Определитель глистов: Кровь на гельминты: цена в Москве

Содержание

(PDF) ЭКОЛОГО-ФАУНИСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ГЕЛЬМИНТОВ ВОДНО-БОЛОТНЫХ ПТИЦ БАЙКАЛЬСКОЙ СИБИРИ: 2. РЖАНКОВЫЕ CHARADRII

27

Ц. З. Доржиев, Е. Н. Бадмаева, Ж. Н. Дугаров. Эколого-фаунистический анализ гельминтов водно-

болотных птиц Байкальской Сибири: 2. Ржанковые Charadrii

Хозяева — ржанковые птицы

Кол-во

видов Виды птиц

Семейство Diplostomidae

Diplostomum gasterostei 1 черныш

Diplostomum mergi 2 черныш, перевозчик

Семейство Echinostomatidae

Echinoparyphium aconiatum 2 черныш, фифи, турухтан

Echinoparyphium recurvatum 2 чибис, черныш

Echinoparyphium leric 2 чибис, поручейник, черныш

Echinoparyphium nordiana 3 чибис, черныш, фифи

Echinoparyphium politum 8азиатский бекас, обыкновенный бекас, черныш,

фифи, мородунка, кулик-воробей, белохвостый

песочник, турухтан

Echinostoma paraulum 2 чибис, большой веретенник

Echinostoma revolutum 4кроншнеп-малютка, мородунка, кулик-воробей,

турухтан

Echinostoma stantschinskii 2 азиатский бекас, лесной дупель

Longicollia echinata 5чибис, азиатский бекас, обыкновенный бекас,

большой веретенник, поручейник

Семейство Leucochloridiidae

Leucochloridium actitis 10

чибис, малый зуек, азиатский бекас, кроншнеп-

малютка, большой кроншнеп, большой улит,

фифи, перевозчик, длиннопалый песочник,

турухтан

Семейство Notocotylidae

Notocotylus linearis 3 чибис, черныш, фифи, мородунка

Семейство Plagiorchiidae

Plagiorchis nanus 18

галстучник, малый зуек, азиатский бекас,

обыкновенный бекас, малый веретенник,

кроншнеп-малютка, большой кроншнеп, щеголь,

большой улит, черныш, фифи, перевозчик,

мородунка, круглоносый плавунчик, длиннопалый

песочник, краснозобик, острохвостый песочник,

турухтан

Plagiorchis uhlwormi 5большой веретенник, кроншнеп-малютка,

большой кроншнеп, перевозчик, кулик-воробей

Plagiorchis vitellatus 8черныш, фифи, сибирский пепельный улит,

перевозчик, мородунка, круглоносый плавунчик,

кулик-воробей, турухтан

Plagiorchis nyrocae 4галстучник, мородунка, круглоносый плавунчик,

кулик-воробей

Семейство Prosthogonimidae

Prosthogonimus cuneatus 5обыкновенный бекас, большой улит, черныш,

кулик-воробей, турухтан

Prosthogonimus ovatus 2 чибис, черныш, фифи

Schistogonimus rarus большой кроншнеп

Семейство Eucotylidae

Tanaisia fedtschenkoi 7галстучник, малый зуек, азиатский бекас,

обыкновенный бекас, черныш, фифи, сибирский

пепельный улит

(PDF) ФАУНА, МОРФОЛОГИЯ И СИСТЕМАТИКА ПАРАЗИТОВ

2. Andеrson R. C. Nematode Parasites of Vertebrates: Their Development and

Transmission. New York: CABI, 2000, 672 p.

3. Агринский Н. И. Насекомые и клещи, вредящие сельскохозяйственным

животным. – М., 1962. – 289 с.

4. Гехтин В. И. О гельминтофауне крупного рогатого скота Каракалпакской

АССР // Полезные и вредные беспозвоночные животные Узбекистана. Ташкент, 1967. –

С. 116–120.

5. Дадаев С. Д. Гельминты позвоночных подотряда Ruminantia Scopoli, 1777

фауны Узбекистана: автореф. дис. …д-ра биол. наук. – Ташкент, 1997. – 56 с.

6. Жадин В. И. Моллюски пресных и солоноватых вод СССР. – М.–Л.: Изд-

во АН СССР, 1952. – С. 164–180.

7. Здун В. И. Личинки трематод в прiсноводных моллюскib Укrаiнu ССР. –

Киев: Вид-во АН УРСР, 1961. – 143 с.

8. Ивашкин В. М., Мухамадиев С. А. Определитель гельминтов крупного

рогатого скота. – М., 1981. – 260 с.

9. Круглов Н. Д. Моллюски семейства прудовиков Европы и Северной

Азии. – Смоленск: Изд. СГПУ, 2005. – 508 с.

10. Лихарев И. М., Раммельмейер Е. С. Наземные моллюски фауны СССР.

Определители по фауне СССР. – М.–Л., 1952. – Вып. 43. – 512 с.

11. Пазилов А., Азимов Д. А. Наземные моллюски (Gastropoda, Pulmonata)

Узбекистана и сопредельных территорий. – Ташкент: Фан, 2003. – 316 с.

12. Сапаров К. А., Голованов В. И., Акрамова Ф. Д., Шакарбоев Э. Б., Азимов

Д. А. Эколого-фаунистический анализ нематод подотряда Filariata – паразитов

млекопитающих Узбекистана // Российский паразитологический журнал. – М., 2012. –

№ 4. – С. 29–37.

13. Сапаров К. А.

Фауна, распространение и экология филяриат птиц и млекопитающих Узбекистана:

автореф. дис. … д-ра биол. наук. – Ташкент, 2016. – 66 с.

14. Скрябин К. И.

Метод полных гельминтологических вскрытий позвоночных, включая человека. – М.–

Л.: МГУ, 1928. – 45 с.

15. Султанов М. А.,

Муминов П. А., Сарысаков Ф. С. и др. Паразитические черви животных Ферганской

долины. – Ташкент: Фан, 1971. – 268 с.

16. Султанов М. А.,

Азимов Д. А., Гехтин В. И., Муминов П. А. Гельминты домашних млекопитающих

Узбекистана. – Ташкент: Фан, 1975. – 184 с.

References

1. Agrinskiy N. I. Nasekomye i kleshchi, vredyashchie selskohozyaystvennym

zhivotnym [Insects and ticks damaging agricultural animals]. M., 1962. 289 p. (In Russian)

2. Anderson R. C. Nematode Parasites of Vertebrates: Their Development and

Transmission. New York, CABI, 2000. 672 p.

3. Azimov D. A., Dadaev S. D., Akramova F. D., Saparov K. A. Gel’minty

zhvachnyh zhivotnyh Uzbekistana [Helminths in ruminants from Uzbekistan]. Tashkent, Fan,

2015. 224 p. (In Russian)

4. Dadaev S. D. Gelminti pozvonochnih podotryada Ruminantia Scopoli, 1777

fauny Uzbekistana: аvtoref. diss…dok. biol. nauk. [Helminths in vertebrates of the suborder

Ruminantia Scopoli, 1777 from the fauna of Uzbekistan. Abst. doct. diss… biol. sci.].

Tashkent, 1997. 56 p. (In Russian)

Рыжиков — это… Что такое Рыжиков?

  • Рыжиков — Рыжиков: Рыжиков, Александр Александрович  герой Российской Федерации. Рыжиков, Анатолий Васильевич  герой Советского Союза. Рыжиков, Андрей Викторович (р. 1988) российский футболист, вратарь. Рыжиков, Константин Минаевич … …   Википедия

  • Рыжиков — РЫЖИХ РЫЖИКОВ Фамилия Рыжих образована по модели: прилагательное в форме родительного падежа множественного числа от именования семьи Рыжие, которые могли быть и не рыжими, а лишь потомками носителя имени Рыжий (как Хромыеа сами не хромали, а… …   Русские фамилии

  • Рыжиков К. М. — РЫ́ЖИКОВ Константин Минаевич (1912–83), гельминтолог, ч. к. АН СССР (1964). Ученик К. И. Скрябина. Тр. по биологии и систематике гельминтов домашних и охотничье промысловых животных, гл. обр. птиц …   Биографический словарь

  • РЫЖИКОВ Константин Минаевич — (1912 83) российский гельминтолог, член корреспондент АН СССР (1964).

    Труды по биологии и систематике гельминтов домашних и охотничье промысловых животных …   Большой Энциклопедический словарь

  • Рыжиков Константин Минаевич — [р. 13(26).9.1912, Смоленск], советский учёный гельминтолог, член корреспондент АН СССР (1964). Член КПСС с 1945. Окончил Смоленский педагогический институт (1937). Ученик К. И. Скрябина. С 1946 работает в Гельминтологической лаборатории АН СССР… …   Большая советская энциклопедия

  • Рыжиков, Сергей Викторович — Сергей Рыжиков …   Википедия

  • Рыжиков, Сергей — Сергей Рыжиков Общая информация Полное имя Прозвище …   Википедия

  • Рыжиков Сергей Викторович — Сергей Рыжиков Общая информация Полное имя Прозвище …   Википедия

  • Рыжиков, Константин Минаевич — Константин Минаевич Рыжиков Дата рождения: 1912 год(1912) Место рождения: Смоленск Дата смерти: 1983 год(1983) Страна …   Википедия

  • Рыжиков Константин Минаевич — (1912 1983), гельминтолог, член корреспондент АН СССР (1964). Труды по биологии и систематике гельминтов домашних и охотничье промысловых животных, главным образом птиц. * * * РЫЖИКОВ Константин Минаевич РЫЖИКОВ Константин Минаевич (1912 83),… …   Энциклопедический словарь

  • a patient today — Translation into Russian — examples English

    Suggestions: patient today

    These examples may contain rude words based on your search.

    These examples may contain colloquial words based on your search.

    I didn’t just lose a patient today.

    Will had

    a patient today who got the wrong medicine.

    And I lost a patient today… a sweet girl whose luck ran out.

    You lost a patient today, didn’t you?

    I slapped a patient today.

    In fact, I saw a patient today who’s terrified she might have it.

    На самом деле, сегодня я видела пациентку, которая в ужасе от того, что, возможно, заразилась.

    I’m blazing the trail as

    a patient today… so I can continue to set the standard as a lawyer tomorrow.

    Suggest an example

    Other results

    I had a patient earlier today who came in for strep, and I told her to send her boyfriend in for a check-up.

    Numbers, however, should not be the sole determinant in the distribution of assistance, as a single patient today could easily lead to a full-blown, uncontrolled pandemic tomorrow.

    Однако цифры не должны быть единственным решающим фактором при распределении помощи, поскольку сегодня единственный
    пациент
    , бесспорно, мог бы вызвать завтра подлинную неконтролируемую пандемию.

    I had a patient full of worms today.

    Crazy I got this patient today.

    That is the third patient today who has requested you.

    You have one more patient today.

    I have patients today, and I…

    Give Yang all your patients today.

    And it’s just too hard to use now and for my patients today.

    Это слишком трудоёмкий процесс, чтобы использовать его здесь и сейчас.

    Yes, I thought I might actually see some patients today for a change.

    All right, team, our patient today is George Follows.

    Итак, команда, сегодня наш пациент — Джордж Фоллоус.

    This isn’t just any patient today.

    Alana Bloom was visiting with your former patient today

    .

    Стронгхолд капли на холку от блох и глистов для кошек, котят и собак в ассортименте — Краснодар

    Название Стронгхолд капли на холку от блох и глистов для кошек, котят и собак в ассортименте
    Цена (розничная)
    Цена (оптовая)
    Ед. изм
    Мин. партия
       
    Производитель
    Web-сайт
     
    Организация Ветеринарная аптека Ле-Мурр
    Адрес
    Телефон 255 31 46
      Подробнее об организации. ..

    Распространенность и определяющие факторы анкилостомоза среди детей школьного возраста в районе Яве, Северо-Запад Эфиопии

    Afr Health Sci. 2019 сен; 19 (3): 2439–2445.

    Кафедра микробиологии, иммунологии и паразитологии, Колледж медицины и медицинских наук, Университет Бахир Дар, почтовый ящик: 79, Бахир Дар, Эфиопия

    Автор переписки: Тадессе Хайлу, доцент кафедры медицинской паразитологии, иммунологии и паразитологии, Медицинский колледж и медицинские науки, Университет Бахир Дар, Эфиопия, П.О. Ящик: 79, телефон: +2512655: moc.oohay@98uliahessedat; te.ude.udb@hessedat Лицензиат африканских медицинских наук. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (https://creativecommons.org/licenses/BY/4.0), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии, что оригинальная работа правильно процитировано.

    Реферат

    Предпосылки

    Анкилостомоз — распространенная паразитарная инфекция в Африке к югу от Сахары.Распространенность анкилостомоза зависит от различных детерминантных факторов. Это исследование было направлено на определение распространенности анкилостомоза и определяющих факторов среди детей школьного возраста на северо-западе Эфиопии.

    Методы

    Поперечное исследование проводилось с апреля 2016 года по август 2016 года. Дети отбирались систематической случайной выборкой, и для выявления анкилостомической инфекции использовался метод концентрации эфира формол. Мы провели описательный и логистический регрессионный анализ для категориальных переменных.Скорректированное отношение шансов было рассчитано с доверительным интервалом 95%.

    Результаты

    Среди 333 детей 49 (14,7%) были инфицированы паразитами анкилостомы. Употребление сырых овощей, ношение обуви, отсутствие регулярного ношения обуви и привычки мыть руки, отсутствие надлежащего использования уборных, отсутствие дегельминтизации были значимо связаны (p <0,05) с инфекцией анкилостомы.

    Заключение

    Распространенность анкилостомоза среди детей школьного возраста была высокой.Ходьба босиком, привычка мыть руки и отсутствие надлежащего использования уборных являются основными определяющими факторами высокой распространенности анкилостомоза. Следовательно, необходимо провести мобилизацию населения и санитарное просвещение, чтобы уменьшить инфицирование анкилостомозом среди детей школьного возраста в районе Яве.

    Введение

    Паразитарная анкилостомическая инфекция является одним из основных представителей геогельминтных инфекций, распространенных в развивающихся странах. 1 Хотя программы борьбы выполнены, бремя анкилостомоза остается высоким, в настоящее время анкилостомоз поражает примерно 500 миллионов человек 2 , с 5.1 миллиард подвержен риску заражения инфекцией во всем мире. 3 и примерно 198 миллионов инфицированных в регионе к югу от Сахары. 4

    Анкилостомоз также является основной причиной смертности и заболеваемости кишечными паразитами в Эфиопии. 5 Распространение паразита анкилостомы различается от региона к региону страны из-за нескольких экологических, социальных и географических факторов. 6

    Исследования на базе школ в Эфиопии показали, что анкилостомоз широко распространен среди детей школьного возраста.Например, высокая распространенность была зарегистрирована в Горгоре на северо-западе Эфиопии 7 , в особой зоне Бахир Дар 8 , в городе Бабиле, на юге Эфиопии 9 и в сельских высокогорных районах Северо-Западной Эфиопии. 10

    Высокая распространенность анкилостомы в основном связана с несколькими определяющими факторами, включая бедность, плохие условия жизни, личную гигиену и гигиену окружающей среды и санитарию. 11 , ходьба босиком и контакт с почвой. 12

    В развивающихся странах бремя болезней значительно.Инфекции, вызываемые анкилостомами, приводят к недоеданию, железодефицитной анемии, задержке роста плода и повышенной уязвимости к другим инфекциям 13 и низкой успеваемости школьников. 14

    Дети подвержены высокому риску заражения анкилостомами, поскольку они играют с почвой голыми руками и ходят босиком. 12 Этот паразит так или иначе влияет на эритроциты (эритроциты) и вызывает анемию, особенно у детей. Например, анкилостомы потребляют эритроциты и вызывают кишечное кровотечение, которое идеально подходит для образования клеток крови и приводит к анемии. 15 Дети, страдающие анемией, а также другими паразитарными инфекциями, в несколько раз чаще страдают задержкой роста и недостаточным весом, чем те, у кого их нет. 16 Информация, полученная в медицинских центрах, свидетельствует о том, что анкилостомоз является основным глистным заболеванием среди детей в районе Яве. Однако доступная информация относительно анкилостомоза и детерминантных факторов в Эфиопии в целом и в районе исследования в частности отсутствует. Таким образом, это исследование было направлено на определение масштабов заражения анкилостомами и определяющих факторов среди детей школьного возраста Северо-Западной Эфиопии.

    Методы

    Дизайн, период и область исследования

    Поперечное исследование проводилось с апреля по август 2016 года среди детей школьного возраста с лихорадкой в ​​Джаве Вореда, Зона Трепет, региональный штат Амхара, Северо-Западная Эфиопия. Высота района от 648 до 1300 метров. Годовая температура в районе исследования колеблется от 16,68 ° C до 37,6 ° C. Среднегодовое количество осадков составляет 1569,4 мм. В исследуемой зоне есть температура окружающей среды, влажность, растительный покров, а также типы глинистых и песчаных почв, которые способствуют существованию в окружающей среде личинок анкилостомы паразита.

    Определение размера выборки и выборка

    В это исследование было включено 333 ребенка школьного возраста. До тех пор, пока не был достигнут требуемый размер выборки, применялся простой метод случайной выборки. Образцы были собраны в поликлиниках Яве и Воркмеда. Размер выборки в каждом медицинском центре был распределен с учетом населения в обслуживаемых районах. В исследование были включены все дети в возрасте от 6 до 14 лет, посещающие медицинские центры Jawe и Worekmeda и желающие участвовать в исследовании.Исключались дети, принимавшие противоглистные препараты в течение последних 8 недель из времени сбора данных.

    Сбор данных

    Медицинские работники собирали данные о демографической информации, объясняющих переменных и факторах окружающей среды посредством личного интервью с родителями / опекуном детей.

    Сбор образцов стула

    Свежие образцы стула были собраны в чистый пластиковый стаканчик в двух медицинских центрах.

    Для обнаружения яйцеклеток анкилостомы при прямой микроскопии примерно 20 мг свежего образца стула помещали на предметное стекло с помощью деревянного аппликатора, эмульгированного с каплей физиологического раствора (0.85%), покрытые покровным стеклом и исследованные под микроскопом с использованием сначала 10-кратных объективов, а затем 40-кратных объективов.

    В методиках концентрирования эфира Формола (FECT) 0,5 грамма образца стула переносили в 10 мл физиологического раствора в стеклянном контейнере и тщательно перемешивали. Два слоя марли помещали в воронку и процедили содержимое в центрифужную пробирку на 15 мл. Затем добавляли 2,5 мл 10% формальдегида и 1 мл эфира. Пробирки хорошо перемешивали и центрифугировали при 1000 оборотах в течение трех минут.Осадок хорошо перемешали, приготовили на предметном стекле и покрыли покровным стеклом, после чего наблюдали яйцеклетку анкилостомы под микроскопом.

    Контроль качества

    Для обеспечения надежного сбора данных перед сбором образцов было проведено обучение лаборантов и медицинских работников по сбору данных и разъяснения по исследованию. Применение стандартных процедур и точность результатов тестирования контролировались ведущим исследователем. Чашки для стульев были промаркированы на основе их серийных номеров.Прямая микроскопия кала была исследована ранее для FECT, как только образец поступил. Чтобы исключить предвзятость наблюдателя, толстые слайды FECT-стула исследовали независимо с двумя опытными лаборантами, и 10% слайдов FECT были случайным образом выбраны и прочитаны другим техником в качестве контроля качества. Результаты их наблюдения записывались для последующего сравнения на отдельных листах.

    Анализ данных

    Данные вводились и анализировались с помощью статистического программного обеспечения Статистического пакета для социальных наук (SPSS) версии 20.Общая величина анкилостомы была рассчитана с использованием описательной статистики. Сила связи между анкилостомозом и различными детерминантными факторами была рассчитана с помощью одномерного анализа. Независимые переменные с грубым отношением шансов (COR) <0,02 были обработаны для многомерного анализа. Была рассчитана многомерная логистическая регрессия, чтобы избежать эффекта софинансирования, и рассчитаны скорректированные отношения шансов (AOR) с 95% доверительным интервалом (CI). Различия считались статистически значимыми, если значение p было <0.05.

    Результат

    Демографические характеристики

    Всего в исследовании приняли участие 333 ребенка школьного возраста; 275 (82,6%) из сельской местности с уровнем отклика 94,5%. Женщины-участники составили 51,1% от общего числа участников исследования. Средний возраст и возрастной диапазон детей составляли 11 лет и 8 лет соответственно со стандартным отклонением 2,7 ().

    Таблица 1

    Социально-демографический профиль участников исследования, Северо-Западная Эфиопия, 2016 г.

    (14.9) 17116
    Переменные N Анкилостомы инфекция
    Положительный Отрицательный
    Возраст 6–9 97 11 (11. 3) 86 (88,7)
    (лет) 10–14 236 38 (16,1) 198 (83,9)
    Пол 23 (14,1) 140 (85,9)
    Женский 170 26 (15,3) 144 (84,7)
    Религия 279 (85,1)
    Мусульманин 5 0 (0) 5 (100)
    Резиденция Сельская местность 227 (82,5)
    Городской 58 1 (1,7) 57 (98,3)
    Образование 73 Неграмотный 86 (15116 86 84.7)
    Основной (1–4) 166 25 (15,1) 141 (84,9)
    Младший (5–8) 76 10 66 (86,8)
    Вторичный 5 1 (20) 4 (80)
    Итого 333 9015 284 (85.3)

    Заражение анкилостомами

    Общая доля анкилостомозов среди детей составила 49 (14,7%). Распространенность анкилостомы среди детей в возрасте 6–9 лет и 10–14 лет составила 11,3% и 16,1% соответственно. Распространенность анкилостомоза среди умеющих читать и неграмотных детей составила 36 (10,8%) и 13 (3,9%) соответственно ().

    Двумерный анализ анкилостомоза

    Определяющие факторы, включая употребление сырых овощей, образование стула, ходьбу босиком, привычку носить обувь, неправильное мытье рук, неправильное использование уборных и отсутствие дегельминтизации, были связаны с инфекцией анкилостомы ( ).

    Таблица 2

    Двумерная связь рассматриваемых переменных с анкилостомозами среди детей школьного возраста на северо-западе Эфиопии, 2016 г.

    9015 Да 16 (5,7) Всегда 902 .000
    Переменные Инфицирование крючковыми глистами AOR (95% ДИ) значение

    Всего Зараженные
    [N,%]
    Неинфицированные
    [N,%]
    9015 9011 Овощной 183 41 (22.4) 142 (77,6) 0,21 (0,06 — 0,70) 0,01
    150 8 (5,3) 142 (94,7) 1
    Изнашиваемая колодка Нет 52 33 (63,5) 19 (36,5) 21,14 (7,04–63,52),00
    265 (94,3) 1
    Как часто носите обувь? Иногда 199 41 (20.6) 158 (79,4) 0,30 (0,09 — 0,69) .04
    Всегда 134 8 (6,0) 126 (94) 1
    Использование уборных Иногда 191 7 (3,7) 184 (96,3) 0,20 (0,06 — 0,64) 0,01
    42 (29,6) 100 (70.4) 1
    Приспособление для мытья рук Иногда 82 34 (41,5) 48 (58,5) 0,07 (0,02 — 19) Всегда 251 15 (6,0) 236 (94) 1
    Дегельминтизация Да 183 1.044
    150 34 (22,7) 116 (77,3) 3,00 (1,03 — 8,3)

    Многовариантный анализ инфекции анкилостомоза 79 od

    На% меньше детей школьного возраста, которые не ели сырые овощи, чем дети, употребляющие сырые овощи. Дети, которые мыли руки, были защищены на 93%, чем дети, которые не мыли руки. Дети, которые не носили обувь, имели в 21,14 (AOR) раз больше шансов заразиться анкилостомами.Вероятность заражения анкилостомами у детей, которые правильно пользовались уборными, была на 80% ниже, чем у тех, кто этого не делал. У детей, у которых не было глистов, в 2,93 (AOR) раза больше шансов получить защиту, чем у детей, не прошедших дегельминтизацию. У детей со сформированным стулом в 3,45 (AOR) раза больше шансов дать положительный результат на анкилостомоз, чем у детей с полутвердым стулом ().

    Таблица 3

    Многомерная связь рассматриваемых переменных с анкилостомозами среди детей школьного возраста на северо-западе Эфиопии, 2016

    значение p 9011 9326 9325

    us Инфекция анкилостомоза — проблема общественного здравоохранения, и она более серьезна в странах с ограниченными ресурсами. Плохая гигиена, открытая дефекация, привычка ходить босиком и нехватка чистой воды являются основными определяющими факторами высокой распространенности.

    17

    Распространенность анкилостомозов (14.7%) в настоящем исследовании было выше, чем исследование, проведенное в Кумаси 18 , сравнимо с предыдущим исследованием, проведенным в Джимме 19 и Южном Гондэре 20 , но ниже, чем исследование, проведенное в Юго-Западной Танзании 21 , Харьяна штат Индия 22 и Северо-Западная Эфиопия 10 . Это может быть связано с различиями в социально-экономическом статусе, информации о здоровье, системе удаления отходов, сезоне сбора проб, типе почвы, а также климатических и топографических факторах исследуемых территорий.

    В большинстве случаев анкилостомоза передается через кожу, но иногда паразиты анкилостомы могут передаваться человеку при попадании в организм нитчатых личинок Ancylostoma duodenale с зараженной пищей. 23 В настоящем исследовании мы обнаружили, что дети, которые не ели сырые овощи, были менее подвержены заражению паразитами анкилостомы. Аналогичный результат был получен в Судане. 24 В этом исследовании распространенность анкилостомоза среди детей, которые не носили обувь, была значительно выше, чем среди тех, кто ее носил.Аналогичным образом, аналогичные находки были зарегистрированы в Южном Гондэре 20 и Авассе. 25

    Загрязненные руки нитевидными личинками могут передавать анкилостомоз во время приема пищи. 23 Грязная рука, необрезанные ногти, загрязнение воды, плохие санитарные условия и дефекация в открытом грунте значительно способствуют передаче инфекции глистами, особенно в школах, что приводит к высокой эндемичности инфекции анкилостомами. 22 Правильное использование уборных и правильное мытье рук идеально подходят для профилактики кишечных паразитозов. 26 В настоящем исследовании дети, которые не могли пользоваться уборными и мыть руки должным образом, были восприимчивы к заражению паразитами анкилостомы. Этот результат был аналогичен предыдущему исследованию, проведенному в Южной Эфиопии 27 и Северо-Западной Эфиопии 28 и сельской местности Таиланда. 29

    В зависимости от распространенности в эндемической зоне дегельминтизация должна проводиться при гельментозных инфекциях. Исследование присутствия у детей, прошедших дегельминтизацию, показало низкую распространенность паразитарной инфекции анкилостомоза.Этот результат согласуется с предыдущими исследованиями в Западной Уганде. 30

    Заключение

    Распространенность анкилостомоза среди детей школьного возраста была высокой. Ходьба босиком, привычка мыть руки и отсутствие надлежащего использования уборных являются основными определяющими факторами высокой распространенности анкилостомоза. Поэтому необходимо провести мобилизацию населения, санитарное просвещение и дегельминтизацию, чтобы снизить бремя анкилостомоза среди детей школьного возраста в районе Яве.

    Благодарность

    Авторы выражают признательность Университету Бахир Дар, Callege of Medicine and Health Sciences, который покрыл бюджет проекта.

