Скрининг коагуляционного гемостаза: Коагулограмма, показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов и показатели нормы.

Содержание

Анализ крови на гемостаз

Система гемостаза имеет в своем составе множество различных биологических веществ, а также механизмов, обеспечивающих жидкое состояние крови. В ней балансируют свертывающие и противосвертывающие факторы. Нарушение механизмов работы системы гемостаза приводит к проявлению процессов гиперкоагуляции, либо гипокоагуляции.

Во время повреждения тканей и сосудов нашего организма, наблюдается образование специального сгустка фибрина. Есть 2 пути свертывания крови (внешний и внутренний). Запуск внешнего пути свертывания крови реализуется тканевым тромбопластином, который высвобождается при травматизации стенки сосудов и тканей. Запуск внутреннего пути свертывания крови реализуется в тот момент, когда компоненты крови контактируют с коллагеном субэндотелия сосудистой стенки. В остальном оба эти пути имеют одинаковые механизмы реализации.

В системе гемостаза большую роль имеет определение ПТИ и МНО. Оба этих показателя позволяют дать оценку внешнему пути свертывания крови. ПТИ представляет собой отношение протромбинового времени к времени свертывания плазмы. Международное нормализованное отношение представляет собой регламентированный показатель протромбинового теста. При анализе данных показателей следует учитывать тот факт, что международное нормализованное отношение и протромбиновый индекс являются обратно пропорциональными данными. Это значит, что при повышении первого показателя, второй снижается.

Данные исследования системы гемостаза помогают определить патологии различного характера в обоих путях свертывания крови, которые связаны с недостаточностью или дефектом I фактора, II, V, VII, X. При их дефиците в циркулирующей крови происходит увеличение протромбинового времени.

Факторы плазмы внешнего пути системы свертывания крови образуются в гепатобилиарной системе. Для синтеза различных факторов свертывания требуется витамин К, дефицит которого может привести к различным нарушениям каскада реакций в системе свертывания крови, вследствие чего не происходит образование тромба. Этот факт имеет большое значение в клинической практике у пациентов с увеличенным риском тромбоэмболий и ССО. При назначении лечения варфарином происходит угнетение образования витамина К. Вследствие этого требуется контроль данной терапии показателем МНО.

Помимо вышеупомянутых показателей в коагулограмме определяются и другие показатели.

АЧТВ (активированное частичное тромбопластиновое время) служит для характеристики внутреннего пути системы свертывания крови. Уровень данного показателя определяют по времени формирования сгустка после добавления к крови Са и тромбопластина. АЧТВ используется в клинической практике для контроля эффективности гепарином. Обнаружение повышенного показателя АЧТВ свидетельствует о повышенном риске кровотечения. Обнаружение же пониженных концентраций свидетельствует о повышенном риске образования тромбов.

Фибриноген представляет собой первый фактор системы свертывания крови. Его выработка, главным образом, происходит в печени, после чего он поступает в циркулирующий кровоток. При действии на фибриноген тромбина, он превращается в нерастворимый фибрин. Данный фактор свертывания крови относится к белкам острой фазы воспаления, именно поэтому данный показатель имеет склонность к повышению при различных воспалительных, инфекционных заболеваниях.

Антисвертывающая система крови блокирует образование факторов крови, участвующих в процессе образования фибринового сгустка.

Антитромбин III представляет собой главный фермент антисвертывающей системы крови. Это белковое вещество, синтез которого происходит в печени. При наличии гепарина в системе кровотока инактивация тромбина происходит гораздо быстрее, нежели в условиях отсутствия данного антикоагулянта. Антитромбин III необходим для корректной работы гепарина, поэтому в условиях дефицита АТ III данный антикоагулянт не будет оказывать своего действия.

Подготовка к анализу

• Исследование проводится натощак, последний прием пищи должен быть не менее, чем за 12 часов до проведения теста.

• Исключить физические силовые нагрузки, эмоциональное перенапряжение за 30 минут до взятия биоматериала.

• Запрещается курить до исследования!

Показания к анализу

• Диагностический поиск при подозрении на ДВС-синдром

• Подготовка пациента к плановому хирургическому вмешательству

• Обследование пациента с повышенной кровоточивостью

• При имеющемся повышенном риске развития сердечно-сосудистых заболеваний у пациента

• Тяжелые заболевания гепатобилиарной системы

• Диагностический поиск при обследовании пациента с тромбозами

• Мониторирование пациентов, получающих терапию антикоагулянтами

• Отягощенный наследственный анамнез по заболеваниям системы гемостаза

Интерпретация результатов

Повышенные концентрации МНО и ПТИ наблюдаются при следующих состояниях:

• ДВС-синдром

• Дисфибриногенемия

• Геморрагическая болезнь новорожденных

• Недостаточный синтез витамина К

• Гипофибриногенемия

• Недостаточность Х фактора

• Острый лейкоз

• Хроническая сердечная недостаточность с застойными явлениями

• Хронические заболевания гепатобилиарной системы

• Злокачественное новообразование поджелудочной железы

• Нефротический синдром

• Мальабсорбция

• Прием варфарина

Пониженные концентрации МНО и ПТИ наблюдаются при следующих состояниях:

• Период гиперкоагуляции при развитии ДВС-синдрома

• При наличии у пациента тромбоза глубоких вен

• При повышении активности VII фактора

• Полицитемия

Повышенные концентрации АЧТВ наблюдаются при следующих состояниях:

• Дефицит следующих факторов: Виллебранда, V, XI, II, VIII, IX, XII

• Недостаток прекалликреина

• Дефицит витамина К

• Острый лейкоз

• Синдром мальабсорбции

• Получение терапии антикоагулянтами

Пониженные концентрации АЧТВ наблюдаются при следующих состояниях:

• Период гиперкоагуляции при развитии ДВС-синдрома

• Неопластический процесс

• Острая кровопотеря

Повышенные концентрации фибриногена наблюдаются при следующих состояниях:

• Наличие острого инфекционного процесса в организме

• Ожоговые состояния

• ИМ, ОКС

• Злокачественные новообразования почек, молочных желез

• Различные аутоиммунные заболевания

• Беременность

• Поражения почек

• Цереброваскулярные заболевания

• Заболевания гепатобилиарной системы

Пониженные концентрации фибриногена наблюдаются при следующих состояниях:

• Гемофилия А и В

• Острый гепатит

• Цирроз печени

• Поздняя стадия развития неопластического процесса

• Острый лейкоз

• Сепсис

• Шоковые состояния

• Анемические состояния

• Эмболия

• Синдром мальабсорбции

Повышенные концентрации антитромбина III наблюдаются при следующих состояниях:

• Дефицит витамина К

• Период менструации

• Холестаз

• Состояние после трансплантации почки

• Терапия варфарином

Пониженные концентрации антитромбина III наблюдаются при следующих состояниях:

• Наследственный дефицит антитромбина III

• Тромбоз глубоких вен

• Неопластический процесс

• Нефротический синдром

• Хронические и острые заболевания печени

• ИМ

• Синдром мальабсорбции

• Сепсис

• Беременность

Сдать анализ крови на Коагулограмму в Исследование системы свертывания крови, цены в лаборатории KDL

Коагулограмма, скрининг – это традиционное исследование системы свертывания крови (коагуляции). Включает показатели оценки равновесия свертывающей и противосвертывающей (антикоагулянтной) систем крови. Это анализ может называться по- разному: анализ гемостаза, коагулограмма, гемостазиограмма, анализ свертывания крови, анализ на свертываемость.

В каких случаях обычно назначают коагулограмму?

Обычно это исследование назначается перед госпитализацией, перед срочными и плановыми оперативными вмешательствами, неоднократно во время беременности, перед началом приема препаратов, влияющих на свертывание крови и для контроля лечения.

Особенно важно следить за состоянием системы гемостаза при беременности, так как в это время у женщины происходит многократная перестройка сосудистого русла и наблюдается склонность к физиологическому повышенному свертыванию (гиперкоагуляции). В случае беременности чаще назначается комплексный тест «Коагулограмма, расширенная». Интерпретировать результаты анализа гемостаза у беременных должен только лечащий врач.

Что именно определяется в процессе анализа?

В комплексном тесте «Коагулограмма, скрининг» определяется следующие параметры:

  • АЧТВ (активированое частичное тромбопластиновое время)
  • Протромбин (протромбиновое время, протромбин по Квику, МНО)
  • Тромбиновое время
  • Фибриноген

Что означают результаты теста?

Результаты теста отражают параметры свертывания на момент взятия крови. В показателях коагулограммы при нормальной беременности можно увидеть повышенные значения фибриногена. При приеме варфарина пациенты обязательно должны регулярно контролировать показатель МНО, который обычно увеличен, прием препарата прадаксы отражается на увеличении тромбинового времени. Нередко увеличение тромбинового времени связано с низким уровнем фибриногена.

Результат МНО (международного нормализованного отношения) рассчитывается по результату протромбинового времени и используется обычно для контроля правильности приема препарата для предотвращения тромбозов – варфарина.

Обычный срок выполнения теста

Обычно результат скринингового исследования гемостаза можно получить в течение 1-2 дней

Нужна ли специальная подготовка к анализу?

Кровь на коагулограмму в плановом порядке берут из вены, желательно в утреннее время, натощак (интервал без приема пищи 8 -14 часов), можно пить воду без газа. Обязательно нужно предупредить лабораторию о приеме препаратов, влияющих на показатели системы свертывания: фраксипарин, клексан, варфарин, прадакса и аналогичные лекарственные средства, а также о приеме аспирина или нестероидных противовоспалительных средств.

скрининг работы системы гемостаза. Показания к прохождению коагулологического скрининга. Нормы показателей в крови детей и взрослых. Где сдать кровь для скрининга по приемлемой цене?

Коагулограмма — это базовый набор тестов, который применяется для анализа состояния системы гемостаза. Данный скрининг позволяет оценить внутренние и внешние пути свертывания крови.

При проведении скрининга исследуются базовые показатели, в частности, измеряется активное частичное тромбопластиновое время, показывающее скорость образования сгустка крови в образцах плазмы и позволяющее оценить систему свертывания в общем. Также при проведении скрининга измеряется протромбиновое время, что позволяет оценить возможность дефицита факторов протромбинового комплекса и общую активность внешнего пути свертывания. Протромбиновое время может оцениваться по Квику, при этом в результатах показывается процент содержания в образце крови факторов протромбинового комплекса. Также данный показатель оценивают по системе международного нормализированного отношения, в ней указано протромбиновое время пациента и то время, которое принято в качестве нормы.

Подобное исследование крови обычно назначают при:

  • подготовке к хирургическому вмешательству;
  • лечении патологий печени, кровеносных сосудов и сердца;
  • приеме антикоагулянтов;
  • беременности;
  • приеме пероральных контрацептивов.

Подготовка к скрининговой коагулограмме

Для проведения анализа в нашем центре необходимо сдать образец венозной крови утром натощак — эту процедуру мы проводим максимально быстро и безболезненно. За 24 часа до анализа стоит отказаться от жирной пищи и употребления алкоголя, а также от сигарет.

Пример выдачи результата:

Система гемостаза

Система гемостаза - одна из важнейших систем жизнеобеспечения организма. Она отвечает за тонкое равновесие в кровеносной системе: обеспечивает свертываемость крови, т.е. не дает человеку умереть от кровопотери при нарушениях целостности сосудистой системы, поддерживает кровь в жидком состоянии и растворяет тромбы, которые выполнили свою задачу.

Гемостаз объединяет нескольких систем, которые обеспечивают баланс между образованием тромбов и их растворением. При наличии проблем в любой из них может возникнуть тромбоз (образование тромбов, препятствующих свободному потоку крови по кровеносной системе) или кровоизлияние (выхождение крови из сосудов). Оба состояния могут быть опасны для жизни.

Исследование системы гемостаза назначается беременным женщинам, перед хирургическими вмешательствами, при назначении гормональных препаратов женщинам старше 35 лет, пациентам с болезнями печени и системы кровотворения.

Основные параметры для контроля системы гемостаза:
  • Система гемостаза (скрининг) - ключевой тест состояния системы свертывания.

  • D-димер (D-dimer) – обнаруживается в крови после того, как разрушается тромб. Повышенные значения могут говорить об активном процессе тромбообразования.

  • Фибриноген (Fibrinogen) - один из ключевых показателей свертываемости крови.

  • Растворимые фибрин-мономерные комплексы (РФМК) – оценка риска внутрисосудистого тромбообразования.

  • Активированное частичное тромбопластиновое время (Activated Partial Thromboplastin Time) – оценка времени, за которое образуется тромб.

  • Протромбин (Prothrombin), Международное нормализованное отношение, МНО (International Normalized Ratio, INR) – оценка состояния свертывающей системы.

ВАЖНО! В некоторых случаях врач может назначить дополнительные исследования, напрямую не ассоциированные с системой свертывания крови, но имеющие важное диагностическое значение для различных патологий и состояний.


Биохимическое обследование крови>>

Биохимическое обследование крови позволяет оценить общее состояние организма и на ранних стадиях предположить наличие серьезных заболеваний, например, сахарного диабета, гепатита или злокачественных новообразований различной локализации. Вместе с исследованием гемостаза позволяет выявить проблемы практически всех органов и систем.


Диагностика ЖДА>>

Железодефицитная анемия (ЖДА) — самый распространенный вид анемии и самая частая патология кровеносной системы. В группе риска находятся женщины репродуктивного возраста, беременные, дети первого года жизни, а также пациенты старше 65 лет. Известно, что у пациентов с ЖДА повышен риск к тромбообразованию. Поэтому этот анализ имеет важное диагностическое значение при оценке системы гемостаза.


Витамин В12>>

Витамин В12 играет важную роль в метаболизме. Известно, что его дефицит или избыток может сказываться на гемостазе. Например, при гемофилии, вызванной избытком гепариноподобных веществ, витамин В12 нормализует их величину.


Витамин К>>

Получил название от слова koagulation, что означает свертывание, поэтому можно догадаться о важности данного элемента для процесса коагуляции. Если витамин в недостатке, повышается риск развития кровотечений. Кроме он нужен для поддержания прочности сосудистой стенки и ускорении заживления ран.

Вы можете сдать эти анализы в офисе LabQuest или в любом удобном месте, вызвав медицинскую сестру на дом.

Схемы лабораторной диагностики нарушений в системе гемостаза

Для  улучшения качества исследования системы гемостаза важно придерживаться следующих принципов

  • При обследовании больных необходимо выделять два последовательных этапа диагностики: первичного скрининга с использованием скрининговых тестов и, на втором этапе – проб, позволяющих уточнить диагноз.
  • Для подтверждения диагноза в случае выявления серьезных нарушений в системе гемостаза (снижение уровня фактора Виллебранда, факторов свертывания, тромбоцитопении, дефицита или аномалии действия физиологических антикоагулянтов, наличия волчаночного антикоагулянта, выраженной тромбинемии и др.) необходимо повторное обследование.
  • Интерпретация показателей коагулограммы должна проводиться с учетом возможного влияния принимаемых лекарственных средств и других воздействий.

Первичный скрининг нарушений в системе гемостаза

  • АЧТВ
  • Протромбин, ПВ
  • Тромбиновое время
  • Фибриноген
  • РФМК в плазме

Диагностика тромбозов, тромбоэмболий и ДВС-синдрома

  • Гемограмма: количество тромбоцитов, эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобин, гематокрит
  • Время свертывания крови по Ли-Уайту
  • АЧТВ
  • Протромбин, ПВ
  • Тромбиновое время
  • Концентрация фибриногена в плазме
  • ПДФ
  • РФМК
  • Активность антитромбина III
  • Время фибринолиза (мин)
  • Фактор VII (%)
  • Фактор VIII (%)
  • Фактор XIII-фибринстабилизирующий (%)

Дифференциальная диагностика стадий ДВС-синдрома

Лабораторные признаки

Норма

I стадия

II стадия

III стадия

Время свертывания крови по Ли-Уайту, (мин)

4 — 8

4 — 2

<4 или 8 — 15

>20 — 30

Количество тромбоцитов (109/л)

200 — 300

300 — 400

N или <200

< 150

Концентрация фибриногена (г/л)

2,0 — 4,0

>4,0

<2,0

<0,5

Тромбиновое время (сек)

15 + 1

Протромбиновое время (сек)

12 — 16

5 — 10

10 — 15

30 — 40

Время фибринолиза (мин)

180 — 240

150 — 180

< 180

< 100

Концентрация ПДФ (мкг/мл)

0 — 3

> 3

>3 — 5

> 5

Протромбиновый индекс (%)

90 — 100

N, ↑

N, ↓

Антитромбин III (%)

70 — 120

70 — 120

70 — 60 или Н

60 — 40

АЧТВ (сек)

45 — 55

N, ↑

Фактор VII (%)

694,5 ± 13, 4

N, ↑

↓, N

Фактор VIII (%)

103,4 ± 11,5

N, ↑

↓, N

Фактор XIII — фибринстабилизирующий (%)

80 — 100

N, ↑

↓, N

Подострые формы ДВС-синдрома
Подострые формы ДВС-синдрома встречаются при некоторой акушерской патологии (в частности, при пузырном заносе, синдроме мертвого плода), при острых лейкозах (особенно промиелоцитарном), в ходе реакции отторжения трансплантата, при некоторых инфекциях и интоксикациях, отморожениях. Типично постепенное развитие нарушений коагуляции в течение дней и даже недель, предшествующих тромбогеморрагическим клиническим проявлениям. В отличие от острого ДВС-синдрома подострые его формы характеризуются более длительной начальной фазой гиперкоагуляции, могут течь волнообразно.

Осложнения при подострых формах ДВС-синдрома
Они часто проявляются тромбозами и эмболиями мелких органных сосудов за счет нарушения микроциркуляции с развитием дистрофических изменений внутренних органов. Позже присоединяются тромбозы крупных вен (почечных, печеночных, полых) с нарушением функционального состояния тех или иных органов. Часто первым симптомом бывает патологический мочевой осадок (протеинурия, цилиндрурия, гематурия) как результат нарастающей блокады микроциркуляции в почках, и лишь позже присоединяется геморрагический синдром.

Затяжные формы ДВС-синдрома
Затяжные (хронические) формы ДВС-синдрома встречаются при различных злокачественных опухолях, болезнях системы крови (чаще – при миелопролиферативных заболеваниях), множественных гигантских ангиомах, в частности при синдроме Казабаха-Меррита (Kasabach-Merritt), иммунокомплексных системных заболеваниях, при неправильном применении дефибринирующих препаратов, а также фибринолитиков, ингибиторов фибринолиза и антикоагулянтов. Описаны хронические формы ДВС-синдрома при тяжелой сердечной недостаточности, циррозе печени, после операций с применением аппаратного искусственного кровообращения, у больных, находящихся на хроническом гемодиализе, при некоторых инфекционных заболеваниях. У ряда больных гипертонической болезнью, особенно при частых гипертонических кризах или развитии острого нарушения мозгового кровообращения, также встречаются проявления хронического ДВС-синдрома. Его клиническая картина зависит во многом от исходного заболевания. Чаще всего преобладает гиперкоагуляционный синдром. Встречаются тромбоэмболии, чаще – мелких органных сосудов, с развитием дистрофических изменений соответствующих органов. Возможны инфаркты легких.

Латентные формы ДВС-синдрома
Латентные формы ДВС-синдрома сопровождают течение многих заболеваний (ИБС, сердечная недостаточность, сахарный диабет, системные заболевания соединительной ткани, болезни почек, некоторые инфекционные заболевания и др.). При этом снижаются антикоагулянтная и фибринолитическая активность сосудистой стенки, истощается функциональная активность про-стациклингенерирующих систем. Происходит также ряд других изменений, приводящих в итоге к локальным нарушениям микроциркуляции. Для латентного ДВС-синдрома не характерны клинически явные тромбоэмболические осложнения или геморрагический диатез, и это состояние выявляется только лабораторными методами. В настоящее время существует мнение, что почти у каждого больного с хронической патологией можно обнаружить латентную форму ДВС-синдрома. Латентный ДВС-синдром усугубляет течение основного заболевания, а иногда при прогрессировании гемокоагуляционных нарушений может проявиться клинически. В таких случаях можно говорить о переходе компенсированной фазы латентного ДВС-синдрома в декомпенсированную. В микроциркуляторном русле в этом случае образуются микротромбы, что ухудшает клиническое течение основного заболевания.

Диагностика латентного ДВС-синдрома
Длительное время наблюдается фаза гиперкоагуляции ДВС-синдрома (повышение спонтанной агрегации тромбоцитов, уровня фибриногена, активности антитромбина III, укорочение временных параметров тромбоэластограммы, положительные паракоагуляционные тесты). Количество тромбоцитов может долго не меняться и даже быть повышенным. У некоторых больных, за сутки до максимальных изменений коагулограммы, снижается уровень фибронектина.

Диагностика тромбозов глубоких вен и тромбоэмболии легочной артерии
Тромбозы глубоких вен нижний конечностей выступают довольно распространенными заболеваниями и к тому же могут приводить к одному из наиболее опасных для жизни больного осложнений – тромбоэмболии легочной артерии (ТЭЛА). Риск развития тромбоза глубоких вен повышен у тучных и пожилых людей, а также у беременных женщин, что в большинстве случаев (80-90%) является причиной развития ТЭЛА.
Своевременная диагностика ТЭЛА до настоящего времени представляет значительные трудности в связи с вариабельностью развивающихся клинических синдромов, внезапностью развития и катастрофической быстротой течения заболевания. При своевременно начатой терапии антикоагулянтами летальность не превышает 10%. В настоящее время основным и первоначальным исследованием, которое должно быть назначено больному при подозрении на наличие ТЭЛА, является лабораторный  тест на Д-димер.
Д-димеры – фрагменты, образующиеся в плазме крови при расщеплении возникших внутри сосудистого русла волокон фибрина. Поэтому появление в плазме крови Д-димера свидетельствует о том, что внутри сосудистого русла идут процессы тромбообразования. Референтные величины содержания Д-димера в плазме крови – меньше 0,25 мкг/мл (250 мкг/л) или 0,5 мкг эквивалентов фибриногена/мл (500 мкг эквивалентов фибриногена/л). Определение Д-димера используют для исключения тромбоза любой локализации и диагностики ДВС-синдрома. У пациентов с ТЭЛА тест положителен в 95-98% случаев.

Алгоритм диагностки ТЭЛА

538 tromb leg art

Повышенные значения Д-димера в плазме могут быть при ИБС, инфаркте миокарда, злокачественных опухолях, заболеваниях печени, активном воспалительном процессе, инфекционных заболеваниях, обширных гематомах, при тромболитической терапии, беременности, лиц старше 80 лет. Введение гепарина вызывает резкое и немедленное падение уровня Д-димера, которое продолжается более медленно и в дальнейшем при лечении прямыми антикоагулянтами. Назначение непрямых антикоагулянтов также сопровождается падением уровня Д-димера, но оно носит более плавный характер. Уровень Д-димера повышается с ранних сроков беременности, достигая к концу беременности значений в 3-4 раза выше исходных. Значительно более высокие значения Д-димера выявляют у женщин с осложнениями течения беременности (гестозы, преэклампсия), а также  у беременных с сахарным диабетом и заболеваниями почек.

Углубленная диагностика тромбозов
Cкрининг нарушений в системе протеинов С+S
Нарушения  системы фибринолиза:

  • Активность плазминогена
  • Тканевой активатор плазминогена, t-PA
  • Ингибитор активации плазминогена, PAI-1
  • α1-антитрипсин
  • α2- антиплпзмин
  • α2-макроглобулин
  • Гомоцистеин
  • Аполипопротеин А-І
  • С- реактивный белок
  • Определение резистентности фактора Va к активированному протеину С

Генетическая диагностика тромбофилий и тромбозов

  • мутации фактора V Leiden
  • мутации гена MTНFR
  • мутации гена протромбина
  • полиморфизм генов фибриногена

Диагностика и мониторинг лечения антифосфолипидного синдрома

  • АЧТВ-L+
  • Протромбин, ПВ
  • Волчаночные антикоагулянты, скрининг тест
  • Волчаночные антикоагулянты, подтверждающий тест
  • Аутоантитела к фосфолипидам, IgG/IgM
  • Аутоантитела к кардиолипину, IgG/IgM
  • Аутоантитела к β2-гликопротеину I, IgM

Диагностика болезни Виллебрандта

  • Фактор Виллебрандта

Дифференциальная диагностика гемофилии А и В

  • АЧТВ-L
  • Дефицит фактора VIII
  • Дефицит фактора IX

Мониторинг лечения прямыми антикоагулянтами

  • Гепарин в плазме
  • АЧТВ-Lдо и после сорбции гепарина
  • Тромбиновое время до и после сорбции гепарина
  • РФМК
  • Антитромбин III с сорбцией гепарина
  • Гемограмма: количество тромбоцитов, эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобин, гематокрит

Мониторинг лечения непрямыми антикоагулянтами (антагонистами витамина К)

  • АЧТВ-L
  • Протромбиновое время с растворимым стандартизированным тромбопластином
  • Скрининг нарушений в системе протеина С
  • РФМК

Мониторинг лечения тромболитическими препаратами

  • АЧТВ-L
  • Протромбин, ПВ
  • Тромбиновое время
  • Фибриноген (фактор I)
  • Определение количества плазминогена
  • Определение D-димера

Мониторинг заместительной терапией дефицита факторов свертывания

  • АЧТВ-L
  • Протромбин, ПВ
  • Определение уровня дефицитного фактора свертывания с количественной оценкой его ингибитора

методы диагностики, нормы показателей, нарушения и оценка изменений

Лабораторное исследование системы гемостаза крови проводится для выявления возможных изменений тромбоцитных параметров, протромбинового индекса, тромбинового времени, увеличения или уменьшения фибриногена, повышенной толерантности плазмы к гепарину.

Также при лабораторной диагностике системы гемостаза можно выявить наличие у человека геморрагического диатеза.

Свертывание крови является защитной реакцией организма, предохраняющей его от кровопотери. Процесс свертывания регулируется нервной и эндокринной системами. Текучесть крови предотвращает слипание клеток и позволяет им легко перемешаться по сосудам.

Свертываемость и текучесть, взаимодействуя между собой, образуют надежную систему гемостаза крови, а нарушение норм её показателей свидетельствует о возможном наличии патологий, требующих своевременного лечения.

Факторы системы гемостаза и параметры анализатора

Система гемостаза обеспечивается следующими факторами:

  1. Сосудистый — с одной стороны, эндотелий сосудов выделяет в кровь вещества, не позволяющие клеткам крови слипаться и прилипать к стенкам сосудов, а с другой — при повреждении сосуда выделяются вещества, способствующие тромбообразованию.
  2. Тромбоцитарный — за счет деятельности тромбоцитов. Тромбоциты (кровяные пластинки) — самые маленькие клеточные элементы крови (величина в 2—3μ).

Тромбоцитные параметры гематологического анализатора при оценке системы гемостаза:

  • PLT — содержание тромбоцитов.

Норма 180—320×109/л

  • MPV —средний объем тромбоцитов.

Норма 7,4-10,4/л

  • PDW—ширина распределения тромбоцитов по объему.

Норма 10—20%

  • РСТ — тромбоцит в норме составляет 0,15—0,4%.
  • P-LCR — количество крупных тромбоцитов. Снижение числа тромбоцитов (ниже 100х109/л) — тромбоцитопения — наблюдается:
  1. Первичная тромбоцитопения — болезнь Верльгофа
  2. Вторичная — при инфекционных заболеваниях
  3. При отравлениях химическими веществами
  4. При острых, реже — хронических, лейкозах
  5. При гемолитической болезни новорожденных
  6. При ионизирующем воздействии
  7. Приеме ряда лекарственных препаратов (сульфаниламиды, аспирин, антибиотики, анестетики)

Повышение количества тромбоцитов (тромбоцитоз) наблюдается:

  • При первичной идиоматической тромбоцитемии,
  • При полицетемии,
  • При травмах и асфиксии,
  • В послеоперационном периоде,
  • При злокачественных опухолях.

Плазменные факторы свертывания:

  • I — фибриноген
  • II — протромбин
  • III — тробопластин
  • IV — ионы кальция
  • V — проакцелерин
  • VI — акцелерин
  • VII — проконвертин (тромботропин)
  • VIII — антигемофильный глобулин А (АГГ)
  • IX — плазменный компонент тромбопластина (ПКТ)
  • X — фактор Коллера
  • XI — плазменный предшественник тромбопластина (ППТ)
  • XII — фактор контакта
  • XIII — фибринолизирующий фактор

Плазменные факторы объединяются в следующие группы:

  1. Коагуляционная система (свертывающая) — способствует свертыванию крови.
  2. Антикоагуляционная система (противосвертывающая) — предотвращает самопроизвольное тромбообразование.
  3. Фибринолитическая — расщепляет и удаляет фибрин из кровотока.

Комплексный анализ системы гемостаза: коагулограмма

Коагулограмма является комплексом лабораторных тестов, дающих представление о состоянии системы гемостаза, антикоагуляции и фибринолиза.

Среди тестов есть простые (ориентировочные) — позволяющие выявить грубые сдвиги, и уточняющие, которые более детально характеризуют механизм имеющихся нарушений.

К комплексным методам исследования сосудисто-тромбоцитарной системы гемостаза относятся:

  • Время кровотечения
  • Определение числа тромбоцитов
  • Определение адгезионной и агрегационной способности тромбоцитов
  • Исследование ретракции кровяного сгустка и др.

Время кровотечения (ВК) — интервал между временем прокола мякоти пальца и остановкой кровотечения.

В норме остановка кровотечения наступает на 2—3-й минуте от момента прокола и дает представление о функции тромбоцитов.

Удлинение времени кровотечения наблюдается при:

  • Наследственных тромбоцитопениях
  • ДВС-синдроме
  • Авитаминозе С
  • Длительном приеме аспирина и других антикоагулянтов

Наряду с подсчетом тромбоцитов определяют адгезию тромбоцитов — свойство прилипать к поврежденной стенке сосуда.

Индекс адгезивности в норме — 20—50 %.

Снижение индекса свидетельствует об уменьшении адгезивной способности и наблюдается при:

  • Болезни Виллебранда
  • Тромбоцитопатии (в т. ч. — тромбостении Гланумана)
  • Остром лейкозе
  • Почечной недостаточности

Агрегация тромбоцитов — способность тромбоцитов соединяться. Спонтанная агрегация в норме — 0—20 %.

Повышение агрегационной способности отмечается при:

  • В начальном периоде ДВС-синдрома
  • Атеросклерозе
  • Тромбозах
  • Инфаркте миокарда
  • Сахарном диабете

Снижение агрегационной способности отмечается:

  • При тромбостении Глацмана
  • При болезни Виллебранда
  • При тромбоцитопении

Определение ретракции кровяного сгустка — процесс сокращения, уплотнения и выделения сыворотки крови сгустком после образования фибрина под действием белка, содержащегося в тромбоцитах.

В норме индекс ретракции — 48—64 %.

Индекс ретракции — отношение объема выделенной сыворотки к объему взятой крови. Его снижение бывает при тромбоцитопениях.

К методам исследования коагуляционного гемостаза относятся:

  • Время свертывания
  • Протромбиновый индекс (ПТИ)
  • Определение тромбинового времени
  • Определение количества фибриногена
  • Вктивированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ)
  • Определение толерантности плазмы, и др.

Время свертывания — интервал между взятием крови и появлением в ней сгустка фибрина.

Норма для венозной крови — 5—10 минут.

Норма для капиллярной крови: начало — 30 секунд — 2 минуты, окончание — 3-5 минут.

Увеличение времени свертывания происходит при гипокоагуляции за счет недостатка ряда плазменных факторов свертывания или действия антикоагулянтов. Наблюдается при:

  • Гемофилии
  • Заболеваниях печени

Уменьшение времени свертывания отмечается за счет гиперкоагуляции при:

  • Приеме оральных контрацептивных препаратов
  • После массивных кровотечений

При ДВС-синдроме в первой стадии время свертывания резко ускорено, а во второй и третьей стадии удлиняется вплоть до полного несвертывания.

Протромбиновый индекс и тромбиновое время

Протромбиновый индекс (ПТИ)— это время образования сгустка при добавлении кальция и тромбопластина.

Увеличение ПТИ свидетельствует о повышении свертываемости и риске развития тромбозов, но может отмечаться в норме в последние месяцы беременности и при приеме пероральных контрацептивов.

Тромбиновое время — время, за которое происходит превращение фибриногена в фибрин.

В норме тромбиновое время равно 15-18 секундам.

Увеличение тромбинового времени отмечается при:

  • ДВС-синдроме
  • Тяжелом поражении печени
  • Врожденной недостаточности фибриногена

Укорочение времени свидетельствует об избытке фибриногена или о наличии парапротеинов.

Этот показатель служит контролем при лечении гепарином и фибринолитиками.

Фибриноген и АЧТВ

Фибриноген — белок, синтезирующийся в печени и под действием фактора XIII превращающийся в фибрин. Норма фибриногена в крови — 2—4 г/л.

Увеличение фибриногена свидетельствует о повышении свертываемости и риске образования тромбов и отмечается:

  • В конце беременности
  • После родов
  • После хирургических вмешательств
  • При пневмонии
  • При раке легких
  • В I фазе острого ДВС-синдрома

Уменьшение фибриногена отмечается:

  • Во II—III фазах острого ДВС-синдрома
  • При тяжелых формах гепатита

Активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) используется для исследования плазменных дефектов образования тромбопластина.

В норме АЧТВ составляет 28—38 секунд.

Увеличение АЧТВ отмечается:

  • При гипокоагуляции (дефицит факторов — II, V, VIII, IX, XI, XII)
  • Во II и III фазе ДВС-синдрома
  • При применении гепарина

Укорочение времени свидетельствует об активации процесса свертывания крови (увеличении активности факторов плазмы).

Толерантность к гепарину

Если введение гепарина резко увеличивает время образования сгустка, то говорят о пониженной толерантности (устойчивости), если же внесение гепарина не замедляет (или незначительно изменяет), говорят о повышенной толерантности плазмы к гепарину.

Нормы толерантности к гепарину системы гемостаза:

  • Толерантность к гепарину нитратной плазмы =10—16 минут, (у 75 % людей — 11-14 минут, у 90 % — 10—16 минут)
  • Толерантность к гепарину оксалатной плазмы = 10—15 минут

Продление срока наступления свертывания (гипокоагуляция) встречается при коагулопатиях (гемофильные состояния, тромбопении), а сокращение срока (гиперкоагуляция) — при тромбоэмболических состояниях, после оперативных вмешательств, при сердечной декомпенсации.

Патология системы гемостаза: геморрагический диатез

Геморрагический диатез — склонность организма к повторным кровотечениям, которые могут возникать как произвольно, так и под воздействием незначительных травм.

Такую патологию системы гемостаза вызывают:

Нарушение коагуляции плазмы — свертываемости крови (коагулопатии) при:

  • Нарушении тромбопластинообразования
  • Нарушении тромбинообразования
  • Нарушении фибринообразования
  • Избытке антикоагулянтов
  1. Тромбоцитопатии.
  2. Поражение стенки сосудов (вазопатии).

Таблица «Типы и тяжесть кровотечений»:

Тип и тяжесть кровоточивости

Нарушение
коагуляции

Нарушения функций тромбоцитов и вазопатии

Гематомное

характерны

редко

Запоздалое
кровотечение

характерны

редко

Кровотечение из поверхностных ран

не характерно

тромбоципатии,
тромбоцитопении

Петехии

редко

характерны

Ограниченные подкожные и кожные кровоизлияния

характерно

характерно

Кровотечения из носа

редко доминируют

часто значительные

Гематурия

обычно

редко


KDL. Система гемостаза (свертывание крови). Анализы и цены

Алергология. ImmunoCAP. Индивидуальные аллергены, IgE

Аллергены деревьев, IgE

Аллергены животных и птиц, IgE

Аллергены пыли, IgE

Аллергены трав, IgE

Пищевые аллергены, IgE

Аллергокомпоненты ImmunoCAP

Аллергокомпоненты деревьев

Аллергокомпоненты животных и птиц

Аллергокомпоненты плесени

Аллергокомпоненты трав

Пищевые аллергокомпоненты

Аллергология. ImmunoCAP. Комплексные исследования IgE (результат по каждому аллергену)

Аллергология. ImmunoCAP. Панели аллергенов IgE, скрининг (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергология. ImmunoCAP. Фадиатоп

Аллергология. Immulite. Индивидуальные аллергены

Аллергены гельминтов, IgE

Аллергены грибов (кандида и плесневых), IgE

Аллергены деревьев, IgE

Аллергены животных и птиц, IgE

Аллергены клещей домашней пыли, IgE

Аллергены лекарств и химических веществ, IgE

Аллергены насекомых, IgE

Аллергены пыли, IgE

Аллергены ткани, IgE

Аллергены трав, IgE

Бактериальные аллегены (стафилококк), IgE

Пищевые аллергены, IgE

Пищевые аллергены, IgG

Аллергология. Immulite. Комплексы аллергенов, IgE (результат по каждому аллргену)

Аллергология. Immulite. Панели аллергенов, скрининг (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергены деревьев, IgE (панель)

Аллергены животных и птиц, IgE (панель)

Аллергены трав, IgE (панель)

Ингаляционные аллергены, IgE (панель)

Пищевые аллергены, IgE (панель)

Аллергология. Immulite. Панели пищевых аллергенов IgG (результат СУММАРНЫЙ)

Аллергология. RIDA. Комплексы аллергенов, IgE

Аллергология. RIDA. Комплексы аллергенов, IgE (результат по каждому аллргену)

Аллергология. Местные анестетики, IgE

Биохимические исследования крови

Диагностика анемий

Липидный обмен

Обмен белков

Обмен пигментов

Обмен углеводов

Специфические белки

Ферменты

Электролиты и микроэлементы

Биохимические исследования мочи

Разовая порция мочи

Суточная порция мочи

Витамины, аминокислоты, жирные кислоты

Гематология

Гемостаз (коагулограмма)

Генетические исследования

HLA-типирование

Исследование генетических полиморфизмов методом пиросеквенирования

Исследование генетических полиморфизмов методом ПЦР

Молекулярно-генетический анализ мужского бесплодия

Гистологические исследования

Гистологические исследования лаборатории UNIM

Гормоны биологических жидкостей

Гормоны гипофиза и гипофизарно-адреналовой системы

Гормоны крови

Гормоны гипофиза и гипофизарно-адреналовой системы

Маркеры остеопороза

Пренатальная диагностика

Ренин-альдостероновая система

Тесты репродукции

Функция органов пищеварения

Функция щитовидной железы

Гормоны мочи

Диагностика методом ПЦР

COVID-19

Андрофлор, иследование биоценоза (муж)

Вирус герпеса VI типа

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус простого герпеса I, II типа

Вирус Эпштейна-Барр

Вирусы группы герпеса

Возбудитель туберкулеза

ВПЧ (вирус папилломы человека)

Грибы рода кандида

Листерии

Парвовирус

Респираторные инфекции

Стрептококки (вкл. S.agalactie)

Токсоплазма

Урогенитальные инфекции, ИППП

Урогенитальные инфекции, комплексные исследования

Урогенитальные инфекции, условные патогены

Фемофлор, исследование биоценоза (жен)

Флороценоз, иследование биоценоза (жен)

Цитомегаловирус

Диагностика методом ПЦР, кал

Кишечные инфекции

Диагностика методом ПЦР, клещ

Клещевые инфекции

Диагностика методом ПЦР, кровь.

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус простого герпеса I, II типа

Вирус Эпштейна-Барр

ВИЧ

Возбудитель туберкулеза

Гепатит D

Гепатит G

Гепатит А

Гепатит В

Гепатит С

Листерии

Парвовирус

Токсоплазма

Цитомегаловирус

Жидкостная цитология

Изосерология

Иммуногистохимические исследования

Иммунологические исследования

Иммунограмма (клеточный иммунитет)

Интерфероновый статус, базовое исследование

Интерфероновый статус, чувствительность к препаратам

Оценка гуморального иммунитета

Специальные иммунологические исследования

Исследование абортуса

Исследование мочевого камня

Исследование парапротеинов. Скрининг и иммунофиксация

Исследования слюны

Исследования слюны

Комплексные исследования

Лекарственный мониторинг

Маркеры аутоиммунных заболеваний

Антифосфолипидный синдром (АФС)

Аутоиммунные заболевания легких и сердца

Аутоиммунные неврологические заболевания

Аутоиммунные поражения ЖКТ и целиакия

Аутоиммунные поражения печени

Аутоиммунные поражения почек и васкулиты

Аутоиммунные эндокринопатии и бесплодие

Диагностика артритов

Пузырные дерматозы

Системные ревматические заболевания

Эли-тесты

Микробиологические исследования (посевы)

Посев крови на стерильность

Посев на гемофильную палочку

Посев на грибы (Candida)

Посев на грибы (возбудители микозов кожи и ногтей)

Посев на дифтерию

Посев на микоплазмы и уреаплазмы

Посев на пиогенный стрептококк

Посев на стафилококк

Посевы кала

Посевы мочи

Посевы на микрофлору (конъюнктива)

Посевы на микрофлору (отделяемое)

Посевы на микрофлору (урогенитальный тракт женщины)

Посевы на микрофлору (урогенитальный тракт мужчины)

Посевы на микрофлору ЛОР-органы)

Ускоренные посевы с расширенной антибиотикограммой

Неинвазивная диагностика болезней печени

Программы неинвазивной диагностики болезней печени

Неинвазивный пренатальный ДНК-тест (НИПТ)

Неинвазивный пренатальный тест (пол/резус плода)

Общеклинические исследования

Исследование назального секрета

Исследование секрета простаты

Исследования кала

Исследования мочи

Исследования эякулята

Микроскопическое исследование биологических жидкостей

Микроскопия на наличие патогенных грибов и паразитов

Микроскопия отделяемого урогенитального тракта

Онкогематология

Иммунофенотипирование при лимфопролиферативных заболеваниях

Миелограмма

Молекулярная диагностика миелопролиферативных заболеваний

Цитохимические исследования клеток крови и костного мозга

Онкогенетика

Онкомаркеры

Пищевая непереносимость, IgG4

Полногеномные исследования и панели наследственных заболеваний

Пренатальный скрининг

Серологические маркеры инфекций

Аденовирус

Бруцеллез

Вирус HTLV

Вирус Варицелла-Зостер (ветряной оспы)

Вирус герпеса VI типа

Вирус Коксаки

Вирус кори

Вирус краснухи

Вирус эпидемического паротита

Вирус Эпштейна-Барр

Вирусы простого герпеса I и II типа

ВИЧ

Гепатит D

Гепатит А

Гепатит В

Гепатит Е

Гепатит С

Грибковые инфекции

Дифтерия

Кишечные инфекции

Клещевые инфекции

Коклюш и паракоклюш

Коронавирус

Менингококк

Паразитарные инвазии

Парвовирус

Респираторные инфекции

Сифилис

Столбняк

Токсоплазма

Туберкулез

Урогенитальные инфекции

Хеликобактер

Цитомегаловирус

Специализированные лабораторные исследования.

Дыхательный тест

Микробиоценоз по Осипову

Тяжелые металлы и микроэлементы

Тяжелые металлы и микроэлементы в волосах

Тяжелые металлы и микроэлементы в крови

Тяжелые металлы и микроэлементы в моче

Услуги

Выезд на дом

ЭКГ

Установление родства

Химико-токсикологические исследования

Хромосомный микроматричный анализ

Цитогенетические исследования

Цитологические исследования

анализов коагуляции | eClinpath

Скрининговые тесты коагуляции и каскадная модель вторичного гемостаза

Скрининговые анализы коагуляции - это «хлеб с маслом» вторичного тестирования гемостаза и состоят из протромбинового времени (PT), активированного частичного тромбопластинового времени (APTT) и времени тромбинового сгустка. Время свертывания тромбина можно изменить для измерения концентрации фибриногена. Время активированной коагуляции (ACT) - это тест в месте оказания медицинской помощи, который предоставляет некоторую информацию о вторичном гемостазе и полезен в качестве инструмента скрининга на серьезную недостаточность фактора свертывания крови.Кроме того, также может быть проведен анализ свертывания крови, чувствительный к дефициту витамин-К-зависимых факторов (анализ PIVKA), но он в значительной степени потерял популярность. Также время разбавленного яда гадюки Рассела (dRVVT) можно использовать для оценки образования сгустка с помощью обычного пути, но это не выполняется рутинно.

Лаборатории

предлагают различные методы скрининга, но большинство профилей гемостаза или коагуляции состоят как минимум из ПВ и АЧТВ, которые интерпретируются вместе на основе классической каскадной модели вторичного гемостаза.Комбинация результатов скрининговых тестов на коагуляцию (ПВ, АЧТВ и фибриноген) может использоваться для определения дефекта факторов свертывания, как показано на изображении и в таблице ниже. Важно отметить, что не все лаборатории созданы равными в отношении тестирования коагуляции. Некоторые лаборатории, такие как Лаборатория сравнительной коагуляции в Корнельском университете, оптимизируют тестирование, чтобы оно было чувствительным к дефициту факторов свертывания крови. Это может включать разбавление определенного реагента, оценку того, какой метод обнаружения сгустка является оптимальным для данного вида, или использование различных активаторов или реагентов для измерения времени свертывания.Скрининговые анализы коагуляции чувствительны только к дефициту факторов, а не к гиперактивной или чрезмерно активированной системе свертывания (гиперкоагуляции), то есть только длительное время имеет диагностическое значение. Короткое время свертывания не обязательно означает состояние гиперкоагуляции и не должно интерпретироваться как таковое. Действительно, короткое время свертывания часто является ошибкой лаборатории или взятия проб. Интерпретацию всех анализов следует проводить только в отношении клинических признаков. Нормальные анализы свертывания крови у кровоточащего животного не , а не исключают дефект вторичного гемостаза (потому что используемый анализ может быть нечувствительным), а увеличенное время свертывания не означает, что у животного кровотечение из-за дефекта вторичного гемостаза (особенно если есть были проблемы со сбором образцов).Критически важно правильно собрать образцы для проверки гемостаза. Существуют также различия в том, как люди интерпретируют результаты (в отношении эталонных интервалов, процентного изменения по сравнению с контролем и т. Д.).

Методы обнаружения сгустков

Обнаружение сгустков

Большинство скрининговых тестов на коагуляцию основаны на том, насколько быстро образуются фибриновые сгустки в образцах пациентов. Поскольку для большинства этих анализов используется плазма с цитратным антикоагулянтом, необходимо добавить кальций вместе с активатором свертывания крови.После добавления этих реагентов регистрируют время образования фибринового сгустка. Разные активаторы запускают разные пути.

  • Активатор внешнего пути : Это тканевой фактор, который обычно предоставляется в виде экстракта головного мозга (тканевого тромбопластина) кроликов или других видов. В настоящее время вместо него можно добавить рекомбинантный тканевый фактор человека.
  • Активатор внутреннего пути : Существуют различные вещества, активирующие фактор XII.Обычно используемые активаторы - это каолин, эллаговая кислота, стекло (поэтому в красной верхней пробирке образуются сгустки крови) и кремнезем (например, целит, диатомит).
  • Активатор общих путей : Яды гадюк, например Яд гадюки Рассела может активировать фактор X. Тромбин можно использовать для измерения времени свертывания тромбина (превращения фибриногена в фибрин).

Существуют различные методы обнаружения образования фибрина в этих анализах, включая метод визуального наклона трубки, механические, фотооптические и вязкоэластографические методы.Они различаются не только по способу обнаружения сгустка, но и по предоставленным результатам.

  • Визуальная наклонная трубка : Бедная тромбоцитами цитратная антикоагулированная плазма помещается в пробирку вместе с активаторами и регистрируется время образования сгустка. Это наименее чувствительный из всех методов (небольшие нити фибрина можно пропустить, поскольку глаз может улавливать только большие сгустки), но он полезен для определения природы сгустка, например плохо сформированный сгусток указывает на проблемы с образованием сгустка, даже если время до образования сгустка не является ненормальным.
  • Механический : Существуют различные механические методы, но они обнаруживают образование фибрина, потому что фибрин ограничивает движение металлического шара (перемещаемого между двумя магнитами) или зондов, вставленных в образец пациента. Предусмотрено время образования сгустка. Это выполняется на плазме с низким содержанием тромбоцитов с цитратным антикоагулянтом.
  • Фотооптический : Это можно оценить по изменению оптической плотности (спектрофотометрический) или мутности (нефелометрический) в образце при образовании сгустка.Результаты записываются как время до образования сгустка, однако некоторые анализаторы также предоставляют кривую образования сгустка (так называемый анализ формы волны). Фотооптические анализы также можно использовать для оценки фибринолиза (путем добавления тканевого активатора плазминогена, а также активатора коагуляции к образцу пациента). Некоторые из этих анализов могут пропускать быстрое обнаружение сгустков в плазме собак и кошек (которые свертываются намного быстрее, чем в плазме человека) и могут ошибочно определять длительное время свертывания. Это, в частности, происходит, если порог для определения времени начала измерения образования сгустка не может быть изменен на приборе (т.е.е. укорочен, чтобы сократить время свертывания).
  • Вязкоэластик : При использовании этого метода зонд вставляется в чашку, содержащую образец пациента. Затем либо зонд вращается внутри чашки (например, Sonoclot или ROTEM®; этот метод называется тромбоэластрометрией, когда выполняется с помощью ROTEM®), либо чашка вращается вокруг фиксированного зонда (при выполнении с TEG® метод называется тромбоэластографией, который дает аналогичные измерения, хотя и с другими названиями, чем тромбэластометрия).Образование фибрина препятствует перемещению зонда по отношению к чашке. Это изменение движения регистрируется электронным или оптическим способом и преобразуется в кривую, которая отражает фактическую кинетику и силу образования сгустка, например время реакции или время начала образования фибрина и максимальная амплитуда или сила сгустка. Эти анализы также могут исследовать разрушение сгустка или фибринолиз. Этот метод, в отличие от механических и фотооптических методов, может выполняться в цельной крови или плазме, богатой тромбоцитами, таким образом добавляя критический клеточный компонент к образованию сгустка, который отсутствует в других методах.Вот почему их часто называют «глобальными» анализами гемостаза, потому что они не только оценивают вторичный гемостаз, но также зависят от количества и функции тромбоцитов. Дополнительная информация о вязкоэластографическом обнаружении сгустков дается отдельно.

Время активированной коагуляции (ACT)

Пробирка ACT для диатомовой земли

ACT - полезный экран для оценки внутренних и общих путей (см. Изображение выше) и выполняется в цельной крови. ACT полагается на тромбоциты и кальций пациента для обеспечения фосфолипидов для поддержки реакции.Есть два способа выполнить тест:

  • Визуальное обнаружение сгустка : Цельная кровь без антикоагулянта добавляется в специальную пробирку, содержащую активатор сгустка, и пробирку осторожно встряхивают через определенные промежутки времени до тех пор, пока не будет обнаружен сгусток. Чтобы свести к минимуму вариабельность результатов теста из-за температуры, трубку следует хранить при 37 ° C в нагревательном блоке (хотя подмышка может служить блоком для нагрева). Ожидаемые «нормальные» значения зависят от пробирки, которая может содержать различные активаторы, в том числе каолин (гематологические технологии) или комбинацию гранул целин-каолин-стекло (MAX-ACT ™, Helena Biosciences; гранулы облегчают обнаружение сгустка).Некоторые люди делают свои собственные пробирки, что касается постоянства концентрации активатора в каждой пробирке. Ранее диатомовая земля использовалась в качестве активатора сгустка, и опубликованные эталонные интервалы для ACT у собак и кошек основаны на этом активаторе, однако он больше не доступен (и эталонные интервалы больше не актуальны, если все еще не используется эта конкретная пробирка). Для пробирок MAX-ACT ™ установлены эталонные интервалы для собак и кошек (см. И др., 2009 г.). Эти интервалы специфичны для последних пробирок и не могут быть экстраполированы на другие пробирки, активирующие сгусток (например,г. на основе каолина) и следующие:
    • Собаки : 55-80 секунд.
    • Кошки : 55-85 секунд.
  • Электрохимическое зондирование : Существуют также картриджи для ручных устройств для ухода за больными, которые содержат активаторы сгустка для измерения ACT, такие как каолин и целит (iSTAT®, Abbott). Вместо образования фибрина они фактически измеряют образование тромбина, используя тромбин-специфические субстраты (расщепляемые тромбином). Исследования на животных с этим типом АКТ не проводились.

Интерпретация

Только длительная АКТ является релевантной находкой. Тест в некоторой степени субъективен, поэтому небольшое повышение ACT следует интерпретировать с осторожностью. Более чувствительные скрининговые анализы (АЧТВ) следует проводить у животных с кровотечением с нормальной или даже слегка пролонгированной АКТ (у животных с нормальным количеством тромбоцитов). Затяжной АКТ может быть:

  • Недостатки внутренних или общих факторов пути: ACT - это нечувствительный тест (чувствительный к дефициту одного фактора <10%) по сравнению с APTT (чувствительный к дефициту <30%, в зависимости от метода), но он достаточно, чтобы продемонстрировать серьезных недостатков фактора свертывания крови , независимо от того, переданы ли они по наследству (например,г. гемофилия A или дефицит фактора VIII) или приобретенный (например, диссеминированное внутрисосудистое свертывание или антикоагулянтные родентициды. Животные с наиболее частыми причинами приобретенного дефицита фактора свертывания крови (а именно отравление антикоагулянтными родентицидами) будут иметь пролонгированную АКТ, и это хороший инструмент скрининга для этой цели ( но не специфичен для этого токсикоза).
  • Тяжелая тромбоцитопения : Из-за того, что реакция зависит от эндогенных тромбоцитов, количество тромбоцитов <10 000 / мкл может привести к умеренно пролонгированной АКТ на основе диатомовой земли (на 10-20 секунд).Влияние количества тромбоцитов на другие активаторы сгустка с АКТ неизвестно.

Протромбиновое время

Протромбиновое время (ПВ, также называемое одностадийным протромбиновым временем или OSPT) измеряет активность внешних и общих факторов метаболизма, за исключением тканевого фактора (фактор коагуляции III), который добавляется в качестве активатора сгустка вместе с кальцием. Так как тканевый фактор никогда не бывает дефицитом in vivo, мы можем использовать его в качестве активатора. После добавления этих реагентов регистрируется время образования сгустка.Плазма собак и кошек быстро сгущается во время ПВ (время обычно <10 секунд), что может привести к пропуску образования сгустка, особенно в фотооптических инструментах, оптимизированных для использования у людей (у которых обычно ПВ более 10 секунд). Кроме того, короткое время свертывания для PT снижает чувствительность анализа. Некоторые лаборатории разбавляют свой реагент PT, чтобы обеспечить более длительное время свертывания крови (чтобы оптимизировать чувствительность к дефициту факторов). Доступны различные источники тромбопластина, и они дают разное время ПВ у одного и того же вида.Следовательно, ПК всегда следует интерпретировать с учетом референсного интервала для конкретного вида, предоставленного лабораторией, и результаты ПК, полученные в разных лабораториях, нельзя напрямую сравнивать. Поскольку в анализе предусмотрен источник фосфолипидов (как часть активатора тканевого фактора), этот анализ не требует тромбоцитов для поддержки реакции.

Интерпретация теста

Только длительный PT является значимым открытием (если это не связано с артефактом метода обнаружения).PT никогда не следует интерпретировать изолированно, а всегда в сочетании с APTT (см. Диагностический алгоритм, сводку таблицы ниже и изображение выше) и, в идеале, концентрацией фибриногена. Это связано с тем, что низкий уровень фибриногена (<75 мг / дл у собак и <50 мг / дл у других видов) продлит ПВ (и АЧТВ) независимо от дефицита других факторов свертывания (оба теста полагаются на адекватное количество фибриногена для образования фибрина. сгусток). Из всех тестов, проведенных в Корнельском университете, чувствительность анализов свертывания к низкому уровню фибриногена составляет: TCT> APTT> PT.

  • Референсные интервалы (из лаборатории сравнительной коагуляции Корнельского университета)
    • Собаки : 11-16 секунд
    • Кошки : 15-20 секунд
    • Лошади : 16-20 секунд
  • Длительный ПВ, нормальный АЧТВ : дефицит фактора VII. Нормальный АЧТВ свидетельствует о том, что факторы пути внутренних и общих факторов не являются недостаточными. Как правило, для увеличения времени свертывания крови факторы должны быть <30% от нормы.
    • Артефакт сбора: ПК может быть продлен при сложной венепункции или при недостаточном количестве крови, собранной в цитрат. Избыточное разбавление плазмы цитратом продлит время свертывания. Это также может происходить у животных с выраженным эритроцитозом (высоким гематокритом), что приводит к рекомендациям использовать формулу коррекции (для степени анемии (и корректировки концентрации цитрата) при сборе образцов крови для тестирования свертывания крови у анемичных животных, но это обычно не делается.
    • Ятрогенный : Терапия варфарином. Варфарин подавляет витамин К-зависимые факторы (II, VII, IX, X).
    • Унаследованный дефицит FVII : Имеется у некоторых пород собак. У них может не быть признаков кровотечения. Чтобы подтвердить специфический дефицит фактора VII, требуется модифицированный PT с использованием плазмы с дефицитом фактора VII (см. Анализ специфического фактора ниже).
    • Ранний дефицит / антагонизм витамина К : Поскольку фактор VII имеет самый короткий период полураспада среди всех факторов (примерно 6 часов у собак), ПВ может быть продлен до АЧТВ, т.е.е. в течение 24 часов после токсикоза. Однако животные обычно не проявляют признаков кровотечения до тех пор, пока не станет дефицит протромбина (фактор II) (к этому времени следует продлить АЧТВ). ПК также используется для мониторинга реакции на терапию витамином K1. Дефицит витамина К также может возникать при других заболеваниях, включая холестастическое заболевание печени и мальабсорбцию жиров.
    • Диссеминированная внутрисосудистая коагуляция : У некоторых животных с ДВС-синдромом будет длительный ПВ и нормальный АЧТВ. Похоже, именно так обстоит дело с кошками по сравнению с собаками или лошадьми.ПВ обычно нормальный у большинства собак (до 65%) с ДВС-синдромом.
    • Синтетическая печеночная недостаточность : Поскольку факторы свертывания, в том числе фактор VII, вырабатываются в печени, PT может быть увеличен при печеночной недостаточности, однако обычно APTT также увеличивается.
    • Ингибиторы фактора VII : Антитела к ингибиторам фактора VII у животных не наблюдались.
  • Продолжительный PT, пролонгированный APTT : Множественный дефицит факторов, влияющий как на фактор VII (см. Список выше), так и на факторы внутреннего пути (XII, XI, IX, X) или дефицит общих факторов пути.Это может быть связано с множеством причин, включая наследственный дефицит фактора X или приобретенные дефекты, такие как дефицит или антагонизм витамина K, ДВС-синдром, печеночная недостаточность и гипофибриногенемия.

Активированное частичное тромбопластиновое время

Анализ активированного частичного тромбопластинового времени (APTT) является индикатором функции факторов свертывания крови во внутреннем и общем путях. Поверхностный активатор (такой как каолин или эллаговая кислота, которые активируют фактор XII), фосфолипид и кальций добавляются к цитратной плазме при 37 ° C, и регистрируется время образования сгустка.У собак время свертывания АЧТВ намного короче (15-20 секунд), чем у людей (25-45 секунд), тогда как у здоровых крупных животных АЧТВ довольно длинные (> 40 секунд). APTT более чувствителен к дефициту факторов свертывания во внутренних и общих путях, чем ACT (<30% против <10% для ACT на основе диатомовых водорослей), а также не требует тромбоцитов для поддержки реакции (из-за добавления фосфолипидов в реагент). Чтобы продлить АЧТВ, активности отдельных факторов обычно должны быть менее 30% (хотя этот процент зависит от используемых реагентов и методов), однако незначительный дефицит нескольких факторов во внутренних или общих путях может продлить АЧТВ, несмотря на то, что отдельные факторы не действуют. <30%.

Интерпретация теста

Только длительное APTT является релевантным открытием (если это не связано с артефактом метода обнаружения). APTT никогда не следует интерпретировать изолированно, а всегда в сочетании с PT (см. Диагностический алгоритм, сводку таблицы ниже и изображение выше) и, в идеале, концентрацией фибриногена. Это связано с тем, что низкий уровень фибриногена (<75 мг / дл у собак и <50 мг / дл у других видов) продлит АЧТВ (и ПВ) независимо от дефицита других факторов свертывания (оба теста полагаются на адекватный фибриноген для образования фибрина). сгусток).APTT более чувствителен, чем PT, к низкому уровню фибриногена (но менее чувствителен, чем TCT).

  • Референсные интервалы (из лаборатории сравнительной коагуляции Корнельского университета)
    • Собаки : 10-17 секунд
    • Кошки : 15-19 секунд
    • Лошади : 45-66 секунд
  • Длительное АЧТВ, нормальное PT : нормальное PT подтверждает, что фактор VII не является дефицитным (тканевый фактор никогда не бывает дефицитным ), указывая на то, что дефект находится во внутреннем пути (факторы XII, XI, IX, VIII) или контакте ( прекалликреин, высокомолекулярный кининоген) факторы.Как правило, для увеличения времени свертывания крови факторы должны быть <30% от нормы.
    • Артефакт сбора: APTT более чувствителен к активации факторов свертывания крови in vitro, чем PT, и может быть продлен (или ложно укорочен, или ложно нормализован) при сложной венепункции. APTT также может быть продлен, если недостаточно крови собрано в цитрат. Избыточное разбавление плазмы цитратом продлит время свертывания. Это также может происходить у животных с выраженным эритроцитозом (высоким гематокритом), что приводит к рекомендациям использовать формулу коррекции (для степени анемии (и корректировки концентрации цитрата) при сборе образцов для тестирования гемостаза у анемичных животных, но это не так. обычно делается.
    • Ятрогенный: Терапия гепарином - гепарин потенцирует антитромботическое действие антитромбина (ингибирует несколько факторов, но особенно факторы II и X). Лечение нефракционированным, но не фракционированным (низкомолекулярным) гепарином продлит АЧТВ, не влияя на ПВ. APTT может использоваться для мониторинга лечения нефракционированным гепарином - целью является APTT, который продлен в 1,5-2 раза больше нормы, но животные могут проявлять признаки кровотечения при дозах, достигающих этого целевого уровня.
    • Унаследованный дефицит внутренних или контактных факторов : из этих заболеваний наиболее распространенным заболеванием является гемофилия A (дефицит фактора VIII), за которым следует наследственный дефицит фактора IX (гемофилия B) у собак. Дефицит фактора XII часто встречается у кошек и вероятная причина длительного АЧТВ у бессимптомных кошек (фактор XII не требуется для физиологического гемостаза). Другие недостатки встречаются гораздо реже. Недостаток контактных факторов (например, прекалликреина) встречается редко и может не привести к чрезмерному кровотечению (контактные факторы не требуются для физиологического гемостаза).Для подтверждения дефицита определенного фактора требуются дополнительные анализы конкретных факторов (см. Ниже).
    • Диссеминированная внутрисосудистая коагуляция : Многие животные с ДВС-синдромом, особенно собаки и лошади, будут иметь длительное АЧТВ и нормальное ПВ (АЧТВ более чувствительно к ДВС-синдрому у этих видов).
    • Синтетическая печеночная недостаточность : Поскольку факторы свертывания (кроме фактора VIII и vWf) продуцируются в печени, АЧТВ может увеличиваться при печеночной недостаточности.
    • Ингибиторы : Антифосфолипидные антитела (например,г. у собак с системной красной волчанкой) или антитела, которые приобретаются вторично после трансфузионной терапии у собак с тяжелым наследственным дефицитом факторов (например, у собак, леченных от гемофилии А, могут развиваться антитела к фактору VIII, что затрудняет дальнейшее лечение животных) или другие заболевания продлить АЧТВ. Эти ингибиторы можно обнаружить, разбавив образец нормальной плазмой. Увеличенное время свертывания крови может сократиться (из-за одновременного разбавления ингибиторов), но все же должно быть продлено, тогда как дефицит одного фактора можно исправить добавлением нормальной плазмы.
    • Другие факторы: в одном исследовании у пациентов с высокими концентрациями С-реактивного белка наблюдалось длительное АЧТВ, особенно с некоторыми реагентами АЧТВ (например, STA Cephascreen). Продление было уменьшено при добавлении фосфолипида, предполагая, что C-реактивный белок мешает фосфолипиду, предоставленному в анализе (van Rossum et al 2012).
  • Продолжительный PT, пролонгированный APTT : множественная недостаточность факторов, влияющая как на фактор VII, так и на факторы внутреннего пути (XII, XI, IX, X) или недостаточность факторов общего пути (факторы X, V, II и фибриноген).Это может быть связано с множеством причин, включая наследственный дефицит фактора X или приобретенные дефекты, такие как дефицит или антагонизм витамина K, ДВС-синдром, печеночная недостаточность и терапия варфарином.
    • Дефицит / антагонизм витамина К : Как только фактор IX, II (протромбин) и X становится недостаточным, АЧТВ будет увеличиваться. Это может занять 48 часов у собак после токсикоза антикоагулянтами родентицидов. К тому времени, когда протромбин станет недостаточным, у животного появятся признаки кровотечения. Дефицит витамина К может также возникать при холестатической болезни печени среди других заболеваний.

Время свертывания тромбина

Время свертывания тромбина (TCT) - это прямое измерение функционального фибриногена, поскольку оно оценивает способность добавленного тромбина образовывать фибриновый сгусток. TCT - это время, необходимое стандартизированному раствору тромбина для преобразования фибриногена в фибрин с образованием сгустка. Образование сгустков уменьшается (что продлевает TCT), если имеется дефицит (гипофибриногенемия) или аномальный (дисфибриногенемия) фибриноген. Более того, любые другие факторы, ингибирующие полимеризацию фибрина, продлят этот тест без каких-либо отклонений от нормы в фибриногене.Это метод, используемый Лабораторией сравнительной коагуляции при Корнельском университете для измерения фибриногена в образцах цитратной плазмы (и обычно является частью их стандартной панели коагуляции).

Интерпретация теста

Только длительное TCT является релевантным открытием (если оно не связано с артефактом метода обнаружения). TCT никогда не следует интерпретировать изолированно, а всегда в сочетании с PT (сводка таблицы ниже и изображение выше) и APTT. Однако TCT более чувствителен, чем APTT или PT к низкому уровню фибриногена.TCT может быть продлен в следующих случаях:

  • Референсные интервалы (из лаборатории сравнительной коагуляции Корнельского университета)
    • Собаки : 5-9 секунд
    • Кошки : 5-8 секунд
    • Лошади : 5-9 секунд
  • Длительные значения
    • Артефакт: Загрязнение антикоагулянтом гепарина или терапией гепарином.
    • Ятрогенный : терапия гепарином подавляет тромбин.
    • Унаследованная гипофибриногенемия или дисфибриногенемия: это нечасто.
    • Приобретенная гипофибриногенемия : Это может быть связано с ДВС-синдромом, когда наблюдается потребление фибриногена (гипофибриногенемия) или синтетическая печеночная недостаточность, которая может привести к снижению продукции фибриногена. Поскольку фибриноген является белком острой фазы, его концентрации отражают эффекты производства (стимулированные основным заболеванием) и потребления и могут быть высокими (производство превышает потребление), нормальным (производство уравновешивается потреблением) или низким (потребление превышает производство) в DIC. .Наиболее частыми находками являются нормальный или повышенный уровень фибриногена, при этом низкий фибриноген наблюдается в <30% случаев (во всяком случае, у собак).
    • Приобретенная дисфибриногенемия : TCT может быть продлен, если присутствуют ингибиторы полимеризации фибрина, включая парапротеины и высокие концентрации продуктов распада фибрина (огена) (FDP), последний из которых возникает при ДВС. Высокие концентрации аномальных иммуноглобулинов могут наблюдаться при новообразованиях с участием плазматических клеток (множественная миелома) или В-клеток (лимфома, хронический лимфолейкоз).
    • Ингибиторы тромбина : Обычно это связано с гепарином (нефракционированным), но приобретенные антитела также могут ингибировать тромбин.

Анализ специфических факторов

В настоящее время существует два метода определения активности конкретных факторов. Первый основан на способности плазмы пациента корректировать увеличенное время свертывания плазмы с известным дефицитом фактора, а второй основан на способности активированных факторов расщеплять определенные хромогенные субстраты.

  • Анализы свертывания : У пациентов с длительным временем свертывания подозревается дефицит определенных факторов, который сокращается или корректируется при разведении в плазме нормального пациента или пуле плазмы. Эта функция используется для количественной оценки концентрации конкретных факторов с использованием модифицированного PT или APTT следующим образом. Определяется способность плазмы пациента нормализовать увеличенное время свертывания плазмы с дефицитом определенного фактора. Например, когда плазма пациента добавляется к плазме с дефицитом фактора VIII и длительное АЧТВ не корректирует (оно может несколько сокращаться), результаты указывают на дефицит фактора VIII или гемофилию А.Степень дефицита затем может быть определена количественно путем сравнения времени свертывания плазмы пациента в плазме, содержащей фактор, со стандартной кривой, полученной из серийного разведения пула стандартной плазмы для конкретных видов животных, который определяется как обладающий специфической активностью фактора. 100% в неразбавленном виде (при нормальном ПВ или АЧТВ). Следовательно, активность измеряемого фактора свертывания крови выражается в процентах от этого стандартного пула по отношению к PT или APTT, достигаемым при добавлении образца пациента к плазме с дефицитом фактора.Как правило, у здоровых животных удельная активность факторов превышает 60%. Животные со специфическими факторами <30% могут демонстрировать клинические признаки кровотечения. В приведенном выше примере активность фактора VIII <30% соответствует диагнозу гемофилии А, при этом <1% - тяжелая, 1-5% - умеренная и 5-30% - легкая недостаточность (симптомы кровотечения коррелируют с степени тяжести дефицита).
  • Хромогенные анализы : Они оценивают способность конкретного фактора расщеплять хромогенно-связанный субстрат.Например, в хромогенном анализе фактора VIII фактор VIII в образце пациента активируется реагентом, содержащим тромбин и активированный фактор IX. Затем активированный фактор VIII ускоряет опосредованное фактором IXa превращение фактора X в фактор Xa. Активность активированного фактора X оценивается путем гидролиза хромогенного субстрата, который специфичен для фактора Ха (и не расщепляется FIXa или FVIIIa). Интенсивность окрашивания пропорциональна активности фактора Ха и, следовательно, активности фактора VIII.Существует несколько хромогенных анализов факторов свертывания, ингибиторов и компонентов фибринолитической системы. Некоторые из них были подтверждены на собаках, тогда как некоторые были проверены на лошадях. Эти хромогенные анализы устраняют потребность в плазме с дефицитом определенного фактора, особенно в плазме с дефицитом специфического фактора, которую трудно или невозможно получить.

ПИВКА

Витамин К-зависимые факторы свертывания крови (FII, FVII, FIX, FX) продуцируются в печени в виде нефункциональных предшественников.Эти предшественники активируются в присутствии витамина К карбоксилированием их остатков глутаминовой кислоты. Это достигается с помощью фермента, называемого γ-глутамилкарбоксилазой. Карбоксилирование этих аминокислотных остатков увеличивает отрицательный заряд белка и позволяет этим факторам свертывания крови связывать кальций, который необходим для адгезии этих факторов к фосфатидилсерину тромбоцитов и образования высокоактивных ферментных комплексов (что необходимо для образования фибрина).В отсутствие витамина K происходит увеличение этих нефункциональных факторов в кровообращении, а также истощение функциональных активированных факторов свертывания крови. Неактивные предшественники, которые накапливаются в кровотоке, называются белками, вызванными антагонизмом или отсутствием витамина К (PIVKA).

Тест PIVKA или тромботест на самом деле является модификацией ПК и не измеряет неактивные предшественники как таковые. В тесте используется разбавленная плазма (которая создает более длительное время свертывания, чем при ПВ) и специальный реагент для тромботических тестов, который, как сообщается, наиболее чувствителен к недостатку фактора X.Хотя в ветеринарной литературе делались заявления о том, что этот тест чувствителен как к увеличению PIVKA (которые, как предполагается, ингибируют реакцию), так и к снижению функциональной коагуляции FII, VII и X (особенно FVII и X) , нет доказательств того, что PIVKA действительно ингибируют реакцию. Следовательно, тест PIVKA следует рассматривать как модифицированный ПК, который выявляет дефицит FII, VII и X, и следует использовать термин тромботест по сравнению с PIVKA, когда речь идет об этом специфическом анализе свертывания.Поскольку время свертывания тромбота больше, чем PT, тест может быть более чувствительным, чем PT для отклонений от нормы этих факторов, однако это не было подтверждено исследованием, измеряющим тромботы, PT и APTT у собак с различными нарушениями гемостаза. Кроме того, этот тест предлагается только в определенных лабораториях, а время выполнения теста больше, чем у ПК, поэтому измерение тромботеста не дает преимуществ перед ПК. Этот тест потерял популярность в ветеринарии и больше не используется.У пациентов-людей нефункциональные некарбоксилированные белки свертывания крови конкретно измеряются с помощью иммунологических тестов.

Интерпретация теста

Результаты интерпретируются аналогично ПТ. Уменьшение времени проведения тромботеста не является диагностически значимым, однако сложная венепункция может активировать факторы свертывания крови, что приведет к ложно нормальному (вместо длительного) тромботесту. Результаты нормальны для собак с наследственной недостаточностью факторов свертывания крови VIII, IX и XI, а также прекалликреина.Длительные значения могут быть вызваны следующим:

  • Артефакт сбора: На тромботест потенциально могут влиять те же переменные, что и на ПВ и АЧТВ (сложная венепункция, чрезмерное разбавление).
  • Ятрогенный : Варфарин. Варфарин подавляет витамин К-зависимые факторы (II, VII, IX, X).
  • Унаследованный дефицит FVII
  • Недостаток / антагонизм витамина К : Как указано выше, тромботест может быть продлен раньше, чем ПВ.
  • Диссеминированная внутрисосудистая коагуляция: Некоторым животным с ДВС-синдромом будет проводиться длительный тромботический тест, в зависимости от степени дефицита факторов. PT и нормальный APTT. Похоже, именно так обстоит дело с кошками по сравнению с собаками или лошадьми. ПВ обычно нормальный у большинства собак (до 65%) с ДВС-синдромом.
  • Синтетическая печеночная недостаточность

Разбавить RVVT

Разбавленный тест на яд гадюки Рассела / время (dRVVT) используется в качестве инструмента скрининга на наличие антифосфолипидных антител или волчаночных антикоагулянтов.В тесте используется яд гадюки Рассела ( видов Daboia ) для активации фактора X, который в присутствии фактора V и фосфолипида превращает протромбин в тромбин. Образование сгустка обнаруживают любым из вышеперечисленных методов. В тесте с разбавлением яд и фосфолипид разбавляются таким образом, чтобы концентрации фосфолипидов ограничивали скорость. Присутствие антител к фосфолипидам снижает доступность фосфолипида для поддержки реакции, тем самым увеличивая время свертывания. Однако дефицит фактора свертывания в общем пути также может увеличивать время, поэтому для различения антифосфолипидных антител и дефицита фактора свертывания крови можно добавить нормальную плазму или избыток фосфолипидов.Если dRVVT корректируется с помощью нормальной плазмы, то вероятен дефицит фактора свертывания крови и показаны анализы на определенные факторы. Если нормальная плазма не корректирует длительное время, а избыток фосфолипидов (который насыщает антитела) - корректирует, то это может свидетельствовать о наличии антифосфолипидных антител.

Краткое описание интерпретации

В таблице ниже представлено краткое описание использования комбинации результатов скрининговых тестов на коагуляцию - PT, APTT и TCT - для определения места дефекта во вторичном гемостазе.Список нарушений не является исчерпывающим.

Интерпретация профилей просеивания коагуляции
PT APTT TCT Расположение дефекта Сопутствующие расстройства Банкноты
Нормальный Нормальный Нормальный Вероятно, не нарушение вторичного гемостаза vWD, тромбопатия, синдром Скотта, фибринолитические дефекты, синдромы гиперкоагуляции (например,г. без явного ДВС) Некоторые вторичные дефекты гемостаза, например легкая форма гемофилии А, может быть пропущена при использовании неоптимизированных скрининговых тестов. Нормальные результаты скрининга коагуляции не исключают нарушения гемостаза
Нормальный Нормальный Внешний путь (фактор VII) Унаследованный дефицит фактора VII, ранний дефицит или антагонизм витамина К, ДВС-синдром, лечение варфарином, заболевания печени (холестатическая, печеночная недостаточность) Длительное изолированное ПВ поддерживает дефицит фактора VII (тканевый фактор является частью реагента в анализе ПВ)
Нормальный Нормальный Внутренний путь (дефицит факторов XII, XI, IX, VIII) Унаследованные дефициты, ДВС, заболевание печени, терапия нефракционированным гепарином, артефакт сбора APTT более чувствителен к артефакту сбора, чем PT.Время может быть увеличено или сокращено из-за неправильной техники венепункции
Нормальный Нормальный Гипофибриногенемия или дисфибриногемия Изолированный дефект продукции фибриногена, ингибиторы полимеризации фибрина (высокий FDP, парапротеины), наследственное нарушение фибриногена Это необычный результат, хотя TCT более чувствителен к изолированной гипофибриногенемии, чем APTT или PT (с анализами, используемыми в Корнельском университете).Обычно причины гипофибриногенемии (ДВС, печеночная недостаточность) приводят к дефициту дополнительных факторов и продлевают ПВ и / или АЧТВ
N Общий путь (факторы X, V, II) или дефекты внутреннего и внешнего пути Явный ДВС-синдром (недостаточно высокий уровень FDP и недостаточный уровень фибриногена для продления ТСТ), дефицит или антагонизм витамина К, заболевание печени (холестатический, недостаточность), наследственный дефект общих факторов метаболизма (за исключением фибриногена), терапия варфарином и нефракционированным гепарином., чрезмерное разбавление крови (слишком мало крови для цитрата, стандартный сбор крови у пациента с тяжелым эритроцитозом), неправильное обращение с образцом (см. руководство по сбору, факторы нестабильны) Ожидайте, что количество тромбоцитов и активность AT будут низкими при явном ДВС-синдроме и нормальными при дефиците или антагонизме витамина К (всегда есть исключения) у собак. Животные с явным ДВС-синдромом должны иметь исходное заболевание (например, воспаление, неоплазию, бактериальный сепсис). Уровень D-димера может быть высоким при явных ДВС- и не-ДВС-синдромах, вызывающих пролонгированное ПВ и АЧТВ (повышенный внутрисосудистый и внесосудистый фибринолиз).
Общий путь (факторы X, V, II, I) или дефекты внутреннего и внешнего пути Только тяжелая гипофибриногенемия (<50 мг / дл собака, <75 мг / дл для других видов животных - см. Причины выше), явная ДВС-синдром, синтетическая печеночная недостаточность, терапия нефракционированным гепарином, возможно чрезмерное разведение крови, неправильное хранение образца Фракционированный гепарин не увеличивает время свертывания (в первую очередь ингибирует FXa, а не тромбин).

Ссылки по теме

.

тестов | eClinpath

Тесты на гемостаз обычно подпадают под категории первичного и вторичного гемостаза, фибринолиза и тестирования на ингибиторы. Мы также предоставили диагностический алгоритм для интерпретации тестов и сводную таблицу механизмов тромбоцитопении и интерпретацию тестов на коагуляцию. Дополнительная информация доступна по всем тестам на коагуляцию, предлагаемым лабораторией сравнительной коагуляции при диагностическом центре здоровья животных.

Первичный гемостаз

Тесты на первичный гемостаз включают оценку количества и функции тромбоцитов, а также оценку фактора фон Виллебранда.Для выявления проблем со стенкой кровеносных сосудов требуются соответствующие клинические признаки (например, повышенное растяжение кожи с хрупкостью у кошек с синдромом Элерса-Данлоса) и гистопатологическая оценка биопсии.

Наиболее частым дефектом первичного гемостаза является приобретенная тромбоцитопения, поэтому необходимо обязательно определять количество тромбоцитов у каждого животного с нарушением свертываемости крови. Единственный тест in vivo для первичного гемостаза - это время кровотечения из слизистой оболочки рта (BMBT), которое также может быть выполнено в клинике, но считается более общим (глобальным) тестом первичного гемостаза, поскольку на него влияют дефекты в vWf, число тромбоцитов или функция тромбоцитов.

Тромбоциты

  • Количество и объем тромбоцитов: Наиболее частым нарушением гемостаза является приобретенная тромбоцитопения, поэтому необходимо обязательно определять количество тромбоцитов у каждого животного с нарушением свертываемости крови. Число тромбоцитов можно определить по мазкам в клинике, тогда как другие тесты на первичный гемостаз предлагаются только в ветеринарных лабораториях.
  • Функция тромбоцитов: Функцию тромбоцитов можно оценить путем измерения адгезии тромбоцитов, агрегации тромбоцитов и реакции высвобождения тромбоцитов.Это достигается с помощью тестов на агрегацию тромбоцитов и анализаторов функции тромбоцитов, таких как PFA-100.
  • Общие анализы (количество и функция): Время кровотечения из слизистой оболочки рта (BMBT), ретракция сгустка, время свертывания цельной крови, анализаторы функции тромбоцитов (PFA).
    • Время свертывания цельной крови (WBCT ): это время, необходимое для свертывания крови в стеклянных, пластиковых или покрытых силиконом пробирках, и зависит от ряда переменных. WBCT в пластиковых или покрытых силиконом пробирках будет увеличиваться при тромбоцитопении, однако результаты весьма различны, и его использование не рекомендуется.
    • Втягивание сгустка : В этом тесте измеряется количество времени, необходимое сгустку, чтобы отреагировать от стенок стеклянного контейнера, и оно зависит от нормального количества и функции тромбоцитов. Удаление сгустка обычно занимает 1-2 часа. Это очень грубый тест, который обычно не используется.

Фактор фон Виллебранда

Болезнь фон Виллебранда (vWD) - наиболее частый наследственный дефект гемостаза. Для диагностики vWD требуются специальные анализы собачьего фактора фон-Виллебранда (vWf), поскольку у большинства собак с vWD количество тромбоцитов нормальное и профили скрининговых тестов на коагуляцию.Наиболее часто используемый метод диагностики vWD - это определение антигена фактора фон Виллебранда (vWf: Ag). Активность vWf можно оценить в анализах связывания коллагена. Структура vWf оценивается с помощью мультимерного анализа, а определенные генетические дефекты могут быть обнаружены с помощью тестов ПЦР на основе ДНК. Глобальные анализы, такие как BMBT и PFA, также могут обнаруживать vWD, но они менее чувствительны, чем более специфические анализы (и не специфичны для vWD).

Стенка сосуда

Для выявления проблем со стенками кровеносных сосудов требуется гистопатологическая оценка биопсий.Это должно сопровождаться наличием соответствующих клинических признаков (например, чрезмерное растяжение кожи и хрупкость у кошек с синдромом Элерса-данлоса).

Вторичный гемостаз

Тесты на вторичный гемостаз включают оценку факторов и путей свертывания крови. Стандартные скрининговые тесты на коагуляцию, предлагаемые лабораториями ветеринарной клинической патологии, включают в себя протромбиновое время (PT), активированное частичное тромбопластиновое время (APTT) и время тромбинового сгустка (TCT) или концентрацию фибриногена.Время активированной коагуляции (ACT) - это быстрый «внутренний» тест внутренних и общих путей. Наиболее частой причиной нарушений вторичного гемостаза являются приобретенные состояния, особенно токсикоз, вызванный антикоагулянтами, родентицидами и ДВС-синдром. Гемофилия A (дефицит фактора VIII) является наиболее распространенным наследственным заболеванием вторичного гемостаза (гораздо чаще встречается vWD).

Скрининговые анализы

  • Время активированной коагуляции (ACT): Модификация APTT, ACT оценивает внутренние и общие пути в цельной крови и требует тромбоцитов и кальция пациента.Он менее чувствителен, чем APTT, но является доступным быстрым скрининговым тестом.
  • Протромбиновое время (PT): PT измеряет активность внешних и общих факторов метаболизма
  • Активированное частичное тромбопластиновое время (APTT): APTT - полезный экран для оценки внутренних и общих путей.
  • Время свертывания тромбина (TCT): TCT - это прямое измерение функции фибриногена. Длительное TCT указывает на снижение образования сгустков и произойдет при дефиците или аномальном фибриногене.
  • Фибриноген: Существует три способа оценки фибриногена. Это тепловое осаждение, фибриноген свертывания и антиген фибриногена
  • PIVKA: Тромботест или тест PIVKA оценивают белки, индуцированные отсутствием / антагонизмом витамина К (PIVKA). Эти белки не активируются в присутствии антагонистов витамина K или дефицита витамина K, что приводит к длительному тромботесту, при котором образование сгустка зависит от факторов, зависимых от витамина K.

Анализ конкретных факторов

В настоящее время существует два метода определения активности конкретных факторов.Первый основан на способности плазмы пациента корректировать длительное время свертывания плазмы, дефицитной по определенным факторам; второй - о способности определенных факторов в плазме крови пациента расщеплять хромогенные субстраты.

Глобальные анализы

Это анализы, которые оценивают образование тромбина или образование фибрина в присутствии клеток (тромбоцитов или других клеточных источников фосфолипидов) и включают методы обнаружения вязкоупругих сгустков (тромбоэластометрия, тромбоэластография) и анализы образования тромбина.

Фибринолиз

Тесты на фибринолиз включают оценку фибринолитического пути. К сожалению, измерение многих компонентов фибринолитического пути, включая плазминоген, тканевый активатор плазминогена, ингибитор активатора плазминогена, обычно не проводится, что является серьезным недостатком при оценке животных на предмет гемостатических или тромботических нарушений. Наиболее распространенными тестами фибринолитической активности являются определение литических продуктов, включая FDP и D-димер.

  • Продукты деструкции: FDP, D-димер
  • Активность или концентрация белка: Измерение тканевого активатора плазминогена, концентрации плазминогена. На самом деле это делается только в исследовательских лабораториях, а не в качестве диагностического теста.
  • Общие анализы: Время лизиса сгустка, тест лизиса эуглобина, tPA-индуцированный фибринолиз с использованием вязкоупругих методов.
    • Время лизиса сгустка : Это время, необходимое для лизирования сгустков цельной крови при 37ºC (и может быть выполнено после времени ретракции сгустка), и зависит от активности плазмина, концентрации фибриногена и степени ретракции сгустка.Плохая ретракция сгустка замедлит лизис. У животных сгусток обычно лизируется в течение 8-20 часов.
    • Время лизиса эуглобулина : Это показатель активности плазмина. В этом тесте эуглобулины (фибриноген, плазминоген, плазмин, активатор плазминогена) выпадают в осадок при разведении водой, тогда как фибринолитические ингибиторы (ингибитор активатора плазминогена, антиплазмин) - нет. Удаление этих ингибиторов позволяет плазмину в образце лизировать осадок, при этом время, необходимое для лизиса, является временем лизиса эуглобулина.Этот тест довольно грубый и не предлагается большинством лабораторий.

Ингибиторы

Наиболее часто используемым тестом на ингибиторы является измерение активности антитромбина (АТ) и протеина С. Тесты на другие ингибиторы, такие как α2-антиплазмин, протеин S и кофактор гепарина II, либо недоступны, не прошли валидацию для использования на животных, либо используются в исследовательских целях конкретными учреждениями.

  • Вторичный гемостаз : Активность AT, протеина C измеряется по их способности ингибировать фактор X (AT) или расщеплять определенный субстрат (протеин C).
  • Фибринолиз : Измерение ингибитора активатора плазминогена недоступно. Метод определения активируемого тромбином фибринолитического ингибитора недавно был протестирован на собаках.
  • Терапевтический мониторинг гепарина: Это может быть выполнено путем продления APTT или измерения анти-FXa активности, в зависимости от типа гепарина.
  • Антикоагулянтные фильтры для родентицидов: Высокоэффективная жидкостная хроматография.
  • Приобретенные ингибиторы (например.г. волчаночные антикоагулянты, антитела против фактора VIII): наличие приобретенных ингибиторов вторичного гемостаза можно заподозрить, когда тесты на коагуляцию (обычно АЧТВ) укорачиваются, когда образец пациента разбавляется стерильным физиологическим раствором. У пациентов с дефицитом факторов АЧТВ будет удлиняться из-за дальнейшего разбавления факторов, тогда как АЧТВ сокращается у пациентов с ингибиторами из-за разведения ингибиторов. Специфические анализы для таких ингибиторов включают анализы Bethesda на антитела против фактора и модифицированные анализы фосфолипидов, такие как время введения разбавленного яда гадюки Рассела для измерения антикоагулянта волчанки.
  • Комплексы фактор-ингибитор : высокие концентрации комплексов тромбин-антитромбин являются чувствительным и специфическим индикатором активации тромбина. Похоже, что анализ позволяет обнаружить комплексы тромбин-антитромбин у некоторых видов животных и использовался для определения гиперкоагуляции в конкретных исследовательских проектах на собаках, кошках и лошадях. Точно так же высокие концентрации комплексов плазмин-антиплазмин являются хорошим индикатором активации плазмина, однако, опять же, это не всегда доступный тест.Как комплексы тромбин-антитромбин, так и комплексы плазмин-антиплазмин имеют высокое содержание у людей с ДВС-синдромом, и эти тесты могут быть полезны на животных, однако в настоящее время ни один из них не является коммерчески доступным для использования в ветеринарии (вероятно, из-за высокой стоимости из-за методов ELISA, используемых для их обнаружения. комплексы).

Глобальные тесты гемостаза

Они могут одновременно измерять несколько путей, включая вклад клеток (тромбоцитов, эритроцитов). В их числе:

Ссылки по теме

.

Алгоритм диагностики скринингового теста на гемостаз

1 Генетическое тестирование на vWD может проводиться у тех пород, для которых доступен генетический тест, однако генетический тест не обязательно коррелирует с клиническими признаками.
1 Тромбопатия (снижение функции тромбоцитов) нечасто является причиной кровотечения, но может быть наследственной или вторичной по отношению к лекарствам (например, аспирину, нестероидным противовоспалительным средствам), заболеваниям (уремия, заболевание печени, ДВС-синдром). Полный анамнез, включая прием лекарств или воздействие токсинов, является обязательным при кровотечении у животных.
3 При необходимости выполните дополнительные анализы для тестирования ДВС, например концентрация фибриногена, концентрация FDP / D-димера, активность АТ. Примечание: если есть сильное клиническое подозрение на ДВС-синдром (больное животное с основным предрасполагающим заболеванием, например, бактериальным сепсисом, раком, тяжелым воспалением, иммуноопосредованной гемолитической анемией), рассмотрите возможность одновременного использования панели ДВС-синдрома и количества тромбоцитов (по сравнению с последовательным тестированием, как показано). Кроме того, в регионах, где Angiostrongylus vasorum представляет собой проблему, рекомендуется тестирование на наличие этого червя, находящегося в сердце и легочных артериях (ПЦР, ELISA, фекальная флотация), и может оказаться целесообразным эмпирическое лечение.
4 Измерение активности FVIIa используется некоторыми клиницистами как маркер дефицита витамина К, а не тест PIVKA (белки, вызванные отсутствием или антагонизмом витамина К). Примечание. Дефицит витамина К может быть вызван токсикозом, нарушениями всасывания жиров или заболеваниями печени (например, холестатическими расстройствами).

«Воспроизведено и изменено с разрешения Руководства BSAVA по клинической патологии собак и кошек, 3-е издание».

.

Диагностический подход | eClinpath

Большинство животных с нарушениями гемостаза проявляются из-за признаков обильного кровотечения, и этим пациентам чаще всего проводят диагностические исследования. Существуют тесты для каждого процесса гемостаза (первичный, вторичный и фибринолиз), а также общие тесты гемостаза, которые оценивают два или более из этих гемостатических процессов одновременно, а также вклад клеток, такие как вязкоупругие методы или тромбоэластография / тромбоэластометрия ( TEG / TEM) и калиброванная автоматическая тромбография (CAT) или анализы образования тромбина.Глобальные тесты требуют специального специального оборудования, что ограничивает их использование академическими учреждениями и крупными специализированными практиками. Большинство тестов на гемостаз предназначены для выявления причин кровотечения или гипокоагуляции и нечувствительны к ускоренному свертыванию (гиперкоагуляция, которая предрасполагает к тромбозу). Некоторые общие анализы (TEG / TEM) могут оценивать фибринолиз, а также образование сгустков и предназначены для выявления гипо- и гиперкоагуляции, однако необходимы дополнительные исследования, прежде чем их можно будет рекомендовать для выявления состояний гиперкоагуляции.

Диагностическая оценка животного с подозрением на нарушение гемостаза начинается с пациента - сигнал (возраст, пол, порода), история болезни, физикальное обследование. Подсказки, полученные от пациента, могут и должны служить ориентиром для диагностического тестирования и интерпретации тестов.

Сигнал

Наследственные заболевания обычно возникают у молодых животных и определенных пород, но могут возникать у любого животного, поэтому не следует сбрасывать со счетов, если не у соответствующей породы. Некоторые наследственные заболевания связаны с полом, и клинические признаки обычно проявляются только у мужчин.У старых животных в первую очередь следует заподозрить аномалии гемостаза, вторичные по отношению к другим заболеваниям (например, канеру, заболеванию печени), хотя симптомы кровотечения у животных с легкими наследственными заболеваниями могут проявиться в более позднем возрасте, а не в более молодом возрасте. Животные любого возраста могут принимать антикоагулянты-родентициды.

История

Поскольку животные не могут говорить сами за себя, получение полной истории жизненно важно. Это должно включать:

  • Эпизоды предшествующего кровотечения : место (кровотечение слизистой оболочки, синяки, гематомы), тяжесть, частота, спонтанные или вызванные травмой или хирургическим вмешательством (например,г. отмечается сильное кровотечение при пережевывании кости). Самопроизвольное кровотечение предполагает более серьезный дефект, чем вызванный травмой или операцией.
  • Семейный анамнез : Симптомы у родителей, братьев и сестер, потомства?
  • История поездок : Воздействие инфекционных агентов, которые могут вызывать нарушения гемостаза
  • Доступ к токсичным веществам : Сюда входят антикоагулянты-родентициды.
  • История лекарств: Известно, что несколько лекарств влияют на гемостаз (например,г. аспирин, нестероидные противовоспалительные препараты, гепарин), и его следует избегать у животных с наследственными нарушениями свертываемости крови. Любой препарат потенциально может повлиять на гемостаз, поэтому все препараты следует рассматривать как потенциальные причины приобретенных нарушений гемостаза, пока не будет доказано обратное.

Осмотр

Пациенты с кровотечением должны быть обследованы на предмет доказательства местной причины кровотечения, например травмы, изъязвления, язвы и тщательный медицинский осмотр.Рутинная оценка частоты сердечных сокращений, частоты дыхания, времени наполнения капилляров и характеристик слизистой оболочки полости рта полезна для оценки общего гемостатического статуса пациента. Всю слизистую оболочку (ротовую, глазную, репродуктивную) и кожу следует исследовать на наличие петехий (точечных кровоизлияний) и экхимозов (более крупных кровоизлияний или синяков, нанесенных кистью).

Скрининговые испытания

Если симптомы кровотечения у животного нельзя отнести к очевидной причине, следует провести серию скрининговых тестов.Тестирование гемостаза может быть выполнено собственными силами (оценка или количество тромбоцитов, анализаторы коагуляции в местах оказания медицинской помощи, АКТ, время кровотечения из слизистой оболочки рта, анализаторы функции тромбоцитов, глобальное тестирование гемостаза с тромбоэластографией / эластометрией), однако большинство внутренних тестов нечувствительны к легкий дефицит факторов или определенные дефекты. В идеале тестирование гемостаза должно проводиться в специализированной ветеринарной лаборатории, например, в Центре сравнительной коагуляции при Корнельском университете, где эффективность анализа оптимизирована для тестирования на животных.Отборочные тесты должны включать следующее:

  • Гемограмма, включая количество тромбоцитов: Подсчет тромбоцитов является обязательным для любого животного с обильным кровотечением. Полная гемограмма помогает определить другие нарушения, которые могут вызывать симптомы кровотечения, например воспаление, лейкоз.
  • Клиническая химия: для определения основных заболеваний, которые могут повлиять на гемостаз. Это особенно важно для старых животных, но не следует сбрасывать со счетов молодых.
  • Скрининговые анализы коагуляции: Наиболее часто используемые скрининговые анализы - это протромбиновое время (PT) и активированное частичное тромбопластиновое время (APTT), при этом активированное время коагуляции (ACT) доступно как менее чувствительный и более субъективный тест по месту лечения. . Некоторые лаборатории также включают определение концентрации фибриногена и ТСТ в качестве тестов для выявления вторичного гемостаза. Эти тесты обычно не специфичны для отдельного дефекта, но оценивают функционирование пути, например внутренний или внешний путь коагуляции.В их основе лежат триггерные реагенты, которые вызывают образование фибринового сгустка в образце в присутствии фосфолипида и кальция. Затем сгусток обнаруживается различными способами (визуальными, оптическими, механическими). У разных реагентов и методов есть свои сильные и слабые стороны. В идеале все анализы свертывания крови должны быть оптимизированы для выявления дефицита факторов, но на самом деле это делается только в нескольких специализированных лабораториях, особенно в тех, которые имеют опыт тестирования гемостаза. В частности, тестирование должно проводиться в ветеринарной лаборатории, потому что плазма животных свертывается намного быстрее, чем плазма человека.У собак, в частности, время коагуляции намного быстрее, чем у людей, и инструменты, которые не могут компенсировать это быстрое время (многие фотооптические инструменты), могут пропускать образование сгустка, давая ошибочные результаты. В диагностических лабораториях анализы коагуляции часто включают в панели, такие как следующие:
    • Стандартная панель: PT и APTT. Некоторые лаборатории также включают измерение фибриногена и TCT в стандартную панель.
    • Панель диссеминированной внутрисосудистой коагуляции (ДВС): Обычно включает ПВ, АЧТВ, фибриноген, FDP / D-димер и антитромбин (АТ).

Отклонения от нормы в этих скрининговых анализах диктуют необходимость дальнейшего тестирования. В некоторых случаях дальнейшее тестирование может также включать скрининговый анализ (например, время кровотечения из слизистой оболочки рта или BMBT при нарушениях первичного гемостаза), но обычно требуется более конкретное тестирование. Специфическое тестирование включает в себя анализ активности или концентрации отдельного фактора (например, активности фактора VIII в отношении гемофилии A) или ингибитора (например, активности AT в отношении DIC) (например, тестирование антигена vWf для болезни фон Виллебранда).В некоторых случаях скрининговые тесты не требуются, и проводится только специальное тестирование, например терапевтический мониторинг гепарина, измерение протеина C в качестве вспомогательного теста для портосистемных шунтов.

Исследования методом гемостаза

Ниже приводится список стандартных и специализированных тестов гемостаза с помощью гемостатического процесса.

  • Первичный гемостаз : Тесты на первичный гемостаз включают оценку количества и функции тромбоцитов и оценку фактора фон Виллебранда.Для выявления проблем со стенкой кровеносных сосудов требуются соответствующие клинические признаки (например, повышенное растяжение кожи с хрупкостью у кошек с синдромом Элерса-данлоса) и гистопатологическая оценка биопсии.
    • Тромбоциты
      • Количество и объем тромбоцитов
      • Функция тромбоцитов : адгезия, реакция высвобождения, прокоагулянтная активность, агрегация, генетический дефект (зависит от породы)
      • Общие анализы (количество и функция тромбоцитов): время кровотечения из слизистой оболочки ротовой полости (BMBT), анализаторы функции тромбоцитов (PFA), время свертывания цельной крови, ретракция сгустка
    • Фактор фон Виллебранда
      • Концентрация антигена
      • Конструкция (мультимеры)
      • Активность : Анализ связывания коллагена, агрегация тромбоцитов (vWf-специфические агонисты)
      • Генетический дефект (порода)
      • Глобальные анализы : BMBT, PFA
    • Стенка сосуда: Биопсия
  • Вторичный гемостаз: Тесты вторичного гемостаза включают оценку факторов или ингибиторов свертывания крови.Некоторые из этих анализов являются достаточно специализированными (например, антиген фибриногена) и доступны только в некоторых лабораториях.
    • Факторы коагуляции
      • Скрининговые анализы : ACT, PT, APTT, TCT, белки, индуцированные отсутствием / антагонизмом витамина K (PIVKA)
      • Удельная активность факторов : Большинство факторов
      • Концентрации специфических факторов : антиген фибриногена
      • Генетический дефект (фактор и порода)
    • Ингибиторы
      • Активность : AT, белок C
      • Терапевтический мониторинг гепарина
      • Антикоагулянтные грохоты для родентицидов : Высокоэффективная жидкостная хроматография
    • Глобальные анализы: Вязкоупругие методы, анализы образования тромбина
  • Фибринолиз : К сожалению, измерение многих компонентов фибринолитического пути, включая плазминоген, tPA, PAI-1, обычно не проводится, что является основным недостатком при оценке животных на предмет гемостатических или тромботических нарушений.Наиболее распространенными тестами фибринолитической активности являются определение литических продуктов, включая FDP и D-димер.
    • Продукты деструкции : СВД, D-димер
    • Активность или концентрация белка : tPA, плазминоген
    • Global assays : Тест лизиса эвглобина, вязкоупругие методы с использованием tPA
    • Ингибиторы : Ингибитор активатора плазминогена-1
  • Глобальные тесты гемостаза : Они могут измерять одновременно несколько путей, включая вклад клеток (тромбоцитов, эритроцитов):
    • Вязкоупругие методы : Тромбоэластография и тромбоэластометрия
    • Калиброванная автоматическая тромбография (CAT): анализ образования тромбина

Интерпретация теста

Трудно переоценить тот факт, что результаты тестов на гемостаз никогда не следует интерпретировать изолированно; их всегда следует интерпретировать в контексте пациента (клинические признаки, исторические подробности, сигналы).Могут происходить и происходят артефактические изменения, которые могут привести к ошибочным результатам. Если результаты не имеют смысла, их следует подвергнуть сомнению. Лечите пациента, а не лабораторные данные.

Существуют различные способы интерпретации результатов гемостаза, и существуют серьезные разногласия - в отношении референтного интервала или контрольного образца и в отношении степени клинически значимых изменений. Основные используемые методы:

  • Референсные интервалы : Обычно результаты интерпретируются относительно референсных интервалов, установленных для здоровой группы животных.Ненормальные результаты теста можно интерпретировать как результаты, которые находятся выше или ниже пределов референтного интервала, независимо от степени изменения (предпочтительный метод). Это может привести к чрезмерной интерпретации легких отклонений (опять же, смотрите на пациента при интерпретации результатов теста). Некоторые исследователи учитывают только процентное изменение (например, 25%) или абсолютное изменение (например, 2 секунды) выше или ниже предела, однако это может привести к игнорированию или пропуску незначительных дефектов. Тесты на гемостаз действительно показывают существенную внутрииндивидуальную вариабельность или биологическую вариабельность (также называемую низким индексом индивидуальности, что означает, что можно увидеть большие изменения в результатах, полученных на одном животном в разных случаях), что позволяет предположить, что эталонные интервалы на основе популяции могут не соответствовать лучший метод интерпретации (потому что они на самом деле слишком широки).В этом случае определение критических различий может быть более подходящим (критические различия основаны на биологических вариациях и применимы к отдельным животным, которые, по сути, служат их собственным контролем, например, если критическая разница в 3 секунды определяется для ПК. Это означает, что результаты PT для отдельной собаки должны отличаться более чем на 3 секунды от исходного значения, чтобы быть диагностически значимыми, даже если это 3-секундное увеличение находится в пределах установленного референтного интервала).Однако обычно это метод по умолчанию, поскольку базовое тестирование на животных обычно не проводится, а подходящие животные для контроля не всегда доступны.
  • Контрольные образцы : Результаты интерпретируются относительно контрольного образца - это может быть объединенная нормальная плазма (предпочтительно) или результаты от отдельного здорового животного, представленные вместе с пациентом. Опять же, существуют различия в способе интерпретации результатов (процентное или абсолютное изменение по сравнению с контролем).Поскольку большинство лабораторий не имеют доступа к объединенным контрольным образцам, референсные интервалы обычно являются методом по умолчанию.

Алгоритм диагностического тестирования

Алгоритм проверки гемостаза

Результаты скрининговых тестов диктуют необходимость дальнейшего или более конкретного диагностического тестирования или могут потребовать дополнительных анализов. При выборе анализов (скрининговых или иных) следует руководствоваться знаниями пациента (возраст, порода, пол, доступ к антикоагулянтным родентицидам, воздействие паразитов, тип симптомов кровотечения, наличие основного заболевания и т. Д.).Если результаты анализов по-прежнему не дали результатов и у животного все еще есть подозрения на нарушение гемостаза, было бы целесообразно направить пациента к специалисту по гемостазу для более специализированного или комплексного исследования. Направление фактического пациента по сравнению с направлением образцов, собранных у пациента, рекомендуется, потому что некоторые исследования требуют использования свежих тромбоцитов от пациента и не могут быть выполнены на хранящихся или отправленных образцах, например анализы функции тромбоцитов. Мы предоставили предлагаемый алгоритм диагностического тестирования для пациента с кровотечением, а также таблицу ожидаемых отклонений теста с различными расстройствами.

.

Leave a Comment

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *