно часто моют руки, особенно перед едой и после посещения туалета.

Люди, ухаживающие за детьми, в том числе работники здравоохранения и по уходу за детьми, также могут распространять вирус, особенно если они не моют руки после смены подгузников.

Какие проблемы могут возникнуть?

Каждый год в США ротавирусные инфекции:

• вызывают около 3 миллионов случаев диареи
• приводят к 55000 госпитализаций по поводу диареи и обезвоживания у детей младше 5 лет

Тяжелые инфекции, называемые ротавирусным гастроэнтеритом, являются наиболее распространенными. ведущая причина тяжелой обезвоживающей диареи у младенцев и детей младшего возраста.

Эти инфекции вызывают относительно немного смертей в США. Но от диареи, связанной с ротавирусом, ежегодно умирает более полумиллиона человек во всем мире, особенно в развивающихся странах.

Как лечится ротавирус?

Младенцам и детям ясельного возраста, страдающим обезвоживанием, может потребоваться лечение в больнице. Им будут вводить жидкости внутривенно, чтобы вернуть нормальный уровень жидкости и соли в организме. Большинство детей старшего возраста можно лечить дома.

Вашему врачу может потребоваться провести анализ крови, мочи или стула вашего ребенка, чтобы подтвердить, что диарея вызвана ротавирусом, а не бактериями. Антибиотики действуют только против болезней, вызванных бактериями. Таким образом, врач не будет назначать антибиотики для лечения ротавирусной инфекции.

Домашнее лечение

Чтобы предотвратить обезвоживание, следуйте советам врача относительно того, что вашему ребенку следует есть и пить. Ваш врач может посоветовать вам давать ребенку специальные напитки, заменяющие жидкости организма, особенно если диарея длилась более 2 или 3 дней.

Дети с легкой диареей, не страдающие обезвоживанием, должны есть как обычно, но пить больше жидкости. Избегайте фруктовых соков и безалкогольных напитков, так как они могут усугубить диарею. Людям с легким или умеренным обезвоживанием следует часто пить небольшие количества раствора для пероральной регидратации.Когда станет лучше, они могут вернуться к обычному питанию. Дети, находящиеся на грудном вскармливании, продолжают грудное вскармливание.

Ребенку, которого рвет, необходимо чаще есть меньшее количество пищи. Не давайте ребенку лекарства от рвоты или диареи, отпускаемые без рецепта, если их не рекомендует врач.

Можно ли предотвратить ротавирус?

Ротавирусная вакцина может предотвратить многие причины ротавируса. Вакцина представляет собой жидкость, которую вводят внутрь детям в возрасте 2 и 4 месяцев, а затем в 6 месяцев, в зависимости от марки вакцины.

Тщательное мытье рук — зачастую лучший способ ограничить распространение ротавирусной инфекции. Дети с ротавирусом должны оставаться дома и не посещать присмотр за детьми до тех пор, пока диарея не пройдет.

Когда мне звонить врачу?

Позвоните врачу, если у вашего ребенка есть признаки ротавирусной инфекции, например:

• водянистая диарея
• лихорадка
• тошнота
• рвота

Немедленно позвоните, если у вашего ребенка есть признаки обезвоживания.

RotaTeq (Ротавирусная вакцина) Вопросы и ответы

Что такое RotaTeq?
RotaTeq — вакцина, производимая Merck and Co.Inc., (Merck) лицензирована FDA в 2006 году для профилактики ротавирусного гастроэнтерита у младенцев в возрасте от 6 до 32 недель.

Что такое ротавирус и как часто он встречается?
Заражение ротавирусом — основная причина тяжелой диареи у младенцев и детей младшего возраста в США и во всем мире. В Соединенных Штатах заболевание чаще возникает зимой, причем наибольшая активность приходится на период с ноября по май. Большинство детей, будь то в США или где-либо еще, заражаются ротавирусом в возрасте до двух лет.

Иногда диарея и рвота из-за ротавирусной инфекции могут привести к потере жидкости организма (обезвоживанию), которая в некоторых случаях может быть достаточно серьезной, чтобы потребовать госпитализации. До внедрения ротавирусной вакцины в Соединенных Штатах ротавирус приводил к примерно 55 000–70 000 госпитализаций и 20–40 детской смертности ежегодно. Однако в развивающихся странах ротавирусный гастроэнтерит является основной причиной детской смертности и, по оценкам, вызывает несколько сотен тысяч смертей ежегодно.
После того, как младенец подвергся воздействию ротавируса, симптомы проявятся примерно через 2 дня. У младенцев и детей развивается рвота и водянистая диарея, которые могут длиться 3-8 дней, часто возникают лихорадка и боли в животе. Ребенок может болеть ротавирусным гастроэнтеритом более одного раза, потому что существует много различных типов ротавирусов, но повторные инфекции, как правило, менее серьезны, чем первоначальная инфекция.

Как лечится ротавирусный гастроэнтерит?
Лечение ротавирусной инфекции в основном заключается в питье жидкостей, содержащих воду с солями и некоторыми минералами (пероральная регидратация).Такое лечение обычно бывает эффективным; однако в тяжелых случаях может потребоваться посещение отделения неотложной помощи или госпитализация, чтобы можно было заменить потерянные жидкости организма жидкостями, вводимыми через тонкую трубку, введенную в вены (внутривенная или внутривенная линия).

Как распространяется ротавирус?
Ротавирус заразен, и инфекция обычно передается от человека к человеку фекально-оральным путем. Фекально-оральная передача происходит, когда бактерии или вирусы, обнаруженные в стуле одного ребенка, проглатываются другим ребенком.Это может произойти, когда небольшое количество фекалий может быть обнаружено на таких поверхностях, как игрушки, книги, одежда и т. Д., А также на руках родителей или воспитателей; но обычно невидимы. Ротавирус также может передаваться через прием воды или пищи, загрязненных фекалиями, или через респираторные капли, которые люди чихают, кашляют, капают или выдыхают. Показатели заболеваемости среди детей в развитых и менее развитых странах схожи.

Как выдается RotaTeq?
Вакцина представляет собой жидкость, вводимую внутрь, первая доза вводится в возрасте 6–12 недель, а две дополнительные дозы вводятся с интервалами от 4 до 10 недель.Все три дозы следует завершить до достижения ребенком 32-недельного возраста. RotaTeq можно назначать недоношенным детям в зависимости от их возраста в неделях с момента рождения.

Можно ли вакцинировать детей младшего возраста или старшего возраста с помощью RotaTeq?
Нет, вакцину следует вводить младенцам с первой дозой в возрасте 6–12 недель, а последующие дозы вводить с интервалами от 4 до 10 недель. Третью дозу нельзя давать после 32-недельного возраста.

Насколько хорошо RotaTeq предотвращает ротавирусный гастроэнтерит?
В целом, около 72 000 здоровых младенцев во всем мире были изучены в рандомизированных плацебо-контролируемых исследованиях, чтобы оценить безопасность RotaTeq и эффективность его действия.Данные, показывающие, насколько хорошо RotaTeq предотвращает ротавирусный гастроэнтерит, получены от почти 7000 этих младенцев из США и Финляндии. В этих исследованиях RotaTeq предотвратил 74% всех случаев ротавирусного гастроэнтерита и 98% тяжелых случаев.

Кроме того, RotaTeq снизила потребность в госпитализации по поводу гастроэнтерита, вызванного ротавирусом, на 96%.

Есть ли возможные побочные эффекты, связанные с использованием RotaTeq?
Во время клинических испытаний частота серьезных нежелательных явлений была аналогичной у младенцев, получавших RotaTeq, по сравнению с младенцами, не получавшими вакцину.
О следующих случаях сообщалось чаще у младенцев, получавших RotaTeq, по сравнению с теми, кто получал плацебо; диарея (24,1% у получателей RotaTeq против 21,3% у тех, кто получал плацебо), рвота (15,2% у получателей RotaTeq против 13,6% у тех, кто получал плацебо), ушная инфекция (14,5% у получателей RotaTeq против 13,0% у тех, кто получал плацебо), насморк нос и боль в горле (6,9% у получателей RotaTeq против 5,8% у получателей плацебо), хрипы и кашель (1,1% у получателей RotaTeq против 0.7% в группе плацебо).

Другая вакцина для предотвращения ротавирусной инфекции была добровольно снята с рынка производителем в 1999 году из-за случаев инвагинации, связанной с введением этой конкретной вакцины. Оценивался ли риск инвагинации для RotaTeq?

Инвагинация — это редкая закупорка кишечника, возникающая, когда одна часть кишечника выдвигается в соседнюю часть.

Большое исследование с участием более 70 000 младенцев, специально разработанное для оценки риска инвагинации, подобное тому, которое было обнаружено для предыдущей ротавирусной вакцины, было проведено до лицензирования RotaTeq.Результаты этого исследования не показали повышенного риска инвагинации для RotaTeq по сравнению с младенцами, получавшими плацебо. Для дальнейшего наблюдения за RotaTeq на предмет вероятности того, что он может быть связан с увеличением частоты инвагинации или других серьезных побочных эффектов, Merck провела еще одно исследование с участием более 85000 младенцев после получения лицензии. Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC) также провели большое исследование в рамках своей Программы данных по безопасности вакцин (VSD), в ходе которого оценивалась безопасность более 786 000 доз RotaTeq (309 000 первых доз).Вакцинация RotaTeq не была связана с повышенным риском инвагинации в ходе предварительного лицензирования исследования, исследования после выдачи лицензии, проведенного Merck, или исследования VSD после выдачи лицензии. Тем не менее, несколько исследований, проведенных в других странах после одобрения, показали потенциальный повышенный риск инвагинации кишечника после применения как вакцины RotaTeq, так и другой ротавирусной вакцины, Rotarix. Rotarix, производимый GlaxoSmithKline Biologicals, получил лицензию FDA в 2008 году.

Таким образом, в 2010 году FDA запустило исследование в рамках программы быстрого мониторинга безопасности иммунизации (PRISM) Mini-Sentinel Postlicensure Rapid Immunization Safety Monitoring (PRISM) для оценки потенциального риска инвагинации кишечника среди U.S. младенцы после вакцинации против ротавируса. В исследовании PRISM повышенный риск инвагинации наблюдался в течение 21 дня после первой дозы RotaTeq, при этом большинство случаев происходило в первые 7 дней. Основываясь на этих результатах, примерно от 1 до 1,5 дополнительных случаев инвагинации происходит на 100 000 вакцинированных младенцев в США в течение 21 дня после первой дозы RotaTeq.

Что происходит при инвагинации кишечника?

Инвагинация чаще всего возникает в месте соединения тонкой кишки с толстой.Поскольку две стенки кишечника прижимаются друг к другу, это вызывает воспаление, отек и, в конечном итоге, снижение кровотока. Если это не обнаружено на ранней стадии, может возникнуть внутреннее кровотечение, отверстие в кишечнике и инфекция в брюшной полости, потому что ткань кишечника погибла из-за снижения кровотока. При своевременном обнаружении и лечении почти все пациенты полностью выздоравливают. Инвагинация может возникать спонтанно при отсутствии вакцинации и может возникать у людей любого возраста, но обычно возникает в возрасте от 5 до 9 месяцев.В США он встречается примерно у 34 из 100 000 младенцев в год.

Что FDA хочет, чтобы медицинские работники, родители и опекуны имели в виду при применении RotaTeq?

FDA считает, что преимущества вакцинации RotaTeq по-прежнему перевешивают риски, связанные с вакцинацией, включая риск инвагинации. FDA рекомендует родителям внимательно следить за своими младенцами на предмет признаков инвагинации, особенно в течение первых 7 дней после вакцинации RotaTeq или Rotarix.Эти симптомы включают боль в животе, рвоту, диарею, кровь в стуле или изменение дефекации. Важно связаться с лечащим врачом ребенка, если у ребенка появятся какие-либо из этих признаков в любое время после вакцинации, даже если с момента последней дозы вакцины прошло несколько недель.

Кого нельзя вакцинировать с помощью RotaTeq?

Младенцы с любым из следующих признаков не должны проходить иммунизацию с помощью RotaTeq:

• аллергия на любой из ингредиентов RotaTeq
• аллергическая реакция после приема предыдущей дозы RotaTeq
• Тяжелый комбинированный иммунодефицит
• история инвагинации

Есть ли определенные заболевания или состояния, которые следует обсудить с врачом перед введением RotaTeq?

Родители должны сообщить лечащему врачу своего ребенка обо всем, что может быть причиной того, что их ребенок не получает RotaTeq:

• известное или предполагаемое ослабление иммунной системы, вызванное лечением, которое они принимают, например облучением или классом препаратов, называемых кортикостероидами, или такими состояниями, как ВИЧ, рак, заболевания крови (например,g., лейкоз) и трансплантат почки или другого органа (дополнительную информацию см. в утвержденной маркировке)
• младенцев, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, если не установлено, что младенец не инфицирован ВИЧ
• температура выше или равна 38,1 ° C (100,5 ° F)
• перенесенная ротавирусная инфекция в анамнезе
• активное кратковременное желудочно-кишечное заболевание
• повторяющиеся желудочно-кишечные проблемы, такие как частая диарея и нарушение нормального развития
• заболевания желудка или брюшной полости в анамнезе с рождения
• история абдоминальной хирургии
• получение переливания крови или продуктов крови, включая иммуноглобулины, в течение 42 дней
• проживают в семье с людьми, чья иммунная система ослаблена и, следовательно, не может также бороться с инфекциями

Каждый раз перед тем, как младенец получит дозу RotaTeq, родители должны обсудить со своим лечащим врачом любые проблемы со здоровьем, которые могут быть у их младенца, и любые лекарства, которые их младенец в настоящее время принимает или которые были прописаны.

Можно ли вводить RotaTeq с другими вакцинами?

При предварительном лицензировании RotaTeq вводили с дифтерийным и столбнячным токсоидами и бесклеточной коклюшной вакциной (DTaP), инактивированной полиовирусной вакциной (IPV), конъюгированной вакциной против гемофильной палочки типа b (Hib), вакциной против гепатита B и пневмококковым конъюгатом. Не было доказательств снижения ответа антител на вакцины, которые вводили одновременно с RotaTeq.

Как я могу сообщить в FDA о серьезных побочных эффектах RotaTeq или других вакцин?

О побочных реакциях и других проблемах, связанных с вакцинами, следует сообщать в Систему сообщений о побочных эффектах вакцин, которая поддерживается FDA и CDC.Чтобы получить копию формы сообщения о вакцинации, позвоните по телефону 1-800-822-7967 или сообщите о ней по телефону http://www.vaers.hhs.gov

Ротавирусная вакцина: что нужно знать

Зачем делать прививки?

Ротавирусная вакцина может предотвратить ротавирус болезнь .

Ротавирус вызывает диарею, в основном у младенцев и маленьких детей. Диарея может быть тяжелой и приводить к обезвоживанию.У детей с ротавирусной инфекцией также часто бывают рвота и жар.

Ротавирусная вакцина

Ротавирусная вакцина вводится путем закапывания капель в рот ребенка. Младенцы должны получить 2 или 3 дозы ротавирусной вакцины, в зависимости от марки вакцины.

Почти все дети, которым вводят ротавирусную вакцину, будут защищены от тяжелой ротавирусной диареи.

Другой вирус, называемый цирковирусом свиней (или его части), содержится в ротавирусной вакцине. Этот вирус не заражает людей, и угроза безопасности неизвестна.Для получения дополнительной информации см. Обновленная информация о рекомендациях по использованию ротавирусных вакцин.

Ротавирусную вакцину можно вводить одновременно с другими вакцинами.

До появления вакцины

До появления ротавирусной вакцины ротавирусная болезнь была распространенной и серьезной проблемой для здоровья детей в Соединенных Штатах. Почти все дети в Соединенных Штатах перенесли хотя бы одну ротавирусную инфекцию до своего 5-летия. Ежегодно десятки тысяч пациентов попадали в больницу, некоторые из них умирали.

Поговорите со своим врачом

Сообщите своему поставщику вакцины, если человек, получающий вакцину:

• Имел аллергическая реакция после предыдущей дозы ротавирусной вакцины или тяжелая, опасная для жизни аллергия .

• Имеет ослабленная иммунная система .

• Имеет тяжелый комбинированный иммунодефицит (ТКИД).

• Перенесли непроходимость кишечника по типу Инвагинация .
  

В некоторых случаях лечащий врач вашего ребенка может решить отложить вакцинацию против ротавируса до следующего визита.

Младенцы с легкими заболеваниями, например с простудой, могут быть вакцинированы. Младенцы со средним или тяжелым заболеванием обычно должны дождаться выздоровления, прежде чем делать ротавирусную вакцину.

Лечащий врач вашего ребенка может предоставить вам дополнительную информацию.

Риски реакции на вакцину

Раздражительность или легкая временная диарея или рвота могут возникнуть после вакцинации против ротавируса.

Существует также небольшой риск инвагинации кишечника в результате вакцинации против ротавирусной инфекции, обычно в течение недели после первой или второй дозы вакцины. Инвагинация — это разновидность непроходимости кишечника, которая лечится в больнице и может потребовать хирургического вмешательства. Это происходит естественным образом у некоторых младенцев каждый год в Соединенных Штатах, и, как правило, причина этого неизвестна. Этот дополнительный риск оценивается в диапазоне от 1 из 20 000 младенцев в США до 1 из 100 000 младенцев в США, которые получают вакцину против ротавируса. Ваш лечащий врач может предоставить вам дополнительную информацию.

Как и в случае с любым лекарством, существует очень малая вероятность того, что вакцина вызовет тяжелую аллергическую реакцию, другие серьезные травмы или смерть.

Что делать, если возникла серьезная проблема?

При инвагинации поищите признаки боли в животе и сильного плача. Вначале эти эпизоды могли длиться всего несколько минут и приходить и уходить несколько раз в час. Младенцы могут подтягивать ноги к груди. У вашего ребенка может быть несколько раз рвота или кровь в стуле, или он может казаться слабым или очень раздражительным.Эти признаки обычно появляются в течение первой недели после первой или второй дозы ротавирусной вакцины, но ищите их в любое время после вакцинации. Если вы считаете, что у вашего ребенка инвагинация, немедленно обратитесь к врачу. Если вы не можете связаться со своим врачом, отвезите ребенка в больницу. Сообщите им, когда вашему ребенку сделали ротавирусную вакцину.

Аллергическая реакция может возникнуть после того, как вакцинированный покинет клинику. Если вы видите признаки тяжелой аллергической реакции (крапивница, отек лица и горла, затрудненное дыхание, учащенное сердцебиение, головокружение или слабость), позвоните 9-1-1 и доставьте человека в ближайшую больницу.Если вас интересуют другие признаки, позвоните своему врачу.

О побочных реакциях следует сообщать в Систему сообщений о побочных эффектах вакцин (VAERS). Этот отчет обычно подает ваш лечащий врач, или вы можете сделать это самостоятельно. Посетить Веб-сайт VAERS или позвоните 1-800-822-7967 . VAERS предназначен только для сообщения о реакциях, и персонал VAERS не дает медицинских рекомендаций.

Национальная программа компенсации травм от вакцин

Национальная программа компенсации за травмы от вакцин (VICP) — это федеральная программа, созданная для выплаты компенсации людям, которые могли быть травмированы определенными вакцинами.Посетить Веб-сайт внешнего значка VICP или позвоните 1-800-338-2382 , чтобы узнать о программе и о подаче иска. Срок подачи иска о компенсации ограничен.

Как я могу узнать больше?

Информация, содержащаяся на этом веб-сайте, не должна использоваться вместо медицинской помощи и рекомендаций вашего педиатра. Ваш педиатр может порекомендовать лечение по-разному, исходя из индивидуальных фактов и обстоятельств.

Ротавирусная инфекция | Свинья

Предпосылки и история

Эти вирусы широко распространены как в популяциях свиней, так и в большинстве других млекопитающих, и существует ряд различных типов или групп.

Группа A, вероятно, обычная свинья, но встречаются также группы B, C и E. Однако частота, с которой встречаются разные, неизвестна и с практической точки зрения, вероятно, носит академический характер.

Ротавирусы распространены повсеместно и присутствуют в большинстве, если не во всех стадах свиней, практически со 100% сероконверсией взрослого поголовья.Еще одной эпидемиологической особенностью является их стойкость за пределами свиней, где они устойчивы к изменениям окружающей среды и многим дезинфицирующим средствам. Материнские антитела сохраняются в течение 3-6 недель, после чего свиньи становятся восприимчивыми к инфекции, но их воздействие не обязательно приводит к заболеванию. Подсчитано, что только 10-15% диареи у свиней вызваны первичной ротавирусной инфекцией.

Тот факт, что вирус сохраняется в окружающей среде, является причиной широкого распространения инфекции и, следовательно, постоянного риска заболевания.

Клинические признаки

Свиньи

Поросята

• Обильный водянистый понос у молодых животных.
• Атрофия ворсинок часто сопровождается обезвоживанием, мальабсорбцией и истощением.
• Диарея обычно продолжается 3-4 дня.
• Свиньи выглядят полыми в брюшной полости и обезвоживаются.
• Глаза запавшие.
• Кожа вокруг прямой кишки влажная.

Отъемыши и производители

В зрелом стаде:

• Обильный водянистый понос появляется у поросят в возрасте от 7 до 10 дней.С возрастом он становится все менее важным.
• Однако, если присутствуют патогенные штаммы E. coli , может развиться тяжелое заболевание с высокой смертностью.
• Атрофия ворсинок — постоянный признак, приводящий к мальабсорбции.
• Обезвоживание.
• Понос обычно длится 3-4 дня.
• Свиньи выглядят пустыми.
• Глаза запавшие.
• Кожа вокруг прямой кишки влажная.

Роль ротавирусов у свиней после отъема, вероятно, менее важна, хотя они часто выявляются при острой болезни E.coli диарея возникает в первые 7-10 дней после отлучения от груди.

Диагноз

При возникновении диареи у свиней в возрасте от 10 до 40 дней необходимо рассматривать ротавирусную инфекцию как первичный или вторичный возбудитель. Требуются лабораторные исследования с помощью электронной микроскопии и ИФА. Попробуйте выполнить лакмусовую бумажку, смочив скребок лакмусовой бумагой. Инфекция E. coli станет синей, а вирусная инфекция — красным.