    Конфликт интересов

    Все авторы просмотрели рукопись и одобряют ее для отправки. Авторы не имеют конкурирующего интереса в публикации рукописи, чтобы объявить

    Вклад авторов

    TH, задумал, спроектировал и написал, провел анализ и отредактировал рукопись.WM & BA критически отредактировали рукопись. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

    Информация об авторах

    TH — доцент кафедры медицинской паразитологии Колледжа медицины и здравоохранения Университета Бахир Дар. WM — доцент медицинской микробиологии в колледже медицины и здравоохранения Университета Бахир Дар. Бакалавр является доцентом медицинской микробиологии в Колледже медицины и медицинских наук Университета Бахир Дар

    Список литературы

    1.Всемирная организация здравоохранения, автор. Профилактика кишечных паразитарных инфекций и борьба с ними, Серия технических отчетов ВОЗ 741. Женева, Швейцария: ВОЗ; 1987. [PubMed] [Google Scholar] 2. Глобальная, региональная и национальная заболеваемость, распространенность и годы, прожитые с инвалидностью для 301 острого и хронического заболевания и травмы в 188 странах, 1990–2013 годы: систематический анализ для исследования глобального бремени болезней 2013, 2015. Lancet. 386 (9995): 743–800. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 3. Пуллан Р.Л., Брукер С.Дж.Глобальные пределы и население, подверженное риску заражения гельминтами, передаваемыми через почву, в 2010 г. Паразитирующие переносчики. 2012; 5: 81. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 4. Хотез П.Дж., Камат А. Забытые тропические болезни в Африке к югу от Сахары: обзор их распространенности, распространения и бремени болезней. PLoS Negl Trop Dis. 2009; 3 (8): e412. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 5. Лейкун Дж. Гельминтозная инфекция и Schistosoma mansoni передаются через почву у школьников из района Чилга, Северо-Западная Эфиопия.Эфиопская наука о здоровье. 2001; 11: 79–87. [Google Scholar] 6. Legesse M, Erko B. Распространенность кишечных паразитов среди школьников в сельской местности недалеко от юго-востока озера Лангано, Эфиопия. Эфиоп J Health Dev. 2004. 18 (2): 116–120. [Google Scholar] 7. Текесте З., Белихун И., Гебрехивот А., Могес Б., Воркине М., Аялев Г., Мандефро М., Кассу А. Эпидемиология кишечного шистосомоза и гельминтозов, передаваемых через почву, среди детей младшего школьного возраста в Горгоре, Северо-Западная Эфиопия. Азиатский Pac J Trop Dis.2004. 3 (1): 61–64. [Google Scholar] 8. Абера Б., Алем Г., Йимер М., Херрадор З. Эпидемиология гельминтов, передаваемых через почву, Schistosoma mansoni и значения гематокрита среди школьников в Эфиопии. J Infect Dev Ctries. 2013. 7 (3): 253–260. [PubMed] [Google Scholar] 9. Тефера Э., Мохаммед Дж., Митику Х. Кишечные глистные инфекции среди учащихся начальной школы города Бабил, Восточная Эфиопия. Пан Афр Мед Дж. 2015; 20:50. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 10. Амор А., Родригес Э., Саугар Дж. М., Арройо А., Лопес-Кинтана Б., Абера Б., Йимер М., Исенгау Е., Зевди Д., Айехубизу З., Хайлу Т., Мулу М., Эхазу А., Кролевеки А. Дж., Апарисио П., Херрадор З, Анегагри М., Бенито А.Высокая распространенность Strongyloides stercoralis среди детей школьного возраста в сельских высокогорных районах на северо-западе Эфиопии: роль интенсивного диагностического обследования. Вектор паразитов. 2016; 9: 617. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11. Ohaeri CC, Orji NB. Кишечные паразиты среди студентов бакалавриата Сельскохозяйственного университета Майкла Окпара, штат Умудике Абиа, Нигерия. World Appl Sci J. 2013; 25 (8): 1171–1173. [Google Scholar] 12. Джирананкул В., Афиджирават В., Мунгхин М., Хоситнитикул Р., Рангсин Р., Трауб Р. Дж., Пиярадж П., Нааглор Т., Таамасри П., Лилауова С.Заболеваемость и факторы риска заражения анкилостомами в сельской местности Центрального Таиланда. Am J Trop Med Hyg. 2011. 84 (4): 594–598. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Обиамуйве Б.А., Нморси. Человеческие желудочно-кишечные паразиты в штате Бендель, Нигерия. Нигерийский журнал Parasitol. 1990; 32: 177–183. [PubMed] [Google Scholar] 14. Nokes C, Купер ES, Робинсон BA, Budy DAP. Инфекция геогельминтов и академическая оценка у детей Ямайки. Trans Roy Soc Trop Med Hyg. 1991; 85: 272–273. [PubMed] [Google Scholar] 15.Albonico M, Stoltzfus RJ, Savioli L, Tielsch JM, Chwaya HM, Ercole E, Cancrini G. Эпидемиологические данные о различном влиянии анкилостомы, Ancylostoma duodenale или Necator americanus на статус железа у детей. Int J pidemiol. 1998. 27 (3): 530–537. [PubMed] [Google Scholar] 16. Hughes RJ, Sharp DS, Hughes MC, Akau’ola S, Heinsbroek P, Velaydudhan R. Влияние окружающей среды на гельминтоз и состояние питания среди школьников из тихоокеанских стран. Int Jour Environ Health Res.2004. 14: 163–177. [PubMed] [Google Scholar] 17. Hossain M, Bhuiyan JU. Анкилостомоз: запущенное тропическое заболевание человечества. Журнал перспективных ветеринарных исследований и исследований на животных. 2016; 3 (4): 297–320. [Google Scholar] 18. Валана В., Аиду ЭНК, Тай СКК. Распространенность анкилостомоза: ретроспективное исследование в Кумаси. Азиатский Пак Джей Троп Биомед. 2014; 4 (1): S158 – S161. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Дебалке С., Ворку А., Джахур Н., Меконнен З. Гельминты и связанные с ними факторы передаются через почву среди школьников в государственной и частной начальной школе в городе Джимма, на юго-западе Эфиопии.Эфиоп J Health Sci. 2013; 23: 3. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 20. Shiferaw MB, Mengistu AD. Гельминтоз: анкилостомоз остается проблемой общественного здравоохранения в округе Дера, Южный Гондар, Эфиопия. PLoS One. 2015; 10 (12): e0144588. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Рис Х., Клоуз П., Кроидл И., Ковуор Д. О., Нсоджо А., Мангу С., Шуле С. А., Мансманн У., Гельдмахер К., Мхина С., Мабоко Л., Хельшер М., Саатхофф Э. Инфекция анкилостомов и факторы окружающей среды в регионе Мбея, Танзания: Поперечное популяционное исследование.PLoS Negl Trop Dis. 2013; 7 (9): e2408. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 22. Верма Р., Чавла С., Кханна П., Сингх С., Сингх А., Диксит П., Шайни М., Сингх Б. Детерминанты заражения нематодами среди школьников: кросс-секционное исследование. CIB Tech J Microbiol. 2015; 4 (2): 1–5. [Google Scholar] 24. Мохамед М.А., Сиддиг Е.Е., Элаагип А.Х., Эдрис АММ, Наср А.А. Паразитарное заражение свежих овощей, продаваемых на центральных рынках в штате Хартум, Судан. Анн Клин Микробиол Антимикроб. 2016; 15:17. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 25.Erosie L, Merid Y, Ashiko A, Ayine M, Balihu A, Muzeyin S, Teklemariam S, Sorsa S. Распространенность анкилостомической инфекции и статус гемоглобина среди сельских детей начальной школы в Южной Эфиопии. Эфиоп J Health Dev. 2002. 16 (1): 113–115. [Google Scholar] 26. Вивас А., Гелайе Б., Нигусу Абосет Н., Кумие А., Берхане Й., Уильямс М.А. Знания, отношение и практика (ЗОП) гигиены среди школьников в Анголеле, Эфиопия. J Prev Med Hyg. 2010 июн; 51 (2): 73–79. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 27.Кетема Х., Бируксев А., Меконнен З. Распространенность инфекции Necator americanus и факторы риска среди детей школьного возраста в районе Мираб Абая, Южная Эфиопия. Азиатский Pac J Trop Dis. 2015; 5 (5): 363–368. [Google Scholar] 28. Гедефау М., Амсалу Й., Тарекегн М., Пробудившийся В. Возможности и проблемы использования уборных в сельских общинах округа Авабель, Северо-Западная Эфиопия. Откройте J Epidemiol. 2015; 5: 98–106. [Google Scholar] 29. Джирананкул В., Афиджирават В., Мунгхин М., Хоситнитикул Р., Рангсин Р., Трауб Р. Дж., Пиярадж П., Нааглор Т., Таамасри П., Лилауова С.Заболеваемость и факторы риска заражения анкилостомами в сельской местности Центрального Таиланда. Am J Trop Med Hyg. 2011. 84 (4): 594–598. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 30. Ndyomugyenyi R, Kabatereine N, Olsen A, Magnussen P. Эффективность ивермектина и альбендазола отдельно и в комбинации для лечения гельминтов, передающихся через почву, при беременности и побочных эффектах: рандомизированное открытое контролируемое исследование вмешательства в районе Масинди, западная Уганда. Am J Trop Med Hyg. 2008. 79 (6): 856–863.[PubMed] [Google Scholar]

    (PDF) Детерминанты и последствия межвидовых вариаций размеров тела у тетрафиллидовых ленточных червей

    768 Oecologia (2009) 161: 759–769

    123

    млекопитающих во всем мире: комплексная морфологическая оценка

    анализ. J Parasitol. doi: 10.1645 / GE-372R

    Agusti C, Aznar FJ, Olson PD, Littlewood DTJ, Kostadinova A, Raga

    JA (2005b) Морфологическая и молекулярная характеристика

    тетрафиллидных мероцеркоидов (Platyhelminthes

    0002). (Stenella coeruleoalba) с запада Mediterra-

    nean.Паразитология. doi: 10.1017 / S0031182004006754

    Anderson DR (2008) Вывод на основе модели в науках о жизни: учебник

    на основе доказательств. Спрингер, Нью-Йорк

    Арнеберг П., Скорпинг А., Рид А.Ф. (1998) Обилие паразитов, размер тела

    , истории жизни и правило энергетической эквивалентности. Am Nat.

    doi: 10.1086 / 286136

    Бернал Д., Донли Дж. М., Шедвик Р. Э., Сайм Д. А. (2005) Маммоподобный

    Плавание с мышечной энергией в холодной акуле. Природа.doi:

    10.1038 / nature04007

    Blackburn TM, Gaston KJ (1997) Критическая оценка формы

    межвидовой связи между численностью и размером тела у

    животных. J Anim Ecol 66: 233–249

    Blackburn TM, Gaston KJ, Loder N (1999) Географические градиенты в размере тела

    : разъяснение правила Бергмана. Divers Distrib.

    doi: 10.1046 / j.1472-4642.1999.00046.x

    Brickle P, Olson PD, Littlewood DTJ, Bishop A, Arkhipkin AI (2001)

    Паразиты Loligo gahi, с филогенетической идентификацией

    их личинок цестод.Может J Zool. DOI: 10.1139 / cjz-79-12-

    2289

    Brown JH (2005) Макроэкология. University of Chicago Press,

    Чикаго

    Бернем К.П., Андерсон Д.Р. (2002) Выбор модели и многомодельный вывод

    : практический теоретико-информационный подход. Springer,

    Нью-Йорк

    Буш А.О., Лотц Дж. М. (2000) Экология «скученности». J Parasitol.

    doi: 10.1645 / 0022-3395 (2000) 086 [0212: TEOC] 2.0.CO; 2

    Bush AO, LaVerty KD, Lotz JM, Shostak AW (1997) Parasitology

    соответствует экологии на собственных условиях: Margolis и другие.пересмотрел. J Paras-

    itol 83: 575–583

    Caira JN, Jensen K (2001) Исследование коэволюционных

    взаимоотношений между онхоботриидными ленточными червями и их хозяевами-ветвями elasmo-

    . Int J Parasitol. DOI: 10.1016 / S0020-7519 (01) 00206-

    5

    Caira JN, Reyda F (2005) Eucestoda (настоящие ленточные черви). В: Rohde K

    (ред.) Морская паразитология. CSIRO, Collingwood, pp 92–104

    Caira JN, Healy CJ (2008) Order Tetraphyllidea Carus, 1863.In: Caira

    JN, Jensen K, Healy CJ (eds) Глобальная база данных цестод (линия

    ). www.cestodedatabase.org. По состоянию на апрель 2008 г.

    Caira JN, Jensen K, Healy CJ (2001) Взаимоотношения между тетра-

    филлидовых и леканицефалидных цестод. В: Littlewood T,

    Bray RA (eds) Взаимоотношения Platyhelminthes. Тейлор

    и Фрэнсис, Лондон, стр 135–158

    Карбон С., РоуклиВе Дж. М., Коулишоу Г., Исаак Нью-Джерси (2007) Масштабирование

    изобилия потребителей и их ресурсов: последствия для

    правила эквивалентности энергии.Am Nat. DOI: 10.1086 / 519858

    Carey FG, Teal JM (1969) Мако и порбигль: акулы с теплым телом.

    Comp Biochem Physiol 28: 199–204

    Compagno LJV (1999) Систематика и формы тела. В: Hamlett WC

    (ред.) Акулы, скаты и скаты: биология гибиножаберных Wshes.

    John Hopkins University Press, Baltimore, pp 1–42

    Compagno LJV, Dando M, Fowler S (2005) Акулы мира.

    Princeton University Press, Princeton

    Damuth J (1981) Плотность популяции и размер тела млекопитающих.

    Природа. DOI: 10.1038 / 2

    Анкилостомоз
    Переменная Всего Зараженные
    [N,%]
    Незараженные
    [N,%]
    AOR [95% CI]
    Сырое питание Да 183 41 (22.4) 142 (77,6) 0,21 (0,06–0,70) 0,01
    Овощной 150 8 (5,3) 142 (94127) Нет 52 33 (63,5) 19 (36,5) 21,14 (7,04–63,5) 0,00
    Изнашиваемый башмак Да 281 265 (94.3) 1
    Как часто
    изнашивает башмак?
    Иногда 199 41 (20,6) 158 (79,4) 0,30 (0,09–0,96) 0,04
    Всегда 134 8 (6,0) 126 (6,0) 9011 1
    Туалет
    использование
    Иногда 191 7 (3,7) 184 (96.3) 0,20 (0,06–0,64) 0,01
    Всегда 142 42 (29,6) 100 (70,4) стирка 1



    Иногда 82 34 (41,5) 48 (58,5) 0,07 (0,02–0,19) 0,00
    Всегда 251 15 (6,0) 1
    Дегельминтизация Нет 150 34 (22.7) 116 (77,3) 2,93 (1,03–8,30) 0,04
    Да 183 15 (8,2) 168 (91,8) 1
    a0

    Дамут Дж. (1987) Межвидовая аллометрия плотности популяции млекопитающих

    млекопитающих и других животных: независимость от массы тела и потребление энергии популяцией

    . Biol J Linn Soc. DOI: 10.1111 / j.1095-8312.

    1987.tb01990.x

    Enquist BJ, Brown JH, West GB (1998) Аллометрическое масштабирование завода

    Энергетика и плотность населения. Природа. DOI: 10.1038 / 25977

    Friggens MM, Brow n JH (2005) Разделение ниши в сообществе цестод

    сообществ двух эластожаберных ветвей.Ойкос. DOI: 10.1111 / j.0030-1299.

    2005.13275.x

    Froese R, Pauly D (eds) (2008) Fishbase. Электронная публикация World Wide Web

    . www.fishbase.org. версия (04/2008)

    Джордж-Насименто М., Муньос Дж., Марке П.А., Пулен Р. (2004) Тест-

    по правилу энергетической эквивалентности с эндопаразитами гельминтов

    позвоночных. Ecol Lett. doi: 10.1111 / j.1461-0248.2004.00609.x

    Hausdorf B (2007) Межвидовая взаимосвязь между численностью

    и размером тела в сообществах наземных улиток Центральной Европы.Базовый

    Прил. doi: 10.1016 / j.baae.2006.03.005

    Heins DC, Baker JA, Martin HC (2002) «эффект скопления» в цестоде Schistocephalus solidus

    : эффекты, зависящие от плотности, на размер и инфекционность плероцеркоидов

    . J Parasitol. DOI: 10.1645 / 0022-

    3395 (2002) 088 [0302: TCEITC] 2.0.CO; 2

    Holmgren S, Nilsson S (1999) Пищеварительная система. В: Hamlett WC (ed)

    Акулы, скаты и скаты: биология гибиножаберных Wshes. John

    Hopkins University Press, Baltimore, pp 144–173

    Kohler NE, Casey JG, Turner PA (1998) Совместная программа мечения акул NMFS

    , 1962–93: атлас меток акул и повторная поимка

    данных.Mar Fish Rev 60 (2): 1–87

    Luque JL, Poulin R (2004) Использование Wsh в качестве промежуточных хозяев паразитами zoan meta

    : сравнительный анализ. Acta Parasitol 49: 353–361

    Luque JL, Poulin R (2008) Связь экологии с разнообразием паразитов в

    Neotropical Wshes. J Fish Biol. DOI: 10.1111 / j.1095-8649.

    2007.01695.x

    Май РМ (1992) Сколько видов населяет Землю? Sci Am 267: 42–

    48

    Morand S, Legendre P, Gardner SL, Hugot J-P (1996) Размер тела evo-

    люция оксиуридных (нематод) паразитов: роль хозяев.Oecolo-

    gia 107: 274–282

    Musick JA, Harbin MM, Compagno LJV (2004) Historical zoogeogra-

    phy of the Selachii. В: Carrier JC, Musick JA, Heithaus MR (eds)

    Биология акул и их родственников. CRC, Boca Raton, pp 33–78

    Pascual S, Resero M, Adrias C, Guerra A (1995) Гельминтофауна

    короткозубых кальмаров Ilex Codetti (Cephalopoda: Ommastrephidae)

    на северо-западе Испании. Dis Aquat Organ. doi: 10.3354 / dao023071

    Peters RH (1983) Экологические последствия размера тела.Cambridge

    University Press, Cambridge

    Poulin R (1995a) Размер кладки и размер яиц у свободноживущих и паразитических

    веслоногих рачков: сравнительный анализ. Evolution 49: 325–336

    Poulin R (1995b) Эволюционное влияние на размер тела у свободноживущих

    и паразитических изопод. Biol J Linn Soc. DOI: 10.1111 / j.1095-

    8312.1995.tb01035.x

    Poulin R (1996a) Эволюция стратегий жизненного цикла паразитических

    животных. Adv Parasitol 37: 107–134

    Poulin R (1996b) Эволюция размеров тела у моногеней: роль размера и широты хозяина в

    .Может ли J Zool 74: 726–732

    Poulin R (1997) Производство яиц у взрослых рематод: адаптация или ограничение штамма

    ? Паразитология. doi: 10.1017 / S0031182096008372

    Poulin R (1999) Размер тела и численность среди видов паразитов: положительные

    отношения? Экография. DOI: 10.1111 / j.1600-0587.1999.

    tb00499.x

    Poulin R (2007) Эволюционная экология паразитов. Princeton Univer-

    sity Press, Princeton

    Poulin R, Justine J-L (2008) Связывание распределения численности видов

    и размеров тела в моногенных сообществах.Parasitol Res.

    doi: 10.1007 / s00436-008-0953-0

    Poulin R, Rohde K (1997) Сравнение богатства многопаразитов

    сообществ эктопаразитов морских Wshes: контроль филогении хозяина

    . Oecologia. doi: 10.1007 / s004420050160

    Прочтите CP (1951) «Эффект скопления» при инфекциях ленточных червей.

    J Паразитол. DOI: 10,1645 / 0022-3395 (2000) 086 [0206: TCEITI] 2.0.

    CO; 2

    Roberts LS (2000) Возвращение к эффекту скучивания. J Parasitol.

    doi: 10.1645 / 0022-3395 (2000) 086 [0209: TCER] 2.0.CO; 2

    Негенетические детерминанты компетентности комаров в отношении малярийных паразитов

    Abstract

    Понимание того, как взаимодействуют переносчики-комары и паразиты малярии, представляет фундаментальный интерес, а также открывает новые перспективы для борьбы с болезнями. Известно, что как генетический, так и экологический контекст влияют на способность комаров поддерживать развитие и передачу малярии, то есть на способность переносчиков.Хотя роль окружающей среды была признана давно, большая часть работ была сосредоточена на генетических эффектах хозяина и паразитов. Однако в последние несколько лет наблюдается всплеск исследований, показывающих большое разнообразие способов, которыми негенетические факторы могут мешать взаимодействиям mosquito-

    Plasmodium . Здесь мы рассматриваем текущие доказательства таких опосредованных окружающей средой эффектов, включая температуру окружающей среды, питание комаров, микробную флору кишечника и историю инфекций, и выявляем дополнительные факторы, которые ранее не учитывались при взаимодействиях mosquito- Plasmodium .Мы также обсуждаем эпидемиологические последствия и эволюционные последствия для иммунитета к переносчикам и стратегий передачи паразитов. Наконец, мы предлагаем направления для дальнейших исследований и утверждаем, что более глубокое знание негенетических влияний на взаимодействия москита- Plasmodium могло бы помочь в реализации традиционных мер борьбы с малярией и внести вклад в разработку новых стратегий.

    Образец цитирования: Lefèvre T, Vantaux A, Dabiré KR, Mouline K, Cohuet A (2013) Негенетические детерминанты компетентности комаров в отношении малярийных паразитов.PLoS Pathog 9 (6): e1003365. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003365

    Редактор: Четан Э. Читнис, Международный центр генной инженерии и биотехнологии, Индия

    Опубликовано: 20 июня 2013 г.

    Авторские права: © 2013 Lefèvre et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Финансирование: Эта работа была поддержана грантом ANR 11-PDOC-006-01 для TL и Седьмой рамочной программой Европейского сообщества (FP7 / 2007–2013) для AC в соответствии с соглашениями о грантах № 242095 и № 223736. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

    Введение

    Несмотря на продолжающиеся усилия по борьбе с малярией, малярия остается одним из самых разрушительных инфекционных заболеваний во всем мире.Развитие устойчивых к инсектицидам комаров-переносчиков и устойчивых к лекарствам паразитов в сочетании с отсутствием в настоящее время адекватных вакцин побудило научное сообщество разработать новые стратегии борьбы с малярией. Один из наиболее многообещающих подходов нацелен на комаров-переносчиков и препятствует передаче паразитов [1] — [3]. В рамках этих усилий возникает важный вопрос: что определяет способность переносчиков малярии переносчиками малярии (, вставка 1, )? Другими словами, почему одни комары способны противостоять инфекции, в то время как другие остаются восприимчивыми, обеспечивая тем самым дальнейшую передачу болезни?

    Коробка 1.Определение и измерение компетентности переносчиков малярии москитных паразитов

    Успешная передача малярийных паразитов от человека к человеку требует ряда сложных преобразований в развитии комаров-переносчиков. Вскоре после приема инфекционной кровяной муки Plasmodium мужские и женские гаметы сливаются, образуя зиготы в средней кишке комара. Затем зиготы развиваются в подвижные оокинеты, которые проникают через стенку кишечника и образуют ооцисты. Там ооцисты претерпевают несколько митотических делений, в результате чего образуются сотни спорозоитов, которые высвобождаются в гемоцеол через 8–22 дня после заражения (в зависимости от Plasmodium spp.) . На этом этапе паразиты мигрируют в слюнные железы, из которых они могут быть введены другому позвоночному хозяину во время последующего приема пищи кровью.

    Каждый шаг этого цикла имеет решающее значение, и паразит обычно сильно сокращается в размере во время этих переходов. Из нескольких сотен видов комаров во всем мире известно, что только около 60 компетентны в отношении малярийных паразитов, то есть они способствуют завершению каждой стадии развития паразита, от слияния гамет и образования ооцист до инвазии слюнных желез и передачи спорозоитов. .Компетенция переносчиков представляет собой комбинированную оценку инфекционности паразита и восприимчивости к переносчикам и, таким образом, охватывает как механизмы устойчивости хозяина, используемые для борьбы с инфекцией, так и механизмы инфицирования паразитов, используемые для преодоления защиты хозяина. Степень переносимости малярии сильно различается у разных видов комаров и даже у людей одного вида или линии.

    Компетенция вектора может быть измерена в лаборатории с помощью ряда экспериментальных тестов кормления.Комары могут подвергаться воздействию заданной дозы паразитарных гаметоцитов во время кормления кровью инфицированных позвоночных-хозяев (анализ прямого кормления) или через мембрану, содержащую либо культивированных паразитов (стандартные анализы мембранного кормления), либо кровь, взятую у естественно инфицированных пациентов (прямая мембрана). Кормление анализов). Каждый из этих подходов измеряет характеристики, связанные с инфекцией, которые характеризуют успех или неудачу инфекции и, следовательно, компетентность переносчиков. Эти черты:

    1. Распространенность паразитов .Это доля москитов, подвергшихся воздействию малярии, у которых есть хотя бы одна ооциста в средней кишке (преобладание ооцист) или спорозоит в слюнной железе (преобладание спорозоитов). Низкая распространенность указывает на высокую противоинфекционную (т. Е. Качественную) устойчивость паразита к заселению комаров и / или низкую инфекционность паразита.
    2. Интенсивность паразитов . Это количество ооцист в кишечнике или количество спорозоитов в слюнных железах инфицированных комаров.Низкая интенсивность указывает на высокую сопротивляемость росту (т.е. количественную) устойчивость к размножению паразитов у комаров и / или низкую способность к развитию паразитов.

    Принимая во внимание эти определения, существует множество негенетических факторов, которые могут влиять на компетентность переносчиков посредством положительного или отрицательного воздействия на инфекционность, развитие и вирулентность паразитов, а также на устойчивость и толерантность к комарам (, рис. 1, ).

    Рис. 1. Разнообразие способов, которыми негенетические факторы могут влиять на способность комаров бороться с малярийными паразитами.

    Чистый эффект этих факторов на способность переносчиков будет зависеть от того, как они влияют как на способность паразита закрепляться и развиваться в насекомом-хозяине, так и на способность комара сопротивляться и / или переносить инфекцию. Все изображения загружены из Википедии, за исключением фотографии позвоночных-хозяев (предоставлено Тьерри Лефевр) и комара (предоставлено Нилом Рахолой).

    https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003365.g001

    Чтобы ответить на этот вопрос, в последние годы были предприняты интенсивные генетические, молекулярные, клеточные и физиологические исследования для изучения иммунного ответа комаров на малярию.Эти исследования выявили ряд механизмов, участвующих в предотвращении или ограничении развития паразитов, включая Toll, IMD, Jak-Stat и комплемент-подобные пути [4] — [10]. Такие результаты пробудили интерес к борьбе с малярией за счет образования резистентных трансгенных комаров [11], [12].

    Хотя эти исследования позволили получить значительный объем знаний о генетических и молекулярных механизмах, лежащих в основе компетентности комаров в отношении малярийных паразитов, они в основном использовали неестественные лабораторные ассоциации паразитов и хозяев, которые могут плохо отражать то, что происходит в естественных экосистемах [13] — [15 ].Принимая во внимание эту критику, недавние исследования были сосредоточены на естественных взаимодействиях переносчиков и паразитов и подтвердили, что генетика комаров играет важную роль в определении компетентности переносчиков [16], [17]. Эти исследования также выявили сложные генетические взаимодействия вектор-паразит, при которых исход инфекции зависит от конкретных взаимодействий между генотипами переносчиков и паразитов (см. Глоссарий , файл S1 ) [16], [18], [19].

    В дополнение к генетическим факторам, быстро развивающаяся область экологической иммунологии [20] демонстрирует, что абиотические и биотические факторы также могут играть решающую роль в модуляции взаимодействий паразит-хозяин [21], [22].Несмотря на медицинскую значимость и долгое время признания влияния температуры на развитие Plasmodium [23], [24], экологическая иммунология взаимодействий mosquito- Plasmodium все еще находится в зачаточном состоянии [14].

    Основная цель этого обзора — дать современную оценку различных способов, которыми эти негенетические факторы влияют на способность переносчиков малярийных паразитов. Мы показываем, что такие факторы, как температура, диета личинок и взрослых комаров и микробная кишечная флора, могут играть важную роль, сравнимую с генотипами хозяина и паразита, в формировании компетентности комаров.Мы также подчеркиваем, что негенетически обусловленная компетентность может иметь важные эволюционные и эпидемиологические последствия. Наконец, мы утверждаем, что более глубокое понимание взаимодействия между комарами, малярийными паразитами, которые они переносят, и окружающей средой, необходимо для разработки мер контроля, эффективных в условиях реального мира.

    Негенетические факторы влияния на компетентность комаров

    В естественной среде обитания комары постоянно сталкиваются с различными биотическими и абиотическими нагрузками, включая ограничение ресурсов, конкуренцию, хищничество, колебания температуры и пестициды, которые влияют на их воспроизводство и выживание.Каждый из этих факторов может также влиять на их компетенцию как векторов Plasmodium ( Рисунок 1 ). Большинство исследований на сегодняшний день сосредоточено на влиянии температуры и микробной флоры кишечника, но другие факторы, такие как диета личинок и взрослых особей, история инфекции и окружающая среда матери, также могут играть роль в определении исхода инфекции комарами. Однако в подавляющем большинстве случаев основные механизмы, посредством которых эти негенетические факторы влияют на компетенцию переносчиков (прямое воздействие на паразита по сравнению с косвенным воздействием через иммунную защиту комаров), остаются неуловимыми.Негенетические факторы, скорее всего, влияют на компетентность через комплексное опосредование иммунитета комаров и развития Plasmodium .

    Температура

    Комары — это небольшие экзотермические насекомые, жизненные особенности которых, включая развитие личинок, выживаемость взрослых особей и иммунный ответ, сильно зависят от температуры окружающей среды [25] — [28]. Точно так же известно, что развитие многих болезнетворных микроорганизмов, переносимых комарами, чувствительно к температуре [27]. В частности, обширные ранние исследования показали, что допустимые температуры для спорогонного развития Plasmodium находятся в диапазоне от 16 ° C до 35 ° C ( Таблица 1 ) [23], [24], [29] — [31].Эти ранние исследования также показали, что паразиты развиваются быстрее при более высоких температурах, предполагая, что передача малярии будет более интенсивной в более теплых условиях [24], [31] — [34]. Однако эксперименты, проведенные в допустимом температурном диапазоне, показывают, что, хотя комары действительно становятся заразными быстрее при повышении температуры, их способность снижаться (около 30 ° C в Anopheles gambiae-Plasmodium falciparum [35], 21–24 ° C в ). Anopheles quadrimaculatus / Anopheles stephensi-Plasmodium berghei [34] и 24–26 ° C в An.stephensi-Plasmodium yoelli [36]).

    Эти результаты предполагают, что передача малярии может уменьшаться, а не расти при более высоких температурах. Однако к их толкованию следует относиться с осторожностью, поскольку комары не испытывают постоянных температурных режимов в природе. Paaijmans et al. [37] показали, что An. stephensi компетенция для Plasmodium chabaudi может подвергаться сложному воздействию колебаний температуры в зависимости от средней температуры, около которой происходят колебания.В частности, по сравнению с эквивалентной постоянной температурой, компетентность повышается, когда суточные колебания происходят около низких средних температур, но уменьшаются с колебаниями около высоких средних температур [37]. Кроме того, комары способны сглаживать экстремальные температуры посредством поведенческой терморегуляции. Стандартные оценки температуры наружного воздуха, использованные в описанных выше экспериментах, могут поэтому ошибочно отражать условия, в которых комары и паразиты живут в полевых условиях [38].

    Диета

    Наличие и качество пищевых продуктов неоднократно показывали, что они являются важным фактором окружающей среды, влияющим на иммунитет и инфекцию насекомых-хозяев [39]. Влияние диеты на инфекции может быть опосредовано либо токсичными вторичными метаболитами [40], либо различиями в питательной ценности, которые, в свою очередь, влияют на иммунитет хозяина [41]. Исследования влияния диеты на взаимодействие комаров- Plasmodium отстают, но некоторые результаты показывают, что питание может влиять на компетентность комаров [28], [42] — [46].Однако эти исследования оказалось трудно согласовать, поскольку сообщалось, что компетентность и иммунный ответ лишенных пищи личинок или взрослых комаров были выше в некоторых случаях [28], [43], [46], но ниже в других [42], [44] ( Таблица 1 ). Остается неясным, связаны ли эти расхождения с видоспецифичными различиями или с типом и степенью пищевого стресса.

    Взаимосвязь между питанием, иммунитетом и инфекцией сложна [47]. Например, питание может косвенно влиять на развитие Plasmodium , опосредуя изменения в микробиоте кишечника, такие как предполагаемые для других взаимодействий паразит-хозяин (, рис. 2, , [47]).Кроме того, комары могут получить доступ к большому количеству питательных ресурсов, которые затем будут распределяться по функциональным признакам, таким как иммунные функции. До сих пор большинство исследований было сосредоточено на количественных, а не на качественных изменениях рациона, и использовались ненатуральные источники пищи (например, растворы глюкозы или кровь от неподходящих позвоночных-хозяев). Это прискорбно, поскольку самки комаров охотно глотают углеводы из широкого спектра видов растений в дополнение к еде с кровью [48]. Еще предстоит выяснить, влияет ли естественное разнообразие растений на способность комаров переносить малярию через токсичные вторичные метаболиты и / или питательные свойства нектара.

    Рисунок 2. Комплексное экологическое посредничество компетентности комаров в отношении малярийных паразитов.

    Факторы окружающей среды, такие как температура и диета, могут влиять на развитие паразитов, физиологическое состояние и иммунный ответ комаров, которые могут взаимодействовать с микробными симбионтами и другими сопутствующими паразитами. Поскольку физиологические обратные связи модулируют поведение, у москита существует возможность приспособить некоторые условия окружающей среды (диета, температура), чтобы оптимизировать свои микробные взаимодействия и иммунную функцию, а также повысить свою сопротивляемость инфекциям.В качестве альтернативы малярийные паразиты могут манипулировать поведением хозяина (например, кормлением, температурным режимом) в своих интересах. Изменено из Ponton et al. [47].

    https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1003365.g002

    Микробиота кишечника, история инфекций и иммунная прайминг

    В последнее время возобновился интерес к роли кишечных кишечных сообществ комаров в компетентности переносчиков [49]. Обилие и разнообразие бактерий, по-видимому, играют роль, при этом высокая бактериальная нагрузка и специфические бактериальные изоляты связаны с нарушением раннего развития Plasmodium [50] — [52] ( Таблица 1 ).Например, Cirimotich et al. [51] идентифицировали энтеробактерии, выделенные из диких комаров, которые придают P. falciparum полную рефрактерность за счет продукции реактивных молекул кислорода. Однако механизмы, ответственные за опосредованное бактериями снижение компетентности переносчиков, также могут быть косвенными. В этом случае бактерии, по-видимому, препятствуют развитию малярии, активируя иммунную систему комаров [50], [52] ( Рисунок 2 ).

    Стоит отметить, что наличие и обилие кишечных бактерий не всегда связано со снижением компетентности.Например, недавнее исследование показало, что численность энтеробактерий была выше у собранных в полевых условиях комаров, инфицированных P. falciparum , чем у их неинфицированных собратьев, что позволяет предположить, что некоторые бактерии могут способствовать развитию паразитов [53]. Однако было неясно, действительно ли эти энтеробактерии влияли на развитие паразитов, или их повышенная численность была простым следствием присутствия Plasmodium или общей уязвимости комаров как для энтеробактерий, так и для паразитов малярии.В целом, наше понимание взаимодействий микробиота-москит- Plasmodium по-прежнему ограничено, и необходимы дополнительные исследования, чтобы определить, в какой степени естественная резидентная микробная флора переносчиков способствует распространению малярийных паразитов.

    Помимо кишечных бактерий, у комаров обитает широкий спектр организмов, которые также могут влиять на развитие Plasmodium . Например, недавние исследования показывают, что микроспоридийные, грибковые и филяриальные паразиты могут уменьшить количество сопутствующих инфекций Plasmodium [54] — [56] (, таблица 1, ).Сообщалось также о совместном заражении несколькими видами малярийных паразитов [57], но последствия для переносчиков инфекции в значительной степени неизвестны. В одном эксперименте одновременное заражение двумя видами птичьего малярийного паразита привело к снижению компетентности в отношении одного из видов сопутствующих паразитов, возможно, из-за прямого межвидового негативного вмешательства во время оплодотворения [58].

    Последовательные инфекции, когда уже инфицированный комар подвергается воздействию второго штамма или вида малярийного паразита, могут быть частыми в естественных условиях и могут повлиять на способность переносчиков [57].Например, комары, впервые инфицированные малярией, демонстрируют повышенный иммунитет к последующему аналогичному заражению паразитами [59]. Интересно, что результирующее снижение вторичной инфекции наблюдалось только у комаров, являющихся носителями бактерий средней кишки, а не у асептических аналогов, что позволяет предположить, что иммуностимуляция комаров опосредована кишечной микробиотой [59].

    Наконец, предыдущее воздействие паразитов может не только обеспечить длительную защиту внутри человека, но также может распространиться на следующее поколение.Доказательства такого межпоколенческого иммунного прайминга становятся обычным явлением в области экологического иммунитета насекомых [20], однако нам известно только о двух исследованиях, в которых эта возможность рассматривалась конкретно на комарах. В первом исследовании не было обнаружено поддержки иммунного прайминга между поколениями: самки Aedes aegypti от матерей, инокулированные чужеродными организмами, имели такую ​​же реакцию меланизации, как и самки от не подвергшихся сомнению контрольных матерей [60]. Однако второе исследование показало, что самка An.gambiae от матерей, инфицированных микроспоридийным паразитом, продемонстрировала более низкую компетентность в отношении P. berghei , чем самки от неинфицированных матерей [61]. Таким образом, микроспоридийные паразиты могут ограничивать заражение малярией не только у индивидуума [56], но и у его потомства [61]. Эти результаты предполагают, что родительская среда может иметь важные последствия для способности потомства заражаться малярийными паразитами. Однако необходимы дополнительные исследования, чтобы проверить, в какой степени такие родительские эффекты могут быть распространены на целый ряд комбинаций москит- Plasmodium и родительских условий окружающей среды.

    Внутренние факторы комаров

    В полевых условиях популяции комаров состоят из особей, различающихся не только генетическим происхождением, но и такими факторами, как возраст, репродуктивный статус и размер тела. Эта неоднородность может иметь важные последствия для компетентности переносчиков. Например, иммунная система хозяина может ослабевать с возрастом, что приводит к повышенной восприимчивости к патогенам. Такое иммунное старение описано у широкого круга насекомых, включая Drosophila , сверчков, мух-скорпионов и комаров Ae.aegypti [62], [63]. Что касается переносчиков малярии, то раннее исследование показало, что способность An. gambiae для меланизации чужеродных организмов было снижено у старых самок [64], недавние исследования не выявили влияния возраста на An. gambiae для грибов [65] или P. falciparum [44].

    С точки зрения паразитов, хотя старые комары могут быть более терпеливыми хозяевами, они представляют собой серьезную проблему для передачи. Поскольку большинство комаров не живут достаточно долго, чтобы обеспечить завершение развития паразитов, ожидается, что старые переносчики уменьшат возможности передачи в будущем [66].Хотя некоторые исследования предполагают, что такое ограничение по времени позволяет отбирать паразитов с более короткой продолжительностью развития (например, [67]), в настоящее время неизвестно, могут ли малярийные паразиты ускорить свой спорогонический цикл, когда их передача затруднена из-за неминуемой гибели их переносчика. Такие зависимые от состояния стратегии развития, описанные у других видов паразитов [68], [69] и у паразитов малярии на стадии крови [70], заслуживают рассмотрения у инфицированных комаров.

    Несмотря на значительные различия в размерах тела в популяциях комаров, их последствия для переносчиков инфекции все еще плохо документированы.В целом часто предполагается, что крупные животные-хозяева несут меньше паразитов, чем мелкие, из-за более высоких вложений в иммунологическую защиту [71]. Напротив, когда развитие паразитов выигрывает от больших питательных ресурсов, крупные хозяева могут страдать от высоких уровней инфекции [72]. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы выявить относительную важность этих двух противоположных процессов в переносчиках малярии, результаты которых противоречивы. Например, одно исследование показало, что меланизация посторонних предметов была наиболее сильной у крупных женщин [28], в то время как другие обнаружили, что более мелкие особи с меньшей вероятностью несли большое количество ооцист, возможно, из-за разницы в размере крови во время инфекции [73], [74].

    Другие недооцененные биотические и абиотические факторы давления

    Накапливающиеся данные показывают, что взаимодействия видов, такие как конкуренция и хищничество, могут косвенно изменять взаимодействия с другими членами сообщества, включая паразитов (косвенный эффект, опосредованный признаками, [75]). Например, присутствие хищников может вызвать поведенческую защиту жертв, что приведет к изменению восприимчивости к паразитам (например, [76], [77]). На сегодняшний день нет исследований, посвященных влиянию этих экологических параметров на взаимодействие комаров-переносчиков инфекции, плазмодия .Однако у комаров Aedes исследования показали, что внутри- и межвидовая конкуренция личинок может повысить переносимость арбовирусов [78] — [82]. Эти исследования не только подчеркнули важность факторов окружающей среды, испытываемых незрелыми стадиями, с латентным воздействием на компетентность на последующих стадиях взрослой жизни, они также выявили сложные интерактивные эффекты множества факторов окружающей среды, включая плотность личинок, инсектицид и температуру [81] — [85] .

    Эволюционные и эпидемиологические последствия

    В совокупности рассмотренные здесь данные показывают, что негенетические факторы могут формировать способность комаров бороться с малярийными паразитами; и это, вероятно, будет иметь глубокие эволюционные и эпидемиологические последствия.Одним из очевидных выводов является то, что интенсивность передачи малярии будет варьироваться в пространстве и во времени в зависимости от биотических и абиотических колебаний окружающей среды. Например, введение кишечных бактерий anti- Plasmodium в популяцию переносчиков снизит передачу заболевания. Однако такие простые прогнозы могут быть ослаблены рядом осложнений. Во-первых, несмотря на то, что мы сосредоточились на компетентности, различные параметры окружающей среды, описанные здесь, могут также влиять на другие важные компоненты способности переносчиков, а именно на развитие личинок комаров, продолжительность жизни взрослых особей и частоту укусов, которые вносят свой вклад в общую динамику малярии.Например, некоторые параметры окружающей среды могут снижать компетентность комаров при одновременном увеличении их продолжительности жизни, тем самым не оказывая чистого воздействия или даже увеличивая передачу малярии. Во-вторых, существует возможность того, что различные параметры окружающей среды оказывают противоположное, аддитивное или синергетическое влияние на компетентность (взаимодействия E × E, , рис. 3, ). Например, температура, при которой подавляется развитие малярии, может зависеть от других факторов, таких как влажность, москитная диета и размер тела.

    Первичным эволюционным следствием изменений окружающей среды является поддержание генетического разнообразия как в популяциях хозяев, так и в популяциях паразитов, при условии, что одни генотипы предпочтительнее в одной среде, тогда как другие генотипы лучше работают в других средах (т. Е. Взаимодействия G × E с нормами реакции скрещивания, Рисунок 3 ) [21], [22]. Хотя эффекты GxE на компетентность еще не описаны, эффекты GxE, по-видимому, обычны в природных системах [22], и исследование обнаружило, что Plasmodium генотипа при взаимодействии с диетой влияет на выживание комаров [43].В соответствии с существованием эффектов GxE, переносчики-комары и паразиты малярии демонстрируют крайний генетический полиморфизм иммунитета [86], [87] и инфекционности [88] соответственно. В свою очередь, это может иметь важные последствия для традиционных и генетических стратегий контроля, поскольку обильный полиморфизм обычно обеспечивает организмам большую эволюционную способность после изменений окружающей среды [86].

    Некоторые исследования показывают, что заражение малярией дорого обходится комару-хозяину. Например, инфекция Plasmodium может оказывать негативное влияние на размножение и / или выживаемость переносчиков [89] — [92].Кроме того, врожденная иммунная система насекомых сильно реагирует на присутствие паразита [4] — [7], что позволяет предположить, что преимущества от установления дорогостоящих физиологических иммунных реакций перевешивают стоимость заражения малярией. Поскольку Plasmodium снижает приспособленность комаров, естественный отбор должен способствовать развитию защиты от него. Помимо иммунологической защиты, насекомые-хозяева могут использовать поведенческие защиты, включая избегание, поведенческую лихорадку и самолечение, чтобы лучше противостоять паразитам или переносить их ( Рисунок 2, , [40], [93] — [95]).Несмотря на растущее количество доказательств опосредованной окружающей средой устойчивости к малярийным паразитам, поведенческий иммунитет комаров остается недооцененной защитной стратегией. Нам известно только об одном исследовании, в котором явно проверялся поведенческий иммунитет у комаров. С помощью температурного градиента в этом исследовании изучали, инфицировал ли P. yoelii An. stephensi может искать места для теплого отдыха, которые повышают температуру их тела до уровней, вредных для малярийных паразитов [96]. Инфицированные и неинфицированные люди демонстрировали схожие температурные предпочтения, поэтому гипотеза поведенческой лихорадки не подтверждалась.Однако нельзя исключить возможность того, что отсутствие влияния Plasmodium на тепловые предпочтения комаров связано с тем, что исследованная ассоциация паразит-хозяин была неестественной [96].

    В качестве альтернативы малярийные паразиты могут изменять поведение своих насекомых-хозяев таким образом, чтобы способствовать их собственному развитию и передаче (, рис. 2, , [97] — [99]). Такое паразитарное манипулирование поведением переносчиков было относительно хорошо описано в контексте кормления комаров кровью, когда спорозоиты (зрелые, трансмиссивные стадии малярийных паразитов) повышают агрессивность переносчиков, способствуя контакту между хозяевами [98], [100].Доказательств эксплуатации паразитами среды обитания комаров посредством манипуляций поведением мало; однако есть косвенные доказательства полевого исследования москитов, инфицированных Plasmodium mexicanum [101]. По сравнению с неинфицированными аналогами инфицированных москитов привлекали более высокие температуры, которые были оптимальными для скорости развития паразитов, но вредными для развития яиц москитов [101].

    Независимо от того, могут ли хозяева и / или паразиты использовать условия окружающей среды в своих интересах, негенетические факторы компетентности могут иметь важные последствия для эволюции физиологического иммунитета хозяина и вирулентности паразитов.Во-первых, поскольку формирование иммунного ответа обходится дорого, условия окружающей среды, которые вызывают повышенную резистентность, скорее всего, приведут к снижению физиологического иммунитета. Например, муравьи сокращают использование своей иммунной системы, когда в их гнездах присутствует противомикробная смола [102]. С другой стороны, сдерживание роста паразитов в окружающей среде может способствовать повышению вирулентности. В соответствии с этим прогнозом теоретические и эмпирические исследования показали, что факторы окружающей среды, такие как противопаразитарная пища хозяина или присутствие других видов или штаммов паразитов, могут способствовать увеличению количества эксплуатируемых паразитов [103] — [105].

    Наконец, влияние окружающей среды на компетентность комаров может иметь противоположные эволюционные и эпидемиологические последствия в зависимости от того, затронуты ли устойчивость или толерантность комаров. Поскольку устойчивость напрямую снижает приспособленность паразита, тогда как толерантность — нет (см. Глоссарий , файл S1 ), обычно предполагается, что генетический полиморфизм устойчивости, но не толерантности, будет сохраняться; и что устойчивые хозяева уменьшат передачу паразитов, в то время как толерантные хозяева увеличат ее [106] — [108].Причина этих различий заключается в том, что устойчивость приводит к отрицательной эпидемиологической обратной связи, когда паразитическая инфекция выбирает устойчивых хозяев, которые уменьшают появление паразитов (при условии, что устойчивость стоит дорого в отсутствие болезни, но ее преимущества перевешивают затраты при наличии болезни). Напротив, эволюция толерантности приводит к положительной обратной связи, когда паразитарная инфекция выбирает толерантных хозяев, что увеличивает количество паразитов. Точно так же факторы окружающей среды, которые придают толерантность, вероятно, увеличивают передачу паразитов, а факторы, вызывающие устойчивость, уменьшают ее.Например, если комары едят пищу, которая делает их более здоровыми, они могут жить дольше и передавать больше паразитов (толерантность), тогда как, если они едят пищу с противопаразитарными свойствами, они будут передавать меньше (сопротивление) (см. [109] для конкретного примера в бабочки). Изучение механизмов защиты от комаров обычно сосредоточено на способности ограничивать распространение инфекции [4] — [10]. Однако растущие данные о позвоночных и насекомых-хозяевах [110] подчеркивают необходимость обратить наше внимание на способность комаров контролировать повреждения в дополнение к их способности бороться с паразитами.

    Значение для стратегий надзора и контроля за заболеваниями

    В эпоху возобновления научных и политических обязательств по борьбе с малярией моделирование потенциального воздействия условий окружающей среды на передачу болезни является очевидной необходимостью. Одна из стратегий заключается в использовании данных об окружающей среде для разработки систем предупреждения и карт рисков, которые позволяют прогнозировать заболеваемость малярией в нашем меняющемся мире. До сих пор этот подход был в основном сосредоточен на последствиях глобального потепления и вызвал споры отчасти из-за того, что большинство климатических моделей предполагали простые отношения между переносчиками, паразитами и температурой.Таким образом, если мы хотим точно спрогнозировать влияние изменений окружающей среды на динамику малярии, нам сначала необходимо преобразовать системы малярии в их естественную среду. В качестве одного конкретного примера можно привести теоретические и эмпирические данные Paaijimans et al. [37], [111] предполагают, что модели, игнорирующие суточные колебания температуры, потенциально могут переоценить риск малярии в теплых регионах, но недооценить его в более прохладных регионах (см. Также [112]).

    Негенетические детерминанты компетентности также могут способствовать разработке новых стратегий контроля.Например, введение неместных штаммов Wolbachia , которые подавляют развитие Plasmodium , было предложено в качестве реального метода борьбы с малярией [113], [114]. Альтернативно, новые потенциальные стратегии могут использовать преимущества местных паразитов и кишечных бактерий, которые, как сообщалось, также снижают как спорогоническое развитие, так и продолжительность жизни комаров [51], [54], [56]. Хотя эти подходы многообещающие, важно изучить, как другие параметры окружающей среды будут взаимодействовать с этими потенциальными агентами биоконтроля.

    Возможное попадание в естественные популяции комаров резистентных трансгенных комаров в последние годы привлекло большое внимание. В настоящее время доступен ряд различных стратегий генетических манипуляций для снижения компетентности комаров в отношении Plasmodium в лаборатории [11], [12], [115]. Однако, прежде чем переносить эти результаты в естественные условия, будет критически важно определить, как на экспрессию трансгенов будут влиять изменения окружающей среды [116], [117].Например, выбранный Plasmodium — огнеупорный штамм An. gambiae [118] демонстрируют различные реакции меланизации в зависимости от температуры и рациона личинок [28]. Нет оснований полагать, что компетентность трансгенных комаров не будет также чувствительна к негенетическим факторам.

    Наконец, негенетически опосредованная компетентность может мешать текущим подходам к контролю несколькими способами. В частности, стратегии борьбы с малярией, основанные на изменении окружающей среды, могут оказывать каскадное воздействие на компетентность комаров, что в конечном итоге может препятствовать желаемым эффектам.Среди других последствий, ликвидация мест обитания личинок может привести к интенсивной конкуренции на оставшихся участках размножения и появлению высококомпетентных переносчиков [79]; Инсектицидная борьба с переносчиками малярии может иметь косвенные последствия для их компетенции в отношении Plasmodium через плейотропные эффекты генетических изменений (эволюция устойчивости к инсектицидам) [119], а меры борьбы с филярийными червями могут усилить передачу малярии в эндемичных районах [55] .

    Outlook

    Наше намерение состояло в том, чтобы доказать, что негенетические факторы могут сильно повлиять на способность комаров бороться с малярийными паразитами и что эволюционные, эпидемиологические и контрольные последствия могут быть серьезными.Несмотря на ранние работы по температурным эффектам и недавний рост доказательств, мы все еще далеки от полного понимания воздействия окружающей среды на взаимодействия Mosquito- Plasmodium . По сравнению с усилиями, посвященными молекулярным и физиологическим исследованиям иммунологии комаров, относительно немного исследований рассматривали экологический контекст, в котором проявляется и развивается иммунитет комаров. Это прискорбно, поскольку это ставит под угрозу наше понимание многих аспектов, связанных с эволюцией системы переносчиков малярии.Этот пробел в наших знаниях также ограничивает как реализацию, так и разработку устойчивых стратегий контроля. Таким образом, существует острая необходимость в изучении воздействия ранее не замеченных негенетических факторов (например, хищничество, конкуренция), а также в переоценке воздействия известных факторов, таких как температура и диета, с использованием экологически значимых параметров (например, симпатрическое растение разнообразие вместо растворов глюкозы и колебания вместо постоянных температур). Кроме того, в этом исследовании в идеале следует использовать естественные комбинации переносчиков и паразитов.В будущих исследованиях следует также определить, возможно ли обобщение для решения вопроса о том, приводят ли сходные условия окружающей среды к одинаковым последствиям для компетентности в ряде различных систем Mosquito- Plasmodium . Другой важной задачей будет расшифровка механизмов, с помощью которых негенетические факторы влияют на компетентность переносчиков. В заключение следует отметить, что рассмотрение экологического контекста имеет решающее значение не только для понимания результатов взаимодействий с москитно- Plasmodium , но и для более точных прогнозов эволюции стратегий передачи паразитов и вирулентности, эволюции иммунитета комаров и динамики малярии. коробка передач.

    Благодарности

    Мы благодарим Jaap de Roode, членов лабораторной группы de Roode, Eleanore Sternberg и Frédéric Simard за обсуждение и комментарии.

    Ссылки

    1. 1. Lehane MJ, Aksoy S, Levashina E (2004) Иммунные ответы и передача паразитов у насекомых, питающихся кровью. Тенденции Parasitol 20: 433–439
    2. 2. Дингласан Р.Р., Калуме Д.Е., Канзок С.М., Гош А.К., Муратова О. и др. (2007) Нарушение развития Plasmodium falciparum антителами против консервативного антигена средней кишки москита.Proc Natl Acad Sci U S A 104: 13461–13466.
    3. 3. Смит Т.А., Читнис Н., Бриет О.Т., Таннер М. (2011) Использование вакцин, блокирующих передачу на стадии комара, против Plasmodium falciparum . Тенденции Parasitol 27: 190–196.
    4. 4. Cirimotich CM, Dong Y, Garver LS, Sim S, Dimopoulos G (2010) Иммунная защита от комаров против инфекции Plasmodium . Dev Comp Immunol 34: 387–395.
    5. 5. Marois E (2011) Многогранный ответ москитов против Plasmodium .Curr Opin Microbiol 14: 429–435
    6. 6. Mitri C, Vernick KD (2012) Anopheles gambiae восприимчивость к патогенам: пересечение генетики, иммунитета и экологии. Curr Opin Microbiol 15: 285–291.
    7. 7. Blandin S, Marois E, Levashina EA (2008) Антималярийные ответы в Anopheles gambiae : от комплемент-подобного белка до комплемент-подобного пути. Клеточный микроб-хозяин 3: 364–374.
    8. 8. Povelones M, Waterhouse RM, Kafatos FC, Christophides GK (2009) Богатый лейцином повторяющийся белковый комплекс активирует комарный комплемент для защиты от паразитов Plasmodium .Наука 324: 258–261.
    9. 9. Гарвер Л.С., Баия А.С., Дас С., Соуза-Нето Дж. А., Шиао Дж. И др. (2012) Anopheles Факторы и эффекторы пути Imd в действии анти- Plasmodium , зависящего от интенсивности инфекции. PLoS Pathog 8: e1002737
    10. 10. Гупта Л., Молина-Круз А., Кумар С., Родригес Дж., Диксит Р. и др. (2009) Путь STAT опосредует позднюю фазу иммунитета против Plasmodium у комара Anopheles gambiae . Клеточный микроб-хозяин 5: 498–507.
    11. 11. Донг Й., Дас С., Чиримотич С.М., Соуза-Нето Дж. А., Маклин К.Дж. и др. (2011) Разработал иммунитет Anopheles к инфекции Plasmodium . PLoS Pathog 7: e1002458
    12. 12. Isaacs AT, Li F, Jasinskiene N, Chen X, Nirmala X и др. (2011) Инженерная устойчивость к развитию Plasmodium falciparum у трансгенного Anopheles stephensi . PLoS Pathog 7: e1002017
    13. 13. Cohuet A, Osta MA, Morlais I, Awono-Ambene PH, Michel K, et al.(2006) Anopheles и Plasmodium : от лабораторных моделей до естественных систем в полевых условиях. EMBO Rep 7: 1285–1289.
    14. 14. Tripet F, Aboagye-Antwi F, Hurd H (2008) Экологическая иммунология взаимодействий москита и малярии. Тенденции Parasitol 24: 219–227.
    15. 15. Донг И, Агилар Р., Си Зи, Варр Э., Монгин Э. и др. (2006) Anopheles gambiae иммунные ответы на человека и грызунов Plasmodium видов паразитов. PLoS Pathog 2: e52
    16. 16.Харрис С., Ламбрехтс Л., Руссет Ф., Абате Л., Нсанго С.Е. и др. (2010) Полиморфизм иммунных генов Anopheles gambiae , связанных с естественной устойчивостью к Plasmodium falciparum . PLoS Pathog 6: e1001112
    17. 17. Mitri C, Jacques JC, Thiery I, Riehle MM, Xu J, et al. (2009) Тонкая дискриминация патогенов в семействе генов APL1 защищает Anopheles gambiae от малярии человека и грызунов. PLoS Pathog 5: e1000576
    18. 18.Lambrechts L, Halbert J, Durand P, Gouagna LC, Koella JC (2005) Генотип хозяина по взаимодействиям генотипа паразита, лежащим в основе устойчивости анофелиновых комаров к Plasmodium falciparum . Малар Дж. 4: 3
    19. 19. Lambrechts L (2010) Анализ генетической архитектуры специфичности патогена и хозяина. PLoS Pathog 6: e1001019
    20. 20. Schulenburg H, Kurtz J, Moret Y, Siva-Jothy MT (2009) Экологическая иммунология. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 364: 3–14.
    21. 21. Wolinska J, King KC (2009) Окружающая среда может изменять отбор во взаимодействиях паразит-хозяин. Тенденции Parasitol 25: 236–244.
    22. 22. Lazzaro BP, Little TJ (2009) Иммунитет в изменчивом мире. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 364: 15–26.
    23. 23. Grassi B (1901) Studi di uno zoologo sulla malaria. Atti dei Linncei Mem 3: 229–505.
    24. 24. Детинова Т.С. (1962) Методы возрастной группировки двукрылых, имеющие медицинское значение.Monogr Ser World Health Organ 47: 13–191.
    25. 25. Lyons CL, Coetzee M, Terblanche JS, Chown SL (2012) Температурные пределы диких и лабораторных штаммов двух африканских видов переносчиков малярии, Anopheles arabiensis и Anopheles funestus . Малар J 11: 226.
    26. 26. Мердок К.С., Паайджманс К.П., Белл А.С., Кинг Дж. Г., Хиллер Дж. Ф. и др. (2012) Комплексное влияние температуры на иммунную функцию комаров. Proc Biol Sci 279: 3357–3366.
    27. 27.Murdock CC, Paaijmans KP, Cox-Foster D, Read AF, Thomas MB (2012) Переосмысление векторной иммунологии: роль температуры окружающей среды в формировании устойчивости. Nat Rev Microbiol 10: 869–876
    28. 28. Suwanchaichinda C, Paskewitz SM (1998) Влияние питания личинок, размера тела и температуры взрослых особей на способность Anopheles gambiae (Diptera: Culicidae) меланизировать шарики сефадекса. J Med Entomol 35: 157–161.
    29. 29. Бойд М. (1932) Исследования Plasmodium vivax .II. Влияние температуры на продолжительность внешнего инкубационного периода. Дж. Хиг (Земля) 16: 851.
    30. 30. Kligler J, Mer G (1937) Исследования влияния различных факторов на инфицирование Anopheles elutus различными видами Plasmodium . Энн Троп Мед Паразитол 31: 71.
    31. 31. Boyd MF (1949) Эпидемиология: факторы, связанные с окончательным хозяином. В: Бойд М.Ф., редактор. Маляриология: всесторонний обзор всех аспектов этой группы болезней с глобальной точки зрения.Филадельфия: W.B. Сондерс. С. 608–697.
    32. 32. Noden BH, Kent MD, Beier JC (1995) Влияние колебаний температуры на развитие Plasmodium falciparum в начале Anopheles stephensi . Паразитология 111: 539–545.
    33. 33. Eling W, Hooghof J, Sauerwein R, Gemert G Van (2001) Тропические температуры могут подавлять развитие паразита малярии человека Plasmodium falciparum в комаре. Труды секции экспериментальной и прикладной энтомологии Нидерландского энтомологического общества 12: 151–156.
    34. 34. Vanderberg JP, Yoeli M (1966) О влиянии температуры Plasmodium berghei на спорогоническое развитие. J Parasitol 52: 559–564.
    35. 35. Океч Б.А., Гуанья Л.С., Вальчак Э., Кабиру Э.В., Байер Дж.С. и др. (2004) Устойчивость естественных паразитов Plasmodium falciparum на ранних стадиях кишечника к высоким температурам у экспериментально инфицированных Anopheles gambiae (Diptera: Culicidae) . Дж. Паразитол 90: 764–768
    36. 36.Paaijmans KP, Blanford S, Chan BHK, Thomas MB (2012) Более высокие температуры снижают переносимость малярийных комаров. Biol Lett 8: 465–468
    37. 37. Пайджманс К.П., Бланфорд С., Белл А.С., Бланфорд Д.И., Рид А.Ф. и др. (2010) Влияние климата на передачу малярии зависит от суточных колебаний температуры. Proc Natl Acad Sci U S A 107: 15135–15139.
    38. 38. Paaijmans KP, Thomas MB (2011) Влияние поведения комаров в покое и связанного с ним микроклимата на риск малярии.Малар Дж 10: 183.
    39. 39. Кори Дж. С., Гувер К. (2006) Опосредованные растениями эффекты во взаимодействиях насекомых-патогенов. Тенденции Ecol Evol 21: 278–286.
    40. 40. Lefèvre T, Oliver L, Hunter MD, De Roode JC, Letters E (2010) Доказательства наличия лекарств, передаваемых из поколения в поколение. Ecol Lett 13: 1485–1493
    41. 41. Alaux C, Ducloz F, Crauser D, Le Conte Y (2010) Влияние диеты на иммунокомпетентность медоносных пчел. Biol Lett 6: 562–565
    42. 42. Lambrechts L, Chavatte J-M, Snounou G, Koella J (2006) Влияние окружающей среды на генетическую основу устойчивости комаров к паразитам малярии.Proc Biol Sci 273: 1501–1506.
    43. 43. Ferguson HM, Read AF (2002) Генетические и экологические детерминанты вирулентности малярийных паразитов у комаров. Proc Biol Sci 269: 1217–1224.
    44. 44. Океч Б.А., Гуанья Л.С., Кабиру Э.В., Бейер Дж.С., Ян Г. и др. (2004) Влияние возраста и предыдущего рациона Anopheles gambiae на инфекционность естественных гаметоцитов Plasmodium falciparum от людей-добровольцев. J Insect Sci 4: 33
    45. 45.Океч Б.А., Гуанья Л.К., Ян Г.Ю., Гитуре Д.И., Байер Дж.С. (2007) Личинки обитания Anopheles gambiae s.s. (Diptera: Culicidae) влияет на переносчиков паразитов Plasmodium falciparum . Малар Дж. 6:50.
    46. 46. Koella JC, Sorensen FL (2002) Влияние питания взрослых на меланизационный иммунный ответ переносчика малярии Anopheles stephensi . Мед ветеринарный энтомол 16: 316–320.
    47. 47. Ponton F, Wilson K, Cotter SC, Raubenheimer D, Simpson SJ (2011) Пищевая иммунология: многомерный подход.PLoS Pathog 7: e1002223
    48. 48. Фостер В.А. (1995) Сахарное кормление комаров и репродуктивная энергия. Анну Преподобный Энтомол 40: 443–474.
    49. 49. Чиримотич С.М., Рамирес Дж. Л., Димопулос Г. (2011) Компетенция переносчиков насекомых-переносчиков нативной микробиоты в отношении патогенов человека. Клеточный микроб-хозяин 10: 307–310.
    50. 50. Донг Й., Манфредини Ф., Димопулос Г. (2009) Влияние микробиоты средней кишки комаров на защиту от малярийных паразитов. PLoS Pathog 5: e1000423
    51. 51.Чиримотич С.М., Донг Й., Клейтон А.М., Сандифорд С.Л., Соуза-Нето Дж. А. и др. (2011) Естественная микробная рефрактерность к инфекции Plasmodium у Anopheles gambiae . Наука 332: 855–858.
    52. 52. Meister S, Agianian B, Turlure F, Relógio A, Morlais I, et al. (2009) Anopheles gambiae Защита от бактерий, опосредованная PGRPLC, модулирует инфицирование малярийными паразитами. PLoS Pathog 5: e1000542
    53. 53. Boissière A, Tchioffo MT, Bachar D, Abate L, Marie A, et al.(2012) Микробиота средней кишки переносчика малярийных комаров Anopheles gambiae и взаимодействия с инфекцией Plasmodium falciparum . PLoS Pathog 8: e1002742
    54. 54. Бланфорд С., Чан Б.К., Дженкинс Н., Сим Д., Тернер Р.Дж. и др. (2005) Грибковый патоген снижает вероятность передачи малярии. Наука 308: 1638–1641.
    55. 55. Aliota MT, Chen C-C, Dagoro H, Fuchs JF, Christensen BM (2011) Филяриальные черви снижают инфекционность Plasmodium у комаров.PLoS Negl Trop Dis 5: e963
    56. 56. Bargielowski I, Koella JC (2009) Возможный механизм подавления развития Plasmodium berghei в комаре Anopheles gambiae микроспоридианом Vavraia culicis . PLoS ONE 4: e4676
    57. 57. Imwong M, Nakeesathit S, Day NPJ, White NJ (2011) Обзор инфекций смешанных видов малярии у анофелиновых комаров. Малар Дж 10: 12.
    58. 58. Paul REL, Nu VT, Krettli AU, Brey PT (2002) Межвидовая конкуренция во время передачи двух симпатрических видов малярийных паразитов москитному переносчику.Proc Biol Sci 269: 2551–2557.
    59. 59. Родригес Дж, Брайнер Ф.А., Алвес Л.К., Диксит Р., Бариллас-Мьюри С. (2010) Дифференциация гемоцитов опосредует врожденную иммунную память у комаров Anopheles gambiae . Наука 329: 1353–1355.
    60. 60. Voordouw MJ, Lambrechts L, Koella J (2008) Отсутствие материнских эффектов после стимуляции реакции меланизации у комара желтой лихорадки Aedes aegypti . Ойкос 117: 1269–1279.
    61. 61. Lorenz L, Koella J (2011) Материнская среда определяет жизненный цикл и подверженность малярии комаров Anopheles gambiae .Малар Дж. 10: 382.
    62. 62. Hillyer JF, Schmidt SL, Fuchs JF, Boyle JP, Christensen BM (2005) Возрастная смертность у иммунных комаров ( Aedes aegypti ) коррелирует с уменьшением количества гемоцитов. Cell Microbiol 7: 39–51.
    63. 63. Стэнли Д. (2012) Старение и иммунное старение у беспозвоночных. Выжившие беспозвоночные J 9: 102–109.
    64. 64. Chun J, Riehle M, Paskewitz SM (1995) Влияние возраста комаров и репродуктивного статуса на меланизацию сефадексных шариков в Plasmodium -рефрактерных и -чувствительных штаммах Anopheles gambiae .J Invertebr Pathol 66: 11–17.
    65. 65. Мнионе Л.Л., Кирби М.Дж., Мпингва М.В., Лветойера Д.В., Кнолс Б.Г. и др. (2011) Инфекция комаров Anopheles gambiae энтомопатогенными грибами: влияние возраста хозяина и статуса кормления кровью. Parasitol Res 108: 317–322.
    66. 66. Смит Д.Л., Эллис Маккензи Ф. (2004) Статика и динамика малярийной инфекции у комаров Anopheles . Малар Дж. 3: 13.
    67. 67. Nidelet T, Koella JC, Kaltz O (2009) Влияние сокращенной продолжительности жизни хозяина на эволюцию истории жизни паразита и вирулентность в системе микробный паразит-хозяин.BMC Evol Biol 9: 65.
    68. 68. Доннелл Д.М., Хантер М.С. (2002) Темпы развития двух родственных паразитоидов, Encarsia formosa и E. pergandiella (Hymenoptera: Aphelinidae) , с использованием различных стратегий яйцекладки. J. Физиология насекомых 48: 487–493.
    69. 69. Hu JS, Gelman DB, Blackburn MB (2003) Возрастное взаимодействие между паразитоидом Encarsia formosa и его хозяином, белокрылкой серебристой, Bemisia tabaci (штамм B).J Insect Sci 3: 28.
    70. 70. Мидео Н., Рис С.Е. (2012) Пластичность фенотипов паразитов: эволюционные и экологические последствия для болезней. Future Microbiol 7: 17–24.
    71. 71. Fellous S, Lazzaro BP (2010) Качество пищи личинок влияет на экспрессию иммунных генов взрослых (но не личинок) независимо от воздействия на общее состояние. Мол Экол 19: 1462–1468.
    72. 72. Bize P, Jeanneret C, Klopfenstein A, Roulin A (2008) Что делает хостинг прибыльным? Паразиты уравновешивают питательные ресурсы хозяина с иммунитетом.Am Nat 171: 107–118.
    73. 73. Lyimo EO, Koella JC (1992) Взаимосвязь между размером тела взрослой особи Anopheles gambiae s.l. и заражение малярийным паразитом Plasmodium falciparum . Паразитология 104: 233–237.
    74. 74. Киттэви С., Эдман Дж. Д., Саттабонгкот Дж. (1990) Оценка потенциала выживания и восприимчивости к малярии среди различных классов размеров выращиваемых в лаборатории Anopheles dirus . Ам Дж. Троп Мед Хиг 43: 328–332.
    75. 75. Вернер Э. Э., Пикор С. Д. (2003) Обзор косвенных взаимодействий, опосредованных признаками, в экологических сообществах. Экология 84: 1083–1100.
    76. 76. Yin M, Laforsch C, Lohr JN, Wolinska J (2011) Защита, индуцированная хищниками, делает Daphnia более уязвимым для паразитов. Evolution 65: 1482–1488.
    77. 77. Decaestecker E, De Meester L, Ebert D (2002) В большой беде: выбор среды обитания ограничен множеством врагов в зоопланктоне. Proc Natl Acad Sci U S A 99: 5481–5485.
    78. 78. Альто Б.В., Лунибос Л.П., Хиггс С., Джулиано С.А. (2005) Конкуренция личинок по-разному влияет на арбовирусную инфекцию у комаров Aedes . Экология 86: 3279–3288.
    79. 79. Alto BW, Lounibos LP, Mores CN, Reiskind MH (2008) Конкуренция личинок изменяет восприимчивость взрослых комаров Aedes к инфекции денге. Proc Biol Sci 275: 463–471.
    80. 80. Бевинс С.Н. (2007) Инвазивные комары, конкуренция личинок и косвенное влияние на способность переносчиков местных видов комаров ( Diptera: Culicidae ).Биол Вторжения 10: 1109–1117.
    81. 81. Muturi EJ, Costanzo K, Kesavaraju B, Alto BW (2011) Могут ли пестициды и конкуренция личинок изменить восприимчивость комаров Aedes ( Diptera: Culicidae ) к арбовирусной инфекции? J Med Entomol 48: 429–436.
    82. 82. Muturi EJ, Blackshear M, Montgomery A (2012) Зависимые от температуры и плотности эффекты среды личинок на компетенцию Aedes aegypti для альфавируса. J Vector Ecol 37: 154–161.
    83. 83. Muturi EJ, Lampman R, Costanzo K, Alto BW (2011) Влияние температуры и инсектицидного стресса на жизненные черты Culex restuans и Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) . J Med Entomol 48: 243–250.
    84. 84. Мутури Э.Дж., Альто Б.В. (2011) Температура окружающей среды личинок и воздействие инсектицидов изменяют компетенцию Aedes aegypti в отношении арбовирусов. Переносимые переносчиками зоонозы Dis 11: 1157–1163.
    85. 85. Muturi EJ, Kim C-H, Alto BW, Berenbaum MR, Schuler MA (2011) Экологический стресс личинок изменяет компетенцию Aedes aegypti для вируса Sindbis.Trop Med Int Health 16: 955–964.
    86. 86. Rottschaefer SM, Riehle MM, Coulibaly B, Sacko M, Niaré O и др. (2011) Исключительное разнообразие, поддержание полиморфизма и недавний направленный отбор на APL1 генов устойчивости к малярии Anopheles gambiae . PLoS Biol 9: e1000600
    87. 87. Dong Y, Taylor HE, Dimopoulos G (2006) AgDscam, гипервариабельный рецептор, содержащий домен иммуноглобулина, врожденной иммунной системы Anopheles gambiae .PLoS Biol 4: e229
    88. 88. Молина-Круз А., ДеДжонг Р.Дж., Ортега С., Хайле А., Аббан Е. и др. (2012) Некоторые штаммы Plasmodium falciparum , паразита малярии человека, ускользают от комплемент-подобной системы комаров Anopheles gambiae . Proc Natl Acad Sci U S A 109: E1957–62
    89. 89. Hogg JC, Hurd H (1997) Влияние естественной инфекции Plasmodium falciparum на плодовитость и смертность Anopheles gambiae sl на северо-востоке Танзании.Паразитология 114: 325–331.
    90. 90. Ahmed AM, Hurd H (2006) Иммунная стимуляция и малярийная инфекция накладывают репродуктивные издержки на Anopheles gambiae через апоптоз фолликулов. Микробы заражают 8: 308–315.
    91. 91. Aboagye-Antwi F, Guindo A, Traore AS, Hurd H, Coulibaly M и др. (2010) Зависимые от водного стресса эффекты инфекции Plasmodium falciparum на выживаемость выловленных в дикой природе самок комаров Anopheles gambiae .Малар Дж. 9: 12.
    92. 92. Vézilier J, Nicot A, Gandon S, Rivero A (2012) Инфекция Plasmodium снижает плодовитость и увеличивает выживаемость комаров. Proc Biol Sci 279: 4033–4041
    93. 93. Лефевр Т., Чанг А., Келавкар М., Ли Х., Ли Дж. И др. (2011) Поведенческая устойчивость бабочки-монарха к простейшим паразитам. J Anim Ecol 81: 70–79.
    94. 94. Lefèvre T, De Roode JC, Kacsoh BZ, Schlenke TA (2011) Стратегии защиты от паразитоидных ос в Drosophila : борьба или бегство? Biol Lett 8: 230–233.
    95. 95. De Roode JC, Lefèvre T (2012) Поведенческий иммунитет у насекомых. Насекомые 3: 789–820.
    96. 96. Blanford S, Read AF, Thomas MB (2009) Температурное поведение Anopheles stephensi в ответ на заражение малярией и грибковыми энтомопатогенами. Малар Дж. 8: 72
    97. 97. Hurd H (2003) Манипуляции с важными с медицинской точки зрения насекомыми-переносчиками их паразитами. Анну Рев Энтомол 48: 141–161
    98. 98. Lefèvre T, Thomas F (2008) За кулисами дергает за ниточки кое-что еще: акцент на паразитарных манипуляциях при трансмиссивных заболеваниях.Заразить Genet Evol 8: 504–519
    99. 99. Lefèvre T, Koella JC, Renaud F, Hurd H, Biron DG и др. (2006) Новые перспективы исследований по манипулированию насекомыми-переносчиками патогенными микроорганизмами. PLoS Pathog 2: e72
    100. 100. Cator LJ, Lynch PA, Read AF, Thomas MB (2012) Манипулируют ли малярийные паразиты комарами? Тенденции Parisitol 28: 466–470.
    101. 101. Fialho RF, Schall JJ (1995) Термическая экология малярийного паразита и его насекомого-переносчика: последствия для успеха передачи паразита.J Anim Ecol 64: 553–562.
    102. 102. Castella G, Chapuisat M, Moret Y, Christe P (2008) Присутствие хвойной смолы снижает использование иммунной системы у древесных муравьев. Ecol Entomol 33: 408–412.
    103. 103. Де Рооде Дж. К., Лопес Фернандес де Кастильехо С., Фейтс Т., Алисон С. (2011) Эволюция вирулентности в ответ на устойчивость к инфекциям: токсичные пищевые растения могут отбирать вирулентных паразитов бабочек-монархов. J Evol Biol 24: 712–722.
    104. 104. Де Рооде Дж. К., Пансини Р., Чизман С. Дж., Хелински М. Е., Хуйбен С. и др.(2005) Вирулентность и конкурентоспособность при генетически разнообразных малярийных инфекциях. Proc Natl Acad Sci U S A 102: 7624–7628.
    105. 105. Choisy M, De Roode JC (2010) Смешанные инфекции и эволюция вирулентности: эффекты конкуренции за ресурсы, пластичность паразитов и нарушение иммунитета хозяина. Am Nat 175: E105–18.
    106. 106. Restif O, Koella JC (2004) Параллельная эволюция устойчивости и толерантности к патогенам. Am Nat 164: E90 – E102.
    107. 107. Рой Б.А., Кирхнер Дж. В. (2000) Эволюционная динамика устойчивости и толерантности к патогенам.Эволюция 54: 51–63.
    108. 108. Miller MR, White A, Boots M (2005) Эволюция устойчивости хозяина: толерантность и контроль как отдельные стратегии. Дж. Теор Биол 236: 198–207.
    109. 109. Штернберг Э.Д., Лефевр Т., Ли Дж., Лопес Фернандес де Кастильехо С., Ли Х. и др. (2012) Устойчивость и устойчивость к болезням пищевого происхождения при естественном взаимодействии бабочек, растений и паразитов. Evolution 66: 3367–3376.
    110. 110. Ayres JS, Schneider DS (2012) Толерантность к инфекциям.Анну Рев Иммунол 30: 271–294.
    111. 111. Paaijmans KP, Read AF, Thomas MB (2009) Понимание связи между риском малярии и климатом. Proc Natl Acad Sci U S A 106: 13844–13849.
    112. 112. Mordecai EA, Paaijmans KP, Johnson LR, Balzer C, Ben-Horin T. и др. (2012) Оптимальная температура для передачи малярии значительно ниже, чем предполагалось ранее. Ecol Lett 16: 22–30.
    113. 113. Kambris Z, Blagborough AM, Pinto SB, Blagrove MSC, Godfray HCJ и др.(2010) Wolbachia стимулирует экспрессию иммунных генов и подавляет развитие Plasmodium в Anopheles gambiae . PLoS Pathog 6: e1001143
    114. 114. Hughes GL, Koga R, Xue P, Fukatsu T, Rasgon JL (2011) Инфекции Wolbachia вирулентны и подавляют паразита малярии человека Plasmodium falciparum в Anopheles gambiae . PLoS Pathog 7: e1002043
    115. 115. Ван С., Якобс-Лорена М. (2013) Генетические подходы для предотвращения передачи малярии комарами-переносчиками.Trends Biotechnol 31: 185–193.
    116. 116. Koella JC (2003) Об эволюционной экологии иммунитета комаров и использовании трансгенных комаров для борьбы с малярией. Экологические аспекты применения генетически модифицированных комаров 2: 173–185.
    117. 117. Boete C (2006) Устойчивость к малярии у комаров: вопрос только в генах? В: Boete C, редактор. Генетически модифицированные комары для борьбы с малярией. Джорджтаун: Eurekah / Landes Bioscience.
    118. 118.Коллинз Ф.Х., Сакаи Р.К., Верник К.Д., Паскевиц С., Сили Д.К. и др. (1986) Генетический отбор Plasmodium -рефрактерного штамма переносчика малярии Anopheles gambiae . Наука 234: 607–610.
    119. 119. Риверо А., Везильер Дж., Вейл М., Рид А.Ф., Гандон С. (2010) Борьба с инсектицидами трансмиссивных болезней: когда возникает проблема устойчивости к инсектицидам? PLoS Pathog 6: e1001000

    Ascaris lumbricoides Интенсивность по отношению к экологическим, социально-экономическим и поведенческим детерминантам подверженности инфекциям у детей из юго-восточного Мадагаскара по JSTOR

    Абстрактный Подсчет

    червей Ascaris lumbricoides был изучен как конечный продукт косвенных переменных воздействия.Обследование 663 детей в возрасте от 4 до 10 лет, проживающих на юго-востоке Мадагаскара, выявило распространенность 93% для A. lumbricoides, 55% для Trichuris trichiura и 27% для анкилостомы. Изгнание гельминтов было проведено у 428 из этих детей; данные показали сверхдисперсное распределение A. lumbricoides со средним арифметическим значением 19,2 червей на ребенка. Параллельное социально-экономическое обследование домашних хозяйств проводилось путем посещения и интервью. Подверженность инфекции оценивалась по экологическим, демографическим, поведенческим и социально-экономическим показателям.Группы Ascaris lumbricoides были связаны с полом, стилем проживания, этнической принадлежностью и сельскохозяйственными факторами. Результаты показывают, что экспозиция и инфекция распространены в этой детской популяции и что на интенсивность A. lumbricoides влияют связанные с полом поведенческие факторы и факторы окружающей среды, которые способствуют экспозиции.

    Информация о журнале

    Журнал паразитологии — официальное издание Американского общества паразитологов (ASP).Он издается непрерывно с 1914 года, когда его основал Генри Болдуин Уорд. Журнал специализируется на общей паразитологии, а также на паразитах, имеющих медицинское, ветеринарное и экономическое значение. Основное внимание уделяется эукариотическим паразитам, хотя векторы для прокариотических организмов и вирусы также включены. Журнал печатается в издательстве Allen Press в Лоуренсе, штат Канзас, шестью номерами в год. Доступны институциональные подписки. Членство в ASP включает получение журнала Parasitology, ежеквартального информационного бюллетеня и выдержек из ежегодных собраний; студенты могут присоединиться по значительно сниженной ставке.Журнал находится в сети через BioOne. Редактор журнала — д-р Майкл В.К. Сухдео. Для получения дополнительной информации о публикации в журнале обращайтесь в редакцию журнала по адресу [email protected]. Для получения информации о членстве в ASP свяжитесь с обществом: http://amsocparasit.org/. Для получения информации о подписке обращайтесь на [email protected].

    Информация об издателе

    Allen Press играет жизненно важную роль в распространении знаний и информации. путем партнерства с организациями в научном, техническом и медицинском сообществе продвигать свои интересы и добиваться поставленных целей.Штаб-квартира в Лоуренсе, KS, Allen Press предоставляет полный спектр интегрированных услуг в широкие области управления контентом, онлайн-доставка и печать, ассоциация менеджмент и издательские услуги. Allen Press — надежный партнер научных общества, профессиональные ассоциации и корпорации по всей стране.

    Разум дождевых червей | История Сегодня

    Ближе к концу своей жизни Чарльз Дарвин был озабочен вопросом, думают ли черви.Ночь за ночью он выходил в сад Даун-хауса, вооруженный лопатками, лампами и свистками, надеясь доказать, что эти черви умнее, чем кажутся. Конечно, это было странное времяпрепровождение. Любой, кому довелось увидеть Дарвина, которому тогда было за семьдесят, бьющим землю, склеивающим листья или кричащим во весь голос, был бы, мягко говоря, озадачен. Но это не было эксцентричной прихотью. Как знал Дарвин, проблема червеобразного интеллекта лежит в основе взаимоотношений человека с животными и угрожает дестабилизировать работу его жизни.

    Тупые скоты

    Философы спорили о познании животных более 2000 лет. Первыми взялись за дело греки. В эллинистический и римский периоды большинство склонялось к мнению, что животные были разумными существами, которые отличались от людей не «сущностью», а только степенью, в которой они обладали разумом. В De abstinentia ab esu animalium Порфирий Тирский утверждал, что разум можно наблюдать в поведении «всех животных».Они могли воспринимать и помнить; они чувствовали боль и удовольствие; они могли выражать эмоции (надежду, страх, горе и т. д.), и во многих случаях они даже издавали звуки, похожие на речь, и все это указывало на рациональное мышление. Другие мыслители пошли еще дальше. Секст Эмпирик считал, что разум также подразумевается знанием навыков животными, оценкой добродетелей и способностью делать выбор; Плутарх нашел это в заботе, которую они проявляют о своих детях, и в их пытливой натуре.

    Аристотель был настроен более скептически.Он не сомневался, что животные демонстрировали поведение, которое выглядело умным. Он также не отрицал, что у них было по крайней мере или возможностей для обработки информации. Но поскольку животные не имеют концепции истины (которую он считал определяющей характеристикой разума), он пришел к выводу, что они неспособны к рациональному мышлению — и, следовательно, принципиально отличаются от людей.

    Со временем мнение Аристотеля победило. Привлеченные его акцентом на истине как детерминанте разума, римские авторы еще больше расширили значение его различия между людьми и животными.В De officiis Цицерон утверждал, что, хотя все существа разделяют некоторые психические процессы, только человек обладает разумом, необходимым для понимания причин и следствий, проведения аналогий и связи прошлого с будущим. А поскольку человек по интеллекту превзошел всех животных, Сенека считал, что может обращаться с животными как угодно.

    Однако именно в трудах христианских богословов взгляды Аристотеля получили свое наиболее полное развитие. Увидев в его различии между животными и людьми параллель с библейскими рассказами о Сотворении мира, отцы церкви истолковали Бытие 1:26 как утверждение о человеческой рациональности.Когда мы читаем, что Бог создал человечество по Своему «образу и подобию», утверждал Августин, мы должны понимать это как то, что люди наделены «божественными» качествами разума и свободы воли. Животные, напротив, были иррациональными. Таким образом, принадлежащие к низшей категории бытия, они заслуживали подчинения человека. Как подчеркнул Фома Аквинский, это означало, что их можно было убить без разбора. Таким образом, подтвержденное верой, разделение Аристотеля между животными и людьми пережило последующие столетия практически невредимым.

    Интеллект или инстинкт?

    С началом научной революции все начало меняться. Хотя большинство философов все еще были убеждены в превосходстве человека, их приверженность аристотелевскому определению разума пошатнулась, что вынудило их искать другие способы продемонстрировать отсутствие интеллекта у животных. Рене Декарт в своей книге « Traité du monde et de la lumière » (около 1629-33) утверждал, что, поскольку животные не могут говорить, нет никаких доказательств того, что они могут думать независимо от внешних раздражителей.Переопределяя разум как способность применять набор общих принципов к различным ситуациям, он также утверждал, что, хотя иногда кажется, что животные действуют рационально, их неспособность переносить свои знания в незнакомые сценарии показывает, что они действуют скорее по привычке, чем по интуиции. или вычет.

    Однако к началу 18 века вера в уникальность человека начала рушиться. Теперь, когда Аристотель был отвергнут, другие пытались определить мышление и разум в более широких терминах, что стерло различие между животными и людьми.Возглавлял атаку Дэвид Хьюм. В «Трактат о человеческой природе » (1739-40) он утверждал, что мысль состоит из «образов», возникающих из сенсорных данных, и что разум следует понимать как «простую склонность или инстинкт к формированию ассоциаций между такими [образами] на поверхности Земли. основа прошлого опыта ». Не забывая о собаках и лошадях, он утверждал, что «звери наделены мыслью и разумом так же, как люди». Похожий аргумент был выдвинут Вольтером в его «Философском словнике » (1764).Тем не менее, хотя в начале 19 века он имел определенную моду, некоторые натуралисты, такие как Уильям Уэвелл, остались в этом убеждены. Цепляясь за теологические обломки, они отказались предоставить животным такой же статус, как и людям; и, в отсутствие каких-либо убедительных доказательств, не подавали никаких признаков изменения своего мнения. Зашел в тупик.

    Человек спускается

    В бой вступил Дарвин. Рожденный чуть более 40 лет спустя после смерти Юма, он был погружен в новое мышление.Его дед, зоолог Эразм Дарвин, был заядлым читателем «Трактата » Юма, и такие прогрессивные идеи были обычным предметом обсуждения в семейном доме. Было почти неизбежно, что он заинтересовался вопросом познания животных. Но когда он это сделал, он подошел к этому с совершенно другой точки зрения.

    В книге г. О происхождении видов (1859 г.) Дарвин продемонстрировал, что все разновидности животного и растительного мира эволюционировали не в результате единственного действия всемогущего божества, а постепенно, на протяжении многих поколений, в результате естественный отбор.Продолжая развивать значение этого аргумента в книге The Descent of Man (1871), он продолжал утверждать, что человек тоже «произошел от какой-то ранее существовавшей формы» и развился в ответ на аналогичные процессы. Как поняли и критики, и сторонники, это поставило под сомнение любую попытку провести различие между людьми и животными и подняло вопросы об их когнитивных способностях.

    Как и Аристотель, Дарвин признал, что все виды, казалось, обладают физическими «инструментами», необходимыми для обработки информации.Но в отличие от Аристотеля он считал, что эта физиологическая непрерывность также должна приводить к когнитивному сходству. Если разные виды обладали сравнимой способностью к мышлению, велика вероятность, что они думали и в одинаковой степени. И если бы они могли думать, почему бы им не рассуждать? Глядя больше на Декарта, чем на Юма, Дарвин считал действие рациональным, если оно демонстрирует некоторую долю предусмотрительности и выходит за рамки инстинктивных реакций. Должен ли быть одержимый разум относительно легко определить, наблюдая за моделями поведения.

    На этом основании Дарвин, как и Порфирий, пришел к выводу, что «разница в разуме между человеком и высшими животными, такими как собаки,« зависит от степени, а не вида ». Но когда дело дошло до «низших» животных, он был менее уверен, особенно когда дело касалось дождевых червей. Они были уникально простой формой жизни; действительно, даже Порфирий изо всех сил старался видеть в них разумных существ. У них не было очевидных средств восприятия; не имел никаких навыков; не шуметь; и уж точно не проявлял никаких эмоций.Перспектива найти какое-либо когнитивное сходство с людьми действительно казалась туманной.


    Изменение ландшафта

    Дарвин, однако, подозревал, что черви могут быть более впечатляющими, чем они кажутся. Вскоре после того, как он вернулся из поездки на HMS Beagle , он получил письмо от своего дяди (и тестя) Джозайи Веджвуда, в котором объяснялось, что слой извести и золы, разложенный по полю, несколько лет разросся. позже он погрузился на несколько дюймов ниже поверхности в результате того, что черви прогрызли почву внизу и выбросили ее вверх.Это произвело на Дарвина такое сильное впечатление, что позже в том же году он прочитал доклад на эту тему в Геологическом обществе и убедился, что, несмотря на свой размер, черви могут изменить ландшафт так же резко, как ветер или приливы.

    Но сколько бы земли ни прошло через кишечник червя, это не было доказательством мысли. Поэтому Дарвин начал тщательно проверять их возможности. Как он объяснил в своей последней книге, Образование плесени в овощах под действием червей (1881), он начал с их органов чувств.То, что они были глухими, было достаточно легко установить. Он свистел в землю, кричал в их норы, играл на фаготе и ставил их на стол рядом с пианино — все без малейшей реакции. Однако, поместив их на пианино , он обнаружил, что они чрезвычайно чувствительны к вибрациям. Затем он обратился к их «слабому» обонянию. Хотя они жадно искали кусочки капусты и лука, они казались равнодушными к кусочкам ваты, пропитанным табачным соком и духами.Однако наиболее показательным было их зрение. Посветив ярким светом на их переднюю часть, Дарвин обнаружил, что, хотя они слепы, они все же могут воспринимать свет. Однако их реакция была не всегда одинаковой; если их внимание было занято чем-то другим, они часто полностью игнорировали свет. Это напомнило Дарвину «высших» животных. Увлеченный спортсмен, он знал, что легче всего подкрасться к оленю, когда он пасется или чем-то занят; и ему казалось, что черви ведут себя примерно так же.Это явно указывало на «присутствие какого-то разума», но ему нужно было больше доказательств, чтобы быть уверенным.

    Манера мужчины

    Дарвин нашел то, что искал, в норах червей. Чтобы предотвратить попадание воздуха, они имеют тенденцию блокировать вход в свои дома, используя все, что есть под рукой. Однако они предпочитают листья. Принимая во внимание, что, если бы у них не было разума, можно было бы ожидать, что они схватят их в любое время, Дарвин заметил, что они « действовали почти так же, как и человек », затаскивая листья в свои норы за заостренный кончик, а не по стеблю.К его изумлению, они делали то же самое, даже когда им давали листья с деревьев, не являющихся коренными для Британии, и когда им давали несколько склеенных вместе листьев. Это не могло быть просто инстинктом. Это должно было быть признаком рационального интеллекта.

    Излишне говорить, что Дарвин был бы первым, кто признал бы, что мысли червей, вероятно, довольно скромны. Но этого, по их мнению, вообще было достаточно, чтобы подтвердить его теорию эволюции — и, вне всяких сомнений, продемонстрировать, что все живые существа разделяют схожие когнитивные процессы.Однако это больше, чем просто научный факт. Это также напоминание о том, что даже самые скромные создания требуют нашего уважения. Ибо если даже червь может думать, как мы, то какая земная причина не проявлять к ним такое же внимание, как мы?

    Александр Ли — научный сотрудник Центра изучения эпохи Возрождения при Уорикском университете. Его последняя книга — Макиавелли: Его жизнь и времена (Пикадор, 2020).

    Установление полярности, асимметричное деление и сегрегация детерминант судьбы у ранних C.Эмбрионы elegans

    Ацето Д., Бирс М. и Кемфуэс К.Дж. (2006). Взаимодействие PAR-6 с CDC-42 необходимо для поддержания, но не для установления асимметрии PAR у C. elegans. Dev. Биол. 299 , 386-397. Абстрактный Статья

    Афшар, К., Вернер, М.Э., Цзе, Ю.С., Глоцер, М., и Гёнчи, П. (2010). Регуляция корковой сократимости и веретена позиционирование протеинфосфатазой 6 PPH-6 на одноклеточной стадии C.elegans эмбрионов. Разработка 137 , 237-247. Абстрактный Статья

    Афшар, К., Уиллард, Ф.С., Коломбо, К., Джонстон, К.А., Маккудден, К.Р., Сидеровски, Д.П., и Генци, П. (2004). RIC-8 необходим для GPR-1/2-зависимой функции Gα во время асимметричного деления эмбрионов C. elegans . Мобильный 119 , 219-230. Абстрактный Статья

    Афшар, К., Уиллард, Ф.С., Коломбо, К., Сидеровски, Д.П., и Генци, П. (2005). Кортикальная локализация Gα белка GPA-16 требует функции RIC-8 во время асимметричного деления клеток C. elegans . Разработка 132 , 4449-4459. Абстрактный Статья

    Ай, Э., Пул, Д.С., Скоп, А. (2011). Длинные астральные микротрубочки и RACK-1 стабилизируют домены полярности во время фазы поддержания у эмбрионов Caenorhabditis elegans .PLoS One 6 , e19020. Абстрактный Статья

    Эндрюс Р. и Аринджер Дж. (2007). Асимметрия раннего распределения эндосом у эмбрионов C. elegans . PLoS One 2 , e493. Абстрактный Статья

    Арата, Ю., Ли, Дж. Ю., Гольдштейн, Б., и Сава, Х. (2010). Внеклеточный контроль локализации белка PAR при асимметричном деление клеток в эмбрионе C. elegans . Разработка 137 , 3337-3345. Абстрактный Статья

    Audhya, A., Desai, A., and Oegema, K. (2007). Роль Rab5 в структуре эндоплазматического ретикулума. J. Cell Biol. 178 , 43-56. Абстрактный Статья

    Балклава, З., Пант, С., Фарес, Х., и Грант, Б.Д. (2007). Полногеномный анализ определяет общие требования к полярности белки в эндоцитарном трафике. Nat. Cell Biol. 9 , 1066-1073. Абстрактный Статья

    Basham, S.E., and Rose, L.S. (1999). Мутации в ooc-5 и ooc-3 нарушают образование ооцитов и восстановление асимметричной локализации белка PAR в двухклеточных эмбрионах Caenorhabditis elegans .Dev. Биол. 215 , 253-263. Абстрактный Статья

    Basham, S.E., and Rose, L.S. (2001). Полярный ген Caenorhabditis elegans ooc-5 кодирует родственный торсину белок суперсемейства ААА-АТФаз. Разработка 128 , 4645-4656. Абстрактный

    Батчелдер, К., Данн, М.А., Чой, Б., Сух, Ю., Кэсси, К., Шим, Э.Й., Шин, Т.Х., Мелло, К., Сейду, Г., и Блэквелл, Т.К. (1999). Репрессия транскрипции с помощью белка зародышевой линии Caenorhabditis elegans PIE-1. Genes Dev. 13 , 202-212. Абстрактный Статья

    Битти, А., Мортон, Д., и Кемфуэс, К. (2010). Гомолог C. elegans из Drosophila Летальные гигантские личинки функционируют избыточно с PAR-2, чтобы поддерживать полярность в раннем эмбрионе.Разработка 137 , 3995-4004. Абстрактный Статья

    Битти, А., Мортон, Д.Г., и Кемфуэс, К. (2013). PAR-2, LGL-1 и CDC-42 GAP CHIN-1 действуют разными путями для поддержания полярности в эмбрионе C. elegans . Разработка 140 , 2005-2014 гг. Абстрактный Статья

    Бирс, м.и Kemphues, K. (2006). Истощение ко-шаперона CDC-37 выявляет два режима корковой ассоциации PAR-6 у эмбрионов C. elegans . Разработка 133 , 3745-3754. Абстрактный Статья

    Бей, Ю., Хоган, Дж., Берковиц, Л.А., Сото, М., Рошело, К.Э., Панг, К.М., Коллинз, Дж., И Мелло, К.С. (2002). Передача сигналов SRC-1 и Wnt действует вместе, чтобы специфицировать энтодерму и контролировать ориентацию расщепления в начале C.elegans эмбрионов. Dev. Мобильный 3 , 113-125. Абстрактный Статья

    Берендс, К.В., Муньос, Дж., Портегийс, В., Шмидт, Р., Григорьев, И., Боксем, М., Ахманова, А., Хек, А.Дж., и ван ден Хеувель, С. (2013). Асимметрия F-актина и связанный с эндоплазматическим ретикулумом белок TCC-1 вносят вклад в стереотипные движения веретена у эмбрионов Caenorhabditis elegans .Мол. Биол. Ячейка 24 , 2201-2215. Абстрактный Статья

    Бергманн, Д.К., Крю, Дж. Р., Крамер, Дж. М., и Вуд, В. Б. (1998). Хиральность кутикулы и форма тела в Caenorhabditis elegans . Dev. Genet. 23 , 164-174. Абстрактный Статья

    Бергманн, Д.К., Ли, М., Робертсон, Б., Цоу, М.Ф., Роуз, Л.С., и Вуд, В. (2003). Выбор эмбриональной направленности у C. elegans включает Gα-белок GPA-16. Разработка 130 , 5731-5740. Абстрактный Статья

    Берковиц, Л.А., и Стром, С. (2000). MES-1, белок, необходимый для неравномерного деления зародышевой линии у ранних эмбрионов C. elegans , похож на рецепторные тирозинкиназы и локализован на границе между зародышевой линией и клетками кишечника.Разработка 127 , 4419-4431. Абстрактный

    Бетчингер, Дж., И Кноблих, Дж. А. (2004). Не бойтесь быть другим: асимметричное деление клеток у Drosophila , C. elegans и позвоночных. Curr. Биол. 14 , R674-685. Абстрактный Статья

    Бенковская, Д., и Коуэн, C.R. (2012). Центросомы могут инициировать ось полярности из любого положения внутри одноклеточных эмбрионов C. elegans . Curr. Биол. 22 , 583-589. Абстрактный Статья

    Бауэрман, Б. (1995). Детерминанты идентичности бластомеров в раннем эмбрионе C. elegans . Bioessays 17 , 405-414. Абстрактный Статья

    Бауэрман, Б., Дрейпер, Б.В., Мелло, Си-Си, и Присс, Дж. Р. (1993). Материнский ген skn-1 кодирует белок, который неравномерно распределен в ранних эмбрионах C. elegans . Мобильный 74 , 443-452. Абстрактный Статья

    Brangwynne, C.P., Eckmann, C.R., Courson, D.S., Rybarska, A., Hoege, C., Gharakhani, J., Julicher, F., and Hyman, A.A. (2009). Гранулы зародышевой линии P представляют собой жидкие капли, которые локализуются за счет контролируемого растворения / конденсации.Наука 324 , 1729-1732. Абстрактный Статья

    Браухле, М., Баумер, К., и Генци, П. (2003). Дифференциальная активация контрольной точки репликации ДНК способствует асинхронность деления клеток у эмбрионов C. elegans . Curr. Биол. 13 , 819-827. Абстрактный Статья

    Браухле, М., Кионтке, К., МакМенамин, П., Фитч, Д.Х., и Пиано, Ф. (2009). Эволюция раннего эмбриогенеза рабдитид нематоды. Dev. Биол. 335 , 253-262. Абстрактный Статья

    Брингманн, Х. (2012). Регулятор 1 G-белка (GPR-1) локализуется в кортикальных участках искусственного механического вдавливания зигот Caenorhabditis elegans . Цитоскелет 69 , 819-825.Абстрактный Статья

    Будирахарда, Ю., и Генци, П. (2008). Асимметрия PLK-1 способствует асинхронному делению клеток эмбрионов C. elegans . Разработка 135 , 1303-1313. Абстрактный Статья

    Чейз, Д., Серафинас, К., Эшкрофт, Н., Косински, М., Лонго, Д., Феррис, Д.К., и Голден, А. (2000). Поло-подобная киназа PLK-1 необходим для разрушения ядерной оболочки и завершения мейоза у Caenorhabditis elegans . Бытие 26 , 26-41. Абстрактный Статья

    Чикс, Р.Дж., Кэнман, Дж. К., Габриэль, В. Н., Мейер, Н., Стром, С., и Гольдштейн, Б. (2004). С.elegans PAR белки функционируют за счет мобилизации и стабилизации асимметрично локализованных белковых комплексов. Curr. Биол. 14 , 851-862. Абстрактный Статья

    Коломбо, К., Гриль, С. В., Кимпл, Р. Дж., Уиллард, Ф. С., Сидеровски, Д. П., и Генци, П. (2003). Перевод сигналов полярности в асимметричное расположение веретена у эмбрионов Caenorhabditis elegans .Наука 300 , 1957-1961. Абстрактный Статья

    Couwenbergs, C., Labbe, J.C., Goulding, M., Marty, T., Bowerman, B., and Gotta, M. (2007). Передача сигналов гетеротримерного G-белка функционирует с динеином, чтобы способствовать позиционированию веретена у C. elegans . J. Cell Biol. 179 , 15-22. Абстрактный Статья

    Коуэн, К.Р., Хайман А.А. (2004a). Асимметричное деление клеток в C. elegans : кортикальная полярность и расположение веретена. Анну. Rev. Cell Dev. Биол. 20 , 427-453. Абстрактный Статья

    Коуэн, К.Р., и Хайман, А.А. (2004b). Центросомы регулируют полярность клеток независимо от сборки микротрубочек у эмбрионов C. elegans . Природа 431 , 92-96.Абстрактный Статья

    Коуэн, К.Р., и Хайман, А.А. (2007). Реорганизация актомиозина и полярность PAR у C. elegans . Разработка 134 , 1035-1043. Абстрактный Статья

    Crittenden, S.L., Rudel, D., Binder, J., Evans, T.C., and Kimble, J.(1997). Гены, необходимые для асимметрии GLP-1 в раннем эмбрионе Caenorhabditis elegans . Dev. Биол. 181 , 36-46. Абстрактный Статья

    Куэнка, А.А., Шеттер, А., Ацето, Д., Кемфуэс, К., и Сейду, Г. (2003). Поляризация зиготы C. elegans проходит через отдельные фазы становления и поддержания. Разработка 130 , 1255-1265.Абстрактный Статья

    Д’Агостино, И., Мерритт, К., Чен, П.Л., Сейду, Г., и Субраманиам, К. (2006). Трансляционная репрессия ограничивает самовыражение из C. elegans Nanos гомолог NOS-2 эмбриональной зародышевой линии. Dev. Биол. 292 , 244-252. Абстрактный Статья

    Дэниэлс, Б.Р., Добровский Т.М., Перкинс Е.М., Сан С.Х. и Вирц Д. (2010). Обогащение MEX-5 у ранних эмбрионов C. elegans опосредовано дифференциальной диффузией. Разработка 137 , 2579-2585. Абстрактный Статья

    Дэниелс, Б.Р., Перкинс, Э.М., Добровски, Т.М., Сан, С.Х. и Вирц, Д. (2009). Асимметричное обогащение PIE-1 в зиготе Caenorhabditis elegans опосредовано бинарной контрдиффузией.J. Cell Biol. 184 , 473-479. Абстрактный Статья

    Дауэс, A.T., и Манро, E.M. (2011). Олигомеризация PAR-3 может обеспечивать актин-независимый механизм для поддержания отдельных доменов белка PAR в ранних эмбрионах Caenorhabditis elegans . Биофиз. J. 101 , 1412-1422. Абстрактный Статья

    ДеРензо, К., Риз, К.Дж., и Сейду, Г. (2003). Исключение белков зародышевой плазмы из соматических линий кулин-зависимым деградация. Природа 424 , 685-689. Абстрактный Статья

    Дрейпер, Б.В., Мелло, К.С., Бауэрман, Б., Хардин, Дж., И Присс, Дж. Р. (1996). MEX-3 представляет собой белок домена KH, который регулирует идентичность бластомеров у ранних эмбрионов C. elegans .Ячейка 87 , 205-216. Абстрактный Статья

    Эйзенманн, Д. (2005). Wnt сигнализация. WormBook , изд. Исследовательское сообщество C. elegans, , WormBook, doi / 10.1895 / wormbook.1.7.1, http://www.wormbook.org.

    Энкалада, С.Е., Мартин, П.Р., Филлипс, Дж. Б., Личак, Р., Хэмилл, Д.Р., Свон, К.А., и Бауэрман, Б. (2000). Репликация ДНК дефекты задерживают деление клеток и нарушают клеточную полярность у ранних эмбрионов Caenorhabditis elegans . Dev. Биол. 228 , 225-238. Абстрактный Статья

    Эванс, Т.К., Криттенден, С.Л., Кодойанни, В., и Кимбл, Дж. (1994). Трансляционный контроль материнской мРНК glp-1 устанавливает асимметрию в C.elegans эмбрион. Ячейка 77 , 183-194. Абстрактный Статья

    Эванс, Т.К., и Хантер, К.П. (2005). Трансляционный контроль материнских РНК. WormBook , изд. Исследовательское сообщество C. elegans, , WormBook, doi / 10.1895 / wormbook.1.34.1, http://www.wormbook.org.

    Фэи, Б., и Дегнан Б. (2010). Происхождение эпителия животных: выводы из генома губки. Evol. Devel. 12 , 601-617. АннотацияСтатья

    Фортин С.М., Маршалл С.Л., Джегер Е.С., Грин П.Е., Брэди Л.К., Айзек Р.Э., Шрандт Дж.С., Брукс Д.Р. и Личак, Р. (2010). Аминопептидаза PAM-1 регулирует позиционирование центросом для обеспечения спецификации передне-задней оси в одной клетке C.elegans эмбрионов. Dev. Биол. 344 , 992-1000. АннотацияСтатья

    Галли, М., Муньос, Дж., Портегийс, В., Боксем, М., Гриль, С.В., Хек, А.Дж., и ван ден Хевел, С. (2011). фосфорилаты aPKC Связанный с NuMA LIN-5 для позиционирования митотического веретена во время асимметричного деления. Nat. Cell Biol. 13 , 1132-1138. АннотацияСтатья

    Галли, М., и ван ден Хеувел, С. (2008). Определение плоскости дробления у ранних зародышей C. elegans . Анну. Преподобный Жене. 42 , 389-411. АннотацияСтатья

    Галло, К.М., Ван, Дж. Т., Мотеги, Ф., и Сейду, Г. (2010). Цитоплазматическое разделение компонентов гранул Р не требуется. для определения зародышевой линии в C. elegans . Наука 330 , 1685–1689.АннотацияСтатья

    Гош Д. и Сейду Г. (2008). Ингибирование транскрипции с помощью белка зародышевой линии Caenorhabditis elegans PIE-1: генетические доказательства различных механизмов, направленных на инициирование и удлинение. Генетика 178 , 235-243. АннотацияСтатья

    Геринг, Н.W., Hoege, C., Grill, S.W., и Hyman, A.A. (2011a). Белки PAR свободно диффундируют через переднезадний граница у поляризованных эмбрионов C. elegans . J. Cell Biol. 193 , 583-594. АннотацияСтатья

    Goehring, N.W., Trong, P.K., Bois, J.S., Chowdhury, D., Nicola, E.M., Hyman, A.A., and Grill, S.W. (2011b). Поляризация Белки PAR посредством адвективного запуска системы формирования паттерна.Наука 334 , 1137-1141. АннотацияСтатья

    Гольдштейн, Б. (1995a). Анализ ответа на индукцию кишечника у эмбриона C. elegans . Разработка 121 , 1227-1236. Абстрактный

    Гольдштейн, Б. (1995b). Клеточные контакты ориентируют некоторые оси клеточного деления у эмбриона Caenorhabditis elegans .J. Cell Biol. 129 , 1071-1080. АннотацияСтатья

    Гольдштейн, Б., и Хирд, С. (1996). Спецификация переднезадней оси у Caenorhabditis elegans . Разработка 122 , 1467-1474. Абстрактный

    Гольдштейн, Б., и Макара, И.Г. (2007). Белки PAR: фундаментальные игроки в поляризации клеток животных.Dev. Ячейка 13 , 609-622. АннотацияСтатья

    Гольдштейн Б., Такешита Х., Мизумото К. и Сава Х. (2006). Сигналы Wnt могут действовать как позиционные сигналы при установлении полярность ячейки. Dev. Ячейка 10 , 391-396. АннотацияСтатья

    Gomes, J.E., Encalada, S.Е., Свон, К.А., Шелтон, К.А., Картер, Дж. К., и Бауэрман, Б. (2001). Материнский ген spn-4 кодирует предсказанный белок RRM, необходимый для ориентации митотического веретена и формирования паттерна клеточной судьбы у ранних эмбрионов C. elegans . Разработка 128 , 4301-4314. Абстрактный

    Gönczy, P., Pichler, S., Kirkham, M., and Hyman, A.A. (1999). Цитоплазматический динеин необходим для различных аспектов MTOC. позиционирование, включая разделение центросом, в одноклеточном эмбрионе Caenorhabditis elegans .J. Cell Biol. 147 , 135-150. Абстрактный

    Gönczy, P., and Rose, L.S. (2005). Асимметричное деление клеток и формирование оси у эмбриона. WormBook , изд. C. elegans, исследовательское сообщество , WormBook, doi / 10.1895 / wormbook.1.30.1, http://www.wormbook.org

    Готта, М., Авраам, М.К. и Аринджер Дж. (2001). CDC-42 контролирует раннюю полярность клеток и ориентацию веретена у C. elegans . Curr. Биол. 11 , 482-488. Абстрактный Статья

    Готта, М., Аринджер, Дж. (2001). Определенные роли Gα и Gβγ в регуляции положения и ориентации веретена у эмбрионов Caenorhabditis elegans . Nat. Cell Biol. 3 , 297-300.Абстрактный Статья

    Готта, М., Донг, Ю., Петерсон, Ю.К., Ланье, С.М., и Аринджер, Дж. (2003). Асимметрично распределенные C. elegans гомологи AGS3 / PINS контролируют положение веретена в раннем эмбрионе. Curr. Биол. 13 , 1029-1037. Абстрактный Статья

    Гулдинг, М.Б., Кэнман, Дж. К., Сеннинг, Э. Н., Маркус, А. Х., и Бауэрман, Б. (2007). Контроль ядерной центровки в зиготе C. elegans с помощью рецепторнезависимой передачи сигналов Gα и миозина II. J. Cell Biol. 178 , 1177-1191. Абстрактный Статья

    Гриффин, Э. Э., Одде, Д. Дж., И Сейду, Г. (2011). Регулирование градиента MEX-5 с помощью пространственно сегрегированного цикла киназа / фосфатаза.Ячейка 146 , 955-968. Абстрактный Статья

    Grill, S.W., Gönczy, P., Stelzer, E.H., и Hyman, A.A. (2001). Полярность контролирует силы, управляющие асимметричным позиционированием шпинделя в эмбрионе Caenorhabditis elegans . Природа 409 , 630-633. Абстрактный Статья

    Гриль, С.W., Howard, J., Schaffer, E., Stelzer, E.H., и Hyman, A.A. (2003). Распределение активных генераторов силы контролирует положение митотического веретена. Наука 301 , 518-521. Абстрактный Статья

    Guedes, S., и Priess, J.R. (1997). Белок C. elegans MEX-1 присутствует в бластомерах зародышевой линии и является компонентом P-гранул. Разработка 124 , 731-739.Абстрактный

    Гусновски Е.М., Срайко М. (2011). Визуализация динеин-зависимых микротрубочек, скользящих по коре клеток: последствия для позиционирования шпинделя. J. Cell Biol. 194 , 377-386. Абстрактный Статья

    Гювен-Озкан, Т., Робертсон, С.М., Ниши Ю., Линь Р. (2010). zif-1 репрессия трансляции определяет вторую, взаимоисключающую функцию OMA в репрессии транскрипции зародышевой линии. Разработка 137 , 3373-3382. Абстрактный Статья

    Хао Ю., Бойд Л. и Сейду Г. (2006). Стабилизация клеточной полярности с помощью белка C. elegans RING PAR-2.Dev. Ячейка 10 , 199-208. Абстрактный Статья

    Гесс, Х.А., Ропер, Дж. К., Гриль, С. У., и Келле, М. Р. (2004). RGS-7 завершает рецепторнезависимый цикл гетеротримерного G-белка, чтобы асимметрично регулировать положение митотического веретена в С. elegans . Ячейка 119 , 209-218. Абстрактный Статья

    Хирд, С.Н., Уайт Дж. (1993). Полярность коркового и цитоплазматического потоков в ранних эмбриональных клетках Caenorhabditis elegans . J. Cell Biol. 121 , 1343-1355. Абстрактный Статья

    Hoege, C., Constantinescu, A.T., Schwager, A., Goehring, N.W., Kumar, P., and Hyman, A.A. (2010). LGL может разделить кору одноклеточных эмбрионов Caenorhabditis elegans на два домена.Curr. Биол. 20 , 1296-1303. Абстрактный Статья

    Хуанг, Н.Н., Мутц, Д.Э., Уолхаут, А.Дж., Видаль, М., и Хантер, К.П. (2002). MEX-3 C. elegans взаимодействующие белки связывают полярность клеток с асимметричной экспрессией генов у Caenorhabditis elegans . Разработка 129 , 747-759. Абстрактный

    Хуанг, С., Шетти, П., Робертсон, С.М., и Лин, Р. (2007). Спецификация судьбы бинарных клеток во время эмбриогенеза C. elegans , управляемая повторяющейся реципрокной асимметрией TCF POP-1 и его коактиватора β-catenin SYS-1. Разработка 134 , 2685-2695. Абстрактный Статья

    Хантер, С.П., и Кеньон, К. (1996). Пространственные и временные регуляторы нацелены на активность спецификации бластомера pal-1 в одной линии бластомера в C.elegans эмбрионов. Ячейка 87 , 217-226. Абстрактный Статья

    Хайен, В., Трембле-Будро, Т., Велмуруган, Р., Грант, Б.Д., Лорк, Д., и Лаббе, Дж. К. (2012). RAB-5 контролирует кортикальную организацию и динамику белков PAR для поддержания полярности раннего эмбриона C. elegans . PLoS One 7 , e35286. Абстрактный Статья

    Джадхав, С., Рана, М., и Субраманиам, К. (2008). Множественные материнские белки координируются, чтобы ограничить трансляцию C. elegans nanos-2 в первичные зародышевые клетки. Развитие 135 , 1803-1812. Абстрактный Статья

    Дженкинс, Н., Саам, Дж. Р., и Манго, С.Е. (2006). CYK-4 / GAP обеспечивает локальный сигнал для инициации переднезадней полярности при оплодотворении. Наука 313 , 1298-1301.Абстрактный Статья

    Кей, А.Дж., и Хантер, К.П. (2001). CDC-42 регулирует локализацию и функцию белка PAR для контроля клеточной и эмбриональной полярности у C. elegans . Curr. Биол. 11 , 474-481. Абстрактный Статья

    Кемфуэс, К.Дж. И Стром С. (1997). Оплодотворение и установление полярности у эмбриона. В C. elegans II, D.L. Риддл, Т. Блюменталь, Б. Дж. Мейер и Дж. Р. Присс, ред. (Колд-Спринг-Харбор, Нью-Йорк: Лаборатория Колд-Спринг-Харбор Press), стр. 335-359. Абстрактный

    Ким, С., Ишидатэ, Т., Шарма, Р., Сото, М.С., Конте, Д., мл., Мелло, К.С., и Шираяма, М. (2013). Wnt и CDK-1 регулируют высвобождение кортикальным слоем WRM-1 / β-catenin для контроля ориентации клеточных делений у ранних Caenorhabditis elegans эмбрионов.Proc. Natl. Акад. Sci. США 110 , E918-927. Абстрактный

    Кимура, А., Онами, С. (2005). Компьютерное моделирование и обработка изображений показывают, что тяговое усилие, зависящее от длины, является основным. механизм миграции через проядер C. elegans самцов. Dev. Мобильный 8 , 765-775. Абстрактный Статья

    Кимура, К., и Кимура, А. (2011). Внутриклеточные органеллы опосредуют притягивающую силу цитоплазмы для центросомного центрирования в Caenorhabditis elegans ранний эмбрион. Proc. Natl. Акад. Sci. США 108 , 137-142. Абстрактный Статья

    Котак С., Буссо К. и Генци П. (2012). Кортикальный динеин имеет решающее значение для правильного позиционирования веретена в клетках человека.Дж. Cell Biol. 199 , 97-110. Абстрактный Статья

    Козловски К., Срайко М. и Неделек Ф. (2007). Контакты кортикальных микротрубочек позиционируют веретено у C. elegans эмбрионов. Ячейка 129 , 499-510. Абстрактный Статья

    Крюгер, Л.E., Wu, J.C., Tsou, M.F., and Rose, L.S. (2010). LET-99 подавляет боковые задние тянущие силы во время асимметричного удлинения веретена у эмбрионов C. elegans . J. Cell Biol. 189 , 481-495. Абстрактный Статья

    Кумфер, К.Т., Кук, С.Дж., Сквирелл, Дж. М., Элисейри, К. В., Пил, Н., О’Коннелл, К.Ф., и Уайт, Дж. (2010). CGEF-1 и CHIN-1 регулируют активность CDC-42 во время асимметричного деления у эмбриона Caenorhabditis elegans .Мол. Биол. Ячейка 21 , 266-277. Абстрактный Статья

    Лаббе, Дж. К., Мэддокс, П. С., Салмон, Э. Д., и Гольдштейн, Б. (2003). Белки PAR регулируют динамику микротрубочек в клетке. cortex в C. elegans . Curr. Биол. 13 , 707-714. Абстрактный Статья

    Лаббе, Ж.К., Маккарти, Е.К., и Гольдштейн, Б. (2004). Силы, которые асимметрично позиционируют митотическое веретено, связаны до окончания сборки шпинделя. J. Cell Biol. 167 , 245-256 Epub 2004 октябрь 2018. Абстрактный Статья

    Ли, М.Х., и Шедл, Т. (2006). РНК-связывающие белки. WormBook , изд. Исследовательское сообщество C. elegans, , WormBook, doi / 10.1895 / wormbook.1.79.1, http://www.wormbook.org.

    Лин Р., Хилл Р. Дж. И Присс Дж. Р. (1998). POP-1 и передне-задние решения судьбы у эмбрионов C. elegans . Ячейка 92 , 229-239. Абстрактный Статья

    Лин Р., Томпсон С. и Присс Дж. Р. (1995). pop-1 кодирует белок HMG-бокса, необходимый для спецификации предшественника мезодермы в начале C.elegans эмбрионов. Мобильный 83 , 599-609. Абстрактный Статья

    Lyczak, R., Zweier, L., Group, T., Murrow, M.A., Snyder, C., Kulovitz, L., Beatty, A., Smith, K., and Bowerman, B. (2006). Пуромицин-чувствительная аминопептидаза PAM-1 необходима для мейотического выхода и переднезадней полярности у одноклеточного эмбриона Caenorhabditis elegans .Разработка 133 , 4281-4892. Абстрактный Статья

    Мадуро, М.Ф. (2006). Спецификация эндомезодермы в Caenorhabditis elegans и других нематодах. BioEssays 28 , 1010-1022. Абстрактный Статья

    Мадуро, М.Ф. (2010).Спецификация клеточной судьбы у эмбриона C. elegans . Dev. Дин. 239 , 1315-1329. Абстрактный Статья

    Манго, С.Э., Торп, С.Дж., Мартин, П.Р., Чемберлен, С.Х., и Бауэрман, Б. (1994). Два материнских гена, apx-1 и pie-1 , необходимы для различения судьбы эквивалентных бластомеров в раннем эмбрионе Caenorhabditis elegans .Разработка 120 , 2305-2315. Абстрактный

    Mayer, M., Depken, M., Bois, J.S., Julicher, F., and Grill, S.W. (2010). Анизотропия коркового напряжения раскрывает физическое основа поляризующих корковых потоков. Природа 467 , 617-621. Абстрактный Статья

    Маккарти Кэмпбелл, Э.К., Вертс, А.Д., и Гольдштейн, Б. (2009). Таймер клеточного цикла для асимметричного позиционирования шпинделя. PLoS Биол 7 , e1000088. Абстрактный Статья

    Макклоски, Р.Дж., и Кемфуэс, К.Дж. (2012). Аппарат деубиквитилирования необходим для эмбриональной полярности у Caenorhabditis elegans . PLoS Genet 8 , e1003092. Абстрактный Статья

    МакНелли, Ф.Дж. (2013). Механизмы позиционирования шпинделя. J. Cell Biol. 200 , 131-140. Абстрактный Статья

    МакНалли, К.Л., Фабрициус, А.С., Эллефсон, М.Л., Флинн, Дж. Р., Милан, Дж. А., и МакНелли, Ф. Дж. (2012). Кинезин-1 предотвращает захват мейотического веретена ооцита спермой. Dev. Мобильный 22 , 788-798. Абстрактный Статья

    Мелло, К.К., Шуберт, К., Дрейпер, Б., Чжан, В., Лобель, Р., и Присс, Дж. Р. (1996). Белок PIE-1 и спецификация зародышевой линии у эмбрионов C. elegans . Природа 382 , 710-712. Абстрактный Статья

    Merdes, A., Ramyar, K., Vechio, J.D., and Cleveland, D.W. (1996). Комплекс NuMA и цитоплазматического динеина необходим для сборка митотического веретена.Мобильный 87 , 447-458. Абстрактный Статья

    Микки, К.М., Мелло, К.С., Монтгомери, М.К., Файер, А., и Присс, Дж. Р. (1996). Индуктивное взаимодействие в эмбрионах C. elegans на стадии 4 клеток включает экспрессию APX-1 в сигнальной клетке. Разработка 122 , 1791-1798. Абстрактный

    Миллер, К.Дж., И Рэнд, Дж. Б. (2000). Роль RIC-8 (Synembryn) и GOA-1 (G o α) в регуляции субнабора движений центросом во время раннего эмбриогенеза у Caenorhabditis elegans . Генетика 156 , 1649-1660. Абстрактный

    Морин, X., и Беллаиш, Y. (2011). Ориентация митотического веретена при асимметричных и симметричных делениях клеток у животных разработка.Dev. Ячейка 21 , 102-119. Абстрактный Статья

    Мотеги Ф. и Сугимото А. (2006). Последовательное функционирование ECT-2 RhoGEF, RHO-1 и CDC-42 устанавливает клеточную полярность у эмбрионов Caenorhabditis elegans . Nat. Cell Biol. 8 , 978-985. Абстрактный Статья

    Мотеги, Ф., Зонис, С., Хао, Ю., Куэнка, А.А., Гриффин, Э., и Сейду, Г. (2011). Микротрубочки вызывают самоорганизацию поляризованных доменов PAR в зиготах Caenorhabditis elegans . Nat. Cell Biol. 13 , 1361-1367. Абстрактный Статья

    Манро, Э., и Бауэрман, Б. (2009). Нарушение клеточной симметрии во время развития Caenorhabditis elegans .Харб Холодного источника. Перспектива. Биол. 1 , а003400. Абстрактный Статья

    Манро, Э., Нэнс, Дж. И Присс, Дж. Р. (2004). Кортикальные потоки, питаемые асимметричным сокращением, транспортируют белки PAR к устанавливают и поддерживают передне-заднюю полярность в раннем эмбрионе C. elegans . Dev. Ячейка 7 , 413-424. АннотацияСтатья

    Накаяма, Ю., Шивас, Дж. М., Пул, Д. С., Сквирелл, Дж. М., Кулькоски, Дж. М., Шлиде, Дж. Б., Скоп, А. (2009). Dynamin участвует в поддержании передней полярности у эмбриона Caenorhabditis elegans . Dev. Мобильный 16 , 889-900. Абстрактный Статья

    Nguyen-Ngoc, T., Afshar, K., and Gönczy, P. (2007). Сцепление кортикального динеина и белков Gα опосредует расположение веретена. in Caenorhabditis elegans .Nat. Cell Biol. 9 , 294-302. Абстрактный Статья

    Ниши, Ю., Роджерс, Э., Робертсон, С.М., и Лин, Р. (2008). Полокиназы регулируют эмбриональную полярность C. elegans посредством связывания с DYRK2-примированными MEX-5 и MEX-6. Разработка 135 , 687-697. Абстрактный Статья

    Niwayama, R., Шинохара, К., Кимура, А. (2011). Гидродинамические свойства цитоплазмы достаточны, чтобы опосредовать цитоплазматический течет в эмбрионе Caenorhabditis elegans . Proc. Natl. Акад. Sci. США 108 , 11900-11905. Абстрактный Статья

    О’Рурк, С.М., Кристенсен, С.Н., и Бауэрман, Б. (2010). Caenorhabditis elegans EFA-6 ограничивает рост микротрубочек в коре клеток.Nat. Cell Biol. 12 , 1235-1241. Абстрактный Статья

    О’Рурк, С.М., Дорфман, доктор медицины, Картер, Дж. К., и Бауэрман, Б. (2007). Модификаторы динеина в C. elegans : легкие цепи подавляют условные мутанты тяжелой цепи. PLoS Genet 3 , e128. Абстрактный Статья

    Эгема, К., Десаи, А., Рыбина, С., Киркхам, М., Хайман, А.А. (2001). Функциональный анализ сборки кинетохор у Caenorhabditis elegans . J. Cell Biol. 153 , 1209-1226. Абстрактный Статья

    Огура К., Кишимото Н., Митани С., Генгё-Андо К. и Кохара Ю. (2003). Трансляционный контроль материнской мРНК glp-1 с помощью POS-1 и взаимодействующего с ним белка SPN-4 в Caenorhabditis elegans .Разработка 130 , 2495-2503. Абстрактный Статья

    Олденбрук, М., Робертсон, С.М., Гувен-Озкан, Т., Гор, С., Ниши, Ю., и Лин, Р. (2012). Функция множественных РНК-связывающих белков комбинаторно для контроля ограниченного сомой паттерна экспрессии субъединицы ZIF-1 лигазы E3. Dev. Биол. 363 , 388-398. Абстрактный Статья

    Пагано, Дж.М., Фарли Б.М., Эссьен К.И., Райдер С.П. (2009). Распознавание РНК детерминантой судьбы эмбриональных клеток и фактор тотипотентности зародышевой линии МЕХ-3. Proc. Natl. Акад. Sci. США 106 , 20252-20257. Абстрактный Статья

    Пагано, Дж. М., Фарли, Б. М., Маккойг, Л. М., и Райдер, С. П. (2007). Молекулярные основы распознавания РНК по эмбриональной полярности определитель МЕХ-5.J. Biol. Chem. 282 , 8883-8894. Абстрактный Статья

    Пейдж Б.Д., Диде С.Дж., Тенлен Дж. Р. и Фергюсон Э. (2007). EEL-1, убиквитинлигаза Hect E3, контролирует асимметрию и персистентность фактора транскрипции SKN-1 в ранних эмбрионах C. elegans . Разработка 134 , 2303-2314. Абстрактный Статья

    Панбьянко, К., Weinkove, D., Zanin, E., Jones, D., Divecha, N., Gotta, M., and Ahringer, J. (2008). Казеинкиназа 1 и Белки PAR регулируют асимметрию фермента синтеза PIP 2 для асимметричного позиционирования веретена. Dev. Ячейка 15 , 198-208. Абстрактный Статья

    Парк, Д.Х., и Роуз, Л.С. (2008). Динамическая локализация LIN-5 и GPR-1/2 в доменах генерации кортикальных сил во время позиционирования шпинделя.Dev. Биол. 315 , 42-54. Абстрактный Статья

    Pecreaux, J., Roper, J.C., Kruse, K., Julicher, F., Hyman, A.A., Grill, S.W., and Howard, J. (2006). Колебания шпинделя во время асимметричного деления клеток требуется пороговое количество активных генераторов кортикальных сил. Curr. Биол. 16 , 2111-2122. Абстрактный Статья

    Петрасек, З., Hoege, C., Mashaghi, A., Ohrt, T., Hyman, A.A., и Schwille, P. (2008). Характеристика динамики белка при асимметричном делении клеток методом сканирующей флуоресцентной корреляционной спектроскопии. Биофиз. J. 95 , 5476-5486. Абстрактный Статья

    Филлипс, Б.Т., Кидд, А.Р., 3-й, Кинг, Р., Хардин, Дж., И Кимбл, Дж. (2007). Взаимная асимметрия SYS-1 / β-catenin и POP-1 / TCF контролирует асимметричные деления у Caenorhabditis elegans .Proc. Natl. Акад. Sci. США 104 , 3231-3236. Абстрактный Статья

    Пихлер, С., Генци, П., Шнабель, Х., Позняковски, А., Эшфорд, А., Шнабель, Р., Хайман, А.А. (2000). OOC-3, новый предполагаемый трансмембранный белок, необходимый для создания кортикальных доменов и ориентации веретена в бластомере P 1 эмбрионов C. elegans .Разработка 127 , 2063-2073. Абстрактный

    Поль К. (2011). Рисунок слева направо в эмбрионе C. elegans : уникальные механизмы и общие принципы. Commun. Интегр. Биол. 4 , 34-40. Абстрактный Статья

    Поль, К., и Бао, З. (2010). Хиральные силы организуют формирование левого и правого паттернов в C.elegans путем разъединения средней линии и переднезадней оси. Dev. Ячейка 19 , 402-412. Абстрактный Статья

    Присс, Дж. Р. (2005). Передача сигналов Notch в эмбрионе C. elegans . WormBook , изд. Исследовательское сообщество C. elegans, , WormBook, doi / 10.1895 / wormbook.1.10.2, http://www.wormbook.org.

    Редеманн, С., Pecreaux, J., Goehring, N.W., Khairy, K., Stelzer, E.H., Hyman, A.A., and Howard, J. (2010). Мембранные инвагинации выявить участки коры, которые притягивают митотические веретена у одноклеточных C. elegans эмбрионов. PLoS One 5 , e12301. Абстрактный Статья

    Редеманн, С., Шлоиссниг, С., Эрнст, С., Позняковский, А., Айло, С., Хайман, А.А., и Брингманн, Х. (2011). На основе адаптации кодонов контроль экспрессии белка у C. elegans . Nat. Методы 8 , 250-252. Абстрактный Статья

    Риз, К.Дж., Данн, М.А., Уоддл, Дж. А., и Сейду, Г. (2000). Асимметричная сегрегация PIE-1 в C. elegans опосредуется двумя комплементарными механизмами, которые действуют через отдельные домены белка PIE-1.Мол. Мобильный 6 , 445-455. Абстрактный Статья

    Риверс, Д.М., Морено, С., Абрахам, М., и Аринджер, Дж. (2008). Белки PAR направляют асимметрию регуляторов клеточного цикла Поло-подобная киназа и Cdc25. J. Cell Biol. 180 , 877-885. Абстрактный Статья

    Рошело, К.Э., Ясуда, Дж., Шин, Т.Х., Лин, Р., Сава, Х., Окано, Х., Присс, Дж. Р., Дэвис, Р.Дж., и Мелло, К.С. (1999). WRM-1 активирует протеинкиназу LIT-1 для передачи сигналов передней / задней полярности у C. elegans . Ячейка 97 , 717-726. Абстрактный Статья

    Роуз, Л.С., и Кемфуэс, К.Дж. (1998a). Ранняя разработка модели C.elegans эмбрион. Анну. Преподобный Жене. 32 , 521-545. Абстрактный Статья

    Роуз, Л.С., и Кемфус, К. (1998b). Ген let-99 необходим для правильной ориентации веретена во время расщепления эмбриона C. elegans . Разработка 125 , 1337-1346. Абстрактный

    Сэдлер, П.Л. и Шейкс, округ Колумбия (2000). Безъядерный Caenorhabditis elegans Сперматозоиды могут ползать, оплодотворять ооциты и направлять передне-заднюю поляризацию одноклеточного эмбриона. Разработка 127 , 355-366. Абстрактный

    Сава, Х. (2012). Контроль полярности клеток и асимметричного деления у C. elegans . Curr. Верхний. Dev. Биол. 101 , 55-76. Абстрактный Статья

    Шенк, К., Брингманн, Х., Хайман, А.А., и Коуэн, К.Р. (2010). Коррекция кортикального домена изменяет границу полярности чтобы соответствовать цитокинетической борозде у эмбрионов C. elegans . Разработка 137 , 1743-1753. Абстрактный Статья

    Schetter, A., Askjaer, P., Piano, F., Mattaj, I., and Kemphues, K. (2006). Нуклеопорины NPP-1, NPP-3, NPP-4, NPP-11 и NPP-13 необходимы для правильной ориентации шпинделя в C.elegans . Dev. Биол. 289 , 360-371. Абстрактный Статья

    Шлезингер А., Шелтон К.А., Малуф Дж. Н., Менегини М. и Бауэрман Б. (1999). Компоненты пути Wnt ориентируют митотический веретено в раннем эмбрионе Caenorhabditis elegans без необходимости транскрипции гена в отвечающей клетке. Genes Dev. 13 , 2028-2038.Абстрактный Статья

    Шмидт Д.Дж., Роуз Д.Дж., Сакстон В.М. и Стром С. (2005). Функциональный анализ тяжелой цепи цитоплазматического динеина у Caenorhabditis elegans с быстродействующими термочувствительными мутациями. Мол. Биол. Ячейка 16 , 1200-1212. Абстрактный Статья

    Шнабель Р.и Присс, Дж. Р. (1997). Спецификация клеточных судеб раннего эмбриона. В C. elegans II, D.L. Риддл, Т. Блюменталь, Б. Дж. Мейер и Дж. Р. Присс, ред. (Колд-Спринг-Харбор, Нью-Йорк: Лаборатория Колд-Спринг-Харбор Press), стр. 361-382. Абстрактный

    Шонегг, С., Хайман, А.А. (2006). CDC-42 и RHO-1 координируют сократимость актомиозина и локализацию белка PAR во время установления полярности в C.elegans эмбрионов. Разработка 133 , 3507-3516. Абстрактный Статья

    Шуберт К.М., Лин Р., де Фрис К.Дж., Пластерк Р.Х. и Присс Дж.Р. (2000). MEX-5 и MEX-6 действуют, чтобы установить асимметрию сомы / зародышевой линии у ранних эмбрионов C. elegans . Мол. Мобильный 5 , 671-682. Абстрактный Статья

    Шульце, Дж., и Ширенберг, Э. (2011). Эволюция эмбрионального развития нематод. EvoDevo 2 , 18. Абстрактный Статья

    Шелтон, С.А., и Бауэрман, Б. (1996). Зависящие от времени ответы на индукцию, опосредованную glp-1 , у ранних эмбрионов C. elegans . Разработка 122 , 2043-2050 гг. Абстрактный

    Шелтон, К.А., Картер, Дж. К., Эллис, Г. К., и Бауэрман, Б. (1999). Немышечный ген регуляторной легкой цепи миозина mlc-4 необходим для цитокинеза, передне-задней полярности и морфологии тела во время эмбриогенеза Caenorhabditis elegans . J. Cell Biol. 146 , 439-451. Абстрактный Статья

    Shin, T.H., Yasuda, J., Rocheleau, C.E., Lin, R., Soto, M., Бей Ю., Дэвис Р.Дж. и Мелло К.С. (1999). MOM-4, белок, связанный с киназой киназы MAP, активирует киназу WRM-1 / LIT-1 для передачи сигналов передней / задней полярности в C. elegans . Мол. Ячейка 4 , 275-280. Абстрактный Статья

    Шинар Т., Мана М., Пиано Ф. и Шелли М.Дж. (2011). Модель цитоплазматического движения микротрубочек в одноклеточный эмбрион Caenorhabditis elegans .Proc. Natl. Акад. Sci. США 108 , 10508-10513. Абстрактный Статья

    Sonneville, R., and Gönczy, P. (2004). zyg-11 и cul-2 регулируют прогрессию через мейоз II и установление полярности у C. elegans . Развитие 131 , 3527-3535 3543. Абстрактный Статья

    Спига, Ф.М., Пруто, М., Готта, М. (2013). Киназа TAO KIN-18 регулирует сократимость и установление полярности у эмбриона C. elegans . Dev. Биол. 373 , 26-38. Абстрактный Статья

    Шринивасан Д.Г., Фиск Р.М., Сюй Х. и ван ден Хеувел С. (2003). Комплекс белков LIN-5 и GPR регулирует передачу сигналов G-белка и функцию веретена у C.elegans . Genes Dev. 17 , 1225-1239. Epub 2003, май 1222. Абстрактный Статья

    Сент-Джонстон, Д., Аринджер, Дж. (2010). Полярность клеток в яйцах и эпителии: параллели и разнообразие. Мобильный 141 , 757-774. Абстрактный Статья

    Субраманиам, К.и Сейду Г. (1999). nos-1 и nos-2 , два гена, родственные Drosophila nanos, регулируют развитие и выживание первичных зародышевых клеток у Caenorhabditis elegans . Разработка 126 , 4861-4871. Абстрактный

    Сугиока К., Мизумото К. и Сава Х. (2011). Wnt регулирует асимметрию веретена для образования асимметричного ядерного β-катенина в С.elegans . Мобильный 146 , 942-954. Абстрактный Статья

    Салстон, Дж. Э., Ширенберг, Э., Уайт, Дж. Дж., И Томсон, Дж. (1983). Линия эмбриональных клеток нематоды Caenorhabditis elegans . Dev. Биол. 100 , 64-119. Абстрактный Статья

    Сумиёси, Э., Такахаши, С., Обата, Х., Сугимото, А., и Кохара, Ю. (2011). Β-catenin HMP-2 функционирует ниже Src параллельно с путем Wnt в раннем эмбриогенезе C. elegans . Dev. Биол. 355 , 302-312. Абстрактный Статья

    Табара, Х., Хилл, Р.Дж., Мелло, Си-Си, Присс, Дж. Р., и Кохара, Ю. (1999). pos-1 кодирует цитоплазматический белок цинкового пальца, необходимый для спецификации зародышевой линии у C.elegans . Разработка 126 , 1-11. Абстрактный

    Такешита Х. и Сава Х. (2005). Асимметричные кортикальные и ядерные локализации WRM-1 / бета-катенина во время асимметричного деления клеток у C. elegans . Genes Dev. 19 , 1743-1748. Абстрактный Статья

    Тененхаус, К., Шуберт, К., и Сейду, Г. (1998). Генетические требования для локализации PIE-1 и ингибирования экспрессии генов в зародышевой линии Caenorhabditis elegans . Dev. Биол. 200 , 212-224. Абстрактный Статья

    Тененхаус, К., Субраманиам, К., Данн, М.А., и Сейду, Г. (2001). PIE-1 представляет собой бифункциональный белок, который регулирует экспрессию материнских и зиготических генов в зародышевой линии Caenorhabditis elegans .Genes Dev. 15 , 1031-1040. Абстрактный Статья

    Тенлен, Дж. Р., Молк, Дж. Н., Лондон, Н., Пейдж, Б. Д. и Присс, Дж. Р. (2008). Асимметрия MEX-5 у одноклеточных C. elegans эмбрионов требует PAR-4- и PAR-1-зависимого фосфорилирования. Разработка 135 , 3665-3675. Абстрактный Статья

    Тенлен, Дж.R., Schisa, J.A., Diede, S.J., и Page, B.D. (2006). Сниженная доза pos-1 подавляет мутанты Mex и выявляет сложные взаимодействия между белками цинковых пальцев CCCH во время эмбриогенеза Caenorhabditis elegans . Генетика 174 , 1933-1945. Абстрактный Статья

    Торп, К. Дж., Шлезингер, А., Картер, Дж. К., и Бауэрман, Б. (1997). Передача сигналов Wnt поляризует ранний C.elegans , чтобы отличить энтодерму от мезодермы. Мобильный 90 , 695-705. Абстрактный Статья

    Thyagarajan, K., Afshar, K., and Gönczy, P. (2011). Полярность опосредует асимметричный транспорт гетеротримерного G-белка Gβ. субъединица GPB-1 в эмбрионах C. elegans . Разработка 138 , 2773-2782. Абстрактный Статья

    Тостевин, Ф., и Ховард, М. (2008). Моделирование установления полярности белка PAR в одноклеточном эмбрионе C. elegans . Биофиз. J. 95 , 4512-4522. Абстрактный Статья

    Цай, М.С., и Аринджер, Дж. (2007). Микротрубочки участвуют в формировании передне-задней оси у эмбрионов C. elegans . J. Cell Biol. 179 , 397-402. Абстрактный Статья

    Це, Ю.К., Вернер, М., Лонгини, К.М., Лаббе, Дж. К., Гольдштейн, Б., и Глотцер, М. (2012). Активация RhoA во время поляризации и цитокинеза ранних эмбрионов Caenorhabditis elegans по-разному зависит от NOP-1 и CYK-4. Мол. Биол. Ячейка 23 , 4020-4031. Абстрактный Статья

    Цоу, М.Ф., Хаяси, А., ДеБелла, Л.Р., МакГрат, Г., и Роуз, Л.С. (2002).LET-99 определяет положение веретена и асимметрично обогащается в ответ на сигналы полярности PAR у эмбрионов C. elegans . Разработка 129 , 4469-4481. Абстрактный

    Цоу, М.Ф., Хаяси, А., и Роуз, Л.С. (2003a). LET-99 противостоит передаче сигналов Gα / GPR для создания асимметрии для позиционирования веретена в ответ на передачу сигналов PAR и MES-1 / SRC-1. Разработка 130 , 5717-5730.. Абстрактный Статья

    Цоу, М.Ф., Ку, В., Хаяси, А., и Роуз, Л.С. (2003b). PAR-зависимые и зависящие от геометрии механизмы позиционирования шпинделя. J. Cell Biol. 160 , 845-855. Абстрактный Статья

    Валленфанг, М.Р. и Сейду Г. (2000). Поляризация передне-задней оси C. elegans — это процесс, направленный по микротрубочкам. Природа 408 , 89-92. Абстрактный Статья

    Ван, Дж. Т., и Сейду, Г. (2013). Спецификация зародышевых клеток. Adv. Exp. Med. Биол. 757 , 17-39. Абстрактный Статья

    Вертс, А.Д., и Гольдштейн, Б. (2011). Как передача сигналов между клетками может ориентировать митотическое веретено. Семин. Cell Dev. Биол. 22 , 842-849. Абстрактный Статья

    Вертс, А.Д., Ро-Джонсон, М., и Голдштейн, Б. (2011). Динамическая локализация белков TPR-GoLoco C. elegans опосредует ориентацию митотического веретена с помощью внешней передачи сигналов. Разработка 138 , 4411-4422.Абстрактный Статья

    Wu, J.C., and Rose, L.S. (2007). PAR-3 и PAR-1 ингибируют локализацию LET-99, чтобы генерировать кортикальную полосу, важную для позиционирования веретена у эмбрионов Caenorhabditis elegans . Мол. Биол. Ячейка 18 , 4470-4482. Абстрактный Статья

    Чжан, Х., Скоп А.Р., Уайт Дж. (2008). Передача сигналов Src и Wnt регулирует накопление динактина на границе клетки P2-EMS. в C. elegans эмбрионов. J. Cell Sci. 121 , 155-161. Абстрактный Статья

    Зонис, С., Мотеги, Ф., Хао, Ю. и Сейду, Г. (2010). Нарушение симметрии и поляризация зиготы C. elegans белком полярности PAR-2.Разработка 137 , 1669-1677. Абстрактный Статья

    РНК-мишень специфичность детерминанты судьбы эмбриональных клеток POS-1

    Аннотация

    Спецификация Caenorhabditis elegans осей тела и судьбы клеток происходит до активации зиготической транскрипции.Несколько тандемных цинковых пальцев типа CCCH (TZF) белки координируют локальную активацию покоящихся материнских мРНК после оплодотворения, что приводит к асимметричной экспрессии факторы, необходимые для формирования паттерна. Первичной детерминантой задней судьбы является белок POS-1 TZF. Мутанты pos-1 являются летальными для матери с терминальным фенотипом, который включает избыток глоточной ткани и отсутствие энтодермы или зародышевой линии. Здесь мы очерчиваем консенсусный элемент распознавания POS-1 (PRE), необходимый для специфического распознавания его целевых мРНК.В PRE необходим, но не достаточен для моделирования экспрессии репортера. PRE отличается от распознаваемых последовательностей родственными белками как млекопитающих, так и нематод, демонстрируя, что варианты этого семейства белков могут распознавать расходящиеся Последовательности РНК. PRE находится в 3′-нетранслируемой области 227 материнских транскриптов, необходимых для раннего развития, включая гены, участвующие в спецификации энтодермы и зародышевой линии.Результаты позволяют предсказывать новые цели, которые объясняют плейотропия фенотипа pos-1 .

    ВВЕДЕНИЕ

    В течение первых нескольких раундов клеточного деления в развитии многоклеточного животного формируются оси тела, определяются судьбы клеток, и установлен примерный план тела.У многих видов эти события происходят без пользы зиготической транскрипции, полагаясь на вместо этого на асимметричную локализацию и трансляцию специфических материнских мРНК (для обзора см. Farley and Ryder 2008). Сеть из цис--действующих регуляторных элементов и родственных -транс--действующих факторов специфичности, включая РНК-связывающие белки и микроРНК, необходима для обеспечения надлежащего соответствия мРНК. регулируется. Часто регуляторные элементы, действующие на цис- , обнаруживаются в 3′-нетранслируемой области (3′-UTR) мРНК, так как эта область не подвергается активному сплайсингу. или транслируется и, следовательно, легко доступен для регуляторных факторов, действующих на trans (для обзора см. Kuersten and Goodwin 2003).

    Ранний эмбриогенез у нематод Caenorhabditis elegans нуждается в регуляции обширной сети материнских мРНК, поскольку начало зиготической транскрипции задерживается. До начала зиготической транскрипции судьбы всех клеток-основателей, которые производят ткани и органы присутствуют у взрослого червя (рис. 1; Sulston et al.1983 г.). Этот процесс начинается вскоре после оплодотворения, когда зигота асимметрично делится поперек передне-задней оси. Более крупная передняя дочь является первой клеткой-основателем, а меньшая задняя дочь является прародительницей зародышевой линии. Прародитель зародышевой линии повторяет этот паттерн асимметричного деления клеток еще три раза, что в конечном итоге дает шесть общих клетки-основатели, которые вместе являются предшественниками всех типов тканей, присутствующих у взрослого червя (Sulston et al.1983 г.). Большинство клеток зиготы не начинают транскрипцию до четырехклеточной стадии, а транскрипция не начинается в линия зародышевой линии непосредственно перед гаструляцией (Mello et al. 1996; Seydoux et al. 1996; Seydoux and Dunn 1997). Таким образом, посттранскрипционная регуляция материнских транскриптов материнскими РНК-связывающими белками является основным механизмом. это управляет спецификацией клеточной судьбы в раннем эмбрионе.

    РИСУНОК 1.

    POS-1 необходим для спецификации судьбы нескольких клеток у ранних эмбрионов C. elegans . ( A ) Показана линия происхождения ранних клеток C. elegans , причем каждая клетка-основатель помечена типами ткани, которую она продуцирует. Экспрессия белка POS-1 показан серым цветом, и каждая клетка-основатель, неправильно указанная в мутантных эмбрионах pos-1 , отображается серым цветом. ( B ) Схема экспрессии POS-1 в ранних эмбрионах.Экспрессия POS-1 показана серым цветом, и каждая клетка-основатель помечена.

    POS-1 является критическим РНК-связывающим белком, необходимым для раннего эмбриогенеза C. elegans (Tabara et al. 1999; Ogura et al. 2003). POS-1 накапливается в задней части оплодотворенной зиготы и наследуется асимметрично на каждом делении (Fig. 1). Эмбрионы, лишенные POS-1, не вылупляются; окончательно дифференцированные эмбрионы не имеют предшественников кишечника и зародышевых клеток и есть избыток глоточной ткани.Каждый из этих типов ткани происходит из разных клеток-основателей, что указывает на то, что POS-1 требуется для множественных событий спецификации клеточной судьбы. Плейотропия мутантного фенотипа pos-1 предполагает, что он управляет множеством аспектов регуляции материнских генов.

    Было идентифицировано три гена, экспрессия которых нарушена у мутантов pos-1 : glp-1 , apx-1 (Ogura et al.2003) и №№-2 (Д’Агостино и др., 2006). nos-2 кодирует белок, подобный Drosophila Nanos, который необходим для развития и миграции зародышевых клеток во время гаструляции (Subramaniam and Seydoux 1999). glp-1 кодирует рецептор клеточной поверхности, гомологичный Drosophila Notch, а apx-1 кодирует лиганд, гомологичный Drosophila Delta, который распознается GLP-1 (Fehon et al. 1990; для обзора см. Artavanis-Tsakonas et al.1999). APX-1 и GLP-1 необходимы для формирования модели переднего развития; их взаимодействие на двухклеточной стадии поляризует передний бластомер, когда он делится, заставляя его заднюю дочь (ABp) принимать гиподермальную судьбу (Mello et al. 1994). У мутантов pos-1 , GLP-1 аберрантно экспрессируется во всех клетках раннего эмбриона, тогда как экспрессия APX-1 не обнаруживается (Ogura et al. 2003). Это предотвращает поляризацию переднего бластомера на стадии двух клеток, вызывая образование избыточной ткани глотки. за счет гиподермы.

    мРНК, кодирующая glp-1 , присутствует в каждой клетке эмбриона до восьмиклеточной стадии, но белок GLP-1 экспрессируется только в передней части эмбриона. эмбрион (Evans et al. 1994; Ogura et al. 2003). glp-1 3′-UTR необходим и достаточен для управления этим паттерном экспрессии, поскольку микроинъектированная мРНК, кодирующая репортер lacZ под контролем glp-1 3′-UTR экспрессируется по паттерну, идентичному эндогенному glp-1 (Evans et al.1994). Это указывает на то, что мРНК glp-1 трансляционно репрессируется через ее 3′-UTR в задней части эмбриона. Два 70-нуклеотидных (нуклеотидных) элемента внутри 3′-UTR, называемые областью пространственного управления (SCR) и областью временного управления (TCR), требуются как для пространственного, так и для временное формирование паттернов. Внутри SCR находятся два регуляторных субэлемента, необходимых для репрессии трансляции ( glp-1 repression element [GRE]) и трансляционной активации ( glp-1 derepression element [GDE]) (Marin and Evans 2003).РНК-связывающий белок GLD-1 в STAR-домене напрямую связывается с GRE, но фактор, действующий на trans , который опосредует регуляцию glp-1 через GDE, неизвестен (Lee and Schedl 2001, Marin and Evans 2003 , Ryder et al. 2004). С помощью гибрида дрожжей-три POS-1 ассоциируется как с SCR, так и с TCR, указывая тем самым, что он репрессирует трансляцию glp-1 посредством прямой ассоциации (Ogura et al. 2003). Однако точное положение связывания POS-1 неизвестно.

    POS-1 является одним из нескольких тандемных белков цинковых пальцев нематод CCCH-типа (далее TZF), необходимых для созревания ооцитов и раннее развитие (Mello et al.1996; Schubert et al. 2000; Shimada et al. 2006; Shirayama et al. 2006 г.). Эти белки связаны с тристетрапролином (ТТР), фактором млекопитающих, который способствует деаденилированию и последующему быстрый оборот мРНК фактора некроза опухолей α (TNFα) за счет прямой ассоциации с его 3′-UTR (Carballo et al. 1998; Lai et al. 1999, 2005). TTP связывается с последовательностью UUAUUUAUU, присутствующей в нескольких копиях в пределах AU-богатого элемента (ARE) TNFα 3′-UTR, с высокая аффинность и специфичность (Worthington et al.2002; Blackshear et al. 2003; Brewer et al. 2004 г.). Напротив, нематодный белок TZF MEX-5, необходимый для переднего развития, связывается с высокой аффинностью, но с ослабленной специфичностью. к последовательностям, богатым уридином (Schubert et al. 2000; Pagano et al. 2007). Мало что известно о специфичности связывания других членов семейства белков TZF нематод, включая POS-1. Чтобы исследовать основы специфического распознавания мРНК POS-1 и облегчить прогнозирование новых регуляторных мишеней POS-1, мы намеревались определить специфичность связывания РНК этого белка.

    РЕЗУЛЬТАТЫ

    POS-1 слабо связывается с сайтами связывания TTP и MEX-5

    Сначала мы спросили, связывается ли POS-1 с РНК с такой же специфичностью, как TTP или MEX-5. Рекомбинантный домен TZF POS-1 (аминокислоты 80–180) был экспрессирован в виде C-концевого слияния с мальтозосвязывающим белком (MBP) в Escherichia coli и очищен почти до гомогенности.Рекомбинантный белок использовали в количественных анализах сдвига электрофоретической подвижности. (EMSA) с меченными флуоресцеином РНК, кодирующими высокоаффинные связывающие последовательности, распознаваемые TTP или MEX-5: ARE13 и поли (U) -13, соответственно (рис. 2A, B; Брюер и др. 2004; Пагано и др. 2007). Различные концентрации POS-1 уравновешивали меченой следами РНК, и связанную РНК отделяли от свободной РНК методом гель-электрофореза. Долю связанной РНК при каждой концентрации POS-1 определяли с помощью FUJI FLA-5000. fluorimager и кажущаяся константа равновесной диссоциации ( K d, приложение ) определяли путем подгонки данных к уравнению Хилла.POS-1 связывается с ARE13 со скромным сродством ( K d, примерно = 200 ± 6 нМ), что примерно в 50 раз слабее, чем ранее опубликованное сродство TTP к ARE13 (Brewer et al. 2004). Аналогичным образом, POS-1 связывается с поли (U) -13 РНК ( K d, примерно = 500 ± 130 нМ), но сродство снижено по сравнению с сродством MEX-5 к той же последовательности (Pagano et al. 2007). Вместе результаты демонстрируют, что, хотя POS-1 связывается непосредственно с РНК, распознаваемой TTP и MEX-5, он делает это с значительно сниженное сродство.

    ФИГУРА 2.

    POS-1 представляет собой специфический РНК-связывающий белок с другой специфичностью, чем TTP или MEX-5. ( A ) Связывание POS-1 с ARE13 измеряли с помощью анализа сдвига электрофоретической подвижности. Показан типичный гель с графиком. концентрации POS-1 по сравнению с приведенной ниже фракцией.Заявленный K дн, приложение — это среднее ± 1 стандартное отклонение трех независимых повторов. ( B ) Связывание POS-1 с U13 измеряли, как в A . ( C ) Схема мозаичных фрагментов glp-1 SCR и TCR. ( D ) Связывание POS-1 с первым и четвертым фрагментами SCR glp-1 измеряли, как в A .

    POS-1 связывается с 3′-UTR нескольких генов, необходимых для эмбриогенеза

    Мы предположили, что POS-1 с большей аффинностью связывается с детерминантами последовательности, которые отличаются от TTP или MEX-5.В В попытке идентифицировать последовательность, взаимодействующую с POS-1 с высоким сродством, мы сконструировали библиотеку мозаичных фрагментов glp-1, SCR и TCR. Ранее было продемонстрировано, что эти элементы связаны с POS-1 с помощью дрожжевого трехгибридного анализа (Ogura et al. 2003). Каждый фрагмент имеет длину примерно 30 нт и перекрывает предыдущий фрагмент на 15 нт (рис. 2С). Связь POS-1 с этими фрагментами была проанализирована с помощью EMSA (рис. 2D; таблица 1). POS-1 связывается с тремя из четырех фрагментов SCR и со всеми четырьмя фрагментами TCR.Сродство POS-1 является самым высоким для фрагмент около 5′-конца СКВ ( K d, приложение = 76 ± 6 нМ), который содержит функциональные последовательности GRE и GDE. Данные указывают на то, что одно или несколько связывания POS-1 с высоким сродством сайты присутствуют как в SCR, так и в TCR. Однако сравнение последовательностей каждого фрагмента нелегко выявить детерминанты высокоаффинных взаимодействий.

    ТАБЛИЦА 1.

    Анализ сдвига электрофоретической подвижности с фрагментами glp-1 3′-UTR

    Во втором подходе для идентификации последовательностей, которые POS-1 связывает с высокой аффинностью, мы создали библиотеку последовательностей из 3′-UTR материнской мРНК, которые содержат по крайней мере два элемента UAUU (полусайты TTP) с не более чем двумя промежуточными нуклеотидами.Мы предположили, что POS-1 может связываться с детерминантами, аналогичными TTP, но с измененным интервалом между этими детерминантами из-за к увеличению количества аминокислот, которые связывают отдельные цинковые пальцы (17 в POS-1 по сравнению с 12 в TTP). В Библиотека была смещена, чтобы включать только фрагменты UTR из генов, которые посттранскрипционно регулируются во время раннего развития (Бауэрман и др., 1993; Мелло и др., 1994; Дрейпер и др.1996; Хантер и Кеньон 1996; Gomes et al. 2001). Сродство POS-1 к каждой последовательности в библиотеке анализировали с помощью EMSA (таблица 2). Всего было протестировано шесть фрагментов UTR из пяти генов (таблица 2, apx-1 , mex-3 , pal-1 , skn-1 и spn-4 ). POS-1 связывается с двумя из этих последовательностей с высокой аффинностью. К ним относятся короткий фрагмент 3′-UTR pal-1 ( K d, app = 84 ± 3 нМ) и более длинный фрагмент 3′-UTR mex-3 , который содержит несколько последовательностей UAUU (фрагмент mex-3 : AACUAUUAUUAUUUUGUUAUUCAUAUUUU, K d, прибл. = 47 ± 7 нМ) (рис.3А).

    ТАБЛИЦА 2.

    Анализ сдвига электрофоретической подвижности с фрагментами материнской мРНК

    РИСУНОК 3.

    POS-1 связывается с фрагментом mex-3 UTR с очевидной стехиометрией 1: 1.( A ) Связывание POS-1 с фрагментом mex-3 UTR измеряли, как на Фигуре 1A. ( B ) Стехиометрический анализ связывания между POS-1 и mex-3 РНК. Указана общая концентрация РНК для эксперимента. Точка молярного эквивалента ( n ) была определена с помощью квадратичной аппроксимации (Rambo and Doudna 2004). ( C ) Гель-фильтрационная хроматограмма рекомбинантного POS-1. Стандарты гель-фильтрации отображаются белым цветом. Молекулярная масса указаны каждый стандартный пик.Профиль элюции POS-1 отображается серым цветом, а концентрация белка и кажущаяся молекулярная указаны вес. ( D ) Равновесные аналитические следы ультрацентрифугирования рекомбинантного POS-1. Скорость вращения, а также концентрация белка для каждой трассы указаны. Серые линии представляют соответствие равновесию мономер-Nmer.

    MEX-3 представляет собой РНК-связывающий белок KH-домена, необходимый для определения судьбы передних бластомеров во время раннего эмбриогенеза. (Draper et al.1996). MEX-3 действует, подавляя программу развития, которая определяет мышцы стенки тела. У эмбрионов дикого типа этот тип ткани продуцируется исключительно одной из задних клеток-основателей, в то время как у mex-3 мутантных эмбрионов он продуцируется эктопически потомками передней дочерней стадии двухклеточной стадии (Draper et al. 1996). Это предполагает, что MEX-3 функционирует на той же стадии эмбриогенеза, что и POS-1, а также что активность MEX-3 должна быть ограничивается передней частью эмбриона.В соответствии с этим, как белок MEX-3, так и мРНК mex-3 асимметрично распределены в передней части эмбриона на двух- и четырехклеточной стадиях в паттерне, который является антикоррелированным. с ПОС-1 (Draper et al. 1996). POS-1 может регулировать экспрессию mex-3 путем репрессии его трансляции, способствуя обороту мРНК mex-3 или и того, и другого. Для дальнейшего изучения потенциальных регуляторных отношений между POS-1 и mex-3 мы решили дополнительно охарактеризовать взаимодействие между мРНК mex-3 и POS-1.

    POS-1 образует эквимолярный комплекс с фрагментом

    mex-3

    POS-1 связывается с 3′-UTR-фрагментом mex-3 с наивысшим сродством из всех протестированных последовательностей. Это могло быть связано с наличием множественной привязки сайтов, или это может быть связано с наличием единственного сайта, который связывается с POS-1 с более высоким сродством.Чтобы различать Эти возможности, стехиометрия комплекса между POS-1 и этим фрагментом РНК была определена с помощью EMSA (рис. 3B). Различные концентрации POS-1 уравновешивались фиксированной повышенной концентрацией немеченой РНК mex-3 с добавлением следовых количеств флуоресцентно меченой РНК mex-3 . После уравновешивания связанную РНК отделяли от свободной РНК гель-электрофорезом и фракцию связанной РНК определяли флуориметрическим методом.Данные соответствовали квадратичной модели насыщаемого связывания (Rambo and Doudna 2004). Очевидная стехиометрия комплекса POS-1: mex-3 является один к одному (точка насыщения = 1,0 ± 0,1), что согласуется с гипотезой о том, что РНК mex-3 содержит единственный сайт связывания с высокой аффинностью.

    Чтобы убедиться, что POS-1 связывается как мономер, состояние олигомеризации рекомбинантного POS-1 определяли с помощью эксклюзионной хроматографии. и равновесным седиментационным ультрацентрифугированием (рис.3В, Г). Оба метода показывают, что POS-1 является преимущественно мономерным, даже при концентрации около 20 мкМ, что на порядки выше. чем кажущаяся константа диссоциации для РНК mex-3 . Мы пришли к выводу, что мономерный POS-1 связывается с 3′-UTR-фрагментом mex-3 с высоким сродством в виде молярного стехиометрического комплекса один к одному.

    POS-1 распознает 12-нуклеотидный фрагмент внутри mex-3 UTR

    Для идентификации минимального сайта связывания POS-1 в 3′-UTR-фрагменте mex-3 были синтезированы три перекрывающихся 15-нуклеотидных субфрагмента этой РНК.Близость каждого к POS-1 был определен с помощью EMSA (рис. 4A). POS-1 связывается с фрагментами 1 и 2 несколько слабее, чем интактная последовательность (рис. 4A, mex-3 фрагмент 1, K d, ок. = 110 ± 40 нМ; мекс-3 фрагмент 2, К d, ок. = 89 ± 5 нМ). Напротив, POS-1 связывается с фрагментом 3 с резко сниженной аффинностью (фиг. 4A, mex-3 framgent 3, K d, приложение = 800 ± 200 нМ).Это говорит о том, что сайт связывания POS-1 с высоким сродством расположен в перекрытии между первым и вторым. мекс-3 фрагментов. Для проверки этой гипотезы был синтезирован 12-нуклеотидный фрагмент, соответствующий этому перекрытию (в дальнейшем мекс-3 мин). Эта последовательность связывается с идентичным сродством, в пределах ошибки, с исходной РНК mex-3 (фиг. 4A, mex-3 min, K d, ок. = 39 ± 6 нМ; мекс-3 РНК, К d, ок. = 47 ± 9 нМ; Инжир.4Б).

    РИСУНОК 4.

    POS-1 специфически распознает 12-нуклеотидный фрагмент 3′-UTR mex-3 . ( A ) Таблица ассоциативных измерений для фрагментов POS-1 и mex-3 . К d, прибл. измеряли с помощью анализа сдвига электрофоретической подвижности, и указанные значения представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для трех независимых повторов.Последовательность mex-3 min выделена серым цветом. ( B ) Типичный анализ сдвига электрофоретической подвижности для mex-3 мин. Подходит и сообщил K d, приложение , как на рисунке 1A. ( C ) Типичный анализ поляризации флуоресценции для mex-3 мин. Каждая точка данных представляет собой среднее значение ± стандартное отклонение пяти считываний независимой реплики. Данные соответствовали уравнению Хилла, и заявленный K d, прибл. — это среднее ± стандартное отклонение трех независимых повторов.( D ) Типичные анализы кинетической флуоресценции поляризации для POS-1 и указанных РНК. к выкл., Приложение было определено путем мониторинга изменения поляризации флуоресценции после добавления 100-кратного избытка немеченых конкурирующая РНК и соответствует единственной экспоненте. Пустые кружки обозначают немаркированного участника mex-3 мин; закрашенные кружки — участник C15 без надписи; закрашенные ромбы, конкурентов нет; и сплошная черная линия представляет единственная экспоненциальная аппроксимация.

    Чтобы подтвердить константу равновесной диссоциации для мекс-3 мин и разработать удобный метод кинетического анализа, мы оценили способность POS-1 изменять поляризацию меченная флуоресцеином на конце mex-3 мин РНК в растворе. Различные концентрации белка уравновешивали ограничивающей меченной mex-3 мин РНК, и значение поляризации определяли с использованием флуоресцентного ридера для планшетов.Ассоциация ПОС-1 с флуоресцентно меченая mex-3 мин РНК значительно увеличивает поляризацию флуорофора, тем самым обеспечивая параметр для мониторинга связывания POS-1 в реальном времени. Кажущуюся константу равновесной диссоциации определяли путем построения поляризации как функции белка концентрации и подгонки данных к уравнению Хилла (рис. 4C). Модель K d, приложение POS-1 для mex-3 РНК составляет 52 ± 4 нМ, аналогично K d, приложение , определенное EMSA.

    Затем поляризационный анализ использовали для определения кинетики диссоциации комплекса. Избыток немеченой mex-3 мин РНК, поли (C) -15 РНК или буферного контроля добавляли к предварительно сформированному комплексу POS-1 и меченой mex-3 мин РНК (фиг. 4D). Немеченый mex-3 мин служит ловушкой для предотвращения повторной ассоциации с меченой РНК в течение эксперимента. Немеченый поли (С) -15 РНК не связывается с POS-1 (таблица 2) и служит в качестве контроля неспецифического связывания.Для контроля диссоциации из-за разбавления был проведен эксперимент с буфер вместо немеченой РНК. Кажущаяся константа скорости диссоциации ( k off, app ) был определен путем подгонки наблюдаемого изменения поляризации как функции времени к экспоненциальному затуханию. Модель K выкл, приложение составляет 2,94 ± 0,08 × 10 −3 сек −1 без маркировки mex-3 мин используется в качестве конкурента.Напротив, небольшая диссоциация наблюдается при добавлении поли (C) -15 или только буфера. На основании по этим измерениям и определение K d, приложение выше, можно вычислить константу скорости ассоциации ( k on, вычислено = 6.0 ± 0.4 × 10 4 M −1 с −1 ). Эти результаты обеспечивают кинетическую и термодинамическую основу для подробного анализа взаимодействия между POS-1 и минимальный фрагмент mex-3 .

    Определение консенсусной последовательности POS-1

    Затем мы решили определить детерминанты последовательности в пределах мекс-3 мин, которые способствуют связыванию. Для этого изменение стандартного изменения свободной энергии (ΔΔG °) измерялось для каждого отдельного точечная мутация mex-3 мин РНК с использованием EMSA. Всего было протестировано 36 отдельных мутаций, представляющих все возможные одиночные нуклеотидные замены. в каждой позиции последовательности mex-3 мин (рис.5А). Мутация семи положений вызывает значительное снижение аффинности (рис. 5A, положения 2–7,10: ΔΔG °> 0,5 ккал / моль), в то время как пять положений могут допускать любую замену оснований (рис. 5A, положения 1,8,9 , 11,12: ΔΔG ° <0,5 ккал / моль). Исходя из этих данных, элементом распознавания POS-1 (PRE) является UAUURDNNG, где R - любой пурин, D - A, G или U, а N - любое основание. По сравнению с сайтом связывания TTP, PRE содержит дополнительный пурин. и демонстрирует большую степень вырождения (Brewer et al.2004 г.). В отличие от связывающей последовательности MEX-5, PRE предъявляет строгие требования в нескольких положениях, в то время как MEX-5 связывает к любой богатой уридином последовательности (Pagano et al. 2007). Несоответствие в специфичности между POS-1, TTP и MEX-5 предполагает, что интерфейс POS-1 – РНК значительно отличается. от тех из других белков.

    РИСУНОК 5.

    POS-1 распознает последовательность UA (U 2-3 ) RD (N 1-3 ) G. ( A ) Систематический мутагенез mex-3 мин. Модель K d, приложение для каждой мутации mex-3 мин измеряли с помощью анализа сдвига электрофоретической подвижности и сравнивали с ранее измеренным значением K d, приложение для mex-3 мин, чтобы определить изменение стандартного изменения свободной энергии (ΔΔG °).Каждая полоса представляет ΔΔG °, вызванную заменой основания. указано на оси x . Замещения, вызывающие более 0,4 ккал / моль (пунктирная линия, примерно двукратная разница в K d, приложение ) изменения стандартной свободной энергии показаны темно-серым цветом. Планки погрешностей — это распространение ошибки, полученной из стандартного отклонения трех повторов в каждой из мекс-3 мин и указанного замещения основания.( B ) Промежуточный мутагенез mex-3 мин. Модель K d, приложение для серии двойных мутаций, которые переключают положение указанного пурина на урацил, расположенный выше или ниже. Измерялся как в A . Каждая полоса представляет ΔΔG °, вызванную одной двойной мутацией, определенной как в A . Двойные мутации, вызывающие изменение стандартной свободной энергии более чем на 0,4 ккал / моль, показаны темно-серым цветом.

    Чтобы исследовать требования к пространству между каждым из пуринов в PRE, относительное положение каждого пуринового нуклеотида варьировали в пределах полиуридинового фона, и ΔΔG ° для каждой мутантной последовательности определяли с помощью EMSA (фиг. 5B). POS-1 толерантен к дополнительному нуклеотиду между A3 и A6 и одному дополнительному нуклеотиду или одному меньшему количеству нуклеотидов между A6. и G10.Принимая во внимание гибкость расстояния между пуринами, мы расширяем PRE до 5′-UA (U 2-3 ) RD (N 1-3 ) G-3 ‘. Этот консенсус присутствует во всех протестированных последовательностях, которые связываются с POS-1 с высокой аффинностью, включая фрагменты из pal-1 и glp-1 3′-UTR ( pal-1 фрагмент 2, K d, ок. = 84 ± 3 нМ; glp-1 SCR фрагмент 1, K d, ок. = 76 ± 6 нМ).

    PRE необходим, но недостаточен для формирования паттерна экспрессии репортера

    Работа Marin and Evans (2003) идентифицировала 34-нуклеотидный фрагмент SCR glp-1 , который достаточен для придания паттернированной эмбриональной экспрессии репортерному гену. В этом фрагменте содержатся два субэлементы, GRE и GDE, которые необходимы для репрессии трансляции и де-репрессии репортера glp-1 у ранних эмбрионов, соответственно.Здесь мы показываем, что GDE и PRE — это одно и то же, и что POS-1 связывает к этому элементу с высокой близостью. Замена 5 нуклеотидов в PRE предотвращает экспрессию репортерного белка без изменение экспрессии репортерной мРНК (рис. 6A; Marin and Evans 2003). Это указывает на то, что PRE необходим для посттранскрипционной регуляции мРНК glp-1 во время раннего эмбриогенеза, и предполагает, что он может играть функциональную роль в регуляции других генов во время тот же период.

    РИСУНОК 6.

    PRE необходим, но недостаточен для паттернированной регуляции репортера. ( A ) Ранее опубликованный мутационный анализ SCR glp-1 выявил два регуляторных элемента, соответствующих предсказанным сайтам связывания POS-1 и GLD-1. ( Выше ) Схематическое изображение сайтов связывания POS-1 и GLD-1 в SCR glp-1 .( Ниже ) Мутации, ранее сделанные в этих сайтах связывания, и их соответствующее влияние на экспрессию репортера, от Марин и Эванс (2003). ( B ) Репортерный штамм 6XPRE GFP. Выше — схема репортерной конструкции, ниже — широкопольное эпифлуоресцентное изображение взрослого гермафродита. Область ооцита обведена пунктирной линией, а эмбрионы отмечены стрелками. Экспрессия GFP одинакова во всех ранних эмбрионах.

    Чтобы проверить, достаточно ли одного PRE для придания паттернированной экспрессии репортеру, мы создали штамм, который экспрессирует GFP из промотора pie-1 , где шесть тандемных копий последовательности mex-3 min были вставлены в 3′-UTR pie-1 (фиг. 6B). Этот UTR не вызывает асимметричной экспрессии репортерных транскриптов у эмбрионов (Reese et al.2000) и, как таковой, обеспечивает нейтральный фон для проверки роли экзогенных цис--действующих элементов. Если PRE достаточно, чтобы вызвать опосредованную POS-1 негативную регуляцию, мы ожидаем увидеть экспрессию GFP. паттерн, который антикоррелирует с POS-1. Вместо этого трансгенные черви экспрессируют GFP по всей синцитиальной зародышевой линии в ооцитах, и во всех клетках раннего зародыша. Это открытие предполагает, что одного PRE и, следовательно, только связывания POS-1 недостаточно. для управления UTR-зависимой регуляцией и могут потребоваться дополнительные факторы для посттранскрипционной регуляции конкретных мишеней.

    Распространенность PRE в C. elegans 3′-UTR

    Чтобы составить список потенциальных нормативных целей POS-1, мы использовали инструмент сопоставления с образцом PATSCAN, чтобы определить местонахождение Консенсус PRE во всех аннотированных 3′-UTR, полученных из Wormbase версии WS180 (Dsouza et al. 1997). Из 10 201 извлеченных 3′-UTR 2902 (28.4%) содержат по крайней мере один сайт связывания POS-1. Потому что POS-1 выражается только у ранних эмбрионов и поскольку мутантные эмбрионы pos-1 обладают летальным фенотипом материнского эффекта (Tabara et al. 1999), ожидается, что критические регуляторные мишени POS-1 будут (1) экспрессироваться в ранних эмбрионах и (2) необходимы для раннего эмбриогенез. Из 2902 генов, которые содержат предполагаемый сайт связывания POS-1, 227 экспрессируются в эмбрионах от одной до восьми клеток. (Боуг и др.2003) и приводят к появлению эмбрионов, которые не могут вылупиться, когда они замалчиваются с помощью RNAi (Fig. 7A; Supplemental Table 1; Sonnichsen et al. 2005). Мы предполагаем, что они представляют собой наиболее вероятных кандидатов-мишеней POS-1, имеющих отношение к его ролям в формировании эмбрионального паттерна.

    РИСУНОК 7.

    PRE содержится в изобилии в 3′-UTR C. elegans C. elegans . ( A ) Биоинформатический анализ генов, содержащих PRE в их 3′-UTR.( B ) Схема цепи Маркова, используемая для генерации случайных библиотек 3′-UTR на основе вероятностей транзита, измеренных от эмбриональные 3′-НТО. Каждая фигура обозначает состояние, а сценарий B и E обозначает начальное и конечное состояния, используемые для моделирования начало и конец случайных 3′-UTR соответственно. Стрелки представляют вероятности прохождения из состояния стрелка выходит из состояния, на которое указывает стрелка.Ниже приведены измеренные вероятности транзита динуклеотидов в раннем эмбриональном состоянии. 3′-НТО. Каждая запись представляет частоту, с которой за состоянием слева следует состояние над . Значения на черном фоне как минимум на пять процентов выше соответствующих им частот мононуклеотидов, тогда как значения с серым фоном, по крайней мере, на пять процентов ниже их соответствующих частот мононуклеотидов.

    В дополнение к glp-1 , mex-3 и pal-1 , ряд генов, необходимых для установления и поддержания передне-задней оси ( par-1 , par-3 , и пар-5 ) (Cuenca et al.2003) и определяющие судьбы кишечника ( mom-2 , mom-5 и skn-1 ) (Rocheleau et al. 1997; Thorpe et al. 1997; Maduro et al. 2001) содержат по крайней мере один PRE в пределах их 3′-UTR. Интересно, что 3′-UTR pos-1 также имеет PRE, предполагая, что POS-1 может играть роль в регуляции своей собственной экспрессии. Ни apx-1 , ни nos-2 , два гена, паттерны экспрессии которых нарушены у мутантов pos-1 , не содержат предсказанного сайта связывания POS-1 в его 3′-UTR, что позволяет предположить, что роль POS- 1 в регуляции этих генов может быть косвенным.

    Чтобы определить, является ли консенсусная последовательность POS-1 статистически недопредставленной, мы сгенерировали 100 рандомизированных искусственных 3′-UTR библиотеки и определили частоту PRE в каждой. Искусственные библиотеки были созданы с использованием цепи Маркова на основе на частотах динуклеотидов, наблюдаемых в эмбриональных 3′-НТО (фиг. 7B). Динуклеотиды использовались вместо мононуклеотидов, потому что количество динуклеотидов встречается более или менее часто, чем можно было бы ожидать на основании только частот мононуклеотидов.Среднее и стандартное отклонение частоты PRE в 100 искусственных библиотеках устанавливается ожидаемое количество и дисперсия PRE, связанная со случайной вероятностью. В отношение количества фактических вхождений к количеству ожидаемых вхождений определяет степень превышения PRE. или недостаточно представлены.

    Существует 2314 случаев появления PRE в 3′-UTR ранних эмбриональных транскриптов.Напротив, существует 1530 ± 40 PRE вхождений в наборе из 100 искусственных 3′-UTR. Таким образом, PRE в 1,51 ± 0,04 раза больше, чем в реальных эмбриональных 3′-UTR. последовательности. Этот вывод согласуется с гипотезой о том, что POS-1 требует дополнительных факторов специфичности для выбора соответствующие цели для регулирования или, альтернативно, что сеть целей, регулируемых POS-1, намного больше, чем раньше ожидается.

    ОБСУЖДЕНИЕ

    Используя биохимические методы in vitro, мы определили, что белок C. elegans TZF POS-1 представляет собой специфичный для последовательности РНК-связывающий белок, который связывается с РНК с новой специфичностью. POS-1 связывает с высшим сродство к последовательности UA (U 2-3 ) RD (N 1-3 ) G, и с умеренным сродством к другим последовательностям, содержащим ARE-подобные элементы.По сравнению с родственными белками TZF TTP и MEX-5, POS-1 связывается с РНК с различной специфичностью, демонстрируя, что это семейство РНК-связывающих белков способно к связывание с различными детерминантами последовательности. TTP распознает последовательность UUAUUUAUU (Brewer et al. 2004), тогда как MEX-5 распознает любую последовательность с 6-8 уридинами в пределах 8-нуклеинового окна (Pagano et al. 2007). Разница одной аминокислоты в каждом цинковом пальце, необходимая для специфического распознавания каждого из двух аденозинов. в элементе распознавания TTP (Hudson et al.2004), достаточно для объяснения различий между специфичностью TTP и MEX-5 (Pagano et al. 2007). Соответственно, идентичность этих остатков отличается в POS-1 по сравнению с MEX-5 или TTP, что позволяет предположить, что эти остатки аминокислоты также вносят свой вклад в различие в специфичности POS-1. Однако POS-1 распознает три пурина по сравнению с два в сайте связывания TTP, что указывает на то, что он должен иметь третий сайт узнавания пурина. Больше работы, в том числе структурной исследования, потребуются для понимания молекулярных основ дифференциального распознавания РНК POS-1.

    PRE встречается в 3′-UTR 227 генов, экспрессируемых в ранних эмбрионах и необходимых для эмбриогенеза. К ним относятся mom-2 , mom-5 и skn-1 , все из которых необходимы для спецификации энтодермы на стадии четырех клеток. mom-2 и mom-5 кодируют гомологи Wnt и Frizzled, соответственно, клеточные сигнальные факторы, которые необходимы для индукции дифференцировки энтодермы (Торп и др.1997). skn-1 кодирует фактор транскрипции, который необходим для активации зиготической транскрипции генов, которые способствуют судьбе энтодермы (Бауэрман и др., 1993; Мадуро и др., 2001). pos-1 у мутантов отсутствует энтодерма, это указывает на то, что нарушение регуляции некоторых или всех этих мРНК ведет к нарушению спецификации энтодермы. PRE также обнаруживается в 3′-UTR генов par-1 , par-3 и par-5 , необходимых для установления передне-задней оси у раннего эмбриона.POS-1 не переводится, пока после того, как передне-задняя ось была установлена, что утверждает, что она не может играть главную роль в установлении этого ось. Однако ось должна поддерживаться после установления, и POS-1 может играть роль в этом пути. Обслуживание передне-задней оси нуждается в MEX-5 (Cuenca et al. 2003), который ограничивает экспрессию POS-1 задней частью раннего эмбриона. Если POS-1 регулирует экспрессию гена par , то MEX-5 может поддерживать поляризацию оси благодаря своей молекулярной функции пространственного ограничения POS-1.

    PRE находится в 34-нуклеотидной области 3′-UTR glp-1 , которая необходима для регуляции трансляции у ранних эмбрионов (Marin and Evans 2003), а мутации, которые непосредственно нацелены на PRE, отменяют экспрессию репортерного гена. , демонстрируя, что PRE является функциональным цис--действующий регуляторный элемент, необходимый для паттерна экспрессии glp-1 . Однако PRE недостаточно, чтобы придать POS-1-зависимую регуляцию ортогональному 3′-UTR, указывая на то, что требуются дополнительные действующие элементы цис и действующие факторы транс .Одним из вероятных кандидатов является GLD-1 (Lee and Schedl 2001; Ryder et al. 2004). Сайт связывания POS-1 в 3′-UTR glp-1 непосредственно примыкает к сайту связывания для GLD-1. Мутации pos-1 или gld-1 приводят к эктопической экспрессии GLP-1 во всех клетках раннего эмбриона и мутациям, которые нарушают сайт связывания для любого белок приводят к аберрантному формированию паттерна репортера (Fig. 6A; Marin and Evans 2003). Возможно, что POS-1 и GLD-1 могут функционировать как кооперативный РНК-связывающий комплекс, который связывается с повышенной специфичностью. только небольшому количеству мРНК.Альтернативно, антагонистическое связывание POS-1 и GLD-1 может модулировать кажущуюся аффинность обоих белков, что приводит к подходящим уровням трансляции glp-1 . Сайты связывания GLD-1 присутствуют в 66 из 227 кандидатов-мишеней POS-1, что позволяет предположить, что взаимодействие между эти факторы могут быть общим требованием для регуляции, опосредованной POS-1.

    Представленные здесь данные демонстрируют, что POS-1 связывается с РНК с новой специфичностью по сравнению с гомологичными белками домена TZF, это указывает на то, что эта складка может развиваться, чтобы распознавать различные последовательности РНК.Относительная простота связывающего консенсуса предполагает дихотомию между специфичностью связывания РНК и выбором специфических мишеней мРНК для регуляции. Признание POS-1 элемент необходим, но недостаточен для придания репортеру шаблонного выражения, что указывает на то, что дополнительные факторы участвует в отборе мишеней мРНК. Требование распознавания множеством РНК-связывающих белков, каждый из которых имеет ограниченную последовательность. специфичность, может объяснить эту дихотомию.Наша работа обеспечивает основу для анализа сети материнских транскриптов. регулируется POS-1 во время развития и предлагает несколько интересных кандидатов-мишеней, которые могут объяснить наблюдаемые фенотипы в мутантах pos-1 .

    МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

    Клонирование очистки ПОС-1 80-180 pHMTc

    Последовательность, кодирующая аминокислоты 80–180 POS-1, была амплифицирована из соответствующего клона ORFeome (Open Biosystems) через ПЦР и клонирование в рамке считывания в сайт множественного клонирования pHMTc, производного pMal-c2x (New England Biolabs), который включает N-концевой 6-his-метка и сайт протеазы TEV после MBP (Ryder et al.2004 г.). Эту конструкцию трансформировали и экспрессировали в штамме BL21 (DE3) Gold (Stratagene) E. coli , . Экспрессию белка индуцировали 1 мМ IPTG и 100 мкМ Zn (OAc) 2 . Клетки лизировали и очищали с использованием колонки с амилозой (New England Biolabs), затем HiTrap SP и HiTrap Q (GE Healthcare). столбцы. Очищенный POS-1 диализовали в буфер для хранения [25 мМ Tris-Cl при pH 8,0, 25 мМ NaCl, 100 мкМ Zn (OAc) 2 , 2 мМ DTT], концентрировали до ~ 100 мкМ с использованием центробежного концентратора 30 000 MWCO ( Vivascience Group) и хранить при 4 ° C до 2 мес.

    Получение РНК, меченной флуоресцеин-5-тиосемикарбазидом

    Все олигонуклеотиды РНК, использованные в этом исследовании, были химически синтезированы Integrated DNA Technologies. Олиго светились флуоресцентным светом. меченный на 3′-конце окислением периодатом с последующей реакцией с флуоресцеин-5-тиосемикарбазидом, как описано (Pagano et al. 2007).Меченую РНК очищали от непрореагировавшей метки с использованием спин-колонки Sephadex G-25 (GE Healthcare). Восстановленная РНК была анализировали электрофорезом в агарозном геле и спектрофотометрией в УФ-видимой области для определения чистоты и эффективности мечения, соответственно. Эффективность маркировки обычно составляла ~ 70%.

    Флуоресцентный анализ сдвига электрофоретической подвижности

    Различные концентрации очищенного POS-1 инкубировали с 3 нМ флуоресцентно меченой РНК в уравновешивающем буфере в течение 3 дней. ч при комнатной температуре.Буфер для уравновешивания содержал 50 мМ Трис (pH 8,0), 100 мМ NaCl, 0,01 мг / мл тРНК, 0,01% (об. / Об.) IGEPAL, и 100 мкМ ZnOAc 2 . Через 3 часа 10 мкл 0,005% (мас. / Об.) Бромкрезолового зеленого в 30% глицерине добавляли к 100 мкл каждого образца и тщательно перемешивали. Пятьдесят микролитров каждой смеси загружали в 1% агарозный гель 1 × TB и прогоняли при комнатной температуре в течение 35 минут при 120 В. для разрешения связанной со свободной РНК. Гели были визуализированы с помощью лазерного формирователя изображения Fuji FLA-5000 для обнаружения флуоресцентно меченой РНК.Долю связанной РНК определяли, взяв отношение связанного сигнала к общему сигналу. Это было замышлено против концентрация общего белка и соответствие уравнению Хилла для определения кажущейся константы диссоциации:

    , где θ — измеренная фракция связанной РНК, [ P ] t — концентрация общего белка, K d, app — кажущаяся константа диссоциации, а n — коэффициент Хилла.Анализы стехиометрического связывания проводили аналогичным образом, за исключением добавления немеченой РНК. до конечной концентрации РНК 4 мкМ, и данные соответствовали следующему уравнению (Rambo and Doudna 2004):

    где θ и K d, приложение такие же, как указано выше, r — молярное отношение белка к РНК, а n — точка молярной эквивалентности.ΔΔG ° при 20 ° C для каждого из мутантов mex-3 min определяли с использованием следующего уравнения:

    , где R — газовая постоянная, а T — температура.

    Гель-фильтрационная хроматография

    Кажущуюся молекулярную массу POS-1 80-180 pHMTc относительно стандартов определяли с использованием геля Superdex 200 10/300 GL. фильтрационная колонка (GE Healthcare).Приблизительно 50 мкл 20 мкМ POS-1 загружали в колонку, уравновешенную 50 мМ Трис. (pH 8,0), 300 мМ NaCl и оптическую плотность при 280 нм. Кажущуюся молекулярную массу POS-1 определяли по формуле сравнение объема элюирования с объемом элюирования для стандартов молекулярной массы.

    Равновесное аналитическое ультрацентрифугирование

    Три концентрации POS-1 (8 мкМ, 12 мкМ и 16 мкМ) центрифугировали при 9000, 12000 и 16000 об / мин, а поглощение через клетку при 280 нм контролировали с помощью аналитической ультрацентрифуги Beckman Optima XL-I.Образцы центрифугировали до достижения равновесия. был достигнут. Полученные следы соответствовали следующему уравнению, описывающему переход мономер / н-мер:

    , где A — измеренная оптическая плотность, a — коэффициент масштабирования, f — доля белка в мономерном состоянии, ω — угловая скорость, R — газовая постоянная, T — температура, M — молекулярная масса белка, n — кажущаяся стехиометрия комплекса, ν — вязкость раствора, ρ — плотность раствора, r — радиус кюветы, r 0 — эталонное расстояние.

    Анализ анизотропии флуоресценции

    Различные концентрации POS-1 и 4 нМ флуоресцентно меченой РНК уравновешивали, как описано в разделе EMSA. Следующий уравновешивания, каждый образец возбуждали линейно поляризованным светом, и параллельные и перпендикулярные интенсивности флуоресценции были измерены пять раз каждый с использованием счетчика Multilabel Counter 3 1420 (Perkin-Elmer) и определена кажущаяся поляризация.График поляризации был нанесен на общий белок. концентрации и соответствуют уравнению Хилла, как указано выше.

    Кинетика скорости диссоциации

    Реакции связывания, содержащие 100 нМ POS-1 и 4 нМ флуоресцентно меченый mex-3 мин, уравновешивали в условиях, описанных выше, в течение 30 мин. После уравновешивания образцы переносили в 96-луночный Планшет FluoTrak (Grenier), содержащий немеченую конкурентную РНК и быстро перемешанный.Сразу после добавления к конкуренту РНК, поляризация флуоресценции образца измерялась каждые 20 секунд, как описано выше. Измерения поляризации флуоресценции были нанесены на график в зависимости от времени и подогнаны к следующему экспоненциальному спаду для определения кажущейся константы скорости диссоциации:

    , где P — измеренная поляризация флуоресценции, P 0 — базовая поляризация флуоресценции, A — поляризация при t = 0, k выкл, — кажущаяся константа скорости диссоциации, а t — истекшее время.

    Биоинформатика

    3′-UTR последовательностей были получены из версии WS180 Wormbase (www.wormbase.org) с помощью WormMart. Чтобы избежать избыточности в пуле последовательностей, только самая длинная 3′-UTR для каждого гена с несколькими моделями генов использовался. Инструмент сопоставления паттернов PATSCAN (Dsouza et al. 1997) был использован для идентификации UTR, которые содержат сайты связывания POS-1 и / или GLD-1.Частоты мононуклеотидов и динуклеотидов были определяется с помощью сценариев Perl и стандартных средств обработки текста UNIX. Случайные 3′-UTR библиотеки были сконструированы с помощью Марковского цепь; вероятности транзита для каждого состояния определялись из наблюдаемого распределения динуклеотидов и следующих уравнение:

    где p i j — вероятность перехода от нуклеотида i к нуклеотиду j , d ij — наблюдаемая частота динуклеотидов ij , а D i — наблюдаемая частота динуклеотидов, начинающихся с i .

    Анализ ошибок

    Для анализов сдвига электрофоретической подвижности и флуоресцентной поляризации указанное значение является средним значением не менее трех независимые реплики, ошибка составляет ± 1 SD. Для экспериментов по равновесной седиментации погрешность аппроксимации определялась следующим образом: построение остатков для сравнения распределения ошибок каждой подобранной модели.

    Конструкция штамма-репортера

    Репортерная конструкция была создана путем переваривания плазмиды pJH 4.52 (щедрый подарок доктора Джеральдин Сейду, Johns Hopkins University) с Spe1 и вставкой синтетического дуплекса ДНК, содержащего 3 × копии mex-3 min последовательности, фланкированной сайтами Spe1. Конструкция, использованная для всех экспериментов, содержала две копии вставки в тандеме.Репортерный штамм был получен путем баллистической трансформации с использованием спасения unc-119 (Praitis et al. 2001). Равная смесь репортерной плазмиды и pDEST-DD03, которая содержит спасательный фрагмент unc-119 (подарок доктора Мэриан Уолхаут, Медицинская школа Массачусетского университета), была использована для покрытия золотых частиц. Спасенных червей анализировали на предмет экспрессии GFP с помощью флуоресцентной микроскопии с микроскопом Zeiss Axioskop.

    БЛАГОДАРНОСТИ

    Мы благодарим Лизу МакКойг за предоставление конструкции экспрессии POS-1; Кирстен Хагстром, Нику Райнд и Мэриан Уолхаут за то, что поделились оборудование; Джеральдин Сейду и Мэриан Валхаут за плазмиды; Масаки Сираяма, Крейг Мелло, Фил Замор, Том Эванс и Кирстен Хагстрому за совет; и Рут Зеарфосс, Карен Мрук и Мелонни Фургасон за комментарии к рукописи.Эта работа финансировалась частично предоставлено NIH Grant GM081422 S.P.R. и стипендией Бэзила О’Коннора от Марша десятицентовиков в пользу S.P.R.

    Сноски

    • Запросы на переиздание по адресу: Шон П. Райдер, Департамент биохимии и молекулярной фармакологии, Медицинская школа Массачусетского университета, Вустер, MA 01605, США; электронная почта: sean.ryder {at} umassmed.edu; факс: (508) 856-6464.

    • Статья опубликована в Интернете до выхода в печать. Статья и дата публикации находятся на http://www.rnajournal.org/cgi/doi/10.1261/rna.1256708.

      • Поступила 07.07.2008.
      • Принято к печати 10 сентября 2008 г.
    • Авторские права © 2008 RNA Society
    .

    Leave a Comment

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *