Течение болезни энтеровирус: о чем должны знать и помнить родители

Содержание

Летняя болезнь — энтеровирусная инфекция

14.06.2021

Лето — пора отпусков и отдыха, когда мы балуем себя и своих детей свежими овощами и фруктами, стремимся выехать на природу, к озёрам и рекам. Вот только радость от общения с природой может омрачить… энтеровирусная инфекция, риски заболеть которой возрастают в тёплые месяцы года. Что это за болезнь и как от неё защититься?

Энтеровирусная инфекция – инфекционное заболевание, вызываемое определённым видом кишечных вирусов. Энтеровирусы (ЭВИ) имеют много разновидностей и характеризуются многообразием клинической картины вызываемых ими заболеваний. Они могут поражать слизистые оболочки, мышцы, центральную нервную систему. Основными возбудителями являются вирусы Коксаки А, Коксаки В, ECHO, энтеровирусы 68-71 типов.

Специалисты напоминают, что источником энтеровирусной инфекции является больной человек или носитель инфекции без клинических проявлений.

Инфекция передается через воду и пищу, контактно-бытовым, воздушно-капельным путями. Факторами передачи могут быть недостаточно обработанные овощи, фрукты, зелень, игрушки, грязные руки, сырая вода и приготовленный из нее лед, а также другие объекты внешней среды, загрязненные энтеровирусами.

Важно знать, что энтеровирусы устойчивы во внешней среде: хорошо переносят низкие температуры (в условиях холодильника они сохраняются в течение нескольких недель), в водопроводной воде выживают до 18 дней, могут сохраняться на предметах обихода, продуктах питания (молоко, фрукты, овощи). Этиловый спирт (70% и более высокой концентрации) убивает энтеровирусы при экспозиции не менее 3-х часов. Энтеровирусы погибают под воздействием ультрафиолетового облучения, при высушивании и кипячении.

ЭВИ характеризуется разнообразием клинических форм и симптомов болезни (температура 39-40 С, головная и мышечная боль, сыпь, тошнота, рвота, герпетическая ангина, жидкий стул, конъюнктивит и др.).

В большинстве случаев заболевание проходит без осложнений, но возможны и тяжелые формы проявления болезни. Наиболее опасен серозный менингит, который сопровождается сильными головными болями, лихорадкой, рвотой.

ЭВИ отличается высокой контагиозностью с быстрым распространением заболевания. При отсутствии ранней изоляции больных в течение 2-3 недель может переболеть до 60 – 80% детского коллектива, поэтому в детских коллективах (школах, летних лагерях, детских садах и др.) особенно важно проведение профилактических мероприятий.

Запомните несколько простых правил личной гигиены, соблюдая которые вы значительно уменьшаете шансы встретиться с энтеровирусом:

  • Для питья используйте только кипяченую или бутилированную воду;

  • Мойте руки с мылом перед каждым приемом пищи и после каждого посещения туалета;

  • Обеспечьте индивидуальный набор посуды для каждого члена семьи, особенно для детей;

  • Перед употреблением овощей и фруктов (в том числе бананов, арбузов, дынь) их необходимо тщательно мыть с применением щетки и последующим ополаскиванием кипятком;

  • Употребляйте в пищу доброкачественные продукты, не приобретайте продукты питания у частных лиц, в неустановленных для торговли местах;

  •  Купайтесь только в официально разрешенных местах, при купании старайтесь не заглатывать воду;

  •  Чаще проветривайте комнаты, влажную уборку проводите с применением дезинфицирующих средств.

Если вам не удалось уберечься от заболевания, и у вас появились клинические проявления инфекционного заболевания (повышение температуры тела, головная боль, рвота и другое) – не занимайтесь самолечением, а обратитесь за квалифицированной медицинской помощью.

Просмотров: 330

Энтеровирусные инфекции

Энтеровирусные инфекции (ЭВИ) — группа острых заболеваний, вызываемых энтеровирусами, и характеризующиеся многообразием клинических проявлений от легких лихорадочных состояний до тяжелых менигоэнцефалитов, миокардитов.


У разных людей энтеровирусная инфекция развивается по-разному и проявляется разными симптомами: у кого-то она может протекать почти незаметно или вызывать только симптомы похожие на обычную простуду, а у кого-то она может развиваться очень тяжело.
Первыми и единственными симптомами энтеровирусной инфекции могут быть: температура от 38,5°С до 40°С, которая сохраняется в течение нескольких дней, сильная слабость и озноб; головная боль, боли в мышцах и суставах; чуть позже (но не обязательно) могут появиться: боли в горле (ангина), тошнота и рвота; боли в животе; понос.

Здоровый ребенок или взрослый человек может заразиться энтеровирусной инфекцией от другого человека, который недавно был заражен и переболел этой болезнью. Вирус содержится в частичках слюны, слизи (из горла), а также в частичках кала заболевшего человека. Здоровые люди могут заразиться при общении с заболевшим человеком, при использовании общей посуды или полотенца, при употреблении в пищу воды или продуктов питания, на которые могли попасть слюна или частички кала зараженного человека. Дети могут заразиться от других детей во время игры.
Еще одним источником заражения энтеровирусной инфекцией могут быть плавательные бассейны и естественные водоемы, в которых энтеровирусы могут выживать в течение некоторого времени.
Ежегодно в мире регистрируются сотни миллионов случаев заражения энтеровирусами. Энтеровирусной инфекцией можно заразиться в любое время года, однако особенно часто случаи этой болезни регистрируется летом и в начале осени.
Инкубационный период при энтеровирусной инфекции составляет от 1 до 14 дней, чаще 5-7 дней. Человек, который заразился энтеровирусом, может стать заразным за несколько дней до появления первых симптомов болезни.
После начала болезни, вирус продолжает выделяться с частицами слизи из горла в течение 1-3 недель и частицами кала в течение 1-2 месяцев.
Если вы или ваш ребенок заболели энтеровирусной инфекцией и вы хотели бы защитить от заражения других членов семьи, постарайтесь соблюдать следующие правила: в течение всего периода болезни и еще в течение 3 недель после выздоровления, следите за тем, чтобы заболевший человек использовал отдельную посуду, полотенце и белье.
Старайтесь чаще мыть руки с мылом (особенно после контакта с заболевшим человеком и любыми предметами, на которых может быть его слюна или частицы кала) и настаивайте на том, чтобы сам заболевший человек чаще мыл руки.
Кроме сыпи в виде сероватых пузырьков на руках и ногах, энтеровирусная инфекция может провоцировать появление более или менее обильной сыпи в виде красных пятен, которая может быть очень похожа на сыпь при кори или при краснухе.
Учитывая возможные пути передачи, меры личной профилактики должны заключаться в соблюдении правил личной гигиены, соблюдении питьевого режима (кипяченая вода, бутилированная вода), тщательной обработке фруктов, овощей с применением щетки и последующим ополаскиванием кипятком. Рекомендуется влажная уборка жилых помещений не реже 2 раз в день, проветривание помещений.
В целях раннего выявления заболевания необходимо наблюдение за детьми, бывшими в контакте с больными, с термометрией не реже 2 раз в день в течение 10 дней. Следует избегать посещения массовых мероприятий, мест с большим скоплением людей (общественный транспорт, кинотеатры и т.д.). Ни в коем случае не допускать посещение ребенком организованного детского коллектива (школа, детские дошкольные учреждения) с любыми проявлениями заболевания, так как это способствует его распространению и заражению окружающих.
После перенесенной энтеровирусной инфекции в организме человека, обычно, формируется сильный иммунитет, который защищает его от заражения этим же микробом еще раз. Тем не менее, этот иммунитет может быть неэффективен против всех разновидностей энтеровирусной инфекции.

Предписание о проведении дополнительных (профилактических) мероприятий, в связи с сезонным подъемом заболеваемости энретровирусной инфекцией

 

 

ГБУЗ «Городская поликлиника»| Энтеровирусные болезни. Симптомы, профилактика и лечение |


Энтеровирусные болезни — острые инфекционные заболева­ния, вызываемые кишечными вирусами из группы Коксаки и ECHO. Клинические проявления многообразны, нередко связаны с поражением центральной нервной системы, мышц, миокарда и кожных покровов.

Этиология. Возбудители энтеровирусных болезней—неполиомиелитные вирусы. Кишечные вирусы относятся к пикорнавирусам (семейство

Picornavindae, род Enterovirus). Существует 23 серотипа вируса Коксаки А, 6 серотиггов Коксаки В, 32 серотипа

виру­сов ECHO и еще 5 энтеровирусов человека (энтеровирусы 68-72 типов). Энтеровирус 70 является возбудителем острого геморраги­ческого конъюнктивита. Энтеровирус 72 соответствует вирусу ге­патита А (см. вирусные гепатиты). Общие свойства энтеровирусов: а) небольшие размеры (15-35 нм), б) содержат РНК, в) устойчивы к эфиру, 70% спирту, 5% лизолу, к замораживанию.

Эпидемиология. Источником инфекции является только чело­век. Инфекция передается воздушно-капельным (от больных) и фекально-оральным (от вирусоносителей) путем. Заболевание рас­пространено повсеместно. В странах умеренного климата харак­терна сезонность с повышением заболеваемости в конце лета и в начале осени. Заболевают преимущественно дети и лица молодо­го возраста. Заболевания наблюдаются в виде спорадических слу­чаев, локальных вспышек (чаще в детских коллективах) и в виде крупных эпидемий, поражающих ряд стран.

Патогенез. Кишечные вирусы проникают в организм через сли­зистую оболочку верхних отделов респираторного и пищевари­тельного тракта. В ряде случаев на месте ворот инфекции возни­кают изменения в виде поражения слизистых оболочек (синдром острого респираторного заболевания, фарингиты, герпангина). После накопления вируса в месте первичного размножения возбудитель проникает в кровь (вирусемия) и разносится по всему организму. Энтеровирусы обладают тропизмом к нервной ткани, мышцам и эпителиальным клеткам, что проявляется и в клиничес­кой картине болезни, а также в морфологических изменениях тка­ней. Некоторое значение имеет лимфогенное распространение ви­русов. У беременных возможно внутриутробное поражение пло­да. Перенесенное энтеровирусное заболевание (или инаппарантная инфекция) оставляет после себя иммунитет к тому типу вируса, которым была обусловлена инфекция. Существуют перекрестные иммунологические реакции к некоторым энтеровирусам.

Симптомы и течение. Инкубационный период продолжается от 2 до 10 дней (чаще 3-4 дня). Энтеровирусные болезни характе­ризуются многообразием клинических проявлений. Некоторые из клинических форм (герпангина, эпидемическая миалгия, перикар­диты) связаны с определенной группой энтеровирусов. Заболева­ния начинаются остро. Ниже приводится краткая характеристика отдельных клинических форм. Нередко наблюдаются сочетанные признаки различных клинических форм.

Герпангина вызывается вирусами Коксаки А (серотипы 2,3,4, 6,7 и 10) и Коксаки В-3. Заболевание начинается остро, быстро повышается температура тела до 39-40°С, однако общее состоя­ние больных остается удовлетворительным. Лихорадка длится 2-5 дней. Боли в горле выражены умеренно или отсутствуют. Харак­терны изменения зева: на фоне умеренно гиперемированной сли­зистой оболочки зева появляются единичные (от 1 до 20) четко отграниченные элементы, которые иногда представлены в виде небольших папул (1-2 мм в диаметре), затем они превращаются в пузырьки (до 5 мм), наполненные прозрачной жидкостью. Пузырь­ки быстро лопаются, и на их месте возникают поверхностные изъязвления, покрытые сероватым налетом и окруженные узким венчиком гиперемированной слизистой оболочки. Отдельные яз­вочки могут сливаться, образуя более обширные дефекты (до 7 мм). Расположены они на передних дужках, реже на нёбе, язычке, нёбных миндалинах. К 4-7-му дню болезни наступает заживление дефекта слизистой оболочки без каких-либо следов. У 1/3 больных наблюдаются и другие проявления энтеровирусных заболеваний.

Эпидемическая миалгия (плевродиния, болезнь Борнхольма) вы­зывается вирусами Коксаки В (типы 1-5), Коксаки А-9 и возможно некоторыми вирусами ECHO (типы 1,6,9). Заболевание начинается внезапно. Появляется озноб, повышение температуры тела (до 39-40°С) и почти одновременно сильнейшие мышечные боли, которые локализуются в мышцах живота (часто в пупочной области) и в ниж­них отделах грудной клетки. Боль усиливается при движении, кашле. Приступы миалгаи продолжаются 5-10 мин и повторяются через 30-60 мин. Иногда они более длительны (от нескольких часов до 1-2 сут). Лихорадка чаще длится 2-3 дня. У половины больных отмечает­ся вторая волна лихорадки с новым приступом болей. У отдельных больных в это время развивается картина серозного менингита (на 5-7-й день болезни). Из других симптомов часто отмечают гиперемию слизистой оболочки зева, лимфаденопатию, иногда экзантему.

Серозный менингит — одна из распространенных форм энтеровирусных болезней, вызывается всеми группами энтеровирусов (Коксаки А (типы 2,4,7,9), Коксаки В (типы 1-5), ECHO (типы 4, 6,9,11,16, 30). Наблюдается как в виде спорадических случаев, так и в виде эпидемических вспышек. Начинается остро с повы­шения температуры тела (до 39—40°С) и симптомов общей инток­сикации. К концу 1 -го или на 2-й день болезни появляются четко выраженные менингеальные симптомы (сильная головная боль, ри­гидность затылочных мышц, симптомы Кернига, Брудзинского и др.). Иногда наблюдаются другие симптомы энтеровирусной ин­фекции (миалгия, экзантема, поражение миокарда, гиперемия сли­зистой оболочки зева). Спинномозговая жидкость вытекает под давлением, прозрачная, цитоз 200-300 в 1 мкл, нейтрофилов до 50%, содержание сахара и хлоридов нормальное. У некоторых больных отмечается вторая волна лихорадки.

Миелит (с параличами) может вызываться вирусами Коксаки А (типы 4,7,10,14) и В (типы 1-6), а также вирусами ECHO (типы 2,4,6,7,9,11,16). По клиническим симптомам и течению напо­минает паралитические формы полиомиелита. Протекает легче. Парезы.и параличи проходят относительно быстро с восстановле­нием двигательных функций. Иногда протекают тяжело. Описаны летальные исходы.

Энцефаломиокардит новорожденных вызывается вирусами Кок­саки В (типы 2-5). Характеризуется тяжелым течением и высокой летальностью (до 60-80%). Описаны небольшие вспышки. Основ­ные признаки: лихорадка, расстройство питания, повышенная сонливость, судороги, цианоз, желтуха, тахикардия, расширение границ сердца, коллапс, геморрагии, увеличение печени и селезенки, понос.

Энцефалит вызывается вирусами Коксаки и ECHO. Тяжесть заболевания широко варьирует. В легких случаях проявляется лишь отдельными, не резко выраженными симптомами и изменениями ЭЭГ. В тяжелых случаях протекает с нарушением сознания, хореоподобными подергиваниями мышц, судорогами, нистагмом, пара­личом лицевого нерва.

Перикардиты и миокардиты вызываются вирусами Коксаки В (типы 2-5) и вирусами ECHO (типы 1,6,8,9,19). Появляются умеренная лихорадка, общая слабость, боли в области сердца, глу­хость тонов, шум трения перикарда, возможен выпот в полость пе­рикарда. Выявляются характерные для миокардита изменения ЭКГ. Течение благоприятное.

Инфекционная экзантема (бостонская экзантема, эпидемичес­кая экзантема, кореподобная и краснухоподобная экзантемы) чаще обусловлена вирусами ECHO (типы 4,5,9,12,16,18), реже виру­сами Коксаки (А-9, А-16, В-3). Заболевание начинается остро. По­вышается температура тела до 38-39°С, отмечаются симптомы интоксикации (слабость, головная боль, мышечные боли, боли в горле). Через 1-2 дня появляется сыпь, которая в выраженных слу­чаях захватывает туловище, конечности, лицо, стопы. По характе­ру экзантема чаще краснухе- или кореподобная, реже скарлатиноподобная или петехиальная. Через 3-4 дня она исчезает. Лихорад­ка длится 1 -7 дней. У отдельных больных наблюдаются и другие проявления болезни (серозный менингит, эпидемическая миалгия).

Своеобразный вариант энтеровирусной экзантемы—заболе­вание, протекающее с поражением кистей, стоп, полости рта (Hand-Fuss —• Mund Krankheit, или сокращенно HFMK). При этой форме на фоне умеренной интоксикации и небольшого повышения тем­пературы тела на пальцах кистей и стоп появляется экзантема в виде небольших везикул диаметром 1-3 мм, слегка выступающих над уровнем кожи и окруженных венчиком гиперемии. Одновременно на языке и слизистой оболочке щек обнаруживают единичные не­большие афтозные элементы. Заболевание вызывается вирусами Коксаки А (серотипы 5,10,16).

Малая болезнь (трехдневная лихорадка, летний грипп, неопре­деленная лихорадка, Коксаки- и ЕСНО-лихорадка) может быть вызвана всеми типами энтеровирусов. Характеризуется кратковремен­ностью и легкостью течения, а также отсутствием выраженных из­менений со стороны отдельных органов и систем. Проявляется в виде умеренной кратковременной лихорадки (1-3-дневная), сла­бости, разбитости, мышечных болей. Иногда отмечаются стертые признаки других клинических форм (нерезко выраженная эпиде­мическая миалгия, герпангина без типичных изменений в зеве, сла­бые менингеальные симптомы и пр.).

Острый катар верхних дыхательных путей вызывается мно­гими типами энтеровирусов. При инфекции, обусловленной виру­сом Коксаки А-21, эта форма является преобладающей. В отли­чие от малой болезни в таких случаях кратковременная лихорадка сочетается с выраженным воспалением слизистой оболочки верх­них дыхательных путей (ринофарингит, ларингит, у детей может возникнуть синдром крупа).

Энтеровирусиая диарея может наблюдаться не только у де­тей, но и у взрослых. Понос может сочетаться с другими проявле­ниями энтеровирусных болезней или быть основным признаком за­болевания. У некоторых больных симптомы энтероколита сочета­ются с выраженной картиной острого мезаденита, что нередко обусловливает диагностические трудности.

Эпидемический геморрагический конъюнктивит обусловлен энтеровирусом 70. Заболевание начинается остро. Обычно сначала поражается один глаз, через 1 -3 дня процесс захватывает и второй глаз. Отмечается светобоязнь, слезотечение, ощущение инородного тела. Общее состояние больного остается удовлетворительным. При осмотре наблюдается отек век, гиперемия и припухлость конъюнк­тив, кровоизлияния в конъюнктиву, чаще верхнего века, отделяемое скудное, слизисто-гнойное или серозное. Роговица поражается ред­ко. Нормализация наступает через 10-14 дней.

Диагноз и дифференциальный диагноз. При ряде клиничес­ких форм диагноз может быть установлен на основании характер­ной клинической симптоматики (герпангина, эпидемическая миал­гия, серозный менингит с экзантемой, эпидемический конъюнкти­вит), особенно во время эпидемических вспышек. Диагностика спорадических энтеровирусных заболеваний нередко вызывает трудности. Для лабораторного подтверждения диагноза использу­ют выделение вирусов (из слизи и смывов зева, спинномозговой жидкости, испражнений) и серологические исследования. Следует учи­тывать, что выделение вирусов из кала может наблюдаться и у здо­ровых вирусоносителей. Для серологических исследований берут парные сыворотки (первая до 4-5-го дня болезни, вторая—после 14-го дня болезни). Диагностическим считается нарастание титра антител в 4 раза и более. Используют реакцию нейтрализации с эта­лонными штаммами энтеровирусов (на тканевых культурах или мышатах-сосунках), РСК, РТГА, реакцию преципитации в геле.

Дифференциальный диагноз проводят в зависимости от клини­ческой формы (с серозными менингитами, инфекционными конъ­юнктивитами, ротавирусными диареями, полиомиелитом и др.). Особая осторожность необходима при диагностике эпидемической миалгии, которая бывает сходна с острыми хирургическими заболе­ваниями (острый аппендицит, кишечная непроходимость и др.).

Лечение. Этиотропного лечения нет. Имеются указания об эффек­тивности иммуноглобулина с высоким титром антител при лечении больных тяжелыми формами энтеровирусного энцефалита у лиц с дефицитом антител. Назначают общеукрепляющие и симптоматичес­кие средства.Курс лечения 5-7 дней.

Прогноз в большинстве случаев благоприятный, серьезный при миелитах и энцефалитах, неблагоприятный при энцефаломиокардитах новорожденных. Сроки потери трудоспособности зависят от клинической формы. При серозных менингитах стационарное ле­чение продолжается 2-3 нед, выписка производится после полного клинического выздоровления и санации спинномозговой жидкости.

Профилактика и мероприятия в очаге. В очаге проводится комплекс профилактических и противоэпидемических мероприятий, направленных на предупреждение инфекций с воздушно-капельным и фекально-оралъным механизмом передачи.Введение иммунного иммуноглобулина не дает выраженного профилактического эффекта. Специфическая профилактика не раз­работана. Срок изоляции 14 дней. Для детей, контактировавших с заболевшими, в детских учреждениях устанавливается карантин на 14 дней после прекращения контакта и дезинфекции. Работников родильных домов и детских учреждений, бывших в контакте с боль­ными, на 14дней переводят на другую работу.

Берегите свое здоровье и здоровье своих близких!

Врач инфекционист поликлиники №14
ГБУЗ «Городская поликлиника»  Федулаева С.В.


 

Клиника Здоровье — «Летний грипп»

Летом понятное желание родителей побаловать детей свежими овощами и фруктами, вывести малышей на дачу, к морю. Однако радость от общения с природой может омрачить… энтеровирусная инфекция. Еще эту болезнь называют «летним гриппом», поскольку пик заболеваемости приходится на летние месяцы.

Энтеровирус чаще всего поражает детей в возрасте до 10 лет, максимально же подвержены инфекции малыши первого года жизни. Серьезные осложнения, например, серозно-вирусный менингит, энтеровирус чаще всего вызывает у детей до 2-х лет.

Cезонные инфекции были, есть и будут всегда. Однако есть факторы, которые способствую вспышке инфекционных заболеваний: жаркий климат, появление новых продуктов в питании, скученность людей. Группирование большого количества людей в одном месте – в детском саду, в загородном лагере – это всегда создание условий для возникновения болезни. Не случайно первый шаг всех противоэпидемиологических мероприятий — разобщение, изоляция. Разумеется, держать детей в квартире все лето- это не выход из ситуации, поэтому надо быть готовым к встрече с инфекцией, так как избежать энтеровирусов мы не сможем.

Самый вероятный способ заражения этеровирусами — водный. Вирус может попасть в организм, когда дети купаются в водоемах и заглатывают воду. Или через употребление некипяченой воды.

Помните от энтеровирусов не спасет ни один даже самый дорогой фильтр — только кипячение!

Энтерэвирусы хорошо переносят низкие температуры: в условиях холодильника они сохраняются в течение нескольких недель, в водопроводной воде выживают до 18 дней, в речной воде — около месяца, в очищенных сточных водах — до двух месяцев.

На втором месте среди возможных источников заражения — пищевые продукты: свежие овощи, фрукты, ягоды. В этом случае никакое, даже самое тщательное мытье, не поможет избежать заражения, если энтеровирусы находятся не только на поверхности плодов, но и в мякоти.

Энтеровирусы способны поражать многие органы и ткани и органы человека (центральную и периферическую нервную систему, сердце, легкие, печень, почки, желудочно-кишечный тракт, кожу, органы зрения). В связи с этим различают различные формы заболевания:

— серозный вирусный менингит,

— энтеровирусная лихорадка,

—герпангина,

— энтеровирусная экзантема,

— геморрагический конъюнктивит,

— энтеровирусная диарея,

— миокардит.

Одна из тяжелых форм энтеровирусной инфекции — серозный менингит. Его особенностями является распирающая головная боль с локализацией в лобно-височной или затылочной области и рвота без предварительной тошноты, не связанная с приемом пищи и не приносящая больному облегчения. При появлении указанных симптомов необходимо немедленно обратиться к врачу.

Педиатрам часто приходится сталкиваться с такой формой заболевания, как герпангина. Она начинается остро с лихорадки. Проявляется в виде высыпаний на дужках нёба, миндалинах, язычке, задней стенке глотки. Сначала это мелкие папулы 1-2 мм с красным венчиком, затем на их месте появляются пузырьки, которые в течение 1-2 суток превращаются в эрозии.

При энтеровирусной диарее, главную опасность представляет обезвоживание организма. По этой причине, если у ребенка, на фоне умеренной температуры возникает рвота, и (или) жидкий стул, то не стоит затягивать с этим, необходимо срочно обратиться за медицинской помощью. Не заниматься самолечением. Помните, что правильный диагноз может поставить только врач! Диагностика энтеровирусных инфекций основывается на эпидемиологических данных, непосредственно на симптомах заболевания, проведения необходимого лабораторно-инструментального обследования. Клиника «Здоровье» обладает всем необходимым новейшим лабораторным и диагностическим оборудованием,позволяющим проводить большой комплекс обследований и процедур Высококвалифицированные специалисты (педиатр, инфекционист, невролог, окулист) клиники своевременно назначат комплексное обследование и эффективное лечение.

В заключение несколько простых правил личной гигиены, соблюдая которые вы значительно уменьшаете шансы встретиться с энтеровирусом:

— для питья используйте только кипяченую или бутилированную воду;

— мойте руки с мылом перед каждым приемом пищи и после каждого посещения туалета;

— обеспечьте индивидуальный набор посуды для каждого члена семьи, особенно для детей;

— перед употреблением овощей и фруктов (в том числе бананов, арбузов, дынь) их необходимо тщательно мыть с применением щетки и последующим ополаскиванием кипятком;

— употребляйте в пищу доброкачественные продукты, не приобретайте продукты питания у частных лиц, в неустановленных для торговли местах;

— купайтесь только в официально разрешенных местах, при купании старайтесь не заглатывать воду;

Берегите своё здоровье! Будьте предусмотрительны, учитывайте факторы риска энтеровирусных инфекций! А мы, врачи клиники «Здоровье», всегда будем рады помочь Вам сохранить здоровье Ваших детей.

Энтеровирусные инфекции — Урайская окружная больница медицинской реабилитаци

Четверг,  15  Июня  2017

Это группа инфекционных заболеваний человека (антропонозы), вызываемых энтеровирусами, имеющие весеннее-летне-осеннюю сезонность, поражающие преимущественно детское население и характеризующиеся лихорадкой, поражением миндалин, центральной нервной системы, желудочно-кишечного тракта, кожными проявлениями и поражением других органов и систем.

Возбудители – группа энтеровирусов, достаточно устойчивых во внешней среде. Устойчивы к низким температурам, выдерживают замораживание и оттаивание. При комнатной температуре могут сохранять жизнеспособность в течение 15 суток. При кипячении погибают мгновенно. Губительно на них действуют хлорсодержащие растворы, растворы перекиси водорода, марганцевого калия, ультрафиолетовое облучение.

Источником инфекции являются больные клинически выраженной формой болезни, бессимптомными формами заболевания, носители вирусов. Зараженные среды источника инфекции – носоглоточная слизь, испражнения, спинномозговая жидкость. Поскольку уже в инкубационном периоде (период с момента заражения до появления первых симптомов заболевания) идет размножение и накопление вируса в слизистой ротоглотки и желудочно-кишечного тракта, больной выделяет вирус в небольшом количестве уже на данном этапе. Максимальное выделение вируса отмечается в первые дни заболевания. Срок заразного периода может длиться 3-6 недель, реже дольше. Важную роль в распространении инфекции играют бессимптомные носители, частота встречаемости которых не превышает 45% (чаще дети раннего возраста), и реконвалесценты (выздоравливающие), которые нередко продолжают выделять вирусы.

Существуют два механизма заражения – фекально-оральный и аэрогенный, ведущим из которых является фекально-оральный. Основные пути передачи – водный (при купании в водоемах, зараженных энтеровирусами) и алиментарный (употребление в пищу зараженной воды, грязных овощей и фруктов, молока и других продуктов). Вирусы могут передаваться через предметы обихода (игрушки, полотенца), грязные руки. Другой путь передачи – воздушно-капельный (выделение вирусов с носоглоточной слизью во время кашля, чихания, разговора). Напоминаем, что группа риска – лица, находящиеся в непосредственном контакте с источником инфекции (при чихании и кашле – это аэрозольное облако 3 метра в диаметре). Возможна и трансплацентарная передача инфекции от матери плоду (в случае заболевания беременной клинически выраженной формой болезни).

Восприимчивость населения к энтеровирусным инфекциям высокая. Возможны семейные вспышки и вспышки в организованных детских коллективах. Группы риска заражения – это лица иммунологически скомпрометированные, то есть лица со сниженной сопротивляемостью организма – дети, люди преклонного возраста, лица с хроническими заболеваниями. После перенесенного заболевания формируется стойкий иммунитет к определенному типу вируса, который часто бывает перекрестным (то есть сразу к нескольким серотипам энтеровирусов).

Симптомы энтеровирусных инфекций

Краткий путь энтеровирусов в организме человека: входными воротами инфекции являются слизистые оболочки носоглотки и пищеварительного тракта, где происходит оседание и накопление энтеровирусов, что по времени совпадает с инкубационным периодом (от 2х до 10 дней, чаще 3-4 дня). Затем вирусы лимфогенно проникают в лимфатические узлы, близкие к входным воротам (регионарные), что совпадает по времени с началом заболевания – 1-2 дня (у пациента может быть фарингит, диарея). Далее вирусы проникают в кровь и гематогенно разносятся по разным органам и системам (первичная виремия) – с 3го дня болезни. Клинически характеризуется многими синдромами в зависимости от тропности (излюбленной системы или органа) конкретного энтеровируса. Возможна вторичная виремия (повторный выброс вируса в кровь), что клинически сопровождается второй волной лихорадки.

Диета направлена на повышение иммунитета, снижение интоксикации, бы­строе разрешение воспалительного процесса, щажение органов ССС и пище­варительной систем, функции почек, предотвращение возможного действия лекарств.   Диету дифференцируют в зависимости от состояния  больного  и        стадии болезни. 
• Для повышения иммунологической реактивности назначается физиологиче­ски полноценный рацион с достаточным количеством белка и повышенным содержанием витаминов А, С, группы В. 
• Для снижения интоксикации показано введение достаточного количества жидкости (лучше морсы из черной смородины, шиповника, черноплодной рябины, лимона). 
• Все продукты назначаются в теплом виде, избегаются острые, жирные, жа­реные, соленые, маринованные блюда.

Меры профилактики энтеровирусной инфекции

Говоря о профилактике энтеровирусной инфекции, в первую очередь следует понимать санитарные правила, соблюдение которых предотвращает инфицирование и распространение инфекции. Перечислим наиболее важные из них:

1.     Проведение мероприятий по контролю загрязнения объектов окружающей среды канализационными отходами, благоустройство источников водоснабжения.

2.     Изоляция больных, тщательная дезинфекция их вещей и предметов гигиены.

3.     Употребление для питья только качественной кипяченой или бутилированной воды, пастеризованного молока.

4.     Тщательное мытье фруктов, ягод, овощей перед употреблением в пищу.

5.     Защита продуктов от насекомых, грызунов.

6.     Соблюдение правил личной гигиены.

7.     Разделочный инвентарь (ножи, доски) для сырых и готовых продуктов должен быть отдельным.

8.     Не покупать продукты в местах несанкционированной торговли.

9.     Купаться только в разрешенных местах, не заглатывать воду во время водных процедур.

Людям, контактировавшим с инфицированными больными, для профилактики энтеровирусной инфекции могут назначаться лекарственные препараты группы интерферона и иммуноглобулина. 


Энтеровирусная инфекция

Основные возбудители:

  • Коксаки A (24 серотипа),
  • Коксаки B (6 серотипов),
  • ECHO (34 серотипа)
  • неклассифицированные энтеровирусы человека 68 — 71 типов.

 

Энтеровирус – это опасно?

 

 

   Большинство энтеровирусных инфекций протекают легко. Но некоторые штаммы могут вызывать более тяжелые заболевания, особенно у маленьких детей.

 

Как происходит заражение?

 

 

       Источник инфекции – человек (больной или носитель). Заражение происходит воздушно-капельным путем, через пыль, а также водным, пищевым и контактно-бытовым путями. Вода открытых водоемов, загрязненная сточными водами, как в качестве источников питьевого водоснабжения, так и используемая в качестве зон для купания населения -наиболее опасна в плане передачи инфекции. Инкубационный период длится 1-10 дней.

 

 

Кто может заразиться?

 

         Энтеровирусами может заразиться любой Чаще всего заражаются и заболевают дети, младенцы и подростки, т.к они еще не обладают иммунитетом (защитой) от предыдущих воздействий этих вирусов.

 

 

Имеет ли заболевание сезонность?

 

 

   Вспышки энтеровирусной инфекции преимущественно возникают в летне-осенний период, но отдельные случаи встречаются в течение всего года.

 

 

Как протекает инфекция?

 

 

       Энтеровирусная инфекция характеризуется разнообразием клинических проявлений и множественными поражениями органов и систем: серозный менингит, геморрагический конъюнктивит, синдром острого вялого паралича, заболевания с респираторным синдромом и другие.

      Один и тот же серотип энтеровируса способен вызывать развитие нескольких клинических синдромов и, наоборот, различные серотипы энтеровирусов могут вызвать сходные клинические проявления болезни. Наибольшую опасность представляют тяжелые формы инфекции с поражением нервной системы.

 

 

Как защититься?

 

    Соблюдение правил личной гигиены имеет жизненно важное значение для предотвращения распространения энтеровирусных инфекций.

Правила гигиены:

  • мытье рук с мылом
  • тщательное мытье овощей и фруктов перед употреблением
  • приобретение продуктов питания только в санкционированных местах
  • термическая обработка продуктов
  • купание только в разрешенных местах
  • соблюдение гигиены во время купания (не заглатывать воду)
  • недопущение контактов с инфицированными людьми, особенно с сыпью
  • пить только бутилированную воду

При подозрении на инфекционное заболевание – немедленно обратитесь к врачу.

Энтеровирусные инфекции и их профилактика » Официальный сайт городского округа Архангельской области «Мирный»

Энтеровирусные инфекции  представляют собой  группу острых инфекционных заболеваний вирусной этиологии, вызываемые  различными представителями  энтеровирусов, характеризуются полиморфизмом клинических проявлений и множественными поражениями органов и систем: серозный менингит, геморрагический конъюнктивит, увеит, синдром острого вялого паралича, заболевания с респираторным синдромом и другие.

Один и тот же серотип энтеровируса способен вызывать развитие нескольких клинических синдромов и, наоборот, различные серотипы энтеровирусов могут вызвать сходные клинические проявления болезни. Наибольшую опасность представляют тяжелые клинические формы с поражением нервной системы.

Резервуаром и источником инфекции является больной человек или инфицированный бессимптомный носитель вируса. При этом велика роль здоровых носителей как источников инфекции. Вирусоносительство у здоровых лиц составляет от 17 до 46%.

Наиболее интенсивное выделение возбудителя происходит в первые дни болезни.  Инфицированные лица наиболее опасны для окружающих в ранние периоды инфекции, когда возбудитель присутствует в экскретах организма в наибольших концентрациях. Вирус обнаруживают в крови, моче, носоглотке и фекалиях за несколько дней до появления клинических симптомов. Через 2 недели после появления клиники большинство энтеровирусов еще выделяется с фекалиями, но уже не обнаруживается в крови или носоглоточном отделяемом.

Вирус весьма эффективно заражает маленьких детей при попадании небольшой дозы пероральным путем и определяется в глотке в первые 3-4 дня (не более 7 дней) после заражения, как при клинически выраженной инфекции, так и в бессимптомных случаях. Вирус выделяется с фекалиями в течение 3-4 недель (не более 5 недель), а у иммунодефицитных лиц может выделяться в течение нескольких лет.

Инкубационный период энтеровирусной инфекции варьируется от 2 до 35 дней, в среднем — до 1 недели.

Механизм передачи энтеровирусных инфекций — фекально-оральный (основной), аэрозольный (вероятный) и вертикальный (возможный).

Пути передачи — водный, пищевой, контактно- бытовой, воздушно-капельный и трансплацентарный.

Факторами передачи служат вода, овощи, контаминированные энтеровирусами в результате применения необезвреженных сточных вод в качестве органических удобрений. Также вирус может передаваться через грязные руки, игрушки и другие объекты внешней среды.

Заболеваемость энтеровирусными  инфекциями имеет выраженную весенне-осеннюю сезонность. Зараженность детей может доходить до 50%. В некоторых районах свыше 90% детей оказываются восприимчивыми к распространенным типам энтеровирусов уже в возрасте 5 лет. Заболеваемость детей выше, чем у взрослого населения. В общем количестве больных удельный вес детей составляет обычно 80-90%, достигая 50% у детей младшего возраста. Часто наблюдается внутрисемейное распространение инфекции. Особую важность имеет распространение энтеровирусных инфекций в организованных детских коллективах (детских садах, школах), когда до 50% детей могут оказаться зараженными и лечебно- профилактических учреждениях (внутрибольничные очаги).

Основные синдромы, наблюдающиеся при энтеровирусных инфекциях неполиомиелитной этиологии
Энтеровирусный (серозный, асептический) менингит и другие формы энтеровирусных инфекций центральной нервной системы. Наиболее частым проявлением поражения ЦНС является энтеровирусный (серозный, асептический) менингит. Термин «серозный менингит» подразумевает клинический синдром воспаления менингеальных оболочек, связанный с вирусными инфекциями.  Инкубационный период при энтеровирусных серозных менингитах составляет в среднем около 1 недели.

Респираторные заболевания, герпангина. Энтеровирусы являются одной из частых причин респираторных заболеваний. Наиболее частыми являются респираторные заболевания верхних дыхательных путей. Они имеют короткий инкубационный период в 1-3 дня.

Энтеровирусная экзантема ( высыпания, сыпь)  полости рта и конечностей (ящуроподобный синдром). Энтеровирусная экзантема (бостонская экзантема, эпидемическая экзантема). На 2-3-й день болезни на фоне лихорадочной реакции и других признаков интоксикации характерно появление экзантемы, локализованной на туловище, лице, конечностях и стопах. Она может быть пятнистой, пятнисто-папулезной, или патехиальной. Длительность высыпаний не превышает 1-2 дней. Инкубационный варьирует от 2 до 12 сут. Болеют преимущественно дети.

Заболевания мышц. Воспалительные заболевания мышц могут быть как острыми, так и хроническими.

Заболевания сердца (энтеровирусная миокардиопатия) Термин «миокардит» обозначает воспаление миокарда, не связанное с ишемическими повреждениями сердца.

Заболевания новорожденных детей и детей младшего возраста. Новорожденные и дети младшего возраста представляют группу особого риска. У большинства из них энтеровирусная инфекция протекает бессимптомно. В некоторых случаях болезнь проявляется как относительно доброкачественная лихорадка, иногда с сыпью.

Заболевания глаз. Острый геморрагический конъюнктивит (ОГК) характеризовался коротким инкубационным периодом, от 24 до 48 часов, предшествовавшим быстрому началу заболевания одного или обоих глаз. Основные симптомы болезни: слезотечение, жжение, боль со стороны пораженного глаза; отек и гиперемия конъюнктивы; субконъюнктивальные геморрагии от небольших петехий до обширных пятен; увеличение околоушных лимфоузлов.

Энтеровирусная лихорадка (малая болезнь). Энтеровирусная лихорадка (малая болезнь) — острая лихорадочная кратковременная болезнь без выраженных симптомов локальных поражений центральной нервной системы или внутренних органов. Данная клиническая форма по частоте распространения занимает первое место среди других клинических синдромов, вызываемых энтеровирусами.  Заболевание обычно начинается остро, реже отмечается короткий продром, длящийся несколько часов. Температура повышается до 38-39°С, наблюдается озноб, головная боль, нередко тошнота и рвота, воспалительные изменения в зеве, гиперемия сосудов склер и конъюнктивы. Температура обычно держится 1-3 дня.

Энтеровирусная диарея (гастроэнтерит). Энтеровирусная диарея (гастроэнтерит) — острая лихорадочная болезнь с поражением желудочно-кишечного тракта, проявляющаяся преимущественно в виде поноса у маленьких детей.

Меры неспецифической профилактики энтеровирусной инфекции такие же, как при любой острой  кишечной инфекции — необходимо соблюдать следующие правила:

  • для питья использовать только кипяченую или бутилированную воду;
  • мыть посуду с применением моющих средств с последующим ошпариванием;
  • тщательно мыть руки с мылом перед каждым приемом пищи, после каждого посещения туалета, после прихода с улицы; строго соблюдать правила личной и общественной гигиены; при невозможности качественно вымыть руки, использовать для их обработки  разрешенные для этих целей дезинфектанты;
  • обеспечить индивидуальный набор посуды для каждого члена семьи, особенно для детей;
  • перед употреблением фруктов, овощей, тщательно мыть их с последующим ополаскиванием кипятком;
  • купаться только в официально разрешенных (по качеству воды) местах, при купании стараться не заглатывать воду; не  купаться в непроточных водоемах;
  • ограничить время пребывания детей в местах массового скопления людей;
  • не контактировать с лицами, имеющими признаки инфекционного заболевания;
  • соблюдать «респираторный этикет» как при гриппе: при кашле и чихании прикрывать рот и нос платком;
  • проветривать помещения, регулярно проводить влажную уборку с применением дезинфицирующих средств.

При первых признаках заболевания необходимо немедленно обращаться за медицинской помощью!

Материал подготовлен начальником отдела социальной работы и здравоохранении муниципального учреждения «Управление социальной политики и здравоохранения администрации Мирного» Морозовым Ю.И. с использованием санитарно – эпидемиологических правил  СП 3.1.2950-11 «Профилактика  энтеровирусной  (неполио) инфекции», методических указаний  МУ 3.1.1.2363-08 «Эпидемиологический надзор и профилактика энтеровирусной (неполио) инфекции».

Энтеровирус D68 (EV-D68): разгадка тайны

Одни только энтеровирусы, за исключением полиовируса, ежегодно вызывают от 10 до 15 миллионов инфекций в Соединенных Штатах. Ежегодно десятки тысяч человек госпитализируются по поводу заболеваний, вызванных энтеровирусами. Энтеровирус D68 (EV-D68, EV68, HEV68) является членом семейства пикорнавирусов, энтеровирусов. Впервые выделенный в Калифорнии в 1962 году и когда-то считавшийся редким, EV-D68 переживает подъем во всем мире в 21 веке. 1

В 2014 г. в США произошла общенациональная вспышка EV-D68, связанная с тяжелым респираторным заболеванием. С середины августа 2014 г. по 15 января 2015 г. CDC или лаборатории общественного здравоохранения штатов подтвердили в общей сложности 1153 случая респираторных заболеваний, вызванных EV-D68, в 49 штатах и ​​округе Колумбия. 1 Почти все подтвержденные случаи были среди детей, многие из которых страдали астмой или хрипами в анамнезе.

Кроме того, вероятно, были миллионы легких инфекций EV-D68, по поводу которых люди не обращались за медицинской помощью и не проходили тестирование. 2

В течение 2014 года CDC получил около 2600 образцов для лабораторного тестирования на энтеровирусы, что значительно больше, чем обычно. Около 36% из них дали положительный результат на EV-D68. Около 33% дали положительный результат на энтеровирус или риновирус, отличный от EV-D68. EV-D68 был обнаружен в образцах 14 умерших пациентов, образцы которых были представлены для тестирования. Государственные и местные чиновники имеют право устанавливать и публиковать информацию о причинах этих смертей. 1

Боль и страдания, вызванные энтеровирусами, и всплеск инфекции EV-D68 заставили мир остановиться, сделать резервную копию и провести ретроспективное расследование, почему произошел всплеск активности и как мы, медицинские работники, можем улучшить ситуацию. предотвратить заражение EV-D68 в будущем до того, как EV-D68 снова поднимет свою уродливую голову.

Энтеровирусы ежегодно поражают миллионы людей во всем мире. Они часто обнаруживаются в выделениях из дыхательных путей (например, слюне, мокроте или слизи из носа) и стуле инфицированного человека. Исторически полиомиелит был наиболее значимым заболеванием, вызываемым энтеровирусом, то есть полиовирусом.

Существует 64 неполиомиелитных энтеровируса, которые могут вызывать заболевания у людей: 23 вируса Коксаки А, 6 вирусов Коксаки В, 28 эховирусов и пять других энтеровирусов. Полиовирусы, а также коксаки и эховирусы распространяются фекально-оральным путем.Инфекция может привести к широкому спектру симптомов, начиная от легкого респираторного заболевания, то есть простуды, болезни рук, ящура, острого геморрагического конъюнктивита, асептического менингита, миокардита, тяжелого неонатального сепсиса и острого вялого миелита.

Виды и генетика: энтеровирусы

Энтеровирусы относятся к семейству Picornaviridae (таблица 1), большой и разнообразной группе малых РНК-вирусов, характеризующихся одноцепочечной РНК с положительным смыслом (оцРНК), ассоциированной с рядом заболеваний человека и млекопитающих. .Все энтеровирусы содержат геном примерно из 7500 оснований и, как известно, имеют высокую скорость мутации из-за низкой точности репликации и частой рекомбинации. После инфицирования клетки-хозяина геном транслируется кэп-независимым образом в один полипротеин, который впоследствии процессируется кодируемыми вирусом протеазами в структурные капсидные белки и неструктурные белки, которые в основном участвуют в репликации вируса. вирус.

Серологические исследования выявили 71 серотип человеческого энтеровируса на основе тестов нейтрализации антител.Дополнительные антигенные варианты были определены в пределах нескольких серотипов на основе сниженной или невзаимной перекрестной нейтрализации между вариантными штаммами.

В зависимости от их патогенеза у людей и животных энтеровирусы первоначально были разделены на четыре группы: полиовирусы, вирусы Коксаки А (КА), вирусы Коксаки В (КБ) и эховирусы. Вскоре стало понятно, что биологические свойства вирусов разных групп существенно совпадают. Энтеровирусы, выделенные в последнее время, названы по системе обозначения видов и порядковых номеров: EV-D68, EV-B69, EV-D70, EV-A71 и т. д.

Таблица 1: Enteroviruses 3
Группа: Группа IV ((+) SSRNA)
Заказать: Picornavirales
Семья: Picornaviridae
Видов Видов Enterovirus Enterovirus B Enterovirus C Enterovirus D Enterovirus E Enterovirus j Rhinovirus enovirus b Rhinovirus C

Гене EnteroVirus включает в себя следующие Двенадцать вида 3 :

  • Энтеровирус А (ранее человеческий энтеровирус А)
  • Энтеровирус В (ранее человеческий энтеровирус В)
  • Энтеровирус С (ранее человеческий энтеровирус С)
  • Энтеровирус D (ранее человеческий энтеровирус D) (ранее человеческий энтеровирус D) энтеровирус группы А)
  • Энтеровирус F (бывший ly Энтеровирус крупного рогатого скота группы B)
  • Энтеровирус G (ранее энтеровирус свиней B)
  • Энтеровирус H (ранее энтеровирус обезьян A)
  • Энтеровирус J
  • Риновирус A (ранее риновирус человека A)
  • Риновирус человека B)
  • Риновирус C (ранее риновирус человека C)

Эти двенадцать видов относятся к серотипам:

  • Вирус Коксаки:
  • Вирусы Коксаки представляют собой нефилогенетическую группу.Вирусы Коксаки А (CV-A) имеют тенденцию инфицировать кожу и слизистые оболочки, вызывая герпетическую ангину, острый геморрагический конъюнктивит и болезнь рук, ног и рта (HFM). Вирусы Коксаки В (CV-B) имеют тенденцию инфицировать сердце, плевру, поджелудочную железу и печень, вызывая плевродинию, миокардит, перикардит, гепатит и панкреатит. Коксаки А и В могут вызывать неспецифические лихорадочные заболевания, сыпь, заболевания верхних дыхательных путей и асептический менингит.
    • Серотипы CV-A1, CV-A11, CV-A13, CV-A17, CV-A19, CV-A20, CV-A21, CV-A22 и CV-A24 (обнаружены под видом: Enterovirus C).
    • Серотипы CV-B1, CV-B2, CV-B3, CV-B4, CV-B5, CV-B6 и CV-A9 (обнаружены под видом: Enterovirus B).
    • Серотипы CV-A2, CV-A3, CV-A4, CV-A5, CV-A6, CV-A7, CV-A8, CV-A10, CV-A12, CV-A14 и CV-A16 (обнаружены под вид: энтеровирус А).
  • Эховирус (E)
    • Эховирусы являются причиной многих неспецифических вирусных инфекций. Он очень заразен, и его основной целью являются дети. Эховирус является одной из основных причин острых лихорадочных заболеваний у младенцев и детей младшего возраста и наиболее частой причиной асептического менингита.Заражение ребенка этим вирусом после рождения может вызвать тяжелые системные заболевания и связано с высокими показателями младенческой смертности. Эховирусы обнаруживаются в желудочно-кишечном тракте и могут вызывать нервные расстройства. Обычными симптомами эховирусов являются лихорадка, легкая сыпь и легкие заболевания верхних дыхательных путей (ВДП).
      • серотипы Е-1, Е-2, Е-3, Е-4, Е-5, Е-6, Е-7, Е-9, Е-11, Е-12, Е-13, Е-14 , Е-15, Е-16, Е-17, Е-18, Е-19, Е-20, Е-21, Е-24, Е-25, Е-26, Е-27, Е-29, Е -30, E-31, E-32 и E-33 (обнаружены под видом: Enterovirus B).
    • Энтеровирус (EV)
      • Серотипы EV-A71, EV-A76, EV-A89, EV-A90, EV-A91, EV-A92, EV-A114, EV-A119, SV19, SV43, SV46 и BA13 (найден под видом: энтеровирус А).
      • Серотипы EV-B69, EV-B73, EV-B74, EV-B75, EV-B77, EV-B78, EV-B79, EV-B80, EV-B81, EV-B82, EV-B83, EV-B84 , EV-B85, EV-B86, EV-B87, EV-B88, EV-B93, EV-B97, EV-B98, EV-B100, EV-B101, EV-B106, EV-B107, EV-B110 и SA5 (найден под видом: Enterovirus B).
      • Серотипы EV-C95, EV-C96, EV-C99, EV-C102, EV-C104, EV-C105, EV-C109, EV-C116, EV-C117 и EV-C118 (обнаружены под видом: Enterovirus C ).
      • Серотипы EV-D68, EV-D70, EV-D94, EV-D111 и EV-D120 (обнаружены под видом: Enterovirus D).
      • Серотипы EV-h2 (обнаружены под видом: Enterovirus H).
      • Серотипы SV6, EV-J103, EV-J108, EV-J112, EV-J115 и EV-J121 (обнаружены под видом: Enterovirus J).
  • Риновирус человека (HRV)
    • Существует три вида риновирусов: риновирус человека A, риновирус человека B и риновирус человека C, которые содержат более 100 серотипов.Риновирусы являются наиболее подозреваемыми возбудителями простуды. Это затрудняет разработку единой вакцины против стольких серотипов.
      • Серотипы HRV-A1, HRV-A2, HRV-A7, HRV-A8, HRV-A9, HRV-A10, HRV-A11, HRV-A12, HRV-A13, HRV-A15, HRV-A16, HRV-A18 , HRV-A19, HRV-A20, HRV-A21, HRV-A22, HRV-A23, HRV-A24, HRV-A25, HRV-A28, HRV-A29, HRV-A30, HRV-A31, HRV-A32, HRV -A33, HRV-A34, HRV-A36, HRV-A38, HRV-A39, HRV-A40, HRV-A41, HRV-A43, HRV-A44, HRV-A45, HRV-A46, HRV-A47, HRV-A49 , HRV-A50, HRV-A51, HRV-A53, HRV-A54, HRV-A55, HRV-A56, HRV-A57, HRV-A58, HRV-A59, HRV-A60, HRV-A61, HRV-A62, HRV -A63, HRV-A64, HRV-A65, HRV-A66, HRV-A67, HRV-A68, HRV-A71, HRV-A73, HRV-A74, HRV-A75, HRV-A76, HRV-A77, HRV-A78 , HRV-A80, HRV-A81, HRV-A82, HRV-A85, HRV-A88, HRV-A89, HRV-A90, HRV-A94, HRV-A95, HRV-A96, HRV-A98, HRV-A100, HRV -A101, HRV-A102 и HRV-A103 (обнаружены под видом: Rhinovirus A).
      • серотипы HRV-B3, HRV-B4, HRV-B5, HRV-B6, HRV-B14, HRV-B17, HRV-B26, HRV-B27, HRV-B35, HRV-B37, HRV-B42, HRV-B48 , HRV-B52, HRV-B69, HRV-B70, HRV-B72, HRV-B79, HRV-B83, HRV-B84, HRV-B86, HRV-B91, HRV-B92, HRV-B93, HRV-B97 и HRV-B99 (обнаружен под видом: Rhinovirus B).
      • серотипы HRV-C1, HRV-C2, HRV-C3, HRV-C4, HRV-C5, HRV-C6, HRV-C7, HRV-C8, HRV-C9, HRV-C10, HRV-C11, HRV-C12 , HRV-C13, HRV-C14, HRV-C15, HRV-C16, HRV-C17, HRV-C18, HRV-C19, HRV-C20, HRV-C21, HRV-C22, HRV-C23, HRV-C24, HRV -C25, HRV-C26, HRV-C27, HRV-C28, HRV-C29, HRV-C30, HRV-C31, HRV-C32, HRV-C33, HRV-C34, HRV-C35, HRV-C36, HRV-C37 , HRV-C38, HRV-C39, HRV-C40, HRV-C41, HRV-C42, HRV-C43, HRV-C44, HRV-C45, HRV-C46, HRV-C47, HRV-C48, HRV-C49, HRV -C50 и HRV-C51 (обнаружены у видов: Rhinovirus C.)
  • Полиовирус (PV)
    • Существует три серотипа полиовируса: PV1, PV2 и PV3. Каждый из них имеет немного другой капсидный белок. Капсидные белки определяют специфичность клеточных рецепторов и антигенность вируса. PV1 — наиболее распространенная форма, встречающаяся в природе; однако все три формы чрезвычайно заразны. Полиовирус может поражать спинной мозг и вызывать полиомиелит.
      • Серотипы PV-1, PV-2 и PV-3, обнаруженные у вида: Enterovirus C.

Опасная для жизни диссеминированная энтеровирусная инфекция во время комбинированной поддерживающей терапии ритуксимабом и ибрутинибом при мантийноклеточной лимфоме: клинический случай | Journal of Medical Case Reports

Нашим пациентом был 57-летний мужчина европеоидной расы, у которого в июле 2017 года была диагностирована стадия MCL cS4a (поражение костного мозга и брюшной полости, шейных и подмышечных лимфатических узлов) и лимфома из мантийных клеток высокого риска International Оценка прогностического индекса. Помимо контролируемой артериальной гипертензии и легкой невропатии у пациентки не было значимых сопутствующих заболеваний.В рамках клинического исследования проведена индукционная химиоиммунотерапия чередованием R-CHOP/R-DHAP (ритуксимаб, дексаметазон, цитарабин, цисплатин), что привело к полной ремиссии. С февраля 2018 года пациентка получала поддерживающую терапию ибрутинибом (560 мг один раз в сутки) и ритуксимабом (1400 мг подкожно каждые 8 ​​недель) в рамках протокола клинического исследования. В августе 2018 года заметил болезненные отеки икр. Диагностическое обследование не выявило признаков тромбоза глубоких вен или инфекции мягких тканей.Ретроспективно больной помнил в это время короткий эпизод гастроэнтерита. Терапия диуретиками привела к временному улучшению, но в последующие недели симптомы у пациента ухудшились и распространились на верхние конечности и проксимальные мышцы туловища. Введение системных стероидов и временное прекращение приема ибрутиниба не оказали влияния. В ноябре 2018 г. у пациентки усилилась отечность икр, но, кроме единичного незначительно увеличенного лимфатического узла в правой паховой области, никаких других новых находок при физикальном обследовании обнаружено не было.Лабораторные тесты показали повышенный уровень лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и креатинкиназы (КК) с отрицательным результатом аутоиммунной серологии. Лечение анальгетиками метамизолом и тилидином было начато с ограниченным успехом. В январе 2019 года компьютерная томография не выявила признаков рецидива лимфомы, но выявила диффузный подкожный отек. Отмечалось постоянное клиническое ухудшение, пациент не мог нормально ходить. Отеки конечностей прогрессировали и в итоге привели к госпитализации.При поступлении пациент испытывал генерализованную мышечную боль, а его показатели работоспособности ухудшились до 3-й группы Восточной кооперативной онкологии (ECOG 3). Присутствовал массивный генерализованный отек, особенно нижних конечностей, сопровождающийся легкой эритемой. Мышцы туловища и конечностей чрезвычайно чувствительны и болезненны при пальпации. Помимо слабого симметричного сжимания кулака и подъема плеча, неврологического дефицита не было.

Первоначальные результаты соответствовали миозиту неизвестной причины.Дифференциальные диагнозы включали аутоиммунный миозит, идиопатический или паранеопластический из-за необнаруженного рецидива лимфомы, побочных эффектов, связанных с терапией, неврологических заболеваний или инфекционных заболеваний, таких как сифилис или боррелиоз. Поскольку нельзя было исключить побочные эффекты, связанные с терапией, применение ибрутиниба и ритуксимаба было прекращено.

Первоначальное лабораторное исследование выявило отчетливую воспалительную констелляцию и слегка повышенный уровень трансаминаз (таблица 1). Уровень белка и альбумина в плазме крови пациента, а также иммуноглобулина G был снижен.Его CK был повышен. Дополнительные панельные тесты на миозит не выявили аутоиммунной реакции, а анализ аспирата костного мозга не выявил признаков рецидива лимфомы. Дальнейшая неврологическая диагностика подтвердила только легкую невропатию.

Таблица 1 Начальное лабораторное обследование при поступлении и при диагностике рабдомиолиза и миокардита

Магнитно-резонансная томография (МРТ) бедер соответствовала миозиту (рис. 1) и была подтверждена биопсией мышц (рис. 2). У больного быстро развилось острое повреждение почек, сопровождавшееся дальнейшим повышением уровня мочевой кислоты, ЛДГ, КК, числа лейкоцитов и миоглобина (табл. 1).Был поставлен диагноз рабдомиолиза с последовательным повреждением почек и проведено симптоматическое лечение. В это время отмечалось повышение уровня тропонина I, а электрокардиография (ЭКГ) выявила вновь приобретенную блокаду правой ножки пучка Гиса и нарушение реполяризации. Впоследствии у больного развилась мерцательная аритмия. МРТ сердца подтвердила диагноз миокардита.

Рис. 1

Магнитно-резонансная томография (МРТ) указывает на миозит. Диффузные высокие внутримышечные и внемышечные сигналы, показывающие отек, соответствующий миозиту (МРТ короткая последовательность восстановления инверсии тау, аксиальные проекции)

Рис.2

При биопсии выявлены признаки вирусного миозита. Биопсия отводящих мышц ноги показывает обширную интерстициальную и периваскулярную инфильтрацию Т-клетками и макрофагами, а также характерные изменения в мышечных волокнах, такие как изменение размера, центральное расположение ядер и стадии некроза и регенерации (окрашивание гематоксилином и эозином, исходное увеличение × 100)

Параллельно стали проявляться нарастающая сонливость и изменения личности. МРТ головного мозга было малозаметным, но в спинном мозге было обнаружено гиперинтенсивное поражение, что весьма подозрительно на миелит.Анализ спинномозговой жидкости (ЦСЖ) показал повышенное количество лейкоцитов, а также повышенный уровень лактата и белка (таблица 2). Расширенный микробиологический и вирусологический скрининг выявил положительный результат полимеразной цепной реакции (ПЦР) на энтеровирусы в ЦСЖ. Впоследствии РНК энтеровируса также была обнаружена в сыворотке пациента, образцах стула и биопсии мышц, тогда как антиэнтеровирусные антитела в сыворотке не обнаруживались. Дальнейшее подтипирование идентифицировало вирус как эховирус 11.

Таблица 2 Анализ спинномозговой жидкости

В совокупности диагностирована полиорганная энтеровирусная инфекция с миозитом, гастроэнтеритом, миокардитом, энцефалитом и гепатитом.Ретроспективно желудочно-кишечные симптомы в августе 2018 г., вероятно, указывают на первичную энтеровирусную инфекцию.

Для восстановления гуморального иммунитета было начато лечение высокими дозами внутривенного иммуноглобулина (ВВИГ; 2 г/кг массы тела ежедневно в течение 4 дней с последующим введением 0,5 г/кг один раз в неделю). Клиническое состояние больного быстро улучшилось. Лабораторные показатели и ЭКГ нормализовались. Через неделю после первой инфузии ВВИГ в сыворотке крови были обнаружены антиэнтеровирусные антитела. Более того, ПЦР на энтеровирусы в спинномозговой жидкости пациента стала отрицательной, а вирусная нагрузка в его кале уменьшилась через 2 недели.Его неврологические симптомы также регрессировали, и он был выписан через 6 недель после поступления.

Во время последнего контрольного визита было обнаружено, что клиническое состояние пациента улучшилось до ECOG 1. Лечение анальгетиками можно было снизить до низких доз, лишь с редкими и легкими приступами боли. MCL пациента все еще находился в стадии ремиссии без дальнейшего антилимфомного лечения. Лечение ВВИГ было продолжено в более низких дозах и с увеличенными интервалами.

Энтеровирус

Энтеровирус

Энтеровирусы

Какие вирусы входят в группу энтеровирус?

  • вирус Коксаки

  • эховирус

  • полиовирус

В какое время года вы встречаете энтеровирусные инфекции?

Энтеровирусные инфекции встречаются во время конец лета и начало осени.

Какая возрастная группа наиболее подвержена энтеровирусные инфекции?

Заболеваемость наиболее высока у детей в возрасте до 1 года. Старый.

Каковы общие методы клинического презентация при энтеровирусных инфекциях?

  • Многие типы энтеровирусов могут вызывать асептические менингит.

  • Миокардит, перикардит и плевродиния связаны с вирус Коксаки группы В.

  • Полиовирусы обычно вызывают паралич (обычно асимметричный), но полиовирус дикого типа, к счастью, был искоренен в американцы. (редкие случаи вакциноассоциированного полиомиелита привели к изменению использования ИПВ до ОПВ в календаре плановой иммунизации детей).

  • Герпангина (везикулярные язвы в полости рта) и ладонно-ягодичная болезнь вызываются классически. вирусами Коксаки группы А.

  • Различные вирусы Коксаки и эховирусы имеют была связана с доброкачественными вирусными экзантемами, имитирующими корь или краснуху.

Что известно о патогенезе инфекция?

Какой путь проникновения вирусов в люди?

  • Верхние дыхательные пути, ротоглотка и кишечный тракт являются входными воротами энтеровирусы.

Опишите их прогресс после получения доступ к людям?

  • Вирионы непроницаемы для желудочного сока, протеаз и желчь.

  • Вирус инициирует репликацию в слизистой оболочке и лимфоидной ткани миндалин и глотки, а затем инфицирует лимфоидные клетки пейеровой бляшки. под слизистой оболочкой кишечника.

  • Первичная виремия распространяет вирус к тканям-мишеням, несущим рецепторы, где начинается вторая фаза вирусного может произойти репликация, приводящая к симптомам и вторичной виремии.

  • Вирус выделение из ротоглотки может быть обнаружено за короткое время до симптомы начинаются, в то время как продукция и выделение вируса из кишечника могут длится 30 дней и более, даже при наличии гуморального иммунного отклик.

  • Вирусы Коксаки и эховирусы распознают рецепторы экспрессируются на многих типах клеток и тканей и вызывают широкий репертуар болезней.

  • Эти и другие энтеровирусы распознают рецепторы на клетки центральной нервной системы, сердца, легких, поджелудочной железы и др. ткани.

Каковы последствия для клеток-мишеней?

Что такое защитный механизм человека?

  • Антитело является основным защитным иммунным ответ на энтеровирусы.

  • Секреторные антитела могут предотвратить установление инфекции в ротоглотке и желудочно-кишечном тракте, и сывороточные антитела предотвращают распространение виремии на ткань-мишень и, следовательно, болезнь.

  • Сывороточные антитела обычно обнаруживаются через 7–10 дней после инфицирования.

 

Рисунок 1. Патогенез энтеровирусов. Ткань-мишень, инфицированная энтеровирусом, определяет преобладающую заболевание, вызванное вирусом.

Каковы результаты ЦСЖ при этом вирусная инфекция?

  •  Нейтрофилы часто обнаруживаются на ранних стадиях вирусный менингит, но преобладают мононуклеарные клетки позже в болезни.

  • Уровни глюкозы в спинномозговой жидкости нормальный

  • Вирусная культура КЧС может подтвердить диагностика вирусного менингита.

Как выявляют вирусную инфекцию?

  • Вирусная культура: Да

  • Вирусный антиген

  • Вирусное антитело

Какое лечение подходит для эта вирусная инфекция?

  • Ведение пациентов с энтеровирусных инфекций включает поддерживающую терапию.

  • Новое лекарство, ингибирующее отшелушивание частицы пикорнавируса проходят клинические испытания.

  • Уменьшает головную боль

  • Уменьшает продолжительность болезни

Каковы меры инфекционного контроля?

  • Больных следует помещать в кишечнорастворимую изоляция.

  • Энтеровирусы передаются в основном фекально-оральным путем, но некоторые серотипы могут распространяться через респираторные выделения или фомиты.

  • Меры инфекционного контроля пациентам и их семьям рекомендуется прервать передачу вирус другим, которые могут быть восприимчивы.

  • К ним относится мытье рук.

  • Это особое значение в детских садах, где возбудители, распространяющиеся фекально-оральным путем вызывают особую озабоченность.

 

 

 

 

Респираторные проявления у детей во время вспышки энтеровируса D68 в 2014 г.

История вопроса . Осенью 2014 г. вспышка энтеровируса D68 в Северной Америке привела к значительному количеству госпитализаций детей в больницы по поводу респираторных заболеваний по всей Северной Америке. Это исследование охарактеризовало клиническую картину и факторы риска тяжелого клинического течения у детей, поступивших в Детскую больницу Британской Колумбии во время вспышки 2014 года. Методы . Ретроспективный обзор карт пациентов с подтвержденной инфекцией EV-D68, поступивших в BCCH с респираторными симптомами осенью 2014 г. Был собран и проанализирован анамнез, клиническая картина, лечение и течение в больнице с использованием описательной статистики. Было проведено сравнение между теми, кто нуждался и не нуждался в госпитализации в отделение интенсивной терапии, для выявления факторов риска. Результаты . В исследование были включены 34 пациента (средний возраст 7,5 лет). У 53% детей в анамнезе были хрипы, у 32% были другие сопутствующие заболевания, а 15% ранее были здоровы.Десять детей (29%) были госпитализированы в детское отделение реанимации. Наличие сложных медицинских состояний (за исключением хрипов) () и копатогенов ассоциировалось с поступлением в ОРИТ (). Выводы . Инфекция EV-D68 приводила к тяжелым, длительным проявлениям астмоподобного заболевания у госпитализированных детей. Наиболее тяжело страдают пациенты с предшествующей историей хрипов и сопутствующими заболеваниями, но вирус также может вызывать хрипы у ранее здоровых детей.

1. Введение

Энтеровирус D68 (EV-D68) представляет собой неполиомиелитный энтеровирус человека, имеющий некоторые общие биологические особенности с риновирусами человека [1, 2]. Впервые он был описан в 1962 г. в связи с респираторными заболеваниями у детей [3], но до 2008 г. о нем редко сообщалось как о причине заболевания человека [4, 5]. С тех пор EV-D68 стал заметным патогеном, вызывающим кластеры респираторных заболеваний в Азии, Европе и США [5–8]. Национальная система надзора за энтеровирусами США сообщила о 79 случаях EV-D68 с 2009 по 2013 год, что более чем вдвое превышает число, зарегистрированное за предыдущие три десятилетия [9].

EV-D68 был связан с рядом респираторных проявлений, включая инфекцию верхних дыхательных путей, пневмонию, бронхиолит, бронхит и обострения астмы [5–8, 10, 11]. Детская популяция, по-видимому, непропорционально поражена, и вирус может быть связан с тяжелым респираторным заболеванием у детей [5, 7, 11]. Во время вспышки в США в 2009 г. более половины случаев EV-D68, выявленных у детей, касались детей в возрасте до четырех лет, а 54% привели к госпитализации в педиатрическое отделение интенсивной терапии (PICU) [5].Аналогичным образом, в серии случаев в Японии было отмечено, что у детей с EV-D68 приступ астмы, который был классифицирован как тяжелый, был непропорционально большим (43,2%) по сравнению с детьми, поступившими в ту же больницу по поводу обострений астмы другой этиологии, у которых только 14,3 % были классифицированы как тяжелые [11].

Осенью 2014 г. вспышка EV-D68 привела к многочисленным госпитализациям детей в больницы по поводу респираторных заболеваний по всей Канаде и США, с задокументированными случаями в 49 американских штатах и ​​девяти провинциях Канады [12].Данные эпиднадзора показали, что пострадавшие лица имели симптомы заболевания нижних дыхательных путей, а дети с предшествующей астмой подвергались особому риску [9, 12, 13]. Несмотря на растущую распространенность за последнее десятилетие, характеристики этого вируса, включая эпидемиологию и спектр заболеваний, еще недостаточно хорошо описаны [14]. Настоящее исследование направлено на описание случаев EV-D68, поступивших в Детскую больницу Британской Колумбии (BCCH) с сентября по декабрь 2014 года.Мы описываем демографические данные пациентов, клиническую картину, ведение в нашем учреждении и основные характеристики, которые могут предрасполагать пациентов к более тяжелым клиническим проявлениям.

2. Методы

Эта ретроспективная серия случаев включала пациентов в возрасте 0–18 лет, которые были госпитализированы в BCCH с респираторным заболеванием и имели положительный результат на EV-D68 в образце из носоглотки в период с 28 августа по 31 декабря 2014 г. Дата начала представляет собой первый подтвержденный случай EV-D68 в BCCH, а дата окончания коррелирует с окончанием периода усиленного наблюдения Центра по контролю за заболеваниями Британской Колумбии (BCCDC) за EV-D68.Пациенты, у которых образцы носоглотки были проверены на респираторные вирусы, были идентифицированы из электронной базы данных микробиологии больницы. Из исследования были исключены пациенты старше 18 лет, не госпитализированные в Детскую больницу Британской Колумбии и имеющие нереспираторные проявления. Совет по этике исследований детей и женщин Британской Колумбии одобрил это исследование.

Назофарингеальные смывы (NPW) или назофарингеальные мазки FLOQ® (Copan, Мурриета, Калифорния, США) были протестированы с помощью VIRAP (панели прямых флуоресцентных окрашиваний антител, охватывающих RSV, грипп A, грипп B, парагрипп 1, парагрипп 2, парагрипп 3, аденовирус, метапневмовирус человека).Образцы были дополнительно протестированы с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) по запросу врача на панель респираторных патогенов (RSV, грипп A и грипп B, парагрипп 1, парагрипп 2, парагрипп 3, аденовирус, метапневмовирус человека, коронавирусы, энтеровирус, риновирус, Mycoplasma pneumonia , Chlamydophila pneumonia , Streptococcus pneumonia и Bordetella pertussis ) или после 4 октября также можно запросить однократную ПЦР на энтеровирус (TrimGen Enterovirus Detection Kit® (TrimGen, Sparks, Maryland) или панель респираторной ПЦР TaqMan, содержащая одиночные праймеры и зонды для энтеровирусов, риновирусов и видов энтеровирусов D).Тестирование назначалось по усмотрению лечащего врача, как правило, для детей, поступивших с респираторными симптомами работы дыхания или хрипов, и определение конкретного случая не использовалось. Все образцы, положительные на энтеровирус, были отправлены в Микробиологическую и справочную лабораторию общественного здравоохранения Британской Колумбии (BC PHMRL) для типирования. Вторая qRT-PCR, специфичная для EV-D68, была проведена в BC PHMRL для выявления всех случаев EV-D68.

Стандартизированный инструмент сбора данных использовался для сбора данных из карт пациентов, включая демографическую информацию, историю болезни, клиническую картину, исследования и курс лечения в больнице.Рентгенограммы грудной клетки были проанализированы детским респирологом (CY), и результаты были классифицированы по внешнему виду как незначительные пятнистые изменения, большие пятнистые изменения, долевые изменения, перибронхиальное утолщение и гиперинфляция. Данные были введены в базу данных, и описательная статистика использовалась для характеристики результатов. При необходимости переменные сравнивались с использованием критерия хи-квадрат, двустороннего критерия и критерия суммы рангов Уилкоксона для определения статистической значимости.

3. Результаты

Всего за период исследования в лаборатории BCCH было собрано и протестировано на наличие вирусов 876 образцов носоглотки.Из них 62 были положительными на энтеровирус, а 56 (6,4%) были подтипированы как EV-D68 в референс-лаборатории (BCP HMRL) (рис. 1). Другие распространенные вирусы в течение периода исследования включали риновирус, грипп и ближе к концу периода исследования респираторно-синцитиальный вирус (RSV) (рис. 2).



Одиннадцать случаев были исключены, поскольку они были амбулаторными, и два случая были исключены, поскольку они не соответствовали возрастным критериям. Один случай был образцом, отправленным из морга, и был исключен, потому что ребенка никогда не госпитализировали в BCCH.Из оставшихся 42 пациентов, поступивших в наше учреждение, восемь были исключены из-за того, что у них не было респираторных заболеваний. Среди пациентов с нереспираторными проявлениями были трое детей с острым вялым параличом, один с желудочно-кишечным кровотечением, трое бессимптомных пациентов с положительным результатом дооперационного скрининга и один онкологический больной с отдаленными вирусными симптомами в анамнезе. Всего 34 пациента соответствовали критериям и были включены в исследование.

3.1. Характеристики пациентов и клиническая картина

Дети были распределены по всем возрастным группам, причем большинство из них были старше 5 лет (60%) (таблица 1). У 53% в анамнезе родители сообщали о хрипах, но в остальном они были здоровы. Еще треть детей (32%) имели другие сопутствующие заболевания, включая врожденный порок сердца, аспирационную болезнь легких, церебральный паралич, недоношенность и хромосомные аномалии. Двое детей находились на домашнем кислороде (один с трисомией 21, аспирационной болезнью легких и AVSD, а другой с аспирационной болезнью легких и тетрадой Фалло), и у одного ребенка была трахеостомия и он находился на домашнем аппарате ИВЛ (по поводу центральной гиповентиляции).

5 (15) 1 1 презентации в больницу для дыхательных дистрибуций 12 (35)

пациентов характеристики (%)

Возраст
<2 5 (15)
2 -4 7 (21)
5-9
13 (38) 13 (38)
10-14 5 (15)
> 15 4 (12)

Пол
Мужской 19 (56)

История болезни
История родителя сообщили хрип, но в остальном
здоров
18 (53)
 Сопутствующие заболевания, кроме хрипов 11 (32)
Edical сопутствующие сочувствия) 5 (15)
NOTE 12 (35)
отделения неотложной помощи только 10 (30)
, допущенных в больницу 12 (35) 12 (35) 12 (35)
. хромосомные аномалии, аспирационная болезнь легких, дизавтономия, недоношенность и церебральный паралич.

Две трети (65%) детей ранее обращались в больницу с респираторным дистресс-синдромом или свистящим дыханием, а 35% ранее поступали в больницу по поводу респираторного заболевания. У пяти ранее здоровых детей, у которых не было хрипов в анамнезе, средний возраст 7,5 лет (диапазон 3–10 лет), у них были одышка и хрипы.

Большинство детей представлено в октябре месяце. Как правило, у детей продромальный период длится три дня, хотя продолжительность симптомов колеблется от одного до семи дней (таблица 2).Наиболее распространенными симптомами, о которых сообщали семьи, были одышка (82%), кашель (82%) и ринорея или заложенность носа (71%). При физикальном осмотре у детей отмечалось тахипноэ (79%) или тахикардия (59%) или сатурация кислорода менее 92% (59%). Общие аускультативные данные включали уменьшение входа воздуха (88%) и хрипы (76%). Оценка педиатрической респираторной оценки (PRAM) была проведена у 22 пациентов, и все они были классифицированы как страдающие тяжелым (73%) или умеренным (27%) дистрессом [16].

3 3 1) 28 (82) 3 4 1 Аускультативные выводы (всего ) Уменьшенный воздушный вход 3 4 1 3 4 1 Лабораторные выводы (всего ) 2 1) 2 1 1 Груд рентгеновские выводы (всего ) 2 11 (38) 3 4

Клинические проявления (%)

Месяц презентации (всего )
Август 1 (3 )
сентября 5 (15)
(74) 25 (74)
ноября 3 (9)
Всего )
28 (82)
кашля 28 (82)
Rhinorrehea / Cuntion 24 (71)
21 (62)
 Свистящее дыхание 15 (44)
 Рвота 11 ( 32)

Vital знаки на презентации (всего )
Тахипноэ 27 (79)
тахикардии 20 (59)
Насыщенность кислорода <92% 20 (59)
лихорадку ≥ 38 ° C 4 (12) 4 (12)
30 (88)
CHEEMEZ 26 (76)
Crackles 12 (35)
Silent Hudh 9 (26)
Оценка PRAM при поступлении (всего )
 0–3 (легкая) 0 (0) 4-7 (умеренные) 6 (27)
8-12 (Service) 16 (73) 16 (73) 16 (73)
лейкоцитоз 12 (52)
нейтрофилезом 17 (74)
лимфопении 19 (83)

Copathogens, идентифицированные на ПЦР тестирования носоглотки стирок (Всего )
11 (42)
Нормальный рентген грудной клетки 4 (14)
 Незначительные неоднородные изменения 6 (21)
 Существенные неоднородные изменения 6 (21)
 Лобарные изменения 0045 1 (3)
Peribronchial утолщение 11 (38)
9 (31) 9 (31)
Важновые параметры знака были определены в соответствии с нормами для возраста согласно Справочнику педиатрии больницы больных детей [15].
В соответствии с лабораторными эталонными значениями возраста BCCH.

Двадцати шести детям была проведена полная ПЦР-панель респираторных возбудителей, а оставшимся восьми детям было проведено тестирование на энтеровирусы, но не на другие вирусы. Копатогены были идентифицированы у 42% детей, которым была проведена полная панель респираторных патогенов, при этом наиболее часто идентифицируемыми микроорганизмами были Streptococcus pneumoniae [5], риновирус [2], аденовирус [2] и грипп [2].Наиболее частыми патологическими изменениями при рентгенографии грудной клетки были перибронхиальное утолщение (38%) и гиперинфляция (31%). Сорок пять процентов имели признаки заболевания воздушно-космической системы, в основном в виде незначительных (21%) и крупных (21%) пятнистых изменений.

3.2. Ведение и клинический курс

В отделении неотложной помощи 65% детей начали лечение астмой по протоколу нашего учреждения, который включал оценку PRAM, пероральный прием дексаметазона и три приема сальбутамола и ипратропия с интервалом в 20 минут.Еще 18% детей получали только сальбутамол. Из 22 детей, которых лечили по протоколу лечения астмы, у 20 была повторная оценка PRAM после применения бронхолитиков (таблица 3). У 45% этих детей наступило улучшение (определяемое как снижение показателя PRAM ≥3) после первоначального лечения [16]. У остальных 55% бронхолитики не улучшались. Реакция на бронходилататоры не зависит от возраста () или пола () и не коррелирует с историей хрипов, о которой сообщают родители ().

3 4

Больница конечно (%)

Местонахождение первоначального приема
Блок детской интенсивной терапии 10 (29)
Стационарная Уорд 24 (71)

Максимальная респираторная поддержка
Нет кислорода 11 (32)
низкий уровень кислорода в поток 13 (38)
Высокий поток кислорода 7 (21)
BiPAP 2 (6)
Настройки домашней трахеостомы 1 (3)
Терапевтические методы
 Системные кортикостероиды 30 (88)
Системные противомикробные 16 (47)
магния сульфата болюсно 13 (38)
Аминофиллина инфузии 4 (12)

кортикостероидами использование +
метилпреднизолон И.В. 14 (47)
дексаметазон или преднизолон PO 16 (53)

Десять пациентов (29% ) были госпитализированы в педиатрическое отделение интенсивной терапии для респираторной поддержки: семь для высокопоточной подачи кислорода, два для двухуровневого положительного давления в дыхательных путях (BiPAP) и один для корректировки параметров трахеостомии.Дети, госпитализированные в ОИТ, чаще имели сопутствующую патологию (60% против 21%, ) и наличие хотя бы одного копатогена при ПЦР-тестировании образца из носоглотки (70% против 17%, ). В остальном они достоверно не отличались от поступивших в палату (табл. 4).

не 4 4 4 4 4 91 234 Собатоген присутствует на полной респираторной вирусной ПЦР панели

Поступил в отделение интенсивной терапии Нет ОИТ стоимость
(%) (%)
Итого, если не указано иное Всего, если не указано иное

Средний возраст 7.4 года 7.1 лет
5 (50) (58) 14 (58)
Первоначальная коляска (умеренная / сильная) 0, Умеренный 6, Умеренные (32)
3, Service (100) 13, Service (68)
(всего) (всего)
LymPhopenia 7 (78) 12 (50) 12 (50)
(всего)
(всего)
История хрипы 8 (80) 16 (67)
других медицинских сопутствующих сопутствующих обществ 6 (60) 5 (21)
7 (70) 4 (25) 4 (25)
(Total) (Total)
Медицинские сочувствия включают дети с врожденными пороками сердца, хромосомными аномалиями, аспирационной болезнью легких, дизавтономией, недоношенностью и детским церебральным параличом.
Копатогены у пациентов ОИТ: аденовирус, Streptococcus pneumonia и грипп А; копатогены у пациентов, не находящихся в отделении интенсивной терапии: Streptococcus pneumonia , грипп B и риновирус.

Средняя продолжительность пребывания в стационаре для всех пациентов составила 90 часов (диапазон от 22 до 432 часов). Медиана продолжительности пребывания в стационаре у пациентов с свистящим дыханием и другими сопутствующими заболеваниями в анамнезе, которые ранее были здоровы, составила 82,5 (диапазон 31–148), 161 (диапазон 37–432) и 50 (диапазон 22–96) часов соответственно. ).

4. Обсуждение

Осенью 2014 г. 34 ребенка с положительными на EV-D68 образцами из носоглотки были госпитализированы в BCCH по поводу респираторных заболеваний. В нашей серии средний возраст составлял 7,5 лет, а наиболее распространенной возрастной группой были дети 5–9 лет. Сообщения о предыдущих вспышках EV-D68 показали, что дети в возрасте 0–4 лет чаще всего подвергались госпитализации [5, 7]. Однако во время вспышки 2014 г. оказалось, что дети школьного возраста были непропорционально поражены, что согласуется с результатами других исследований [13, 17].Кроме того, исследования вспышки 2014 года, в которых сравнивали пациентов с EV-D68 с пациентами без EV-D68, показали, что случаи с EV-D68 были старше [13, 17]. Следует отметить, что в нашем учреждении было только два случая EV-D68 у младенцев в возрасте до одного года, и оба были исключены из этого исследования, поскольку у них были преимущественно нереспираторные проявления. Учитывая, что 37% назофарингеальных тестов в нашем исследовании было проведено в возрастной группе от 0 до 1 года, это открытие указывает на более низкую частоту воздействия или менее тяжелые клинические проявления у младенцев.

Пятьдесят три процента случаев в нашей серии имели предшествующую историю хрипов, о которых сообщали родители. Это согласуется с другими исследованиями вспышки 2014 г., в которых сообщается, что у 31–70% детей, поступивших в больницу с EV-D68, уже была астма [9, 11, 13, 17–19]. Наши результаты вносят свой вклад в растущее количество доказательств того, что EV-D68 непропорционально влияет на тех, у кого есть основное респираторное заболевание. Однако, как и в когорте Канзас-Сити, в нашем исследовании также было выявлено 15% детей, которые ранее были здоровы, что указывает на то, что вирус также может вызывать серьезное респираторное заболевание с хрипами у детей без идентифицируемых факторов риска, хотя ни один из этих детей не нуждался в госпитализации в отделение интенсивной терапии. 17].

В нашем исследовании у трети пациентов были сопутствующие заболевания, отличные от хрипов, и они составили 60% пациентов, поступивших в отделение интенсивной терапии, что свидетельствует о более тяжелом клиническом течении в этой популяции. Предыдущие отчеты показали, что взрослые пациенты со сложными заболеваниями и с ослабленным иммунитетом могут быть более восприимчивы к EV-D68 [6, 19, 20], и было по крайней мере одно сообщение о смерти ребенка со сложными заболеваниями в контексте EV-D68. инфекции [21]. Серия случаев стационарных и амбулаторных пациентов сообщила об одинаковой частоте 28% с сопутствующими заболеваниями [18], хотя другое исследование, в котором участвовали только пациенты, поступившие в отделение интенсивной терапии, показало, что только 18% имели сопутствующие заболевания.

В нашей серии 30% пациентов требуют допуска в PICU. Показатели госпитализации в PICU, о которых сообщалось во время вспышки 2014 г., составляли 4% в Альберте, 18% в Канзас-Сити и 23% в Гамильтоне [13, 17, 18]. Различия в зарегистрированных показателях могут быть объяснены различиями в популяциях пациентов, поскольку исследования Гамильтона и Альберты включали как стационарных, так и амбулаторных пациентов. Следует отметить, что все дети, поступившие в отделение интенсивной терапии в нашем исследовании, получали кислород с высокой скоростью потока, CPAP или BiPAP; напротив, только 51% и 10% детей, поступивших в отделения интенсивной терапии в Канзас-Сити и Гамильтоне, получали либо неинвазивную, либо инвазивную вентиляцию легких [17, 18].Таким образом, показания для госпитализации в ОРИТ различаются в разных учреждениях и могут быть еще одной причиной расхождений в показателях.

Когда была проведена полная ПЦР-панель респираторных патогенов, у 42% пациентов были выявлены копатогены при тестировании образцов из носоглотки. Высокий уровень присутствия копатогенов также наблюдался в предыдущих вспышках EV-D68 [22, 23]. В то время как потенциально патогенные бактерии могут колонизировать носоглотку, не вызывая заболевания, есть некоторые доказательства того, что бактериальная колонизация может играть роль в повторяющихся эпизодах хрипов либо самостоятельно, либо в качестве кофактора вирусной инфекции [24, 25].Недавний метаанализ не выявил каких-либо различий в тяжести клинического заболевания у детей с коинфекцией вируса и у детей с одним возбудителем [26]. Однако в нашей серии случаев дети, поступившие в отделение интенсивной терапии, значительно чаще имели идентифицированный респираторный копатоген, что позволяет предположить, что роль копатогенов в инфекции EV-D68 заслуживает дальнейшего изучения.

Наше исследование было ограничено тем фактом, что оно было ретроспективным, и, таким образом, решение о проведении тестирования на вирусы оставалось на усмотрение врача.У нас не было контрольной группы, и мы не можем комментировать тяжесть инфекции по сравнению с детьми с другими респираторными вирусами. Кроме того, размер нашей выборки был небольшим и исключал тех, кто лечился амбулаторно, что, вероятно, переоценивало тяжесть инфекции EV-D68.

Это исследование дополняет растущее количество доказательств того, что EV-D68 вызывает серьезные респираторные заболевания у детей, даже у тех, у кого ранее не было респираторных заболеваний. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить долгосрочные последствия вируса в этой группе.В дополнение к тем, у кого в анамнезе были хрипы, это исследование также показало, что люди со сложными заболеваниями подвержены риску тяжелых заболеваний, связанных с EV-D68. Наконец, необходим постоянный эпидемиологический надзор для наблюдения за эволюцией вируса как значимого патогена человека.

Раскрытие информации

Текущий адрес Патрика Танга: Медицинский и исследовательский центр Сидра, Доха, Катар. Текущий адрес Акшата Капура — Королевская детская больница Александра, Брайтон, Великобритания.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Вклад авторов

Все авторы участвовали в разработке исследования и редактировали статью. Джорджина Мартин, Рэйчел Ли, Мэтью Карвана и Виктория Э. Кук участвовали в сборе данных. Джорджина Мартин и Рэйчел Ли написали статью.

1400 — Количественная ПЦР на энтеровирусы | Клинический

Клиническая утилита

Энтеровирусы являются хорошо известными этиологическими агентами вирусного менингита, вирусного энцефалита, миокардита и заболеваний дыхательных путей, а также широкого спектра других клинических состояний.Количественную ПЦР можно использовать для обнаружения присутствия вируса, а также для отслеживания течения инфекции.

Об энтеровирусах

Энтеровирусы человека — это повсеместно распространенные вирусы, которые передаются от человека к человеку при прямом контакте с вирусом, выделяемым из желудочно-кишечного тракта или дыхательных путей. Энтеровирусы вызывают широкий спектр инфекций, от легкой формы до клинически значимой инфекции, особенно у людей с ослабленным иммунитетом. 1-2  Большинство инфекций протекают субклинически, особенно у детей младшего возраста, но клинически проявляющееся заболевание может вызывать целый ряд клинических состояний, от сыпи и инфекций верхних дыхательных путей до менингита и других неврологических заболеваний. 3

Процедура

Экстракция нуклеиновой кислоты энтеровируса из образца с последующей обратной транскрипцией вирусной РНК, затем амплификация и обнаружение кДНК с помощью количественной ПЦР в реальном времени. Внутренний контроль добавляется, чтобы убедиться, что экстракция была проведена правильно и реакция ПЦР не была ингибирована. Дизайн анализа Viracor Eurofins включает несколько мишеней для учета вирусных мутаций, что значительно снижает вероятность ложноотрицательных результатов.Этот тест не был одобрен или одобрен для диагностического использования Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.

Специфика

Выявляет весь спектр энтеровирусов человека, включая вирусы Коксаки А, Коксаки В, эховирусы, полиовирусы и энтеровирусы с 68 по 71. Анализ не различает серотипы. Этот анализ предназначен для специфического обнаружения энтеровирусов; однако риновирусы представляют собой близкородственную и очень разнообразную группу патогенов.С некоторыми штаммами риновирусов наблюдалась перекрестная реактивность. Результаты должны использоваться в сочетании с клиническими данными и не должны служить единственной основой для постановки диагноза или решения о лечении.

Динамическое ремоделирование протеома и фосфопротеома клетки-хозяина человека при энтеровирусной инфекции

Анализ протеома инфицированных клеток

Сначала мы решили исследовать уровни общего белка в инфицированных клетках на протяжении инфекционного цикла энтеровируса с использованием CVB3, модельный вирус, обычно используемый в исследованиях энтеровирусов.Образцы клеток, инфицированных в разные моменты времени до 10 часов после заражения (hpi), когда цикл репликации завершен и клетки демонстрируют CPE как показатель их гибели, были проанализированы с помощью однократной нЖХ-МС/МС и точной относительной количественной оценки. белков (рис. 1а). В каждый момент времени можно было идентифицировать от ~ 26 000 до ~ 34 000 пептидов, что привело к общей идентификации 6466 белковых групп (дополнительные данные 1) в 18 образцах (шесть временных точек, три биологических повтора).Из этих идентифицированных белков надежная количественная оценка была получена примерно для ~ 3500 белков в каждый момент времени (рис. 1b), при этом во всех образцах было количественно определено 3202 белка (дополнительные данные 1). 10-часовые образцы имели более низкий выход, предположительно из-за того, что клетки подверглись экстенсивному округлению и отделению, что привело к относительно более низкому выходу белка. Наш углубленный количественный анализ протеома показал очень высокую воспроизводимость со средней корреляцией Пирсона ~ 0,96 в биологических повторах и ~ 0.95 по всем образцам (дополнительный рис. 1a и файл исходных данных). Для общей оценки протеомных сходств и различий инфицированных клеток мы использовали анализ основных компонентов (PCA), который ясно показал высокое сходство в данных протеома (дополнительный рисунок 1b и файл исходных данных). Тем не менее, начиная с 8 hpi в инфицированных клетках произошли существенные изменения, причем наиболее обширные изменения произошли при 10 hpi (рис. 1c, дополнительный рис. 1c и файл исходных данных).

Рис. 1: План эксперимента и обзор данных (фосфо)протеома.

a Экспериментальный план для (фосфо)протеомного анализа клеток HeLa, инфицированных CVB3. Клетки инфицировали CVB3 в течение 30 мин (MOI 10), среду заменяли и клетки инкубировали в течение указанного времени (2–10 ч). Контрольные образцы были ложно инфицированы и инкубированы в течение 0 или 10 часов. Цветовая схема, представляющая данные каждой отдельной временной точки, остается неизменной на протяжении всего документа. b Сводная информация об идентифицированных (ID) и количественных (Q) пептидах, фосфопептидах, белках и сайтах фосфорилирования, включая специфичность обогащения, определяемую как доля обнаруженных фосфопептидов в каждом образце. c Временная динамика глобальных изменений протеома и фосфопротеома при инфекции CVB3, показывающая, что изменения в фосфорилировании происходят намного раньше, чем изменения в уровне белка. d Фракция белков и фосфозитов, динамически регулируемая во время инфекции, по оценке с помощью теста ANOVA. e График плотности, показывающий распределение величины изменений значительно регулируемых белков и фосфозитов, показывающий, что различия в фосфорилировании обычно более значительны, чем различия в уровне белков. Пунктирные линии показывают изменение медианы кратности для каждого набора данных. Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных для ( c ), ( d ) и ( e ).

Чтобы получить надежную статистику, мы сосредоточили анализ только на ~3200 белках, которые можно было количественно определить во всех образцах, что позволило провести подробный анализ их уровней на протяжении всего периода инфекции.Из этих белков 798 (~ 25%) значительно изменились (ANOVA, FDR < 0,05) во время инфекции (рис. 1d и файл исходных данных) со средним изменением уровня белка почти в четыре раза (1,96 2 log) (рис. 1e и файл исходных данных). Неконтролируемая иерархическая кластеризация показала, что ранние временные точки не группируются очень сильно, что указывает на то, что в ранние временные точки произошло не так много изменений в протеоме. Начиная с 6 hpi и далее изменения содержания белка становились более очевидными. Из дифференциально регулируемых белков содержание 587 белков уменьшалось по мере развития инфекции, в то время как содержание второго кластера из 211 белков увеличивалось с течением времени (рис.2а, дополнительные данные 1 и файл исходных данных). В то время как снижение уровня белка может быть объяснено индуцированным вирусом отключением трансляции белка, наблюдение, что определенные уровни белка увеличились, предполагает, что подмножество клеточных белков избегает массового отключения трансляции, вызванного вирусным расщеплением eIF4G. Выделяется несколько групп белков, количество которых увеличивается во время инфекции (дополнительный рисунок 2a, дополнительные данные 1 и файл исходных данных), включая подмножество митохондриальных белков и многие лизосомальные белки.

Рис. 2: Динамический и функциональный анализ данных (фосфо)протеома.

a Тепловая карта содержания белков с оценкой z (интенсивность LFQ) белков, дифференциально выраженных во времени (ANOVA, FDR < 0,05). Два кластера включают 587 белков с пониженной экспрессией (кластер А) и 211 белков с повышенной экспрессией (кластер В). b Тепловая карта и иерархическая кластеризация z — интенсивность сайтов 14 371 CVB3-регулируемых фосфозитов (ANOVA, FDR < 0.05). Три кластера различают активированные (кластер 1), динамически регулируемые (кластер 2) и подавленные (кластер 3) фосфозиты. c Прогнозный анализ восходящих киназ с помощью NetworKIN фосфосайтов, регулируемых CVB3, предполагает, что несколько классов киназ активируются по-разному во время прогрессирования инфекции. Киназы сгруппированы на основе их семейств. Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных для всех панелей.

Мы выполнили точный тест Фишера для всех белков, которые значительно изменились с течением времени, и обнаружили множество белков, связанных с вирусной инфекцией, транскрипцией и трансляцией, наряду с белками, участвующими в метаболических, мембранных, митохондриальных и РНК-процессах (точный тест Фишера, FDR < 0 .05; Дополнительные данные 2, дополнительный рис. 2b и файл исходных данных). Самые большие кластеры белков, которые уменьшились, связаны с механизмом трансляции, включая рибосомные белки и факторы инициации трансляции (дополнительный рисунок 2b и файл исходных данных). Многие из мРНК, кодирующих эти белки, имеют 5'-концевые олигопиримидиновые (5'TOP) мотивы, что позволяет регулировать трансляцию независимо от объемных мРНК, например, в стрессовых условиях (рассмотрено в 12 ).

Мы также отслеживали уровни белка CVB3 во время инфекции, которые, как и ожидалось, резко возросли во время инфекции (дополнительная рис.3 и файл исходных данных). Все вирусные белки происходят из одного и того же предшественника, который протеолитически процессируется вирусными протеазами. Специфическое обнаружение N-концевых или С-концевых пептидов позволило идентифицировать и количественно определить довольно много этих процессированных вирусных белков. К сожалению, многие другие вирусные пептиды нельзя однозначно отнести к конкретным белкам, и они были отнесены к наименее обработанной форме, в которой они встречаются (дополнительные данные 3). Данные о вирусных белках отражают, что инфекция была высокоэффективной и воспроизводимой, поскольку в конце временного периода все обнаруженные вирусные белки находились в пределах примерно 40% обнаруженных белков.

Анализ фосфопротеома инфицированных клеток

Затем мы исследовали ремоделирование фосфопротеома в ходе инфекции, используя рабочий процесс, аналогичный полному анализу протеома, с добавлением сверхчувствительного и автоматизированного обогащения фосфопептидами, который мы ранее описан 13 (рис. 1а). В большинстве образцов, за исключением 10-часового образца, можно было идентифицировать> 14 000 фосфопептидов, происходящих из> 3500 исходных белков, что привело к количественной оценке во всех образцах 16 944 событий фосфорилирования (дополнительные данные 4), принадлежащих ~ 14 000 уникальных сайтов фосфорилирования класса I ( Инжир.1б). Этому высокому охвату фосфопротеома, даже в отсутствие обширного предварительного или постфракционирования образца, способствовала высокая селективность обогащения используемой стратегии обогащения Fe(III)-IMAC, при этом 87–94% идентифицированных пептидов были обнаружены как фосфорилированные последовательности. в каждом образце (рис. 1b). Высокий уровень согласованности между биологическими повторами был достигнут также при количественном определении фосфопротеома со средней корреляцией Пирсона ~0,88 в биологических повторах и ~0.71 по всем образцам (дополнительный рисунок 1a и файл исходных данных). Эта несколько более низкая воспроизводимость, чем для анализа протеома, может быть связана с гораздо более высокой динамикой и изменчивостью фосфопротеома. Более того, более низкая корреляция, измеренная между временными точками, предполагает, что существенные изменения в фосфорилировании произошли во времени. Это наблюдение было дополнительно подчеркнуто нашим анализом PCA, который ясно показал, что существенные изменения в уровнях фосфорилирования уже произошли в инфицированных клетках при 4 hpi (дополнительная рис.1b и файл исходных данных) и дополнительно увеличился при 6–8 hpi (рис. 1c, дополнительный рис. 1c и файл исходных данных). Систематическая оценка дифференциально регулируемых белков и фосфосайтов (т. е. белков и/или фосфосайтов, которые могут быть количественно определены во всех биологических повторах по крайней мере в один момент времени) показала, что около 85% количественного фосфопротеома динамически регулируется в течение времени инфекции. (т. е. сумма всех количественных фосфосайтов, которые изменились в любой момент времени, деленная на общее количество количественно определенных фосфозитов), тогда как только около четверти количественного протеома подвергается временной регуляции (рис.1d и файл исходных данных). Кроме того, наш анализ показал, что фосфорилирование белка претерпевает наибольшую степень изменений со средним изменением примерно в семь раз (2,82 2 log) (рис. 1e и файл исходных данных), что указывает на то, что фосфопротеом гораздо более динамичен и чувствителен к CVB3. инфекции, чем протеом.

Наш фосфопротеомный анализ в совокупности идентифицировал 17 141 сайт фосфорилирования класса I, расположенных на 4428 белках (~ 2/3 всего обнаруженного протеома), включая 25 816 сериновых (86.4%), 2228 остатков треонина (13%) и 97 остатков тирозина (0,6%) (дополнительные данные 4). Мы провели иерархический кластерный анализ 14 371 значительно регулируемого события фосфорилирования (ANOVA, FDR < 0,05), определив три основных кластера дифференциально регулируемых фосфозитов (рис. 2b и файл исходных данных). Кластер 1 (2830 сайтов) содержит сайты, фосфорилирование которых активировалось относительно поздно во время инфекции. Кластер 2 (3605 сайтов) включал сайты, в которых фосфорилирование увеличивалось на ранних стадиях инфекции и снова снижалось в более поздние сроки.Кластер 3 (7936 сайтов) включает сайты, фосфорилирование которых снижалось во время инфекции. Подобно тому, что показал PCA на всем количественно определенном фосфопротеоме, 10-часовые ложно инфицированные клетки сильно сгруппированы с другими ложными контрольными образцами (дополнительный рисунок 1a и файл исходных данных), что указывает на то, что наблюдаемые изменения в фосфорилировании вызваны эффектами вирусной инфекции, а не физиологических изменений, которые происходят в течение применяемого времени инкубации.

Чтобы выяснить, принадлежат ли определенные категории фосфорилированных белков к каждому из этих трех широких кластеров, мы затем провели анализ обогащения (точность Фишера, FDR < 0.05). Конкретные наборы наблюдаемых онтологических терминов (дополнительный рисунок 2a, дополнительные данные 2 и файл исходных данных) включали общие категории, такие как части и процессы мембраны, цитозоля и цитоскелета, а также конкретные категории, включая термины аппарата Гольджи, которые были обогащены в поздней фазе инфекции (кластеры 1 и 3) и процессы, связанные с мРНК, которые были обогащены только в кластере, содержащем сайты с пониженной экспрессией (кластер 3). Хотя также несколько функциональных групп, связанных с транскрипцией/трансляцией и вирусной инфекцией, были явно затронуты на уровне фосфопротеома (дополнительная рис.2а и файл исходных данных), оказалось, что события фосфорилирования происходили во многих различных функциональных группах. Тем не менее, при сравнении функциональных групп, которые значительно изменились как в протеоме, так и в фосфопротеоме, выделялся кластер процессов транскрипции и РНК и кластер инициации трансляции (дополнительный рисунок 2c и файл исходных данных).

Идентификация киназ, активируемых инфекцией CVB3

Мы дополнительно использовали наш обширный набор данных фосфопротеомики и предсказали потенциальные киназы, ответственные за описанные выше регуляции.Мы использовали два независимых подхода: (i) motif-x 14 , который идентифицирует обогащенные мотивы линейной киназы исключительно на основе аминокислотной последовательности, фланкирующей регулируемые фосфозиты (дополнительный рисунок 4 и файл исходных данных), и (ii) NetworKIN 15 , который предсказывает восходящие киназы, ответственные за фосфорилирование регулируемых сайтов (рис. 2c, дополнительные данные 5 и файл исходных данных).

Motif-x идентифицировал в общей сложности 95 мотивов (77 pS и 18 pT), большинство из которых в равной степени представлены среди трех кластеров регулируемых фосфозитов (центральное облако на тройном графике на дополнительном рис.4 и файл исходных данных). В основном это были мотивы, характеризующиеся присутствием одного или нескольких кислотных остатков, окружающих сайт фосфорилирования, что позволяет предположить, что передача сигналов казеинкиназ одинаково активна на протяжении всего течения инфекции. Кроме того, анализ также выявил несколько специфически обогащенных мотивов (дополнительная рис. 4), в том числе (i) чрезмерное представительство pSQ-содержащих мотивов (напоминающих субстраты ATM/ATR) в кластере 1, (ii) почти исключительное обогащение мотивов с пролином в положении +1 (называемым пролин-направленным) в кластере 3 и (iii) обогащением базофильноподобных мотивов в кластере 2 и 3.Анализ предсказания восходящей киназы привел к аналогичной картине, что позволило нам оценить возможный вклад каждой отдельной киназы в наблюдаемые изменения в фосфопротеоме. Соответственно, как и ожидалось, мишени ATM/ATR были сильно обогащены в кластере 1, т. е. постепенно увеличивались в ходе вирусной инфекции, тогда как среди базофильных киназ, PKC и некоторых GRK в основном прогнозировались участки раннего повышения/позднего снижения (кластер 2).

Сигнальные пути, затронутые при инфекции CVB3

В то время как для некоторых фосфосайтов известно их влияние на активность белка и/или киназ, которые фосфорилируют эти сайты, большинство обнаруженных здесь сайтов не имеют аннотированной функции или даже не описаны в крупных публичных репозиториях, таких как UNIPROT (www.uniprot.org) или баз данных PhosphositePlus (www.phosite.org). Тем не менее, анализ сигнальных сетей может дать представление о функциональных результатах.

Чтобы получить общую картину внутриклеточной динамики во время инфекции CVB3, мы объединили наши количественные данные протеомики и фосфопротеомики во все моменты времени. Мы использовали программное обеспечение PhosphoPath 16 для проведения анализа путей и картирования регулируемых белков и фосфозитов в наборе предопределенных путей, на которые, как известно, влияет CVB3 или которые предполагаются нашими данными.Анализ показал, что некоторые из регулируемых белков и сайтов участвуют во множестве взаимосвязанных сигнальных каскадов (дополнительный рисунок 2d и файл исходных данных). Пути, вовлеченные в апоптоз/гибель клеток или транскрипцию/трансляцию, были наиболее обогащены, за ними следуют PI3K/AKT/mTOR и сигнальные каскады MAPK 17,18,19 . Ниже мы сосредоточились на пути mTORC1, который, как известно, ингибируется энтеровирусами, но для которого отсутствует подробный и всесторонний надзор.

Инактивация передачи сигналов mTORC1 при инфекции CVB3

Сигнальный путь mTORC1 играет центральную роль в регуляции клеточного метаболизма, роста, пролиферации и выживания 20,21 . mTORC1 представляет собой комплекс, в котором mTOR является каталитической субъединицей. Активность mTORC1 регулируется широким спектром факторов, включая факторы роста, доступность питательных веществ и энергетический статус клеток. В ответ на эти сигналы mTORC1 фосфорилирует свои мишени, чтобы контролировать активность ряда функциональных цепей, включая трансляцию и аутофагию (дополнительная рис.2д). Наш фосфопротеом покрывал множество фосфосайтов в сети mTORC1 (рис. 3). Сетевой анализ выявил общее снижение активности киназы mTORC1 (рис. 3). Хотя мы не обнаружили ключевой регуляторный остаток S2484 на каталитической субъединице mTOR, несколько событий фосфорилирования соответствуют снижению активности mTORC1, включая снижение (кластер 3) аутофосфорилирования PRAS40 S183 22,23 и PRAS40 T246 фосфорилирования. Мы также наблюдали события, указывающие на повышенную активность mTORC1 (т.г. увеличение (кластер 1) фосфорилирования Raptor S863 24,25 и PRAS40 S203 26 ), но это происходит только на очень поздних стадиях инфекции.

Рис. 3: Обзор событий фосфорилирования в передаче сигналов mTORC1 в CVB3-инфицированных клетках.

Анализ фосфосайтов на белках в сигнальной сети mTORC1 и некоторых восходящих киназах, ограниченных этими киназами, сайты которых обнаружены в комплексе mTORC1. В дополнительных данных 4 перечислены обнаруженные фосфозиты и кластеры, к которым принадлежат значительно измененные сайты.Подробное описание смотрите в основном тексте. Влияние фосфорилирования на активность белка обозначается знаком плюс и минус, что указывает на увеличение и уменьшение, соответственно. В случае, если сайт имеет несколько форм фосфорилирования, показан образец для самой низкой обнаруженной множественности фосфорилирования.

Поскольку активность mTORC1 трудно вывести из регуляторных участков на самих субъединицах mTORC1, мы проанализировали несколько мишеней mTORC1. Фосфопротеомный анализ эукариотического фактора инициации трансляции 4E, связывающего белок 1 (4EBP1), выявил сниженное фосфорилирование почти всех обнаруженных сайтов, которые непосредственно фосфорилируются mTORC1 (рис.3), что мы подтвердили вестерн-блоттингом с использованием нескольких фосфоспецифических антител 4EBP1 (рис. 4a и файл исходных данных). Кроме того, 4EBP1 мигрирует в геле несколькими полосами, которые представляют собой дифференциально фосфорилированные формы белка. В соответствии с потерей фосфорилирования 4EBP1 постепенно схлопывался в нижнюю, наименее фосфорилированную полосу. В совокупности наши данные демонстрируют постепенную потерю фосфорилирования нескольких остатков 4EBP1, которые, как известно, непосредственно фосфорилируются mTORC1, начиная с 6 hpi, достигая кульминации в почти полной потере фосфорилирования при 8 hpi.Соответственно, мы наблюдали пониженное (кластер 3) фосфорилирование фосфорилированных mTORC1 остатков на 4EBP2 и TFEB (см. ниже).

Рис. 4: Анализ активности mTORC1 в клетках, инфицированных энтеровирусом.

a Вестерн-блот-анализ инфицированных клеток, показывающий ингибирование mTORC1. Клетки HeLa инфицировали CVB3 при 50-й множественности множественности, как на рис. 1a, лизировали в разные моменты времени, и лизаты анализировали с помощью вестерн-блоттинга с использованием антител, которые распознают белки в сигнальном пути mTORC1 или специфические фосфорилированные формы этих белков.Различные полосы 4EBP1 представляют собой дифференциально фосфорилированные формы белка, при этом более медленно мигрирующие полосы представляют более экстенсивно фосфорилированные формы белка. Антитело против вирусного белка 2C, которое также обнаруживает белки-предшественники расщепления 2C 2BC и P2, служит в качестве контроля для выявления инфекции. Актин используется в качестве контроля загрузки. 10-часовые инфицированные образцы содержат меньше материала из-за цитопатического эффекта и последующего отслоения части инфицированных клеток. Клетки b HeLa инфицировали CVB3 (энтеровирусы вида B) или полиовирусом (PV, виды энтеровируса C) при множественности инфекций 25, и вестерн-блот-анализ 4EBP выполняли, как показано на панели ( a ).В качестве инфекционного контроля использовали антитело против капсидного белка VP1 CVB5, которое обладает высокой перекрестной реактивностью с VP1 CVB3 и в меньшей степени также распознает VP1 PV. Тубулин использовали в качестве контроля загрузки. c Клетки HeLa инфицировали CVB3, обрабатывали 2 мМ ингибитора репликации гуанидина, как указано, лизировали через 8 часов и обрабатывали для вестерн-блоттинга, как описано в ( a ). Ингибирование mTORC1 проявляется в коллапсе полос 4EBP1 в наименее фосфорилированную нижнюю полосу только тогда, когда клетки были инфицированы CVB3 в отсутствие гуанидина.Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных для всех панелей.

Затем мы проанализировали рибосомную протеинкиназу S6 B1 (RPS6KB1, также известную как p70 S6K ), которая является центром контроля mTORC1 нижестоящей передачи сигналов в направлении регуляции трансляции. Хотя мы не обнаружили ключевой регуляторный остаток S412, который фосфорилируется mTORC1 и активирует p70 S6K , мы могли сделать вывод о явном ингибировании активности p70 S6K из сниженного (кластер 3) фосфорилирования шести из семи обнаруженных Сайты-мишени p70 S6K на рибосомном белке S6 (RPS6), белке запрограммированной гибели клеток 4 (PDCD4) и эукариотическом факторе инициации 4B (eIF4B) (фиг.3), что в совокупности приводит к уменьшению трансляции и роста клеток. Мы подтвердили это с помощью Вестерн-блоттинга с антителами, которые специфически распознают RPS6, фосфорилированный по S240/244 (рис. 4a и файл исходных данных). Сниженная активность p70 S6K также должна приводить к снижению фосфорилирования ингибирующего сайта S366 киназы эукариотического фактора элонгации 2 (eEF2K). Хотя мы не обнаружили этот сайт, мы могли вывести повышенную активность eEF2K из повышенного фосфорилирования на eEF2K T348 (ранний рост) и S474 (поздний рост), которые автокаталитически фосфорилированы 27,28 .eEF2 T57 (в литературе часто обозначаемый как T56) непосредственно фосфорилируется eEF2K и ингибирует функцию eEF2 в элонгации трансляции 29 . Действительно, данные фосфопротеома показали, что уровни p-T57 eEF2 увеличивались в ранние моменты времени, хотя уровни снижались на поздних стадиях инфекции (кластер 3) (дополнительные данные 4). Вестерн-блоттинг подтвердил, что этот сайт фосфорилируется во время инфекции. Только при 10 hpi уровень фосфорилирования снижался, что, вероятно, было вызвано снижением общего уровня eEF2, обнаруженным при полном анализе протеома (логарифмическое 2-кратное изменение -1.84, дополнительные данные 1) и с помощью вестерн-блоттинга (рис. 4а и файл исходных данных).

В целом, наши данные согласуются с ингибированием активности mTORC1, что приводит к подавлению кэп-зависимой трансляции мРНК хозяина. Энтеровирусы также репрессируют кэп-зависимую инициацию трансляции мРНК хозяина путем расщепления эукариотического фактора инициации трансляции 4G (eIF4G). Ингибирование mTORC1 может подавлять трансляцию подмножеств белков, которые нечувствительны к расщеплению eIF4G, и, таким образом, эти два пути, вероятно, дополняют друг друга для достижения глобального отключения трансляции мРНК хозяина.Интересно, что мы наблюдаем, что часть протеома активируется во время инфекции, что подразумевает другой уровень регуляции.

Несколько путей способствуют регуляции mTORC1 во время инфекции

mTORC1 интегрирует входные сигналы от многих различных сигнальных путей 20 . Анализ событий фосфорилирования нескольких вышестоящих регуляторов mTORC1 выявил участие нескольких различных регуляторов (Akt1-TSC1/2, p90 S6K , AMPK и MAPK8) в ингибировании mTORC1 (рис.3). Передача сигналов через ось Akt1-TSC1/2-Rheb является каноническим регуляторным путем mTORC1 в ответ на внеклеточные сигналы, такие как инсулин 20 . Мы наблюдали снижение фосфорилирования Akt1 S124, что указывает на снижение активности Akt1 30,31 . Соответственно, фосфорилирование нижнего остатка S981 TSC2 было снижено, что косвенно коррелирует со сниженной активностью mTORC1 32 . Точно так же фосфорилирование PRAS40 T246, которое ослабляет ингибирующую активность PRAS40 в отношении активности mTORC1 33,34,35,36 , было снижено (кластер 3) в соответствии со сниженной активностью mTORC1.

Мы также обнаружили сигнализацию киназ митоген-активируемой протеинкиназы 8 (MAPK8), AMPK и рибосомной протеинкиназы S6 A1 (RPS6KA1, также известная как p90 S6K ), достигающую высшей точки на субъединице mTORC1 Raptor, которая рекрутирует субстраты mTORC1 21 . Фосфорилирование нижестоящих сайтов MAPK8 S696 (кластер 2) и S863 (кластер 1) на Raptor было (временно) повышенным, что, как сообщается, коррелирует с повышенной активностью mTORC1 24,25,37 . Следовательно, маловероятно, что MAPK8 ингибируется в инфицированных клетках.Активность p90S6K также вряд ли ингибируется. Мы наблюдали временную активацию (кластер 2) нескольких событий фосфорилирования на p90S6K, которые связаны с активацией, включая S221, T359, T573 и S380, последний из которых автокаталитически фосфорилирован 38 , хотя фосфорилирование S363, которое также связано с активацией активация 38 была подавлена ​​(кластер 3).

AMPK является основным датчиком состояния клеточной энергии, который способствует ингибированию mTORC1 посредством фосфорилирования Raptor S722 39 .Мы наблюдали несколько событий фосфорилирования на AMPK, которые подразумевают раннюю активацию AMPK и последовательное раннее увеличение фосфорилирования целевого остатка AMPK GBF1 T1337 (обсуждалось выше). Тем не менее, мы наблюдали пониженное (кластер 3) фосфорилирование целевого остатка AMPK Raptor S722, и фосфорилирование целевого AMPK ULK1 S556 также подавлялось. Следовательно, трудно установить прямую корреляцию между фосфорилированием регуляторных сайтов на AMPK и сигнальным выходом сети mTORC1.Важно подчеркнуть, что активность mTORC1 тонко регулируется многими различными параметрами, что многие субстраты mTORC1 также фосфорилируются др. белками и что разные субстраты mTORC1 могут регулироваться по-разному и конкурировать друг с другом 22,40 .

Инактивация mTORC1 зависит от трансляции и репликации CVB3

Данные, описанные выше, ясно демонстрируют инактивацию mTORC1 с помощью CVB3. Об этой инактивации сообщалось и для других энтеровирусов, включая полиовирус 41 (рис.4b и файл исходных данных) и наблюдался во всех протестированных клеточных линиях (дополнительный рисунок 5a и файл исходных данных). На активность mTORC1 может влиять множество различных событий, происходящих на разных стадиях жизненного цикла вируса. Мы предположили, что клеточные сигнальные события, индуцированные во время входа CVB3, достаточны для ингибирования mTORC1. Проникновение энтеровируса включает доставку вирусного генома через ограничивающую лизосомы мембрану, что требует прокола мембраны неизвестным еще способом. Это приводит к рекрутированию механизмов для сигнализации и восстановления повреждений, которые включают фосфолипазу A2 G16 (PLA2G16) и galectin-8 42 .Несколько galectins, включая galectin-8, как недавно сообщалось, участвуют в регуляции активности mTORC1 -43-. Чтобы проверить, достаточно ли повреждения лизосом, происходящего во время проникновения CVB3, чтобы вызвать наблюдаемое ингибирование mTORC1, мы заразили клетки CVB3 и инкубировали их в течение 8 часов с ингибитором репликации гуанидином. В этом случае заражение CVB3 не приводило к ингибированию активности mTORC1, о чем свидетельствует неизмененный паттерн 4EBP1 (рис. 4c и файл исходных данных). Следовательно, ингибирование активности mTORC1 во время энтеровирусной инфекции зависит от репликации вирусного генома и/или последующего высокого уровня экспрессии вирусного белка.Примечательно, что ингибирование mTORC1 является не просто следствием накопления дцРНК пикорнавируса, поскольку оно не происходит в клетках, инфицированных вирусом энцефаломиокардита (EMCV), пикорнавирусом, принадлежащим к роду Cardiovirus (дополнительный рисунок 5b и файл исходных данных). .

Фактор транскрипции нижестоящего mTORC1 EB (TFEB) влияет на нелитическое высвобождение вируса через внеклеточные везикулы

Аутофагия индуцируется при инфицировании энтеровирусом и, как предполагается, участвует в различных стадиях жизненного цикла вируса, включая репликацию вирусной РНК, сборку вириона и выпустить 4,5,6 .Индукция аутофагии при энтеровирусной инфекции включает активацию ULK1, ключевого индуктора аутофагии, который подавляется mTORC1. Кроме того, mTORC1 контролирует транскрипцию генов, кодирующих белки, функционирующие в аутофагосомах и лизосомах посредством событий репрессивного фосфорилирования нескольких ключевых остатков TFEB 44 (rev. in 45). Хотя мы не обнаружили mTORC1-зависимого фосфорилирования на ULK1 во время инфекции, мы обнаружили снижение фосфорилирования ранее сообщавшегося mTORC1-фосфорилированного ингибирующего сайта на TFEB (S122) 46 (рис.3). Соответственно, мы наблюдали повышенные уровни РНК генов, регулируемых TFEB, после инфекции (дополнительная рис. 5c и файл исходных данных), а также повышенные уровни лизосомных белков, наблюдаемые в эксперименте по протеомике и вестерн-блоттингу (дополнительная рис. 2b, дополнительная рис. 5e). , дополнительный рисунок 6 и файл исходных данных).

Учитывая сложную взаимосвязь между аутофагией и жизненным циклом вируса, мы исследовали, является ли TFEB ключевым фактором энтеровирусной инфекции, используя нокаутные клетки TFEB (TFEB KO ).В этих клетках мы подтвердили причинно-следственную связь между активацией TFEB и повышенной экспрессией лизосомных/аутофагосомных генов (дополнительный рисунок S5f и файл исходных данных). Используя репортерный вирус, экспрессирующий люциферазу, мы не наблюдали влияния нокаута TFEB на репликацию вируса (дополнительный рисунок 5g и файл исходных данных). Сходные уровни люциферазы в присутствии ингибитора репликации гуанидина в клетках дикого типа и TFEB KO указывают на то, что нокаут TFEB также не влияет на трансляцию вирусного полипротеина (дополнительная рис.5g и файл исходных данных).

В то время как уровни внутриклеточного вируса оставались неизменными, мы постоянно наблюдали 5-10-кратное снижение титров внеклеточного вируса при 8 hpi в клетках TFEB KO (рис. 5a и файл исходных данных). Различия во внеклеточном вирусе не были вызваны различиями в клеточной целостности, поскольку инфицированные клетки при 8 hpi все еще находились на ранних стадиях (быстрой) индукции клеточной гибели, а степень лизиса клеток была одинаковой у инфицированных дикого типа и TFEB KO. клетки (рис.5b, дополнительный рис. 7a и файл исходных данных). В дополнение к индукции лизиса клеток вирусы также могут нелитически высвобождаться из инфицированной клетки-хозяина, в первую очередь за счет почкования и высвобождения вирионов внутри EV, заключенного в липидный бислой. Аутофагический путь ранее был вовлечен в высвобождение энтеровирусов, заключенных в ЭВ, на основании обнаружения маркера аутофагии LC3 на ЭВ, высвобождаемом во время инфекции, и на наблюдаемой связи между уровнями аутофагии и высвобождением нелитического вируса 47,48,49,50 .Поэтому мы оценили, влияет ли нокаут TFEB на нелитическое высвобождение вируса через EV. ЭВ выделяли из супернатанта инфицированных клеток путем осаждения при 100 000 ×  г . Из-за высокого содержания липидов ЭВ имеют меньшую плавучую плотность, чем голые вирионы. Эту функцию можно использовать для отделения вирусов, заключенных в EV, от совместно выделенных голых вирионов CVB3 по градиенту плотности, что было подтверждено обработкой тритоном-X100 (дополнительный рисунок 7b и файл исходных данных). Количественная оценка восстановления вируса в фракциях плотности «голого» вируса и EV-содержащих фракций показала значительное снижение высвобождения вируса, заключенного в EV, в отсутствие TFEB (рис.5c, дополнительный рисунок 7c и файл исходных данных). Кроме того, наблюдалась тенденция к снижению выхода голых вирусных частиц. Это снижение может быть связано с изменчивостью экспериментов, хотя мы не можем формально исключить вклад TFEB в высвобождение литического вируса. Поскольку TFEB является центральным узлом в механизме аутофагии, способность CVB3 индуцировать аутофагию в клетках дикого типа и TFEB KO контролировали путем измерения липидизации LC3 с помощью вестерн-блоттинга. В то время как никаких дефектов внутриклеточных уровней аутофагии не наблюдалось ни в ложнообработанных, ни в инфицированных клетках TFEB KO (фиг.5d и файл исходных данных), нокаут TFEB почти полностью предотвратил секрецию LC3 в изолятах EV из инфицированных клеток (рис. 5e и файл исходных данных). Этот результат подтверждает наблюдаемое снижение высвобождения вируса, заключенного в EV (рис. 5c и файл исходных данных). Таким образом, TFEB, по-видимому, потенцирует секреторный аутофагический путь, который включается во время инфекции, чтобы опосредовать нелитическое высвобождение вируса. Это зависимое от TFEB высвобождение вируса, заключенного в EV, произошло только в течение узкого периода времени (рис. 5a и файл исходных данных).Объяснение этого вывода состоит в том, что до момента времени 8 hpi инфекционный вирус не образовывался, в то время как позднее при инфекции литическое высвобождение является основным источником внеклеточного вируса.

Рис. 5: TFEB способствует нелитическому высвобождению CVB3 на ранних стадиях инфекции.

a Накопление внеклеточного вируса задерживается в клетках, лишенных TFEB. Клетки HAP1 дикого типа (HAP1 WT ) и клетки с нокаутом TFEB (TFEB KO ) инфицировали CVB3 при MOI 1, как показано на фиг.4а. Внутриклеточные и внеклеточные титры вируса в указанные моменты времени определяли титрованием конечной точки. Показаны средние значения, планки погрешностей представляют  ± SEM ( n  = 3 независимых эксперимента, каждый с тремя биологическими повторами; результаты всех повторов были усреднены). Результаты были статистически оценены с помощью двухфакторного ANOVA с апостериорным критерием Бонферрони. ***, p  < 0,001 ( p  = 0,0005). Графики, показывающие отдельные точки данных, доступны в файле исходных данных. b Жизнеспособность клеток при 8 hpi не зависит от нокаута TFEB. Клетки HAP1 WT или TFEB KO HAP1 инфицировали CVB3 при MOI 10. Жизнеспособность клеток при 8 hpi определяли с использованием окрашивания жизнеспособности на основе FACS. Показаны средние значения, планки погрешностей представляют  ± SD. Разные символы обозначают данные трех независимых экспериментов. c Нокаут TFEB нарушает высвобождение внеклеточного вируса, заключенного в везикулы. Вирус, высвобождаемый в супернатанте при 8 hpi, выделяли осаждением при 100 000 ×  г и очищали с помощью центрифугирования в градиенте плотности.Инфекционность, обнаруженная в голом вирусе (1,35–1,15 г мл -1 ) и фракциях, содержащих вирус EV (1,10–1,04 г мл -1 ), определяли с помощью титрования конечной точки. Отношение между восстановлением вируса из образцов клеток HAP1 WT и TFEB KO HAP1 показано после поправки на любую разницу во внутриклеточных титрах. Показаны средние значения, планки погрешностей представляют  ± SD ( n  = 3 независимых эксперимента). Результаты были статистически оценены с использованием одновыборочного теста t .Подробная информация о статистике включена в файл исходных данных. **, p  < 0,005 ( p  = 0,0017). d, e Нокаут TFEB влияет на индукцию секреторной аутофагии. Вестерн-блоттинг белка LC3, связанного с аутофагией, в лизатах цельных клеток ( d ) и 100 000 ×  г осажденного материала из супернатантов клеточных культур ( e ) из CVB3-инфицированных HAP1 WT или TFEB 9004 или TFEB 9004 клетки при 8 hpi. Показаны репрезентативные изображения трех независимых экспериментов.Исходные данные предоставляются в виде файла исходных данных для всех панелей.

Фосфорилирование факторов хозяина, участвующих в формировании органелл репликации вируса

Репликация генома энтеровирусов связана со специализированными мембранными структурами (называемыми органеллами репликации), которые предположительно образуются в результате ремоделирования эндоплазматического ретикулума и/или аппарата Гольджи. Энтеровирусы узурпируют специфический набор клеточных белков для создания органелл репликации, включая белки, полученные из Гольджи, Гольджи-специфический брефельдин А-чувствительный фактор 1 (GBF1), белок 3, содержащий домен связывания ацил-КоА (ACBD3), фосфатидилинозитол-4-киназный тип. IIIβ (PI4KB) и оксистерол-связывающий белок (OSBP) (рассмотрено в 1 ).Мы обнаружили фосфозиты на GBF1, PI4KB и OSBP, но не на ACBD3, некоторые из которых ранее были связаны с целостностью Гольджи (дополнительная рис. 8a) и, следовательно, могут играть роль в формировании органелл репликации. Мы сосредоточились на фосфосайтах GBF1 T1337 и PI4KB S266, потому что эти сайты были связаны с целостностью Гольджи и потому что для этих белков были доступны подходящие экспериментальные модели для проверки роли сайтов в репликации энтеровирусов. Как более подробно обсуждается в дополнительном тексте и показано на дополнительном рис.8, когда активность или экспрессия эндогенных белков были нарушены, фосфомиметические и нефосфорилируемые мутанты этих сайтов могли восстановить репликацию вируса, что указывает на то, что фосфорилирование в сайтах, которые считаются важными для мембранного гомеостаза в неинфицированных клетках, не имеет значения. для энтеровирусов, чтобы построить свои органеллы репликации. Эти данные подтверждают идею о том, что энтеровирусы могут перепрограммировать клеточные пути для эффективной репликации.

Наш непредвзятый анализ протеома и фосфопротеома клеток-хозяев, инфицированных энтеровирусом, показал, что вызванные инфекцией изменения в клеточном протеоме происходят на нескольких уровнях, хотя наиболее драматические изменения происходят на посттрансляционном уровне. Атрибуция функциональных эффектов сильно затруднена из-за огромной нехватки функциональных знаний для большинства фосфитов. Тем не менее, сетевой анализ и специальные эксперименты позволили нам проанализировать передачу сигналов mTORC1 как основную сеть, передача сигналов которой изменяется во время заражения вирусом, что через TFEB может способствовать распространению вируса через EV.Наши наборы данных (фосфо)протеома предоставляют богатый ресурс для дальнейшего анализа вызванных энтеровирусами изменений в клеточной инфраструктуре и метаболизме. Это необходимо для лучшего понимания вирусного патогенеза и может открыть новые возможности для разработки фармакологических ингибиторов для лечения энтеровирусных инфекций.

Вспышка энтеровируса D68: проблема общественного здравоохранения


Фарм США
. 2015;40(5):22-26.

ВЫДЕРЖКА: Энтеровирус D68 (EV-D68) — это высококонтагиозное вирусное заболевание, вызывающее симптомы респираторной инфекции.Хотя этот вирус способен заражать взрослых и детей, дети с ранее существовавшими респираторными заболеваниями, такими как астма, подвергаются наибольшему риску развития наиболее серьезных побочных эффектов. Фармацевты могут сыграть важную роль в продвижении возможностей предотвращения и ограничения распространения инфекции. Они также могут предлагать клинические рекомендации по безрецептурной поддерживающей терапии при легком заболевании, направления для подтверждения диагноза и рекомендации по немедленному медицинскому вмешательству для пациентов с более тяжелыми проявлениями этой инфекции.В настоящее время не существует вакцины для предотвращения инфекции EV-D68.

Среди самых популярных сообщений в СМИ в 2014 году новости о появлении высоковирулентных вирусов явно были одними из самых тревожных. Одна из самых заметных вирусных вспышек в 2014 году привела к тому, что сотни детей попали в больницы, встревожили родителей и привели местные школы в состояние повышенной готовности из-за более непосредственной угрозы — опасной и потенциально смертельной болезни, которая может заразить школьников по всей территории Соединенных Штатов. . 1 Заражение энтеровирусом D68 (EV-D68) начинается как обычная простуда и имеет сходные респираторные симптомы на протяжении всего заболевания. Клиническая картина этой инфекции в подтвержденных вспышках варьировала от легких симптомов до тяжелого заболевания, с медицинскими осложнениями, часто требующими госпитализации, а в некоторых случаях приводящими к смерти.

Исходная информация

Впервые EV-D68 был обнаружен в Калифорнии в 1962 г., когда он был выделен из образцов, взятых у детей с пневмонией. 1 Более высокая частота тяжелых случаев у детей по сравнению со взрослыми, вероятно, связана с физиологическими различиями в размере дыхательных путей и менее развитом ранее иммунитете. CDC подтвердил в общей сложности 1153 человека в 49 штатах и ​​округе Колумбия с респираторным заболеванием, вызванным EV-D68, с середины августа 2014 года по 15 января 2015 года, при этом 14 человек погибли. 1 По словам Сьюзен Гербер, доктора медицины, руководителя группы респираторных вирусов и пикорнавирусов отдела вирусных заболеваний Центра по контролю и профилактике заболеваний, «большинство людей, заразившихся EV-D68, выздоравливают, но для тех, у кого есть сопутствующее респираторное заболевание, может быть риск тяжелого респираторного заболевания.Дети, страдающие астмой или хрипами в анамнезе, подвергаются повышенному риску тяжелых респираторных заболеваний». 2

Энтеровирусы происходят из семейства Picornaviridae и рода Enterovirus и представляют собой безоболочечные вирусы с одноцепочечной РНК (оцРНК) с положительным смыслом. 3 EV-D68 эпидемиологически и биологически сходен с риновирусом человека. 3 Было распознано примерно 100 серотипов неполиомиелитных энтеровирусов, но EV-D68 был одним из менее часто регистрируемых.В связи с тем, что люди являются единственным известным хозяином, эти энтеровирусы описываются как человеческие и далее классифицируются как эховирусы, полиовирусы и вирусы Коксаки групп A и B. Хотя в настоящее время распознано больше видов, первоначальное подразделение энтеровирусов человека ( ВГЕ) распределили вирусные характеристики по четырем видам: ВГЕ типов A, B, C и D. В настоящее время HEV-68 переименован в EV-D68, что отражает недавний пересмотр таксономии, в результате которого было удалено описание «человека» как из энтеровирусов, так и из видов риновирусов и добавили номер типа к обозначению вида. 3 Из признанных в настоящее время видов ВГЕ EV-D68 наиболее похож на человеческий риновирус в отношении его способности вызывать респираторные заболевания.

Хотя это не новое заболевание, EV-D68 стал новым патогеном, ответственным за возникновение вспышек на международном уровне. Tokarz et al. изучили возросшую распространенность и/или распознавание этого заболевания и сообщили, что в геноме EV-D68 произошла мутация в расположении белка, которая привела к делеции белка во всех исследованных штаммах. 3 В 1990-х годах произошла еще одна вирусная мутация и делеция белка, что повлияло на репликацию вируса, его вирулентность, приспособленность и устойчивость. Считается, что эти изменения улучшили эффективность трансляции/репликации вируса и могут быть связаны с недавним увеличением числа случаев EV-D68 на международном уровне. 3

CDC получил одну полную геномную последовательность и шесть почти полных геномных последовательностей вирусов, представляющих три известных штамма EV-D68, ответственных за инфекции во время текущей вспышки.Эти последовательности генетически связаны с предыдущими штаммами. Эти образцы были отправлены в GenBank, чтобы сделать последовательности доступными для дальнейшего тестирования. GenBank — это база данных генетических последовательностей Национального института здравоохранения, в которой хранится коллекция всех общедоступных последовательностей ДНК. 4

По словам доктора Гербера, «существует много различных типов энтеровирусов, и различные типы обычно преобладают в зависимости от сезона летом и осенью. CDC идентифицировал небольшие вспышки EV-D68 в предыдущие годы.Однако считается, что усиление эпиднадзора и осведомленности привело к большему количеству признанных диагнозов инфекции EV-D68. Возможно и наиболее вероятно, что многие случаи и вспышки EV-D68 и других заболеваний, связанных с энтеровирусами, имели место, но не подвергались специальному тестированию. Кроме того, в некоторых вспышках может быть систематическая ошибка обнаружения из-за наблюдаемой тяжести заболевания, поскольку тестирование более вероятно в тяжелых случаях. Ожидается, что высокий процент случаев EV-D68 будет выявлен среди пациентов интенсивной терапии и тех, кто нуждается в наиболее интенсивной поддерживающей терапии.Были новые сообщения о смертельных случаях в текущей вспышке». 2

«Эта болезнь не требует уведомления Департамента здравоохранения или CDC; поэтому его трудно отследить с какой-либо степенью точности», — сказал доктор Гербер. 2 «Не все лаборатории имеют возможность проводить тесты для подтверждения этой инфекции, что затрудняет сравнительный анализ, поэтому для будущих сравнений необходим более тщательный сбор информации. Энтеровирусы могут вызывать широкий спектр заболеваний, в том числе ящур с сыпью в качестве отличительного признака, асептический менингит и конъюнктивит.Фармацевты должны знать о том, что EV-D68 может вызывать респираторные заболевания, и нет утвержденных вакцин или противовирусных препаратов для использования. По-прежнему существует интерес к расширению исследований в этой области, поэтому существует более широкая база знаний для применения на практике». Пожалуйста, обратитесь к боковой панели для получения дополнительной информации из интервью с доктором Гербером. 1-3,5,6

Интервью со Сьюзан Гербер, доктором медицины 2

На дополнительные вопросы отвечает докторГербер, руководитель группы по респираторным вирусам и пикорнавирусам CDC

Вопрос: Вы упомянули, что не все лаборатории могут легко проводить тесты на это заболевание. Это основано на расходах или тест доступен не всем? В пресс-релизе CDC от 14 октября 2014 г. говорится, что они разработали и начали использовать новый, более быстрый лабораторный тест для обнаружения EV-D68 в образцах, взятых у людей в США 5 . использует полимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией или rRT-PCR и, как ожидается, идентифицирует все штаммы EV-D68, о которых сообщалось и которые были задокументированы в США.С. этим летом и осенью. Были ли разработаны какие-либо дополнительные тесты с тех пор?

Ответ: Многие больницы и некоторые врачебные кабинеты могут проводить тестирование больных пациентов на наличие энтеровирусной инфекции. Однако большинство из них не могут проводить специальные тесты для определения типа энтеровируса, такого как EV-D68. CDC и некоторые департаменты здравоохранения штатов могут проводить такого рода тестирование. Не было новых тестов для идентификации EV-D68 с тех пор, как CDC разработал и начал использовать новый тест rRT-PCR 14 октября 2014 года.CDC сделал протоколы этого лабораторного теста общедоступными на своем веб-сайте [www.cdc.gov/non-polio-enterovirus/hcp/EV-D68-hcp.html] 6 и изучает варианты предоставления тест-наборов для государственные лаборатории общественного здравоохранения.

Вопрос: Ожидалось, что этот новый тест увеличит общее число подтвержденных случаев по сравнению с 1000 оставшихся образцов, собранных и хранящихся с сентября. Это произошло?

Ответ: Да, CDC смог протестировать оставшиеся образцы в очереди, что привело к увеличению числа подтвержденных случаев.

Вопрос: Знаем ли мы сейчас что-то большее, чем в октябре 2014 года, когда история впервые появилась?

Ответ: Фармацевты могут проверить веб-сайт CDC EV-D68 [www.cdc.gov/non-polio-enterovirus/about/ev-d68.html] 1 и следить за сводной информацией о вспышка на нашем сайте в ближайшее время. Мы знаем, что вспышка затронула практически всю страну (как минимум один человек из 49 из 50 штатов дал положительный результат на EV-D68).CDC, работая с департаментами здравоохранения штатов, идентифицировал как минимум три отдельных штамма EV-D68, которые вызывали инфекции в США в 2014 году. Обычно несколько штаммов одного типа энтеровируса циркулируют в одном и том же году. Мы также знаем, что штаммы EV-D68, циркулирующие в этом сезоне, не новы. Самый известный штамм был в США с 2012 года; это не было недавним введением. Это также связано со штаммами EV-D68, обнаруженными в предыдущие годы в странах Европы и Азии.

Вопрос: Текущий штамм EV-D68 генетически связан со штаммами предыдущих лет, но согласны ли вы с группой Tokarz, 3 , которая сообщила об делециях белков, которые могли способствовать приспособленности и эффективности вируса?

Ответ: Обычно мы не комментируем исследования, проведенные другими. Мы связываем увеличение числа случаев в этом году с усилением эпиднадзора и осведомленности, а также с увеличением количества тестов.

Вопрос: По данным CDC, с середины августа по 20 ноября 2014 года в 47 штатах был лабораторно подтвержден 1121 случай этого вируса.Это сейчас по-другому?

Ответ: Данные в основной части вашей истории до 18 декабря верны и являются самыми последними. На веб-сайте EV-D68 постоянно появляются обновления. 1

Вопрос: CDC собрал и протестировал более 2500 образцов: 40% оказались положительными на EV-D68, 30% оказались риновирусами или энтеровирусами, отличными от EV-D68. Что составляли остальные 30%?

Ответ: Остальные 30% были отрицательными на EV-D68 и любой другой энтеровирус или риновирус.

Вопрос: Является ли серьезность этой вспышки выше, чем в прошлом?

Ответ: Медицинские работники США не обязаны сообщать в департаменты здравоохранения об известных или предполагаемых случаях инфекции EV-D68, поскольку в США это заболевание не подлежит регистрации на национальном уровне. собирает информацию об инфекциях EV-D68; в настоящее время нет данных об общем бремени заболеваемости или смертности от EV-D68 в США.С. По сути, у нас нет данных для сравнения этого сезона с предыдущими годами. Тем не менее, инфекции были широко распространены с подтвержденной инфекцией EV-D68 среди тяжелых случаев в 49 из 50 штатов по состоянию на 18 декабря 2014 года. при этом две детские больницы сообщили об увеличении частоты госпитализаций по поводу тяжелых респираторных заболеваний и увеличении числа инфекций, подтвержденных анализом полимеразной цепной реакции (ПЦР) образцов из носоглотки. 7 Респираторное заболевание — не единственное физическое проявление болезни, другие симптомы обсуждаются в следующем разделе.

В конце лета и осенью 2014 г. энтеровирусы и риновирусы, вероятно, в наибольшей степени способствовали росту респираторных заболеваний. В течение 2014 года наиболее распространенным обнаруженным типом энтеровируса был EV-D68. 1 Многие вирусы могут вызывать схожие респираторные заболевания, и их можно идентифицировать и дифференцировать только с помощью лабораторных исследований.Однако многие люди с респираторными заболеваниями, которые обращаются к врачу, не проходят тестирование, и часто люди с легким респираторным заболеванием не обращаются за медицинской помощью. В конце осеннего сезона, как и ожидалось, энтеровирусные инфекции начали снижаться, и в то же время стали более распространенными респираторные заболевания, вызванные другими вирусами, такими как грипп. Причина этого сезонного изменения распространенности вируса, вероятно, связана с температурной чувствительностью EV-D68 и приводит к более сложной диагностической проблеме для поставщиков медицинских услуг. 8 Общие респираторные заболевания могут выглядеть одинаково; однако источники вирусной инфекции могут быть совершенно разными.

Инкубационный период EV-D68 составляет от 1 до 5 дней, как и у других энтеровирусов и риновирусов, и человек считается заразным в период от 1 дня до появления симптомов до 5 дней после их появления. 3 Вирус обнаруживается в носовой слизи, мокроте и слюне и распространяется, скорее всего, воздушно-капельным путем, выделяемым инфицированным человеком при кашле и чихании.Орально-фекальный путь является еще одним вероятным путем передачи через немытые руки и загрязненные предметы и поверхности. Как ранее отмечал доктор Гербер, в настоящее время нет вакцин или противовирусных препаратов для предотвращения инфекции. 2

Неврологические заболевания

12 сентября 2014 г. Департамент здравоохранения и окружающей среды штата Колорадо уведомил CDC о том, что у ряда детей развились острые неврологические заболевания, включая слабость, дисфункцию черепных нервов, диплопию, опущение лица. , дисфагия и дизартрия в период с августа по сентябрь 2014 г. 9 Сообщается, что возрастной диапазон пораженных пациентов составляет от 1 до 18 лет со средним возрастом 8 лет. У всех были симптомы лихорадки от 3 до 16 дней до появления неврологических симптомов.

26 сентября 2014 г. Центр по контролю и профилактике заболеваний (CDC) выпустил рекомендации по охране здоровья, основанные на его исследовании 10 педиатрических пациентов, госпитализированных в результате этого неврологического заболевания, отметив, что это исследование изучало потенциальную связь между этими симптомами и вспышкой вируса EV-D68. . 10 Четверо из 8 детей дали положительный результат на EV-D68.С середины августа 2014 г. по 15 января 2015 г. CDC или государственные лаборатории общественного здравоохранения подтвердили в общей сложности 1153 человека в 49 штатах и ​​округе Колумбия с респираторными заболеваниями, вызванными EV-D68. 1 По данным CDC, почти все подтвержденные случаи были среди детей, многие из которых страдали астмой или одышкой в ​​​​анамнезе, в то время как миллионы других с легкими симптомами инфекции EV-D68 даже не обращались за медицинской помощью или тестами .

Пациенты в возрасте ≤21 года с острым началом очаговой слабости конечностей, возникшей 1 августа 2014 г. или позже, а также МРТ, показывающей поражение спинного мозга, ограниченное серым веществом, подходили для включения в это исследование.В большинстве случаев выздоровление наступало в течение нескольких дней поддерживающей терапии, включая интенсивную терапию и вспомогательную вентиляцию легких. 9

Группы высокого риска

Фармацевты должны быть осведомлены о конкретных группах, особенно о детях, которые подвергаются высокому риску заражения EV-D68, включая 7 :

  • Дети в возрасте ≤44 лет.
  • Дети с респираторными заболеваниями в анамнезе (например, одышка, астма, бронхиолит), особенно с более тяжелыми заболеваниями
  • Дети и взрослые с иммунодефицитными состояниями.

Дети с астмой особенно подвержены риску тяжелых симптомов инфекции EV-D68. Поэтому, если у ребенка астма, родители должны принять меры по подготовке на случай, если ребенок заболеет EV-D68. CDC рекомендует следующее для контроля астмы у ребенка в течение этого времени 1 :

  • Обсудить варианты разработки и обновления плана действий ребенка при астме с его или ее врачом
  • Информировать родителей о важности соблюдения режима лечения и обеспечение того, чтобы ребенок принимал назначенные ему или ей лекарства от астмы в соответствии с указаниями, особенно препараты длительного контроля при персистирующей астме. пероральные антагонисты лейкотриеновых рецепторов, такие как монтелукаст (Сингуляр).Более тяжелое заболевание требует более интенсивного стероидного вмешательства и часто включает пероральную терапию. У детей с перемежающейся астмой можно контролировать бронходилататоры короткого действия, которые используются только при необходимости; тем не менее, общее использование следует контролировать, а о более частом использовании следует незамедлительно сообщать педиатру, чтобы исключить более серьезное обострение респираторных заболеваний может спровоцировать приступ астмы
  • Немедленно направить родителей и членов семьи к своему поставщику медицинских услуг, если у ребенка появляются новые или ухудшающиеся симптомы астмы помочь, если ребенок испытывает какие-либо симптомы, связанные с астмой.

Роль фармацевта

Фармацевты имеют хорошие возможности для информирования общественности о EV-D68. Все пациенты должны быть вакцинированы для предотвращения гриппа в начале сезона, а лица из группы риска должны получить пневмококковую вакцину. Это уменьшит вероятность заражения вирусом гриппа и, хотя вакцинация не будет на 100% эффективна против всех возможных штаммов, поможет в сортировке диагноза возможного респираторного заболевания.

Пациентам не следует настаивать на приеме антибиотиков при обсуждении вариантов лечения с лечащим врачом.Антибиотики неэффективны против EV-D68 или любых других вирусных заболеваний, а чрезмерное или неправильное использование антибиотиков способствует резистентности. Каждый год в США не менее 2 миллионов человек заражаются бактериями, устойчивыми к антибиотикам, и не менее 23 000 человек ежегодно умирают в результате этих инфекций. 12

Правильная гигиена рук важна для предотвращения передачи вируса. Пациентам следует часто мыть руки водой с мылом после посещения туалета, смены подгузников, а также до и после прикосновения к глазам, носу или рту.Пациентам также следует избегать прикосновения к глазам, носу и рту немытыми руками, совместного пользования посудой или чашками для питья с больными людьми, тесных контактов с другими людьми (например, объятий и поцелуев), а также посещения работы или школы, если они больны. Поверхности, к которым часто прикасаются, такие как дверные ручки и игрушки, должны быть продезинфицированы, если кто-то болен.

Поддерживающая терапия: Поддерживающая терапия также является важным элементом лечения и играет роль в обеспечении комфорта пациентов даже в легких случаях.Жаропонижающие и болеутоляющие средства, такие как ацетаминофен и нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП, например, ибупрофен), можно использовать для взрослых и детей. В целях повышения безопасности и эффективности использования этих продуктов родители и опекуны должны быть проинструктированы об использовании калиброванного перорального шприца (или мерного стаканчика) при введении этих продуктов детям. Измерительные устройства часто прилагаются к продукту, и тем, кто принимает лекарства, следует напомнить всегда читать и следовать указаниям, указанным на этикетке, прежде чем давать дозу, независимо от используемой марки.В 2011 году FDA уведомило общественность о том, что дополнительная концентрация жидкого ацетаминофена, продаваемого для младенцев (160 мг/5 мл), теперь доступна без рецепта. До этого выпуска жидкий ацетаминофен, продаваемый для младенцев, был доступен только в виде концентрированных капель 80 мг/0,8 мл или 80 мг/мл. 13

В том же году FDA объявило о проведении совместного заседания Консультативного комитета по безрецептурным препаратам и Консультативного комитета по педиатрии для обсуждения безрецептурного использования ацетаминофена у детей. На основании рекомендаций, сделанных этим объединенным комитетом, Ассоциация потребительских товаров для здоровья (CPHA), национальная торговая ассоциация, представляющая ведущих производителей и дистрибьюторов безрецептурных препаратов, предприняла дальнейшие действия, добровольно прекратив выпуск концентрированных капель и поставляя только стандартную жидкую концентрацию, доступную для дети в возрасте ≥2 лет (180 мг/5 мл). 14 Руководящие принципы безрецептурного дозирования рекомендуют подтверждать соответствующие дозы для детей младше 2 лет и ограничивать общее количество доз не более чем 5 в течение 24 часов. 13 Однако, если поставщики обращаются за рекомендацией фармацевта по дозировке для других возрастных групп, могут быть предоставлены следующие рекомендации по дозировке ( ТАБЛИЦА 1 ). 15 Родителям и опекунам следует напомнить не использовать ацетаминофен для детей дольше 5 дней и не использовать его при очень высокой лихорадке (определяемой как температура >39.5˚C или 103,1˚F), лихорадка, сохраняющаяся более 3 дней, или рецидивирующая лихорадка, если только это не предписано врачом.

Аспирин и комбинации, содержащие аспирин или аспириноподобные продукты, включая пепто-бисмол и каопектат, следует избегать у детей из-за повышенного риска синдрома Рея. Хотя причинно-следственная связь не была полностью определена, этот риск связан с приемом аспирина у детей с вирусным заболеванием. 15

Назальный солевой спрей 0.65% (например, назальный спрей с солевым раствором океана) можно использовать так часто, как это необходимо, или по указанию врача для уменьшения заложенности носа. Имеющиеся в продаже флаконы-дозаторы можно использовать в качестве капель для младенцев и спрея для детей старшего возраста. 16 Пероральные назальные деконгестанты не рекомендуются пациентам с гипертонией, а местные деконгестантные спреи могут вызвать повторную заложенность носа при длительном использовании. Многоцелевые продукты часто содержат ингредиенты, которые не нужны и могут не подходить для детей; следует использовать только продукты, состоящие из одного ингредиента, которые соответствуют конкретным симптомам и подходят.

Лечение тяжелых случаев должно проводиться только под непосредственным наблюдением лечащего врача и часто требует госпитализации. Любого пациента с тяжелыми симптомами, включая свистящее дыхание и затрудненное дыхание, следует немедленно направить для оказания неотложной помощи. 17

Заключение

EV-D68, признанный инфекционный объект с 1960-х годов, недавно пережил всплеск выявленных случаев. Теперь, когда для подтверждения диагноза доступны улучшенные технологии лабораторных испытаний, ученые предположили, что этот всплеск больше связан с «точным подтверждением заболевания», а не с увеличением общей заболеваемости EV-D68.Хотя специалисты по инфекционному контролю признают, что эта инфекция по-прежнему вызывает озабоченность общественного здравоохранения, в настоящее время основное внимание уделяется стандартным мерам предосторожности и профилактике вирусных инфекций, при этом на горизонте нет новостей о разработке новой вакцины или противовирусного препарата, предназначенного специально для этой болезни.

ССЫЛКИ

1. CDC. Энтеровирус D68. Обновлено 23 марта 2015 г. www.cdc.gov/non-polio-enterovirus/about/ev-d68.html. По состоянию на 8 апреля 2015 г.
Сьюзан Гербер, руководитель группы респираторных вирусов и пикорнавирусов в Центре контроля заболеваний, 6 января 2015 г.
3. Tokarz R, Firth C, Madhi SA, et al. Появление множественных ветвей энтеровируса во всем мире 68. J Gen Virol . 2012;93: 1952-1958 гг.
4. Национальный центр биотехнологической информации (NCBI). Обзор Генбанка. www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank. По состоянию на 6 января 2015 г.
5. CDC разрабатывает новый, более быстрый лабораторный тест на энтеровирус D68. 14 октября 2014 г. www.cdc.gov/media/releases/2014/p1014-test-enterovirus-D68.HTML. По состоянию на 8 апреля 2015 г.
6. ​​CDC. Энтеровирус D68 для медицинских работников. Обновлено 23 марта 2015 г. www.cdc.gov/non-polio-enterovirus/hcp/EV-D68-hcp.html. По состоянию на 8 апреля 2015 г.
7. Национальный сотрудничающий центр инфекционных заболеваний. Опрос по болезни: EV-D68. Что мы знаем о текущей и предыдущей вспышках энтеровируса D68 (EV-D68). Обновлено 19 января 2015 г. www.nccid.ca/disease-debrief-ev-d68#Q1. По состоянию на 8 апреля 2015 г.
8. Liu Y, Sheng J, Fokine A, et al.Структура и ингибирование EV-D68, вируса, вызывающего респираторные заболевания у детей. Наука . 2015;347(6217):71-74.
9. Департамент общественного здравоохранения и окружающей среды штата Колорадо. Рекомендации по охране здоровья: тяжелое респираторное заболевание, связанное с энтеровирусом D68. 12 сентября 2014 г. https://www.colorado.gov/pacific/sites/default/files/DC_ComDis-HAN-Severe-Respiratory-Illness-Associated-with-Enterovirus-D68.pdf. По состоянию на 8 апреля 2015 г.
10. Рекомендации CDC по вопросам здравоохранения. Острое неврологическое заболевание с очаговой слабостью конечностей неустановленной этиологии у детей.26 сентября 2014 г. http://emergency.cdc.gov/han/han00370.asp. По состоянию на 8 апреля 2015 г.
11. Potter PC. Современные рекомендации по лечению бронхиальной астмы у детей раннего возраста. Аллергия Астма Иммунол Рез . 2010;2(1):1-13. www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2831604. По состоянию на 12 апреля 2015 г.
12. CDC. Угрозы устойчивости к антибиотикам в США, 2013 г. www.cdc.gov/drugresistance/threat-report-2013. По состоянию на 12 апреля 2015 г.
13. Дозировка ацетаминофена для младенцев и детей.Тайленол. www.tylenol.com/children-infants/safety/dosage-charts. По состоянию на 12 апреля 2015 г.
14. Ассоциация потребительских товаров для здоровья. Информационная книга: совместное совещание Консультативного комитета по безрецептурным препаратам и Консультативного комитета по педиатрии . 17-18 мая 2011 г. www.chpa.org/workarea/downloadasset.aspx?id=1349. По состоянию на 13 апреля 2015 г.
15. Клиническая фармакология [онлайн-база данных]. Тампа, Флорида: Gold Standard, Inc.; 2013. www.clinicalpharmacology.com. По состоянию на 13 апреля 2015 г.
16. Детский солевой спрей для носа OCEAN. Valeant потребительские товары. www.oceannasalcare.com/saline-nasal-products/kids-saline-nasal-spray#how-it-works. По состоянию на 13 апреля 2015 г.
17. CDC. Что нужно знать родителям об энтеровирусе D68. www.cdc.gov/features/evd68. По состоянию на 13 апреля 2015 г.

Чтобы прокомментировать эту статью, обращайтесь по адресу [email protected]

.

Leave a Comment

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *